内皮抑素在脑胶质瘤中的表达及意义

目的：探讨内皮抑素（Endostatin，ES）在人脑胶质瘤中的表达及其意义。方法：采用免疫组织化学方法，对45例脑胶质瘤和5例正常脑组织标本中ES表达进行定位和定性分析。结果。高缎别胶质瘤（Ⅲ～Ⅳ胶质瘤）ES表达水平明显高于低级别胶质瘤（Ⅰ～Ⅱ胶质瘤）和正常脑组织，差异有显著性意义（P〈0．01）；低级别胶质瘤（Ⅰ～Ⅱ胶质瘤）和正常脑组织ES表达水平差异无显著性意义（P〉0．05）。结论：ES可能在人脑胶质瘤细胞侵袭性生长及恶性发展中起重要作用，且有可能与胶质瘤的恶性度及预后有关。     

血管内皮生长因子与胶质瘤

胶质瘤是颅内肿瘤中最常见的恶性肿瘤之一,占颅内肿瘤的30%～50%[1],而恶性肿瘤侵袭性生长是一个多步骤的复杂过程.肿瘤经过缓慢的无血管生长期后,进入血管形成期,使瘤体得到营养而生长,因而血管生成是实体肿瘤生长和侵袭的前提.血管内皮细胞中血管内皮生长因子(VEGF)是作用最强、特异性最高的血管形成因子之一,与胶质瘤的侵袭性有密切关系.     

血管生成拮抗因子内皮抑素在急慢性白血病中的应用研究

应用vWF标记免疫组化法观察骨髓新生血管情况及ELISA法测定血浆内皮抑素(ES)含量,研究急慢性白血病患者骨髓新生血管情况及血浆血管生成拮抗因子ES的变化情况。结果表明：急性白血病(AL)和慢性白血病(CML)患者骨髓微血密度(MVD)较对照组极显著增高,治疗后获缓解者骨髓MVD显著降低,且接近正常水平;AL和CML血浆ES显著高于对照组,化疗后获完全缓解(CR)的AL和CML血浆ES含量均降至正常水平。说明初诊白血病患者存在骨髓新生血管及血管生成拮抗因子ES水平的增高,白血病患者体内ES的增加很可能对机体具有一种保护作用,其含量的变化可能与白血病患者的预后有关。     

内皮抑素基因的克隆及其序列测定

内皮抑素(endostatin)能抑制内皮细胞的增殖和转移.试验应用TD-PCR法从人胎盘中扩增Endostatin的cDNA片段,将其克隆到pUCm-T载体中,并进行克隆基因的序列分析.序列分析表明,该cDNA开放阅读框长555 bp,编码184个氨基酸残基的多肽序列,其编码序列与国外报道的相应序列基本一致.     

蛴螬提取物对视网膜静脉阻塞兔内皮抑素表达的影响

目的 评价蛴螬提取物对兔视网膜静脉阻塞的治疗作用及其机制。方法 将40只兔随机分为4组：空白组、模型组、复方血栓通组、蛴螬组,每组10只兔20只眼,除空白组外,其余3组均用光化学动力法建立视网膜静脉阻塞（retinal vein occlusion,RVO）动物模型,于给药后1周、3周行FFA检查、HE染色、免疫组化观察内皮抑素表达。结果 FFA检查结果显示：给药后周1周,模型组中央静脉荧光渗漏、出血,复方血栓通组和蛴螬组渗漏、出血较模型组少;给药后3周,模型组渗漏、出血的静脉周围出现无灌注区,复方血栓通组渗漏、出血明显减小,蛴螬组渗漏、出血基本吸收。视网膜切片光镜观察结果显示：蛴螬组视网膜各层结构病理变化均轻于模型组、复方血栓通组。内皮抑素免疫组化结果显示：各造模组内皮抑素表达均下降,蛴螬组表达最强,模型组表达最弱,差异有统计学意义（P<0.05）。结论 蛴螬提取物能改善视网膜缺血缺氧的状态,促进RVO模型中内皮抑素的表达。     

乙二醛酶1在脑胶质瘤组织中的表达

目的 探讨乙二醛酶1(GLO1)在人脑胶质瘤组织中表达的情况.方法 western blot检测GLO1在29例不同类型的脑胶质瘤与20例脑外伤挫伤脑组织(对照组)中表达的差异.结果 western blot证实GLO1在23例非少突细胞胶质瘤组中的表达比对照组普遍下降(P＜0.01),GLO1在胶质瘤中的表达水平跟胶质瘤分类分级、患者的年龄、性别等无关.结论 GLO1在非少突细胞胶质瘤组织中的低表达可能预示着胶质瘤在肿瘤代谢方面存在新机制.     

血管内皮生长因子在宫颈癌组织中的表达及其意义

目的 :探讨血管内皮生长因子 (VEGF)的表达与宫颈癌生物学行为特征的关系。方法 :采用免疫组化法 (SP)检测 78例宫颈癌中 VEGF的表达 ,以 2 5例正常宫颈组织为对照。结果 :(1) VEGF在宫颈癌中的阳性表达率为 4 1.0 %(32 /78) ,明显高于对照组的 8.0 % (2 /2 5 ) (P<0 .0 1)。 (2 ) VEGF阳性表达率在宫颈癌临床分期≤ b期者 (18.6 % )明显低于≥ a期者 (6 8.6 % ) (P<0 .0 1) ;淋巴结无转移者 (30 .0 % )明显低于有转移者 (6 0 .7% ) (P<0 .0 5 ) ;并随病理分化程度 (高、中、低分化 )的降低 ,其阳性表达率显著升高 (P<0 .0 5 )。结论 :VEGF的表达与宫颈癌的浸润转移等生物学行为关系密切 ,在宫颈癌的发生发展过程中发挥着重要作用。     

血管内皮生长因子在上皮性卵巢肿瘤中的表达及其意义

目的了解血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在上皮性卵巢肿瘤中的表达及其意义。方法应用ELISA法检测上皮性卵巢癌患者(恶性组,n=30)、卵巢良性肿瘤患者(良性组,n=30)和正常妇女(对照组,n=20)外周血中VEGF水平。结果恶性组血清VEGF水平明显高于良性组和对照组(P<0.01),良性组和对照组相比较差异无统计学意义(P>0.05)。恶性组术前血清VEGF水平明显高于术后(P<0.01),良性组术前、术后的VEGF水平差异无统计学意义(P>0.05)。恶性组Ⅲ、Ⅳ期患者的VEGF水平高于Ⅰ、Ⅱ期,低分化G3期的VEGF水平高于高中分化G1、2期,差异有统计学意义(P<0.01)。结论检测血清VEGF水平对上皮性卵巢肿瘤的诊断及恶性上皮性肿瘤的分期、分级和预后有重要意义。     

14-3-3及Bcl-2蛋白在人脑胶质瘤中的表达及意义

目的通过检测14-3-3和Bcl-2蛋白在人脑胶质瘤中的表达情况,探讨其在胶质瘤发生、发展中的作用机制.方法采用免疫组化S-P法对5例正常脑组织标本和68例人脑胶质瘤标本进行14-3-3和Bcl-2蛋白检测.结果与正常脑组织比较,14-3-3蛋白在胶质瘤表达异常增强（P〈0.05）;在不同病理分级中胶质瘤组织表达无统计学意义（P〉0.05）,随着胶质瘤恶性程度的增加,14-3-3蛋白表达的强度和范围增加（P〈0.05）.Bcl-2蛋白在不同级别的恶性胶质瘤中阳性表达率有差别（P〈0.05）,且表达强度随着胶质瘤病理分级增高呈明显增高趋势.结论 14-3-3和Bcl-2蛋白对胶质瘤的恶性程度、肿瘤的病理分级有影响,可作为指导临床病理诊断及分级的参考指标.     

手术加VM26-MeCCNu序列治疗恶性脑胶质瘤29例

恶性脑胶质瘤目前治疗的结果仍不能令人满意 ,单独手术治疗平均术后存活期不超过 6个月 ,术后继以放疗 ,平均生存期也未超过 12个月。1992年 6月～ 1999年 12月 ,笔者对 2 9例恶性脑胶质瘤患者 ,采用手术切除后加替尼泊甙 (威猛 ,VM2 6 )和甲基环亚硝脲 (Me CCNu)序列化疗 ,取得较为满意的效果 ,现报道如下。1　临床资料1.1　一般情况本组 2 9例 ,男 17例 ,女 12例 ,年龄 12～ 6 5岁 ,平均 38岁。肿瘤性质 :星形细胞瘤 ～ 级 9例 , ～ 级 8例 ,室管膜瘤 ～ 级 5例 ,多形性成胶质细胞瘤 4例 ,复发的少支胶质细胞瘤 3例。肿瘤均位于大…     

层连蛋白受体67LR在胶质瘤细胞增殖中作用的研究

脑胶质瘤是颅内常见恶性肿瘤,常规的治疗手段很难将其完全治愈.67 kD层连蛋白受体(67 kDlaminin receptor,67LR)属于高亲和,非整联蛋白家族成员,试验表明,该蛋白在许多癌细胞表面过量表达,并且其表达水平与肿瘤细胞的粘附、增殖、分化、迁移、信号转导及转移能力密切相关.本试验利用shRNA干扰、RT-PCR、免疫细胞化学和MTT等技术通过下调67LR基因的表达来探讨其在胶质瘤细胞中的表达情况,及其对胶质瘤细胞增殖能力的影响.结果发现,相对于正常脑组织,67LR在脑胶质瘤细胞表面大量表达.采用shRNA下调其表达后发现胶质瘤细胞的增殖能力明显降低.结果表明,67LR在胶质瘤细胞表面的过表达与此细胞的增殖能力呈明显相关.     

大肠杆菌甜菜碱醛脱氢酶基因的克隆及其在烟草中的表达

利用PCR克隆了大肠杆菌甜菜碱醛脱氢酶基因(betB),构建了含betB基因的重组植物表达质粒载体pLM47,并用农杆菌介导的叶圆盘法对烟草叶片进行遗传转化。结果表明,在含有潮霉素的MS筛选分化培养基上筛选,获得基因转化烟草植株3株;经报告基因GVS的组织化学检测和Western blot检测,证明betB基因在烟草转化植株中得到了表达。     

景观设计中的人文表达——以常熟市宝岩生态观光园为例

指出面对中国城市出现的危机,景观设计必须注重景观的人文表达,将具有本土化特点的自然景观与具有地域性特色的人文景观相结合。以人文精神为切入点,通过对常熟市宝岩生态观光园景观设计的实例分析,从景观设计中人文化的表达思路和表达方式2方面阐述了景观设计的人文环境营造,强调景观人文化的表达思路在于主题明确、贯穿始终,特点突出、相互衔接,本土人文、自然生长,活动丰富、情景互动;而表达方式上则应尊重自然、融合环境,传承历史、聆听故事,引入活动、体验生活。以期使景观成为完美理念和自然景象的化合物,成为人文景观与自然景观的结合。     

重组hIL-2表达载体的构建及在毕赤酵母中的表达

本试验根据hIL-2氨基酸序列、三维结构及其与受体IL-2R结合机制,设计并合成IL-2Rα亚基结合位点修饰性hIL-2基因片段。合成的修饰性hIL-2基因序列被插入真核表达载体pPIC9K,并转化入毕赤酵母基因组中。经筛选得到阳性重组子后,通过诱导培养得到了表达产物。对表达产物进行Elisa初步测定,结果成功表达出重组hIL-2,表达水平达0.93g/L。本项研究为进一步开展IL-2Rα结合位点修饰性hIL-2的生物活性研究奠定了基础。     

人F3-Restin基因的克隆与表达

目的:克隆人F3-Restin基因,表达有生物学活性的新型融合蛋白F3-Restin。方法:采用亚克隆技术构建融合表达载体PET32a(+)-F3-Restin,原核诱导表达,经Ni2+-NTA琼脂糖树脂亲和层析纯化,透析去盐。结果:在20℃、10h的条件下IPTG原核诱导表达、纯化,得到分子量约为40kD的高纯度的可溶性蛋白F3-Restin。结论:成功地克隆了人F3-Restin基因,构建融合表达载体PET32a(+)-F3-Restin,并表达出新型融合蛋白F3-Restin,为进一步研究F3-Restin蛋白抗肿瘤血管生长的活性及作用机理奠定了良好的基础。     

茉莉酸甲酯诱导的小麦白粉病抗性与9个抗病相关基因表达间的关系

[目的]为了明确茉莉酸对小麦白粉病抗性的诱导作用和对抗病相关基因的激活作用,以及抗病性变化与基因表达变化之间的相关性,探索小麦抗白粉病分子机理。[方法]以田间表现不同的代表性感白粉病小麦品种＂中国春＂、＂濮麦9号＂和＂周麦18＂为材料,用茉莉酸甲酯（methyljasmonate,MeJA）处理小麦幼苗叶片进行诱导,通过离体叶段培养法接种白粉菌（Blumeria graminis f.sp.tritici,Bgt）进行抗性鉴定;用实时定量PCR技术检测叶片中PR1（PR1.1）、PR2（β,1-3葡聚糖苷酶）、PR3（几丁质酶）、PR4、PR5（类甜蛋白）、PR9（TaPERO,过氧化物酶）、PR10、TaGLP2a（类胚素蛋白）和Ta-JA2（茉莉酸甲酯诱导蛋白）基因的表达变化。[结果]MeJA处理可以显著提高＂中国春＂、＂濮麦9号＂和＂周麦18＂对白粉菌的抗性水平。诱导抗性可以从MeJA处理后12～96h检测到,24h达到峰值。虽然存在一定差异,但MeJA对3个品种中除TaGLP2a外的8个抗病相关基因的表达有显著激活作用,在处理12、24或48h后达到峰值。MeJA对PR9和PR1的诱导作用最强,可达100倍,对PR2、PR4、PR5、PR3、PR10和Ta-JA2的诱导作用强,可达10-70倍;对TaGLP2a没有明显作用。茉莉酸诱导的抗病性提高与8个抗病相关基因的表达增强呈正相关。[结论]茉莉酸诱导的抗病性增强与抗病相关基因的表达增强呈正相关,茉莉酸信号传导途径在小麦抗白粉病反应中起作用,对这一途径的调控可提高小麦的白粉病抗性。     

人白介素-12转基因马铃薯中hIL-12的表达

[目的]研究人白介素-12转基因马铃薯中hIL-12的表达。[方法]采用ELISA和WesternBlot,检测转基因马铃薯中hIL-12的表达情况。[结果]转基因马铃薯叶与块茎中均能被hIL-12p70二聚体特异性的抗体识别的蛋白表达,与野生对照组相比均有0.01水平显著差异。WesternBlot分析结果显示,在40kD处有特异性的蛋白条带出现。[结论]所建立的人白介素-12转基因马铃薯表达体系能正确、有效表达hIL-12二聚体。     

HLXN基因产物人羧肽酶A抑制剂的表达与纯化

目的:表达并纯化HLXN编码蛋白latexin。方法:用IPTG诱导含重组质粒HLXN-pQE30的E.coli M15表达latexin蛋白;HiTrapTMChelating层析柱纯化基因工程his6-latexin蛋白;SDS-PAGE检测目的蛋白纯度和相对分子质量;考马斯亮蓝法测定超滤液中蛋白浓度。结果:由HLXN表达产物制备和提纯得到了纯化his6-latexin蛋白;该蛋白的分子量为32kD;蛋白含量为2.67g/L。结论:HLXN编码蛋白latexin的成功表达与纯化为进一步研究探讨HLXN基因的生物学功能、与人类临床疾病的关系以及在临床的应用奠定了基础。