自然发酵辣椒中一株乳酸菌的分离筛选及鉴定

为了筛选符合辣椒发酵的乳酸菌,从自然发酵辣椒中分离出优势菌,对分离得到的一株乳酸菌进行了生长曲线、产酸能力、耐盐、耐亚硝酸盐的试验。结果表明,这株乳酸菌有较好的产酸能力、耐盐以及耐亚硝酸盐的能力,因此具有较好的发酵特性,经形态观察和碳源利用试验,符合发酵辣椒的生产要求,经初步鉴定为植物乳杆菌。     

抗真菌乳酸菌的筛选及菌种鉴定

采用双层培养基法从中国传统发酵食品(发酵乳、泡菜、发酵肉)中筛选到20株对真菌有拮抗作用的乳酸菌菌株。对其中7株具有明显拮抗作用菌株的抑菌谱进行了初步研究,这7株菌对啤酒酵母、汉逊酵母、枯草芽胞杆菌等有明显的抑制作用,对黑曲霉可明显抑制其孢子的成熟。对其中2株菌进行了常规生理生化及16SrRNA分子鉴定,鉴定结果为干酪乳杆菌鼠李糖亚种。     

三株乳酸菌形态特征的研究

选取3株乳酸菌分别为保加利亚酸乳杆菌(Lactobacillus bulgaricus)、嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)和植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum),活化菌株并培养至第2代,接种到培养基中,待菌生长到8,10,12,14,16,18,20,22,24 h,对菌种进行制片和革兰氏染色,对比3株乳酸菌的形态变化。3株乳酸菌的所有涂片都呈现蓝紫色,证明3株乳酸菌均为革兰氏阳性菌。3株乳酸菌在培养16～18 h时,为对数期末期,革兰氏染色试验菌体呈现典型形态。在对菌体染色过程中,应注意控制好菌龄和脱色时间。     

酸菜汁中乳酸菌的分离与鉴定研究

为明确自然发酵酸菜中乳酸菌的种类,采用添加溴甲酚紫的SL分离培养基对其中的产酸菌进行分离,结合表型形态测定筛选其中的乳酸菌,并根据《伯杰氏系统细菌学手册》,对筛选到的乳酸菌进行形态学与生理生化鉴定。结果表明,自然发酵酸菜汁中的产酸优势菌为G+菌,且它们大多属于乳酸菌;筛选到9株乳酸菌SY1～SY9,其中SY4为发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum),SY6为植物乳球菌(Lactococcus plantarum),其他7株都为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)。     

金针菇泡菜中乳酸菌的发酵性能研究

从金针菇泡菜中筛得一株乳酸菌,通过菌株生长曲线得出该菌株发酵性能稳定,产酸力强,24 h内p H由7.0降至3.8;该菌株耐酸性较强,在p H 3.0环境下仍有活性;菌株耐盐性也较好,对食盐的最高耐受浓度为10%。利用该菌株制作金针菇乳酸菌发酵泡菜,通过单因素试验确定乳酸菌兼性厌氧发酵时最优工艺参数为:接种量4%,发酵温度30℃,发酵8 d时金针菇泡菜达到成熟。     

新疆传统泡菜中乳酸菌的分离鉴定及其益生性能评价

从新疆地区自然发酵的泡菜中分离出5株性能优良的乳酸菌,经形态学分析和生理生化试验并结合16S rRNA分子鉴定,确定菌株R53为鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus),R62、R63和R73为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum),R2为类肠膜魏斯氏菌(Weissella paramesenteroides),并对其进行了益生性能评价试验.结果表明:在NaCl浓度为4％时,所有菌株均有较强的生长能力;在pH值为3.0的模拟胃液中培养2 h存活率仍达90％以上,在pH值为8.0的模拟肠液中培养6 h仍保留超过77％的存活率;R53、R62和R63菌株对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes)、大肠杆菌(Escherichia coli)和鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella ty-phimurium)4种食源性病原细菌均有一定的抑制作用,对常见的抗生素如红霉素、青霉素、氯霉素、氨苄西林和头孢唑啉均敏感.     

遏蓝菜发酵过程中微生物菌群演变规律及菌株分离鉴定

将遏蓝菜发酵30 d,每隔3 d从汁液中采样,利用MRS与PDA培养基进行分离纯化,获得6株菌株,其中1株酵母菌、1株未确定菌、4株乳酸菌。研究发现,遏蓝菜发酵过程中3~6 d优势微生物是酵母菌;之后优势微生物菌群为乳酸菌,6~15 d主要为乳球菌;15~30 d主要为乳杆菌,即植物乳杆菌、短乳杆菌。     

蝴蝶兰根内生细菌的分离及可分泌IAA细菌的筛选

为从蝴蝶兰(Phalaenopsis amabilis)根部分离出可分泌吲哚乙酸(Indole-3-acetic acid,IAA)的内生细菌,通过探讨蝴蝶兰根部表面消毒的最佳条件,采用分离培养法、生理生化实验和16S rDNA分析,对蝴蝶兰根部出内生细菌进行研究。结果表明,NA培养基分离出的6株细菌分别属于短杆菌属(Brevibacterium)、伯克氏菌属(Burkholderia)、Dyella和类芽胞杆菌(Paenibacillus);R2A培养基分离出的20株细菌分别属于伯克氏菌属(Burkholderia)和Dyella;分离获得的26株内生细菌中,具有分泌IAA的功能有23株,占分离总菌数的88.5%。综合来看,蝴蝶兰根中存在可分泌IAA不同种属的内生细菌,为进一步研究内生细菌与蝴蝶兰植物之间的相互作用提供了菌种资源。     

乳酸菌混合发酵毛酸浆果汁工艺优化及发酵特性分析

以毛酸浆果汁为原料,采用植物乳杆菌和副干酪乳杆菌混合发酵果汁,分析发酵前后的毛酸浆果汁理化指标、黄酮、多酚含量和挥发性气味成分变化情况。结果表明：植物乳杆菌和副干酪乳杆菌接种比例2∶1（V∶V）,接种量1.0%（V∶V）,发酵时间12 h时,毛酸浆发酵果汁感官评分、总黄酮和多酚含量构成的综合评分最佳。毛酸浆果汁中主要的气味成分为萜烯类物质和无机硫化合物,混合乳酸菌发酵可以明显提高果汁中萜烯类物质、无机硫化物、氮氧化合物、有机硫化物和芳香物质含量,特别是对健康有益的萜烯类物质。本研究对乳酸菌发酵毛酸浆果汁的工业化生产具有重要的指导意义。     

植物乳杆菌SC9直投式发酵剂的研究

采用50 L发酵罐对植物乳杆菌SC9进行培养,同时流加NaOH中和发酵过程产生的酸,培养至16 h时活菌数达到8.6×1012CFU/mL。确定植物乳杆菌SC9直投式发酵剂的制备工艺:收集发酵菌液并于4℃,7 000 r/min下离心10 min,用生理盐水洗涤菌体后重悬菌体,室温静置30 min,离心,向菌泥中添加11%脱脂乳、1%甘油、3%谷氨酸钠、2.5%海藻糖和2.5%果糖混合液作为保护剂,发酵剂菌粉中活菌数为4.3×1011CFU/g。     

解磷钾细菌与褐环乳牛肝菌相互作用的研究

菌根是生态分布较广的一类植物共生体,其生态功能为大众所认可。一些植物根际微生物对菌根共生体的建立及其功能具有显著的促进作用。以内蒙古地区优势菌根真菌之一的褐环乳牛肝菌(Suillus luteus;SP7)为研究对象,选择从其菌根际分离得到的2株具有溶磷钾能力的细菌荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens;P15)和胶质芽孢杆菌(Bacillus mucilaginosus;K2),研究2株根际细菌对褐环乳牛肝菌在纯培养条件下的促生长作用。结果显示,在纯培养条件下,2种细菌对菌根真菌菌丝的促生作用有赖于培养的先后顺序,其中P15对菌根真菌SP7促生作用最高可增加30.7%;K2对菌根真菌SP7促生作用最高可增加34.7%。菌根真菌SP7对P15和K2的促生作用在真菌培养液的加入量为细菌培养基的1/2时达到最大,细菌OD值分别为2.421 6和2.489 1;同时接种3种菌解磷解钾效果为最好,培养10 d后,培养液中可溶性K的质量浓度为9.46μg/mL;可溶性P的质量浓度为720.07μg/mL。     

剁辣椒中抗氧化功能乳酸菌的筛选及应用研究

从自制的剁辣椒中分离纯化乳酸菌,通过菌株的抗氧化功能初筛(H2O2耐受性)和复筛(总抗氧化能力(FRAP法)、超氧阴离子清除能力、DPPH自由基清除能力和羟自由基清除能力),获得一株抗氧化能力较强的发酵乳杆菌BLHN3.将该菌株与嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌用于剁辣椒发酵,通过单因素试验及正交试验确定最佳工艺参数为:发酵温度26℃,食盐添加量7％,接种量2％,发酵10 d,剁辣椒的总酸含量为9.32 g/kg,感官评分82.89分.研究结果可为抗氧化菌株BLHN3的多菌种混合发酵工业化应用提供参考.     

解磷巨大芽孢杆菌液体发酵培养条件的优化

为了获得高密度培养的解磷细菌菌剂,以一株解磷巨大芽孢杆菌为研究对象,以OD600为依据测定活菌数量,优化最佳液体发酵培养条件。首先采用单因素试验对其培养条件如接种量、装液量、发酵温度、起始pH、发酵时间、摇床转速等进行筛选,获得单因素试验最佳值;在此基础上,利用L9(34)正交试验对其培养条件进行优化及验证,并制作菌株生长曲线。研究结果表明：该株巨大芽孢杆菌的最佳培养条件为：发酵温度30℃、起始pH 8.0、装液量20 mL/250 mL三角瓶、接种量3%、摇床转速250 r/min、培养时间22 h。在此最优条件下培养,以平板涂布法计数,发酵液最终活菌数达到3.2×109 cfu/mL以上。培养2~8 h,菌体生长处于对数期,8 h后菌体生长进入稳定期,22 h后进入衰亡期。试验结果为工业生产解磷巨大芽孢杆菌菌剂提供了基础数据。     

益生菌对酸牛奶中酵母 霉菌的抑菌效果分析

通过牛津杯法评价益生菌上清液对发酵乳产品中酵母菌、霉菌的抑菌效果,结果表明,植物乳杆菌、副干酪乳杆菌对发酵乳产品坏包中的酵母菌、霉菌有不同程度抑制作用,并且添加植物乳杆菌和副干酪乳杆菌对发酵乳后产酸无影响。     

16S rDNA序列分析法鉴定乳酸菌

利用16SrDNA序列分析法,对从西藏传统发酵的酸牦牛奶中分离得到的4株乳酸菌,分别提取DNA,经PCR扩增后,测定其16SrDNA序列,并与基因库中基因序列进行同源性比较,经鉴定1株为瑞士乳杆菌、1株为发酵乳杆菌、2株为干酪乳杆菌。结果表明,该实验方法可以实现乳酸菌种级水平鉴定,与传统方法相比具有简便、快速等优点,适合实验室及工业化生产中对乳酸菌的鉴定。     

降解胆固醇和甘油三酯发酵酸豆奶的研制

以具有高效降解胆固醇、甘油三酯功能的植物乳杆菌为试验菌株,通过对发酵酸豆奶品质的影响因素研究,确定发酵酸豆奶的工艺参数.试验结果表明,蔗糖添加量、接种量、发酵温度及发酵时间对酸豆奶品质的影响显著,最佳发酵条件为接种量4％,蔗糖添加量4％,发酵温度40℃,发酵时间8h,在此条件下发酵酸豆奶为乳白色,口感细腻嫩滑,酸度为83.6°T,总活菌数为4.36×108 CFU/g,胆固醇和甘油三酯的降解率分别为50.01％和39.23％.     

植物乳杆菌Zhang-LL高密度发酵的研究

本试验旨在通过优化培养条件提高植物乳杆菌Zhang-LL发酵培养液中的菌体浓度,为获得高活菌数的益生菌产品奠定基础。对植物乳杆菌的发酵培养基中的氮源进行单因素筛选,选取501油菜籽蛋白胨作为MRS培养基的替代氮源。基于优化的培养基成分,采用单因素及4因素3水平L9(34)正交试验优化发酵条件,确定最优发酵条件为;501油菜籽蛋白胨含量为3.0%、温度34℃、p H 6.5、接种量7%,发酵罐流加15%Na2CO3,转速为150 r/min;在此优化条件下,发酵液活菌数可达1.07×1010CFU/m L。     

永川豆豉中高产蛋白酶菌株的筛选鉴定及液体培养条件的研究

从永川豆豉中筛选、鉴定高产蛋白酶菌株,并对菌株的液体培养条件进行了研究。采用酪蛋白平板法,从永川豆豉中初步筛选出68株产蛋白酶菌株,通过比较发酵后蛋白酶活力,筛选出1株蛋白酶活达1468.7U/mL的高产菌株A-4。依据菌种形态和其生理生化特征,将其鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。研究液体培养条件对菌株生长的影响,确定菌种液体培养的最佳条件为:温度34℃,pH值为8,接种量4%,菌龄12h。     

植物乳杆菌lai基因同源重组敲除载体的构建与鉴定

植物乳杆菌中lai基因编码亚油酸异构酶可催化亚油酸转化生成共轭亚油酸,为了进一步研究lai基因的功能,利用同源重组基因敲除技术,成功构建用于敲除植物乳杆菌lai基因的同源重组敲除载体。这不仅为乳杆菌基因缺失工程菌的构建提供一个快速有效的手段,也为乳杆菌基因功能研究奠定基础。     

水稻内生菌K12G2菌株的鉴定及其促生特性研究

为了开发新的可替代化肥、农药的促植物生长微生物肥料,对从水稻种子中分离得到的1株具有抗氧化活性的内生细菌K12G2进行分类鉴定,检测其促生特性,并通过平板培养和水培试验测定其对水稻幼苗的促生长作用。结合菌株K12G2的形态学、生理生化特征检测及分子生物学鉴定,K12G2为柠檬色短小杆菌(Curtobacterium citreum);该菌株表现为产IAA、溶磷、固氮及淀粉酶活性的促生特性;在限菌平板培养条件下,菌株K12G2培养液浸种1 h处理比4 h处理后对水稻种子的萌发和生长效果明显,培养液处理的水稻幼苗根长和芽长显著增加;在水培条件下,接种K12G2的水稻幼苗根长显著提高47.08%,生长至三叶期的幼苗比例是对照组的4.5倍。结果表明,菌株K12G2促生作用明显,具有一定的应用前景。