应用PCR试剂盒对奶牛结核病的检测

应用聚合酶链式反应技术制备的PCR式剂盒,对贵州省某奶牛场140份血样和奶样标本中的结核分枝杆菌进行检测,结果显示:在111份奶样中有8份为阳性,阳性检出率7.2%。在39份血样中12头牛为阳性,阳性检出率为30.76%。本试验对PPD检测与PCR检测法进行验证,将1200头牛中PPD检测阳性牛和可疑牛,再用PCR法进行检测,PCR法阳性牛共计20头份,阳性检出率为1.67%,PPD法阳性牛24头份,阳性检出率为3.67%。结果表明:PCR试剂盒在检测牛结核病不同标本中显示出快速、特异等优点。     

聚丙烯酰胺凝胶电泳法用于仔猪腹泻病粪便中轮状病毒的检测

用聚丙烯酰胺凝胶电泳法,检测了仔猪腹泻病粪样中的轮状病毒,结果证明轮状病毒是引起仔猪腹泻的一种主要病原。     

阿克苏市动物棘球蚴病感染状况调查分析

采用剖检和ELISA方法调查2015—2017年阿克苏市动物感染棘球蚴情况,评价该地区动物棘球蚴病防控效果,以期为进一步做好棘球蚴病综合防控提供基础数据。结果表明,2016—2017年共检测羊血清200份,阳性血清有21份,阳性率为10.5%;2016年、2017年阳性率分别为15%和6%;2016年、2017年犬粪棘球蚴抗原阳性检出率分别为35%和22.2%;屠宰场剖检牛、羊棘球蚴阳性率分别为26.7%和34.3%。     

大理州部分奶牛肠道寄生虫感染情况调查

为了解大理州奶牛肠道寄生虫的感染情况,制定出有效的防治措施,从大理州巍山、洱源、宾川等地采集奶牛新鲜粪样共计241份,采用饱和食盐水漂浮法及水洗沉淀法进行检测。结果显示:样品总阳性率为32.0%,其中线虫卵阳性率为20.3%,绦虫卵阳性率为1.24%,吸虫卵阳性率为3.73%,球虫卵囊阳性率为15.8%,混合感染率为7.88%;从不同地理位置来看,巍山奶牛未检出,洱源奶牛检出率为35.6%,宾川奶牛检出率为41.8%。大理州部分地区奶牛寄生虫感染情况比较严重,且存在混合感染,需加强防治。     

河南省部分地区黄犊牛腹泻症病原和治疗的研究报告

从一九八六年至一九八七年对我省黄犊牛腹泻病的流行病学、病原、临床诊断和治疗进行了比较系统的研究。调查1799头黄犊牛,发病1079头,发病率60.98％;死亡106头,死亡率5.89％;致死率9.66％。应用电镜观察51份腹泻犊牛粪样,30份有轮状病毒颗粒,检出率58.82％。应用聚丙烯酰胺凝胶电泳法(PACE)直接检验病毒核酸60份粪样,33份出现典型的轮状病毒核酸电泳图谱,检出率55％。二而符合率96％(48/50)。采用白痢散和犊痢汤配合补液纠酸等方法进行治疗试验,疗效显著。     

三种检测法调查河池市屠宰猪旋毛虫感染状况

采用镜检、集样消化和ELISA法三种方法对屠宰猪旋毛虫进行检测。2001年至2003年共采集9 196份肉样和9 003份血清样品进行检验,结果镜检法阳性检出率为0;集样消化法检出阳性13份,阳性率为0.14%(13/9 196);ELISA法检出阳性1 350份,阳性率15%(1 350/9 003)。三种检测方法检测结果有较大的差异。临床上要根据实际情况灵活掌握。     

南京部分牧场牛兔隐孢子虫感染研究初报

用改良抗酸染色法检查南京地区部分奶牛场和兔场的牛、兔粪样。共发现3例隐孢子虫卵阳性牛,2例阳性兔。牛、兔群的隐孢子虫感染率分别为3.2％(3/94)和1.8％(2/113)。其中成年牛感染率为2.0％(1/50)、犊牛4.5％(2/44),而腹泻犊牛的感染率达16.7％(1/6)。同时在6例腹泻犊牛粪样中查出2例感染了轮状病毒。未发现隐孢子虫和轮状病毒混合感染病例。     

G6P[5]型牛轮状病毒的分离鉴定

轮状病毒(Rotavirus,RV)是全世界范围内引发多种幼龄动物及婴幼儿病毒性腹泻的最主要病原之一,给畜牧业发展和人类健康造成严重危害。通过RT-PCR对来自宁夏犊牛腹泻粪样进行检测,选取阳性样品经MA104细胞进行病毒分离。细胞盲传4代后出现CPE,至7代后细胞CPE现象明显,获得1株牛轮状病毒,扩增VP7、VP4基因并测序分析,结果表明该分离株属于G6P[5]型轮状病毒,命名为NX28。研究明确了G6P[5]型在国内牛群中的存在及流行,并为下一步的牛轮状病毒的分子流行病学研究奠定基础。     

牛轮状病毒免疫初探

研究证实,轮状病毒是近年来广泛流行于黄淮平原地区的黄犊牛腹泻症的主要致病因子之一.作者先后从安徽、河南两地的腹泻黄犊牛粪样中分离出3株适应MA-104细胞的轮状病毒株,通过人工发病试验证实它们对剥夺初乳的黄犊牛有致病作用.我们用牛轮状病毒BRV014高代细胞培养物,通过非肠道途径,在黄犊牛腹泻流行区免疫孕期母牛,较有效的控制了黄犊牛腹泻症的发生.材料与方法(一)病毒及免疫物牛轮状病毒BRV014株系从安徽省界首县黄犊牛腹泻粪样中分离.病毒经胰酶预处理后,接种MA-104细胞单层.待产生75%以     

牛结核PCR诊断试剂盒检测某奶牛场结核病的报告

本文采用自发研究的牛结核病PCR诊断试剂盒,对某奶牛场856头份奶牛血液和奶样进行检测,共检测阳性牛16头份,阳性检出率为1.87%,检出时间为6小时,同时,采用PPD的检测方法进行了检测,检测阳性牛17头份,阳性检出率为1.98%,两种方法的检测符合率为94.12%。试验表明:PCR试剂盒在检测牛结核病标本中显示出快速、特异等优点。为今后牛结核病的检测工作提供了一条新途径。     

牛轮状病毒的分离及其RT-PCR鉴定

采用MAl04细胞从疑似轮状病毒腹泻犊牛粪样中进行轮状病毒分离，盲传4代后接种细胞出现明显细胞病变（CPE），对分离病毒进行核酸聚丙烯酰胺凝胶电泳，电泳条带为4：2：3：2型，具备典型A群轮状病毒特征。依据NCBI等登录的牛轮状病毒的VPl基因序列设计一对引物，对其VPl基因进行克隆及序列分析，结果分离毒与国外牛轮状病毒分离株RF的核苷酸同源性为98．9％，与UK的核苷酸同源性为91．5％，证明分离毒株是一株牛轮状病毒。     

湖南省畜禽肿瘤的调查研究——Ⅵ.牛白血病普查

本文报道了利用琼脂扩散试验,对湖南省境内21个牛场的奶牛、黄牛和水牛以及一个县农户的水牛进行的牛白血病检查的结果。     

黄瓜穴盘育苗三合一基质的筛选

将麦秸、土和牛粪以不同比例配成三合一基质 ,进行黄瓜穴盘育苗 ,均能形成紧实的塞子苗 ,其中以 6∶1∶3(麦秸∶土∶牛粪 )比例配成的基质最适合黄瓜幼苗生长 ,并且形成的塞子容重小 ,育苗程序简便、成本低廉 ,适宜于在广大地区推广应用。以这种三合一复合基质在 72孔穴盘上培育黄瓜苗 ,形成塞子苗的初始苗龄为第 2片真叶初展期。     

贵州省家畜布氏杆菌病血清学检测

为了解贵州省各地区布氏杆菌病流行情况,采用试管凝集试验对部分地区牛血清(706份)、羊血清(180份)、猪血清(720份)共计1606份进行了试验检测.结果表明:牛阳性血清7份,阳性率0.99%(7/706);羊阳性血清2份,阳性率1.11%(2/180);猪阳性血清3份,阳性率0.42%(3/720).贵州部分地区存在布氏杆菌病感染的可能.     

新疆地区流产奶牛新孢子虫病和布氏杆菌病的流行病学调查

为了调查我国新疆地区流产奶牛新孢子虫病和布氏杆菌病的感染情况,应用酶联免疫吸附试验(ELISA),对新疆15个地区419份奶牛血清样本(有流产史奶牛)进行了牛新孢子虫病和布氏杆菌病的检测.结果显示新疆地区流产奶牛新孢子虫感染率为10.3;,布氏杆菌病抗体阳性率为2.7;,同时检测到既有新孢子虫抗体又有布氏杆菌抗体的奶牛血清,占总数的0.95;,各牛场所检流产奶牛血清新孢子虫抗体阳性率在0～50;,各个年龄段奶牛血清的抗体阳性率差异不显著(P> 0.05).不同妊娠胎次的奶牛血清抗体阳性率差异显著(P< 0.05).调查结果表明,新疆部分地区奶牛存在新孢子虫的感染且是导致流产的重要原因之一.此次调查研究为今后新疆地区有效预防和治疗新孢子虫病提供了一定的科学依据.     

云南省猪布鲁氏杆菌病血清学调查

采用虎红平板凝集试验与试管凝集试验相结合的方法,对云南省部分养殖场和屠宰厂采集的猪血清样本进行布病血清学检测,检测血清样本302份。经虎红平板凝集试验筛选,共检出阳性血清样本30例,检出率为9.934%。阳性者通过试管凝集试验证实,最终检出阳性血清样本14例,检出率为4.636%。其中屠宰厂检出率为6.091%,养殖场检出率为1.905%,屠宰场的检出率高于养殖场。     

牛冠状病毒的血清流行病学调查

用血凝抑制试验检测了我国奶牛、黄牛、水牛、牦牛、绵羊、山羊、猪和人共1733份血清中的牛冠状病毒(BCV)抗体,其阳性率分别为80.2%,67%,23.2%,44.3%,5.3%,0%,19%和19.3%。奶牛血清 BCV 抗体有年龄差异,黄牛、水牛、牦牛及人等抗体检出率存在地区性差异。结果表明,BCV 在我国普遍存在,可能为犊牛及成年牛腹泻的重要病原之一。     

延边黄牛气肿疽间接ELISA诊断方法的建立

[目的]检测延边黄牛气肿疽病原体,为牛气肿疽的检测提供科学方法和依据。[方法]采用气肿疽梭菌裂解菌体为抗原,建立检测该病原菌的酶联免疫吸附检测方法,确定其最适工作条件。[结果]气肿疽梭菌菌体裂解抗原最适包被浓度为50μg/m l;待检血清的最适稀释度为1∶200,酶标二抗的最适工作浓度为1∶2 000;对随机采集于延边地区的30份牛血清样品进行间接ELISA检测,阳性率为20%。[结论]建立的间接ELISA方法特异性和重复性好。     

牛病毒性腹泻病毒夹心ELISA快速检测方法的建立与初步应用

用增殖与浓缩后的牛病毒性腹泻病毒(BVDV)分别免疫健康牛犊和家兔,制备牛抗BVDV和兔抗BVDV超免疫血清,并用层析法纯化牛抗BVDV IgG和兔抗BVDV IgG,建立了检测BVDV的双抗体夹心ELISA快速检测方法.结果表明:该检测方法的最佳反应条件为:牛抗BVDV IgG包被浓度为100μg/mL,兔抗BVDV IgG最佳工作浓度为50μg/mL,样品反应时间为90min,酶标抗体工作浓度为1∶8 000,以D490nm≥0.177作为阳性判定标准.该ELISA检测方法的重复性CV小于10%,最低检测限为1.87μg/mL,与牛轮状病毒、牛冠状病毒、猪瘟病毒、犊牛大肠杆菌和沙门菌等病原无交叉反应,该ELISA试剂在室温下至少可保存6个月.用该ELISA方法和IDEXX公司抗原检测试剂盒对甘肃省不同地区牛场156份临床粪便样品进行了检测,阳性检出率分别为17.3%和16.7%.表明本试验建立的ELISA方法特异性强、敏感性高且重复性好,可用于BVDV的快速检测.     

洱海流域畜禽饲料·粪便·土壤中四环素类抗生素残留分析

[目的]研究洱海流域畜禽粪便、饲料和土壤中的四环素类抗生素残留状况。[方法]以云南省洱海流域养殖业链为研究对象,采样分析了11个饲料样品、10个粪便样品、21个土壤样品中土霉素、四环素、金霉素残留状况。[结果]饲料中四环素、土霉素、金霉素的检出率分别为100%、100%、50%,其中猪饲料中土霉素、金霉素含量最高,其次是鸡饲料,奶牛饲料添加的抗生素相对较低;粪样中土霉素检出率为100%,四环素检出率为80%,金霉素检出率为90%,其中鸡粪中残留的抗生素最高;土壤抗生素残留较低,金霉素的检出率为66.6%,四环素、土霉素均未检出。[结论]洱海流域养殖业残留抗生素对环境和人体健康的风险较低。