鸭疫里氏杆菌病三价油乳剂灭活疫苗的研究

以1、2、10型鸭疫里氏杆菌（RA）分离株为菌种，研制鸭疫里氏杆菌病三价油乳剂灭活疫苗。经无菌及安全检验合格后，对6日龄樱桃谷雏鸭颈部皮下接种0.4mL／只,免疫后第10、14、21和35d分别用1、2、10型RA强毒株攻攻，第14d的攻毒保护率为91.7%-100%,35d攻毒保护率为66.6%-83.3%。田间试验结果表明，雏鸭5－7日龄免疫后至上市保护率可达95.0%-100%。     

鸭疫里默氏菌1,2,4和5型铝胶复合佐剂四价灭活疫苗的研究

选择了流行最为广泛的血清 1,2 ,4和 5型鸭疫里默氏菌 (RA)制备四价铝胶复合佐剂灭活苗 ,经过无菌及安全检查合格后 ,3日龄樱桃谷鸭颈背皮下注射 0 .5mL/只。免疫后 10 ,13和 16天对同源RA的攻击表现出 10 %～ 35 %、80 %～ 10 0 %和 10 0 %免疫保护 ,5 1～ 6 5d免疫保护力开始下降。疫苗一次免疫后 2 3d抗体水平均达到高峰 ,至 93日龄时仍能检出抗体 ,10日龄进行二次免疫后可产生更高的抗体水平 ,到 6 5d时仍能保持较高抗体水平。疫苗免疫雏鸭后能够显著 (P <0 .0 5 )或极显著 (P <0 .0 1)地增强T细胞的免疫力 ,时间达 2 2周。对攻毒保护试验、抗体消长规律、细胞免疫测定和田间试验结果综合分析表明 ,RA四价铝胶复合佐剂灭活苗免疫雏鸭后免疫保护的形成是体液免疫与细胞免疫协同作用的结果 ,疫苗均具有良好的安全性和免疫原性 ,为生产中有效预防该病的发生提供了良好的疫苗     

复合多糖对鸭疫里氏杆菌疫苗免疫效果的影响

将复合多糖与免疫效果较好的蜂胶分别作为佐剂,设定不同的浓度制备鸭疫里氏杆菌参考株RA2F2与本地分离株YM1、YM2的三联灭活疫苗,首免后第7天开始采集试验鸭鲜血制备血清,每隔4～5d采用试管凝集反应监测其抗体滴度,比较各试验组的免疫效果。结果表明:高浓度(10g/mL)复合多糖佐剂及多糖蜂胶复合佐剂于首免疫后的第11天抗体效价均达到1∶40;多糖蜂胶复合佐剂最高效价于免疫后的第19天达到1∶160,一直维持较高水平,适合作为制备鸭疫里氏杆菌多联灭活疫苗的佐剂,其最适添加比例是15mg/mL,其中蜂胶与复合多糖的比例是1∶2;本研究同时也表明于3～5日龄首免、10～12日龄加强免疫一次是预防鸭疫里氏杆菌病发生的较好免疫程序。     

鸭疫里氏杆菌病灭活疫苗的研制

从河北省某肉鸭场的鸭疫里氏杆菌病发病鸭中分离出鸭疫里氏杆菌（Riemerella anatipestifer,RA)菌株。对该菌株采用液体、固体两种方法增菌培养后制成油乳剂灭活疫苗，以0.5mL/只剂量经皮下免疫7日龄雏鸭，并在河北省某发病肉鸭场进行了田间试验，表明该疫苗免疫效果良好，保护率达90％以上。     

鸭传染性浆膜炎蜂胶疫苗研制

从重庆疫鸭中分离到2株细菌，经细菌形态学、生理生化指标鉴定，证明为鸭疫里氏杆菌（Riemerella anatipestifer,RA)。用改良的血清酵母肉汤进行培菌培养，将2菌株菌液混合（1：1，体积比），经甲醛灭活后加入蜂胶左剂，制成蜂胶灭活疫苗。用其免疫5－7日龄雏鸭，一免后7、10、15d皮下注射RA混合菌液攻毒（0．2mL/只）,平均保护率达66．67％；10d后二免，二免后7、10d攻毒（0．2mL／只）,平均保护率达94．47％。     

鸭疫里氏杆菌油乳剂三价灭活疫苗的研究

为了更有效地控制鸭疫里氏杆菌病的流行,选择鸭疫里氏杆菌3个不同血清型流行菌株GXRA01、GXRA07和RAGX09制备油乳剂三价灭活疫苗。对疫苗进行免疫接种剂量试验、安全性检验、免疫效力检测以及保存期试验。结果表明,疫苗安全有效,每只雏鸭颈部皮下注射0.5 mL,能抵抗鸭疫里氏杆菌的攻击,免疫保护期为50 d,4℃~8℃疫苗保存期为6个月。研制的鸭疫里氏杆菌油乳剂三价灭活疫苗具有良好的安全性和免疫原性。     

鸭传染性浆膜炎油佐剂灭活疫苗的研究

以血清Ⅰ型鸭疫里默氏菌(RA)分离株为菌种研制RA油佐剂灭活疫苗,对3日龄樱桃谷鸭颈背皮下注射0.25mL/只即可产生良好的免疫应答,免疫后10、13和16天对同源RA的攻击表现出35%、85%和100%免疫保护。疫苗一次免疫后30天ELISA抗体滴度达到高峰,至93日龄时仍能检出抗体。10日龄进行第二次免疫可产生更高的抗体滴度,到65天时仍能保持较高抗体水平。ELISA抗体滴度≥500时雏鸭即获得免疫保护。疫苗免疫雏鸭后能够显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)地增强T细胞的免疫力,时间持续两周。RA油佐剂灭活疫苗免疫雏鸭后免疫保护的形成是体液免疫与细胞免疫协同作用的结果,其中体液免疫占主导作用。     

鸭疫里氏杆菌和大肠杆菌二联灭活疫苗研究

将鸭疫里氏杆菌(RA)通过加有血清的改良肉汤培养，得菌数在520亿—2000亿／mL的菌液；鸭大肠杆菌(E．coli)通过普通肉汤培养，得菌数在1000亿～5000亿／mL的菌液，将两茵液甲醛灭活后以2.5：1的比例混合，再与灭菌的油乳剂以2：5的比例强力搅拌，制成二联油乳剂灭活疫苗，经无菌检验，安全检验合格后，做免疫保护试验，免疫6日龄雏鸭(0．5mL/只)，于18天后攻毒(RA：0．2mL／只；E.coli：0．1mL/只)，保护率分别为75％和50％；6日龄一免，14日龄二免(均0．5mL/只)，于二免后11天攻毒，保护率分别为100％和80％。     

家禽H5亚型禽流感(Re-6株)疫苗免疫抗体消长规律研究

为了解H5亚型重组禽流感Re-6株灭活疫苗在鸡、鸭免疫后的抗体消长规律,本实验分别选择一个鸡场和鸭场开展了临床免疫实验。实验鸡群于14日龄首免单价疫苗(Re-6株)和H5亚型二价疫苗(Re-6株+Re-4株)后,在30日龄~200日龄不同时间点采血检测Re-6抗体,结果表明,二价疫苗比单价疫苗免疫后的Re-6免疫抗体产生早、效价高、抗体整齐度好;40日龄二免后20 d,二价疫苗和单价疫苗的Re-6免疫抗体消长规律趋于一致。实验鸭群于17日龄分别采用禽流感(H5+H9)双价灭活疫苗和单价灭活疫苗(H5N1亚型,Re-6株)进行免疫,免后45日龄~205日龄不同时间点检测Re-6抗体,结果表明,双价疫苗与单价疫苗均可以诱导免疫鸭产生高水平抗体,而且两种疫苗的消长规律相似。此外,45日龄二免Re-6株疫苗的免疫程序要优于70日龄二免的免疫程序。本研究评估Re-6疫苗的防控效果,为家禽H5亚型禽流感免疫防制提供了实验依据。     

短喙矮小综合征灭活苗母源抗体消长及其被动保护研究

为了解实验室试制短喙矮小综合征(SBDS)灭活疫苗免疫种鸭后代的母源抗体消长规律及被动保护效果,本研究收集了160份SBDS灭活疫苗免疫樱桃谷鸭种鸭后代不同日龄的血清,用鹅细小病毒(GPV)胶乳凝集抑制试验(LPAI)跟踪检测抗体效价,并对8日龄不同母源抗体雏鸭进行攻毒,记录发病情况并测定攻毒后第14 d的体重、喙长宽值。结果显示,樱桃谷种鸭免疫SBDS灭活疫苗后能够使其后代携带较高水平的母源抗体,至10日龄为2.4±0.7514(-log2),阳性率100%;21日龄为0.2±0.37(-log2),阳性率15%。拟合出1日龄~14日龄母源抗体消长曲线公式为y=6.409e~(-0.10x),R~2=0.99421,其中y表示抗体水平,x表示日龄。母源抗体被动保护试验结果显示雏鸭母源抗体LPAI效价≥2(-log2)可抵抗SBDSV强毒攻击,获得有效被动保护。表明SBDS灭活疫苗免疫种鸭可保护其后代雏鸭抵抗SBDSV强毒感染,有效被动保护期10 d以上。本研究为鸭SBDS的免疫程序制定和有效防控奠定了基础。     

鸭源巴氏杆菌-大肠埃希菌二联多价蜂胶灭活疫苗的制备与免疫效果试验

本研究选取鸭致病性大肠埃希菌（E．coli）常见血清型O1、O2、O18、O78和3株分离自发病鸭场、毒力强、免疫原性好的巴氏杆菌（Pasteurella multocida,P砌）D22、D23、D157作为制苗菌株,分别以鲜血琼脂和马丁琼脂进行固体表面培养制备的抗原与蜂胶佐剂高速乳化,制备鸭多杀性巴氏杆菌-大肠埃希菌二联多价蜂胶灭活疫苗。结果表明,疫苗安全可靠,雏鸭一免后第14天对同源E．coli、Pm攻击免疫保护率为100％和90％;雏鸭二次免疫后第14天的免疫保护率均为100％。用间接ELISA对免疫鸭进行抗体消长规律检测,7日龄商品麻鸭首免后20d抗体达到高峰,抗体维持时间在54d以上;首免7d后进行二免,可产生显著高于一免的抗体水平。疫苗免疫雏鸭能够显著（P〈0．05）或极显著（P〈0．01）地增强T细胞的免疫力,可维持3周左右。疫苗在4℃可保存12个月以上。     

鸭疫里默氏菌铝胶佐剂与铝胶复合佐剂4价灭活疫苗的比较

以血清 1、2、4、5型鸭疫里默氏菌 (Riemerella anatipestifer,RA)制备 4价铝胶佐剂和铝胶复合佐剂 2种灭活苗 ,经过无菌及安全检查合格后 ,对 3日龄樱桃谷鸭颈背部皮下注射 0 .5 m L/只。(1 )免疫后 1 0、1 3、1 6 d对同源 RA的攻击 ,铝胶佐剂苗表现出 5 %～ 2 0 %、75 %～ 90 %、1 0 0 %免疫保护 ,2 3～ 30 d免疫保护力开始下降 ;铝胶复合佐剂苗表现出1 0 %～ 35 %、80 %～ 1 0 0 %、1 0 0 %免疫保护 ,5 1～ 6 5 d免疫保护力开始下降。(2 ) 2种疫苗 1次免疫后 2 3d抗体水平均达高峰 ,至 93日龄时仍能检出抗体的存在 ,1 0日龄进行第 2次免疫后可产生更高的抗体水平 ,到 6 5 d时仍能保持较高抗体水平 ;其中 1 6～ 6 5 d进行 2次免疫的铝胶复合佐剂苗产生的抗体水平显著 (P<0 .0 5 )或极显著 (P<0 .0 1 )地高于铝胶佐剂苗。 (3) 2种疫苗免疫雏鸭后能够显著 (P<0 .0 5 )或极显著 (P<0 .0 1 )地增强 T细胞的免疫力 ,时间达 2周。对攻毒保护试验、抗体消长规律和细胞免疫测定结果综合分析表明 ,RA4价铝胶佐剂和铝胶复合佐剂 2种灭活苗免疫雏鸭后 ,免疫保护的形成是体液免疫与细胞免疫协同作用的结果。经实验室攻毒保护试验、EL ISA抗体消长规律测定、T细胞免疫水平测定和田间试验表明 ,研制的 2种疫苗均具有     

鸭疫里氏杆菌蜂胶灭活疫苗的研制及临床应用

以从本地病番鸭群和樱桃谷鸭群中分离到的鸭疫里氏杆菌(RA),W-4和Z-3株为菌种,蜂胶为佐剂研制而成的鸭疫里氏杆菌蜂胶灭活疫苗,经无菌试验和安全性试验合格后,给6日龄雏鸭注射0.3mL/只,接种后10d用相应的2株强毒进行攻击,能获得80%以上的保护率,临床应用保护率在92%以上,疫苗经半年保存后,其物理性状仍均匀稳定。经临床应用证明它具有使用方便、安全、高效等特点。     

黄芪多糖佐剂对Ⅰ型鸭疫里氏杆菌灭活疫苗的作用研究

本研究以Ⅰ型鸭疫里氏杆菌武汉分离株为菌种,经复苏、增菌、浓缩、灭活后与黄芪多糖佐剂混合制成灭活疫苗。试验鸭在5日龄时按最佳免疫剂量（0.3 mL/只）注射疫苗,免疫后第3、7、10、14、21天的攻毒保护率分别为100%、90%、100%、100%、90%,免疫后第3天即能用琼脂扩散法在血清中检测出Ⅰ型鸭疫里氏杆菌特异性抗体,效价逐渐升高,至免疫后第10天达高峰（P<0.01）。试验结果表明,该灭活疫苗能有效预防鸭传染性浆膜炎。     

2型和11型鸭疫里默氏菌二价灭活苗的研制

为研制血清2型和11型鸭疫里默氏菌(Riemerella anatipestifer,RA)二价灭活疫苗,以RA1325株(2型)和RA1229株(11型)为菌种,经培养、灭活、浓缩,混合后制成二价灭活油乳剂疫苗。将疫苗皮下接种7日龄番鸭,免疫后7、14、21、56、63、70、77 d进行攻菌试验,测定疫苗的免疫原性。免疫后每隔7 d用ELISA方法测定血清中的抗体。结果表明,疫苗免疫后14 d产生良好保护,保护率超过80%,免疫持续期可达60 d。免疫后14~63 d抗体效价处于较高水平,说明研制的二价灭活疫苗能对血清2型和11型RA引起的鸭疫里默氏菌病产生良好的预防效果。     

樱桃谷肉鸭禽流感疫苗免疫程序的探讨

鸭流感是由禽流感病毒引起的鸭的一种病毒性传染性疾病,目前鸭流感疫情主要是由H5N1亚型毒株引起的。本试验采用常规的血清学方法对雏鸭的母源抗体水平下降规律及不同日龄首免禽流感油乳剂灭活疫苗后的抗体动态变化的检测分析,并通过不同疫苗剂量接种肉鸭后的抗体检测结果分析,6日龄为樱桃谷肉鸭禽流感的最佳首免日龄,0．5ml／只作为首次免疫较为合适的免疫剂量。     

鸭传染性浆膜炎油佐剂灭活疫苗的研究

以１、２型鸭疫里默氏菌分离株为菌种研制了１型鸭传染性浆膜炎单价油佐剂灭活疫苗和１、２型鸭传染性浆膜炎二价油佐剂灭活疫苗。经过无菌及安全检查合格后对７日龄雏鸭经颈部皮下接种０．５ｍＬ／只,免疫后１４、２４ｄ用相同血清型强毒攻击,保护率达９０％￣１００％。单价疫苗免疫后２周内,抗体水平持续上升,从第３周开始缓慢地下降,５周时仍然维持在较高水平。通过攻毒保护试验和抗体消长规律的测定表明,鸭传染性浆膜炎油     

血清10型鸭疫里默氏杆菌灭活油乳剂疫苗的研制

鸭疫里默氏杆菌(Riemerella anatipestifer,RA)感染是主要危害2~8周龄雏鸭的高致病性细菌性传染病。为研制血清10型RA灭活油乳剂疫苗,选取10株血清10型RA分离株进行动物体复壮、分离和鉴定后,分别对部分毒株进行了毒力测定和灭活油乳剂疫苗的研制。结果表明,所有试验用分离株对7日龄雏鸭均具有较强的致病力。分离株YXL1和HXb2的半数致死量分别为2.8×108 cfu和82 cfu,不同菌株之间的毒力差异很大。用研制的灭活油乳剂疫苗对雏鸭进行2次免疫后,免疫鸭可获得高水平的特异性抗体,并可抵抗强毒RA的攻击,以HXb2免疫后的攻毒保护性最好。抗体水平检测和攻毒保护试验结果表明,用血清10型RA分离株HXb2制备的油乳剂灭活疫苗具有良好的免疫保护作用。     

免疫程序与母源抗体对H5禽流感疫苗免疫鸭和鹅HI抗体水平的影响

对不同日龄与母源抗体水平的鸭和鹅，用H5亚型禽流感疫苗免疫后，其HI抗体消长情况进行了比较和观察，结果，初生水禽3日龄首免即可对禽流感疫苗（H5亚型）产生良好的免疫应答；雏鹅母源抗体几乎以每4d下降1个HI抗体效价单位的速度消退；母源抗体对H5禽流感疫苗免疫后的HI抗体水平存在一定的干扰作用；加强免疫鸭和鹅所产生的H5 HI抗体水平及其维持时间与仅免疫一次的鸭和鹅所产生的抗体水平之间存在显著差异；鸭和鹅免疫H5禽流感疫苗后第25～30d H5 HI抗体水平达到高峰。     

鸭疫里氏杆菌二价灭活疫苗制备及免疫效力研究

【目的】根据鸭疫里氏杆菌(Riemerella anatipestifer,RA)血清1型、2型贵州流行株制备二价灭活疫苗,为鸭疫里氏杆菌病的防控及疫苗研制提供研究资料。【方法】以血清1型RA(RA-G06株)、血清2型RA(RA-HS01株)地方流行株为菌种,通过涂板法测定菌株生长曲线,利用改良寇氏法计算菌株对鸭的半数致死量(median lethal dose, LD₅₀),将2株菌培养至终浓度为1×10¹⁰ CFU/mL后等比例混合,以卡波姆为佐剂制备二价灭活疫苗,经疫苗质量检验后进行雏鸭免疫试验;通过检测免疫鸭血清中特异性抗体水平和攻毒保护试验评价疫苗的保护率,对攻毒试验鸭心脏、肝脏、脾脏和脑组织进行组织病理学观察。【结果】RA-G06株和RA-HS01株均在培养12 h时到达峰值,活菌数分别为2.1×10¹¹和3.3×10¹¹ CFU/mL,LD₅₀分别为1.44×10¹⁰和2.63×10⁸ CFU/mL;制备的疫苗安全性良...