捕食线虫性真菌Duddingtonia flagrans冻干制剂临床模式

本试验选用耐高温高压的菌种袋作为玉米粒培养基的培养容器,对Duddingtonia flagrans厚壁孢子进行批量培养,然后经孢子洗脱液将孢子洗脱后,将其制备成冻干制剂,并在内蒙古地区的呼和浩特市和林格尔、包头市萨拉齐、呼伦贝尔西旗等地养殖场共165头绵羊中进行了临床应用研究。通过设立不同的试验组和对照组,使用常用驱虫药伊维菌素进行驱虫试验,同时配合口服捕食线虫性真菌Duddingtonia flagrans厚壁孢子,在不同时间进行动物直肠采粪,对粪便进行第三期幼虫培养,然后检测比较不同组别粪便中感染性幼虫的数量,评价捕食线虫性真菌临床应用模式效果。结果显示,将伊维菌素与D.flagrans冻干制剂联合应用于绵羊的寄生性线虫病防治,可使粪便中幼虫数量降低100%,效果优于单独用药组。结果表明,捕食线虫性真菌Duddingtonia flagrans冻干生物制剂与驱虫药物联合使用的临床应用模式,可以取得较好的家畜线虫病临床防控效果,值得进一步在生产实践中进行深入研究和推广。     

捕食线虫性真菌Duddingtonia flagrans冻干制剂的杀虫效果

本试验通过在含有0.05%琼脂粉的沙氏葡萄糖肉汤培养基中培养Duddingtonia flagrans(D.flagrans)再转接到玉米粒培养基的方法,对D.flagrans厚壁孢子进行培养,之后将其洗脱并制备成冻干制剂,然后对冻干制剂的萌发率和杀虫率进行观察。结果显示,D.flagrans冻干制剂厚壁孢子在接种玉米粉琼脂培养基(CMA)培养后5d萌发率达到峰值78.3%;经口饲喂绵羊D.flagrans冻干厚壁孢子剂量为1×106个/kg时,幼虫平均减少率为81.4%。结果表明,D.flagrans冻干制剂使用方便,复苏和杀虫效果较好,其在生物防制家畜胃肠道线虫病方面有很大的应用前景。     

嗜线虫真菌Duddingtonia flagrans减少绵羊粪便中线虫感染性幼虫剂量测定

嗜线虫真菌Duddingtonia flagrans是目前发现的一种最具有动物胃肠道线虫病生物防治应用潜力的真菌。为了解该菌捕杀绵羊粪便中感染性幼虫效果与剂量的关系,为今后该制剂应用和质量检验标准的制定提供依据,用不同剂量的厚垣孢子,分别以不经消化道直接加入感染羊粪便,或作添加剂通过饲喂进入消化道后采集直肠粪便,经培养检测感染性幼虫数量的变化。结果表明,嗜线虫真菌Duddingtonia flagrans具有良好的捕杀胃肠道线虫感染性幼虫的生物学特性。以制剂厚垣孢子4×103/g剂量加入感染羊粪便,或以每天5×105/kg体质量的剂量饲喂绵羊,可使粪便培养物中线虫感染性幼虫数减少83.6%~87.5%。     

捕食性真菌Duddingtonia flagrans原生质体的快速制备与再生

为快速获得大量捕食性真菌Duddingtonia flagrans原生质体并使其再生,本试验研究了酶质量浓度、酶解温度、菌龄、酶解时间对D.flagrans原生质体产生的影响,以确定D.flagrans原生质体最佳快速制备条件。结果表明,在溶壁酶2mL/L、蜗牛酶8g/L、纤维素酶8g/L时,35℃恒温条件下,酶解菌龄为2d的菌丝7h,捕食性真菌D.flagrans产生原生质体数量最多且能够再生。这为下一步转化并标记和克隆捕食性相关基因奠定了重要基础。     

嗜线虫真菌Duddingtonia flagrans培养基的筛选

2000年新疆畜牧科学院从丹麦皇家农业和兽医大学引进了Duddingtonia flagrans菌株,经过3年多的研究,对该真菌进行了实验室驯化、基础培养、生物学特性和体内外捕杀新疆牛羊胃肠道线虫的效果检测。结果表明该真菌具有与国外研究一致的良好的生物防治效果。嗜线虫真菌D.flagrans经培养后产生大量的厚垣孢子能通过动物的胃肠道不被消化而随粪便一起排出体外,在适宜条件下该厚     

嗜线虫真菌Duddingtonia flagrans保存方法的研究

目的探讨嗜线虫真菌Duddingtonia flagrans长期保存以及复苏后生物学活性测定技术。方法分别将菌株置4℃、-25℃和液氮保存,定期进行菌落生长速度、厚垣孢子生成时间以及捕杀绵羊粪便中感染性幼虫活性测定。结果4℃保存15个月、-25℃保存30个月以及液氮保存5年对该菌生长和捕杀感染性幼虫能力无明显影响。结论嗜线虫真菌D.flagrans具有较高的生物学稳定性。     

不同培养条件对捕食性真菌Duddingtonia flagrans生长的影响

为了研究不同生长条件对捕食线虫性真菌Duddingtoniaflagrans生长的影响,本研究将带有D.flagrans菌丝的琼脂块分别接种于不同碳氮比及不同pH值(4.0~8.5)的CMA固体培养基中,在不同温度下(10℃~45℃)进行培养,每天定时观察菌株的发育情况,并测量菌丝生长长度。结果表明,D.flagrans生长最适pH值范围为6.5~7.0,其中以pH 7.0中生长最快;最适温度为35℃;最适碳氮比范围为5∶1~10∶1,其中在碳氮比为5∶1时,生长率最高。菌丝呈辐射状生长,纵横交错,无色,分隔,生长后期有缠绕圈和厚壁孢子的形成。上述结果为进一步研究D.flagrans的生长特性及捕食作用条件奠定了基础。     

嗜线虫真菌Duddingtonia flagrans防制绵羊胃肠道线虫病

将 30只 4～ 6月龄羊分为 2组 ,分别在各自的围栏草场中放牧。用毛圆线虫和血矛线虫为主的第 3期幼虫对所有羊只人工感染 2次后 ,一组羊按每千克体重 1× 10 6 个的剂量每天饲喂嗜线虫真菌的厚垣孢子制剂 ;另一组羊作对照 ,仅饲喂等量的上述制剂基质——小麦。第 2次人工感染后 8周 ,2组羊粪便 EPG基本相近 ,但与对照组相比较 ,真菌组粪便培养物中感染性幼虫减少了 6 9.7% ;草场草样中感染性幼虫数也较对照组减少 6 7.8%。再把以上 2组羊驱虫后分别放养于上述围栏草场 ,8周后真菌组羊粪便 EPG较对照组减少 87.3% ;草场感染性幼虫也较对照组减少82 .6 %。上述结果显示 ,嗜线虫真菌 Duddingtonia flagrans在绵羊胃肠道寄生性线虫病生物防制中具有良好的应用前景     

捕食性真菌Duddingtonia flagrans基因组DNA的提取及基因组survey分析

采用透析膜培养法结合DNA柱式提取法进行基因组DNA提取,同时利用第2代高通量测序技术,分析了捕食性真菌Duddingtonia flagrans基因组概况。结果显示:透析膜培养结合DNA柱式提取法所提取的基因组DNA质量及浓度均能达到测序标准;捕食性真菌Duddingtonia flagrans基因组约为37.6 Mb,GC含量为44.95%,基因组杂合度较低。结果表明:透析膜培养法结合柱式法提取其基因组DNA的方法简便可行,为丝状真菌DNA提取,提供了新的思路;基因组survey分析为捕食性真菌Duddingtonia flagrans全基因组精细图谱的绘制奠定了基础。     

嗜线虫真菌中Duddingtonia flagrans培养性状的初步研究

研究嗜线虫真菌中Duddingtonia flagrans在不同生长环境中的培养特性.选择普通琼脂培养基(WA)、玉米琼脂培养基(CMA)、马铃薯琼脂培养基(PA)和面粉琼脂培养基(FA)4种不同培养基培养,结果表明,在WA中真菌生长速度最快,在PA中产孢量最多.从应用的角度考虑,PA为最佳培养基;以10～35 C每隔5℃设置7种不同温度组培养,结果表明,10℃和35℃时不生长,25℃和30℃时菌丝生长率较高,产孢量较多,其中以30℃培养效果最好.     

食线虫真菌Duddingtonia flagrans冻干制剂低温保存后体外杀虫效果研究

测定食线虫真菌Duddingtonia flagrans冻干制剂在4 ℃贮存2年期间对绵羊捻转血矛线虫感染性幼虫(L3)杀虫活性的变化。用食线虫真菌D.flagrans 当地分离株(SDH035)进行厚垣孢子培养,经真空冷冻干燥后制备成冻干制剂。三批冻干制剂分别在4 ℃保存1年和2年时取样,加入含有捻转血矛线虫虫卵的绵羊粪便为试验组,对照组的粪便不加真菌,然后进行粪便培养、L3分离和计数,计算L3的平均数和百分减少率。     

食线虫真菌Duddingtonia flagrans海藻酸钠包埋颗粒不同保存条件下杀虫效果研究

为了解食线虫真菌Duddingtonia flagrans海藻酸钠包埋颗粒中厚垣孢子在贮存期间的稳定性,本研究将含有D. flagrans的颗粒(实验组)和不含有D. flagrans的颗粒(对照组)分别置于4℃、-20℃各保存2年、4年以及完全暴露在户外0～12个月,用含有捻转血矛线虫虫卵的绵羊粪便与颗粒制剂进行体外试验,测定感染性幼虫(L3)的数量。另取4℃和-20℃同期保存的D. flagrans颗粒制剂,每批喂服绵羊2只(共24只),进行体内试验,测定喂服前后绵羊粪便中L3的数量。结果显示,颗粒制剂于4℃和-20℃保存2年、4年时,体外试验中实验组粪便L3数量均显著低于对照组(p0.05),对L3的杀虫率为66.32%～94.01%;颗粒制剂通过绵羊消化道后对粪便L3杀虫率均在60%以上。该制剂在完全户外条件下存放0～12个月,杀虫率从88.88%降至57.84%。上述结果表明D. flagrans颗粒在低温贮存时有效期可达4年,在完全户外贮存时有效期至少可达半年。本研究结果为海藻酸钠颗粒制剂大规模应用奠定基础。     

食线虫真菌Duddingtonia flagrans的粉剂在不同条件下的体外杀虫效果

为了得到食线虫真菌SDH035分离株的厚垣孢子在环境中发芽后对毛圆科线虫三期幼虫(L3)的杀虫效果。本研究采用了不同数量的SDH035分离株的厚垣孢子,分别在室温和26℃恒温条件下做体外杀虫试验。结果表明,26℃恒温条件下杀虫效果比室温条件好;并且加入的孢子量越大,杀虫效果也越好;但随着培养时间的延长,杀虫效果差异不显著。     

相对湿度和培养时间对食线虫真菌Duddingtonia?flagrans产孢量的影响

本研究旨在评估食线虫真菌Duddingtonia flagrans当地分离株(SDH035)在生长发育的过程中培养时间和环境中的相对湿度对其产孢量的影响。利用实验室已保存的当地分离的SDH035分离株,用液固双相法分别在35%和85%的相对湿度下分别培养7 d、14 d、21 d、28 d、35 d、42 d、49 d、56 d和62 d,用0.05%(w)的灭菌Twain-80将生长在谷粒表面的菌物洗脱下来,用双层纱布过滤,获得含有厚垣孢子的菌悬液,用血细胞计数版对其孢子进行计数,最后推算出每克谷粒产生的厚垣孢子数量。结果表明,随着培养时间的延长,该菌株的产孢量逐渐升高,当培养时间为7～14 d时,产孢量缓慢上升,此后产孢量急速增加,在培养28 d后该菌株的产孢量趋于平缓,培养至49 d时其产孢量达到高峰。分离株在两种相对湿度、不同培养时间段的产孢量。在相同的培养时间下,85%的相对湿度所获得的产孢量显著高于35%的相对湿度。培养时间和湿度条件均影响厚垣孢子的产量。     

嗜线虫真菌捕食绵羊粪便中捻转血矛线虫幼虫的效果观察

采集感染捻转血柔线虫等胃肠道线虫绵羊粪便培养、分离三期幼虫，加入嗜线虫真菌纯培养物中，72h后84％的幼虫被真菌丝绕和捕获；将该真菌培养物与感染捻转向矛线虫等胃肠道线虫的绵羊粪便便混合后共同培养10d，粪便培养物中的三期幼虫减少82％。     

捕食动物线虫性真菌相关研究进展

畜禽线虫病是由线形动物门中多种线虫引起的一类寄生虫病,给养殖业带来了严重的经济损失.长久以来,采用化学药物驱虫进行防治产生的耐药性、环境污染及动物源性食品药物残留等问题愈发严重,迫切需要寻找能替代化学药物驱虫的防治手段.利用捕食线虫性真菌进行动物寄生性线虫的生物防治对建立可持续发展战略和无公害农业具有重要意义.通过综述...     

捕食线虫性真菌的分离鉴定

本文报道首次从我国内蒙古土壤中分离出一株捕食线虫性真菌,该菌株适宜在２０℃,ｐＨ６,玉米粉浓度０．４ｇ／Ｌ的玉米粉琼脂（ＣＭＡ）培养基中生长。通过对其菌丝、孢子及捕食性结构的形态学观察,鉴定其为节丛孢属的少孢节丛孢菌ＣＩＭＨＩ株（Ａｒｔｈｒｏｂｏｔｒｙｓｏｌｉｇｏｓｐｏｒａ,ｓｔｒａｉｎＣＩＭＨＩ）。     

不同培养基及诱导物对捕食性真菌Duddingtonia flagrans发酵液中蛋白质的产生及杀虫作用的影响

为研究捕食性真菌Duddingtonia flagrans发酵液中蛋白质的产生及杀虫作用,使用不同营养成分组成的液体培养基及诱导物,对Duddingtonia flagrans进行培养和诱导,测定其发酵液中的蛋白质含量、蛋白酶活性、磷酸酶活性和杀虫作用,进而确定Duddingtonia flagrans产生胞外蛋白质和杀虫作用最适的培养基与诱导物。结果显示,不同培养基及诱导物对Duddingtonia flagrans的代谢过程会产生明显影响,导致其分泌的蛋白质种类、浓度以及蛋白酶和磷酸酶的活性显著不同;Duddingtonia flagrans发酵液不仅具有杀线虫活性,而且有杀蝇蛆作用。上述结果为进一步研究捕食线虫性真菌的杀虫机理提供了重要参考依据。     

捕食线虫性真菌对寄生性线虫的生物控制

用自然界存在的捕食线虫性真菌对寄生性线虫进行防治是寄生虫生物控制的一个重要方面．一直受到各国生物科学家的重视。     

驱除马圆线虫,予防血栓疝及其他圆线虫幼虫病的效果观察

近几年来,我场马匹常发生疝痛性疾病,且反复发作,用镇痛和泻下剂,无效,往往以死亡告终、剖检中发现肠道内寄生大量马圆线虫,在有的病例中,见肠系膜动脉根处有肿瘤物,剖开肿瘤物尚能检出一定数量的幼虫。初步认定我场圆线虫污染严重,病马死亡主要系幼虫移行造成血栓栓塞性疝痛(简称血栓疝)和寄生虫性腹膜炎反复发作所致。血栓疝目前无有效疗法,我们设计了