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1 接种前的预处理 母种在长期保存过程中,棉塞易出现感染。试管壁上可能有大量的杂菌孢子或菌丝。处理方法:取试管时棉塞端向下轻拿轻放,以防棉塞上的杂菌孢子落到斜面菌苔上。先用酒精灯火焰烧棉塞,再把塞棉塞试管部分置 相似文献
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蘑菇的多孢分离,大多沿用玻璃钟罩、培养皿、搪瓷盘等收集孢子的方法,操作复杂,不易掌握。我所采用试管收集孢子,操作比较简易,成功率也较高,现将其作法简介于下. (一)准备工作:①采收长至八分成熟的种菇(菌膜未破),用利刀将菇柄切去(留0.5cm左右),用消毒药水擦洗整个菇的表面。②取口径15mm的薄壁试管塞上棉塞,在1.5公斤压力下灭菌30分钟,也可将试管在酒精灯火焰上来回灼烧灭菌,然后棉塞过酒精灯火焰灭菌即塞上试管备用.③接种室或接种箱,用常规方法灭菌。 相似文献
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黑木耳原种历来均在实验室内分离,一般采用孢子弹射和组织分离两种方法。近几年来,我们将试管孢子分离法加以改进,就地采种分离,效果很好,成功率均达90%以上。将现场采下的种耳用冷开水浸两小时,并冲洗3~4次,放入灭菌培养皿或搪瓷盘内,盖上无菌纱布,收尽耳面余水,再用灭菌剪刀将木耳剪成蚕豆大小的耳片。用灭过菌的接种铲挑取一小块种耳,迅速地移入试管,并贴在事先涂放少许培养基的试管壁上,种耳长孢子的一面,朝向斜面培养基。于18~20℃下培养24小时,当斜面上有孢子印时,用 相似文献
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用粪草培养基制作双孢菇母种,接种块萌发早,菌丝长势旺、均匀,菌丝满管较常用的玉米粉、PDA、麦粒等培养基制种早5~10天。现将其制作方法介绍如下: 1培养基配方 干粪草料250g,葡萄糖20g,琼脂20g,磷酸二氢钾3g,硫酸镁1.59,VB_13片,蛋白胨5g,水1000mL。 2培养基制作 粪草料(发酵好的双孢菇粪草培养料)250g,置铝锅中,加水至淹没料,煮拂保持20~25分钟,用4~6层纱布过滤,取滤液;将滤液加热至沸,加入琼脂,文火并用玻棒搅拌,待琼脂完全溶化后加入其它营养物质,使其溶化;最后补足水至1000mL,调pH值,趁热分装试管(占试管长度的1/4~1/5),注意培养液易沾附试管口壁,加棉塞,5支或10支一把用牛皮纸包扎好,高压灭菌30分钟,趁热摆斜面。 3接种培养 试管斜面冷却凝固后,放入超净工作台或接种箱接种。接种后置25~28℃温度下培养,一般12~15天满管。 相似文献
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试管组织分离常常由于细菌、酵母菌污染导致失败,既耽误了时间又浪费了培养基,实是遗憾。现将此法操作略作改进,可达到分离成功的目的。(一)试管组织分离培养法:子实体选取、消毒、培养基制作均同常规,只是在接种时,使试管培养基的斜面朝下,将组织块放于试管棉塞前的内壁上,塞好棉塞后竖立试管让组织块沿壁下滑达管的底部并接触培养基。注意组织块下滑时不能接触到培养基,这样即使组织块带菌也不至于污染整个培养基斜面。接种后将试管立放或斜放,斜放程度不得低于培养基在 相似文献
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金针菇母种分离由于其菇柄、菇盖小,接触外界面广,易粘上杂菌,且分离时用酒精消毒易使组织块、孢子受到伤害的特点,分离不易成功。对此笔者采用在克氏瓶和未开袋无菌条件下长成的子实体进行孢子和组织分离,成功率达90%以上,且菌丝生长迅速、洁白,现将试验方法和结果报告如下。 相似文献
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在利用 PDA培养基进行母种分离、母种扩大、活化过程中 ,杂菌的污染在所难免。对此 ,我们经多次实验 ,在 PDA培养基中加入 1.2 5 m g/ L四环素 ,起到良好的防杂效果。现将试验情况总结如下。1 培养基制作 在 PDA培养基分装前 ,把四环素磨成粉 ,每升加医用四环素 5片 ,然后搅拌均匀 ,分装试管。如常规灭菌即可。其颜色比 PDA深 ,呈黑褐色。2 母种分离结果 分离用平菇苏平一号 ,草菇 V96 6 ,茶树菇一号 (引自福建农科院 )。分别在平菇 2 0 0 0年 1月 ,9月 ,2 0 0 1年 3月进行。每种菇重复 3次 ,每重复 10支试管 ,分离后每天观察 ,凡… 相似文献
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1.细菌污染提纯法: (1)材料:含量为4万单位/1毫升的庆大霉素一支;经高压灭菌的PDA斜面培养基10支(试管规格18×180毫米);高压灭菌的1毫升注射器一支;6号针头一个。 (2)方法:在无菌箱(室)内,把4万单位/1毫升的庆大霉素液用砂轮割开,用无菌注射器分别注入10支冷却至45℃左右的斜面试管培养基中,摇动培养基使之充分混匀,立即摆成斜面。然后把被细菌污染的菌种以无菌操作移入该斜面培养基中,置25℃下培养。2次即可把细菌甩掉,效果甚佳,对食用菌菌丝无抑制作用。 2.霉菌污染提纯法: (1)试管棉塞受潮污染了霉菌,大都出现在斜面前端,可在酒精灯火焰上连同培养基一块灼 相似文献
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新乡市所辖各县区秋粮主要种植玉米 ,每到收获季节 ,秸杆就地焚烧 ,严重污染环境。 2 0 0 0年始 ,我们推广了玉米秸杆双孢蘑菇春菇冬种技术 ,每 30~ 4 0m2 种植面积可消耗玉米秸杆 10 0 0kg ,经过三年来的示范推广 ,产量稳定在 10~ 15kg/m2 。其栽培技术总结如下 :1 菌种供试菌种As2 796 ,1998年引自河南省商丘市农科所食用菌研究室 ,出菇试验后经组织分离获得。1 1 母种 母种采用Fe -PDA培养基 ,即 10 0 0mlPDA培养基中加入 1g硫酸亚铁。按常规制成试管斜面培养基 ,接种培养。在 2 5℃环境温度条件下 ,菌丝粗壮均匀 ,生长速度较快… 相似文献
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金针菇的母种分离,一般是采用常规袋栽的子实体组织分离法。因菇体小,菌肉薄,柄中空,出菇时要求相对湿度大污染杂菌机会多,分离时用酒精消毒又使组织块受伤,所以分离成功率很低。为提高成功率,笔者采用现蕾后在无菌条件下套瓶法培养的子实体进行组织分离和孢子分离,于1995年1月各试验15支试管,成功率为86.7%和93.3%。现将方法及结果报告如下: 相似文献
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食用菌生产菌种是关键,母种分离及扩繁是菌种制作的重要环节。传统的母种分离方法的消毒处理需要将分离材料在0.1%~0.2%的升汞水中浸泡1分钟,而后用无菌水漂洗2次,不仅程序烦琐而且常在分离材料中留下残液,影响成活率。在母种扩繁过程中,左手拿2支试管,右手夹2个棉塞,还要拿一个接种铲,操作不便。鉴于上述情况,我们对母种的分离及扩繁进行了改进。 一、材料及方法 (一)试验材料 种菇,菇木,解剖刀,接种耙,接种架,酒精灯,70%酒精,培养皿,玻璃铅笔,PDA培养基,原始母种。 相似文献
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一般试管培养基灭菌后需要在室内取出摆成斜面,笔者认为,此法有两个缺点。一是棉塞未干,在空气中易沾上杂菌孢子而染杂;二是培养基从高压锅内取 相似文献
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为长期保藏菌种,对产孢的菌株可采用以下简易的砂土管保藏法:(1)选洁净河砂,过孔径0.5毫米筛子后,用清水反复淘洗并不断搅动,直到水清澈为止。(2)将淘洗过的砂粒充分干燥(烘或炒干)后装入指形管中,每管约装1克,加压或常压灭菌。(3)在接种箱内按无菌操作用接种铲在斜面上刮取孢子或菌丝(绝对不可夹带培养基),再将接种铲插入砂土管内反复搅动,使孢子均匀地散布于砂粒上,1支斜面上的孢子可做1支砂土管。(4)接种后紧塞棉塞,齐管口剪 相似文献
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为保持食用菌菌种的优良种性和防止杂菌污染,较长期保藏斜面菌种,我们试用蜡封管口法,效果良好。采用此法无需专门设备、特殊药物,材料易得,操作简便。具体做法如下: 1.培养基的制备。取大型试管(口径为20~25毫米),适当加大培养基中琼脂的比例(占3%),增加注入试管中培养基的数量(占容积的1/4),棉塞要做紧。培养基的配方应根据该菌种生长发育对营养的需求,选择最佳方案,一般多采用马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA培养基)。 2.接种培养。在已选定的菌株中,挑取茁壮的菌丝为接种体,接种体不要过大(3×3毫米)。在该菌生长最适的温度下进行培养,长满斜面后须继续培养2~3天。 3.剪塞浸蜡。将已培养好的斜面,齐管 相似文献