僧帽牡蛎和华贵栉孔扇贝染色体的制作

本实验以僧帽牡蛎和华贵栉孔扇贝的胚胎、担轮幼虫和鳃组织等为材料，经秋水仙素处理，海水蒸馏水低渗，甲醇、冰醋酸固定液固定后得到的细胞悬液、压片或滴片，醋酸洋红或吉姆莎染料染色，最后获得较理想的染色体玻片标本。     

几种单胞藻饵料对刺参耳状幼体烂胃的影响

刺参(Stichopus japonicus)属于楯手目(Aspido- chirota)、刺参科(Stichopodidae)、刺参属(stichopus)。刺参有明显的变态生活史,由受精卵卵裂经囊胚期→原肠期→小耳状幼虫→中耳状幼虫→大耳状幼虫→樽形幼虫→五触手幼虫→稚参→幼参→成参(廖玉麟, 2001)。其中小耳状幼体、中耳状幼体、大耳状幼体统称为耳状幼体。耳状幼体是刺参整个生命周期中短暂而唯一的一个浮游生活阶段,幼体浮游一般需10天左右,之后变态为樽形幼体改为底栖生活,浮游时期幼体     

2种桡足类的染色体组型分析

采用秋水仙素溶液整体浸泡，KCl低渗，卡诺固定液固定，空气干燥，Giemsa染色等方法对挪威小毛猛水蚤（Microsetella novegica Boeck)和硬鳞暴猛水蚤（Clytemnestra scutellate Dana)染色体的数目和组进行了初步观察和分析，结果表明，挪威小毛猛水蚤染色体数目为2n=20，全部为中部着丝点染色体，总臂数NF=40，硬鳞暴猛水蚤染色体的数目为2n=20,其中6对为中部着丝点染色体，4对为亚中部着丝点染色体，总臂数NF＝40，本研究旨为解决分类学中的某些疑难问题提供语气，并为饵料生物的引种与驯化提供科学依据。     

5-羟色胺诱导刺参幼虫附着变态

采用不同浓度的5-羟色胺（5-HT）溶液诱导刺参幼虫附着变态,处理不同时间后,计算附着变态率。结果表明：使用浓度为0．001、0．01、0．1和1mmol／L的5-HT溶液诱导刺参幼虫12和24小时均可不同程度地提高刺参幼虫附着变态率。以浓度为0．1mmol／L的5-HT溶液诱导刺参幼虫24小时效果最好,附着变态率提高12．8％。     

抗“腐皮综合症”刺参体腔液指标变化的初步研究

对用“腐皮综合症”致病菌灿烂弧菌（Vibrio splendidus）感染刺参的7个体腔液指标进行了测定。结果显示：1）抗病刺参和易感刺参体腔液吸光值和颗粒细胞浓度在第10天差异显著（P〈0．05）。2）抗病刺参和易感刺参总细胞浓度和透明细胞一淋巴样细胞浓度在第5天差异显著（P〈0．05）。3）抗病刺参体腔液碱性磷酸酶活力在试验各天均保持较高水平,且在第10天与易感刺参有显著差异（P〈0．05）;易感刺参体腔液酸性磷酸酶活力在第5天明显高于抗病刺参（P〈0．05）,之后各天迅速降低,并显著低于抗病刺参（P〈0．05）。4）抗病刺参和对照组刺参超氧化物歧化酶活力各天始终无显著蒡异（P〉0．05）．抗病刺参和易感刺参在第10天蒡异昂著（P〈0．05）．     

条斑星鲽染色体核型分析

采用体内注射植物血细胞凝集素（PHA）和秋水仙素法制备条斑星鲽染色体。实验鱼头肾细胞经体内短期培养,取出体外经低渗处理、卡诺氏固定液固定后,常规空气干燥法制作染色体标本。Giemsa染液染色后获得中期分裂相进行核型分析。结果表明,条斑星鲽有46条染色体,其核型为2n=46=2sm＋44t,即有1对亚中部着丝点染色体和22对端部着丝点染色体,染色体臂数为NF=48,尚未发现有多倍体的现象,也未发现异型性染色体和随体染色体。     

双齿围沙蚕胚胎及幼体发育的研究

2003-2004年，观察了双齿围沙蚕(Perinereis aibuhitensis)胚胎及幼体发育。结果表明，成熟卵为绿色，卵径175-228μm，多油球；胚胎发育经历卵裂期、囊胚期、原肠期、担轮幼虫期；后担轮幼虫期胚体脱卵膜孵化；幼体从3刚节疣足幼虫开始，在3刚节疣足幼虫后期开始摄食；4刚节疣足幼虫后期纤毛轮消失，进入匍匐阶段；10刚节疣足幼虫形态与生态都与成体相似；从受精卵发育到4刚节疣足幼虫的时间在不同水温情况下变化较大，水温在25-26℃为118h、而水温在27．5～32℃为82h。     

刺参幼体培育阶段换水方法研究

正在刺参人工育苗过程中,换水是改善池水环境的主要技术措施,在刺参耳状幼体培育阶段,传统上采用网箱或滤鼓换水,存在换水效果差、工作效率低、劳动强度大、幼体易损伤、易造成病害交叉感染以及因筛绢破损造成幼体跑漏等问题。笔者在长期进行刺参人工育苗科研与生产实践中,对传统的换水方法进行改进,结合刺参耳状幼虫的生物习性及不同培育阶段的水质特点,探索出效果好、简便易行的新方法。该方法分为前期加水和后期换水两个阶段,采用的换水方式不同。     

大瓶螺胚胎发育的初步观察

本文对大瓶螺（Ａｍｐｕｌｌａｒｉａｇｉｇａｓ）的胚胎发育进行了研究。由于大瓶螺卵具钙质卵壳，故采用定时取样，破壳取胚，间断观察的方法。在２５±１℃气温中，胚胎发育从卵产出母体后至孵化需２７４小时，长度增长２２倍。全过程可分为７个时期：卵裂期、囊胚期、原肠期、担轮幼虫期、面盘幼虫期、幼螺形成期和孵化期。对各期的外部形态特征进行了描述，并绘制了各期形态图，还对卵的结构，各期发育时间及胚胎大小变化作了描述。     

真鲷染色体组型的初步研究

以真鲷幼鱼为材料,胸腔注射PHA,36h后注射秋水仙碱溶液。1.5～3h后断尾失血约0.5h时,取出肾脏部分在鱼用生理盐水中稍洗后制成细胞悬浮液,通过低渗、固定处理后,用适当浓度的细胞悬浮液进行冰片滴片。60℃干燥制片,室温下吉姆萨染色。油浸镜下检查标本,以放大照片进行染色体测量。分析了染色体数目和组型,确定了真鲷染色体数目2n=48,其中有一对亚中部着丝点染色体,23对端部着丝点染色体,每条染色体相对长度平均范围:2.576±0.117至1.489±0.110,臂数NF=25。     

香鱼染色体核型分析

采用PHA和秋水仙素体内注射法，以前肾为材料，低渗一空气干燥法制片，对香鱼的染色体进行了分析研究。结果表明，香鱼染色体绝对长度较小，为0.83-2．90μm。其二倍体数目2n=42，核型公式为2n=18m 2sm 22t，染色体总臂数NF=62。     

六带石斑鱼染色体核型和银染研究

以六带石斑鱼为材料,利用腹腔注射法体内注射植物血球凝集素和秋水仙碱获得大量处于分裂中期的头肾细胞,头肾细胞经低渗处理、卡诺氏液固定后,常规自然晾干法制作成染色体标本后,进行染色体核型分析和银染研究。结果显示,六带石斑鱼的二倍体染色体数目为2n=48,核型为2n=2st+46t,NF=48;Ag-NORs仅有一对位于第24对染色体即亚端部着丝点染色体的短臂上。     

栉孔扇贝♀和长牡蛎♂杂交受精及早期胚胎的细胞学研究

以栉孔扇贝Chlamys farreri为母本、长牡蛎Crassostrea gigas为父本进行人工杂交。采用Bouin氏液固定、石蜡切片和苏木精-伊红染色在光镜下对其受精和第1次卵裂过程中核相变化进行观察;运用压片法和热滴片法分别对4～8细胞期和担轮幼虫期胚胎进行染色体制片。结果表明,长牡蛎精子可以进入栉孔扇贝卵子,并激活卵子减数分裂使其释放第1极体（PB1）和第2极体（PB2）,能够形成雌、雄原核并融合为合子核,接着受精卵开始第1次卵裂;杂交胚胎发育过程中,囊胚期很长、胚胎畸形严重,只能发育到担轮幼虫期;杂种胚胎染色体数目变化范围较大,在20～85之间,染色体不能平均分配到两个子细胞中是杂种胚胎死亡的主要原因。杂交胚胎不能存活保证了异源精子诱导栉孔扇贝雌核发育的可靠性。     

单环刺螠虫变态前幼虫发育的同工酶及酶学研究

对实验室条件下培养的单环刺螠虫(Urechis uniconctus)变态前幼虫发育的同工酶及酶学特性进行研究。研究中5种同工酶(EST、MDH、AMY、LDH、ALP)酶谱均随发育表现出一定的差异。EST酶谱最为复杂，由原肠期的1条酶带增至体节幼虫时期的6条。MDH在发育各时期皆有表达。在原肠时期未检测到AMY、LDH及ALP活性。采用生化法对5种酶(ACP、ALP、PO、POD、CarE)的酶活测定结果显示，随着单环刺螠虫的发育，各种酶的活力都有明显增强。以上结果表明，摄食行为的开始对其某些消化酶活性的表达有显著的增强作用。至中期担轮幼虫时期，幼虫已具备了一定的对脂类等物质的消化能力。至晚期担轮幼虫及体节幼虫时期，其免疫能力也有显著增强。     

仿刺参补体B因子溶血活性初步研究

应用高等哺乳动物血清补体B因子溶血检测技术，检测了健康仿刺参以及人工诱导化皮仿刺参体腔液补体B因子活性。结果显示仿剌参体腔液有补体B因子存在，且含补体B因子仿刺参体腔液溶血活性明显高于去补体B因子体腔液的溶血活性。实验对仿刺参体腔液进行加热处理，结果显示其补体B因子是对热不稳定的分子，此特性与高等哺乳动物B因子特征相同。仿刺参体内存在补体B因子，它与脊椎动物补体B因子性质相似，在免疫中起重要作用。     

仿刺参补体B因子溶血活性初步研究

本文应用高等哺乳动物血清补体B因子溶血检测技术检测仿刺参个体体内补体B因子。通过溶血法检测了健康仿刺参以及人工诱导化皮仿刺参体腔液补体B因子活性。结果显示仿刺参体腔液有补体B因子存在,且含补体B因子仿刺参体腔液溶血活性明显高于去补体B因子体腔液的溶血活性。实验对仿刺参体腔液进行加热处理结果显示其补体B因子是对热不稳定的分子,此特性与高等哺乳动物B因子特征相同。仿刺参体内存在补体B因子,它与脊椎动物补体B因子性质相似,在免疫旁路途径中起重要作用。     

刺参蛋白胰蛋白酶解产物生物活性的研究

用胰蛋白酶对刺参蛋白进行水解,研究其酶解液所具有的抗氧化活性及其对肠道菌群的作用。通过测定刺参蛋白酶解液清除DPPH(二苯基苦基苯肼)自由基、Feton体系产生的羟基自由基和邻苯三酚自氧化体系产生的超氧阴离子自由基的能力。同时,研究了刺参蛋白酶解液体外对肠道菌群生长的影响。结果表明,刺参蛋白胰蛋白酶解液具有抗氧化活性和促进乳酸杆菌生长、抑制大肠杆菌和产气杆菌生长的作用。     

刺参肠、性腺酶解多肽体外抗氧化作用研究

刺参（Apostichopus japonicus）肠和性腺是刺参加工过程中的副产物,为丰富其高值化利用的基础理论,研究了刺参肠、性腺酶解过程中可溶性蛋白和氨基酸态氮质量浓度变化,分析了酶解多肽对11-二苯基苦基苯肼（DPPH·）、羟基自由基（·OH）和超氧阴离子自由基（O2^-·）的体外清除效果。结果显示,刺参肠和性腺经生物酶水解后,水解度分别为53.63%和63.40%,酶解液中可溶性蛋白质量浓度分别为4.62 mg·mL-1和5.01 mg·mL-1,氨基酸态氮质量浓度分别为0.43 mg·mL-1和0.56 mg·mL-1。刺参肠和刺参性腺酶解多肽清除DPPH·的半抑制质量浓度（IC50）分别为3.31 mg·mL-1和0.88 mg·mL-1,清除·OH的IC50分别为9.53 mg·mL-1和8.81 mg·mL-1,清除O-2·的IC50分别为6.42 mg·mL-1和3.22 mg·mL-1。刺参肠和刺参性腺酶解多肽具有一定的体外抗氧化效果,应用前景广阔。     

影响刺参幼参成活和生长的几个因素的研究

在刺参人工育苗过程中，从稚参到幼参阶段极易受外界综合因子影响，成活率很低。本文采用数理统计的方法，选择四种因子对此阶段死亡率进行试验。从方差和直观分析看到稚参的附着密度和饵料品种对其成活率和生长的影响大于水温和换水方式。稚参附着密度以0．2头／cm^2为最佳，0．5头／cm^2次之；饵料以鼠尾藻磨碎液为最佳，其次是鼠尾藻液和叉鞭金藻的混合液．     

日本蟳胚胎发育的初步观察

对日本胚胎发育进行了观察。日本卵子为中黄卵,受精卵起初为螺旋型等裂,以后趋向表面卵裂,形成边围囊胚。原肠作用以外包、集中和内陷的方式进行。原肠胚形成后,再经第一期膜内无节幼虫、第二期膜内无节幼虫、第一期膜内蚤状幼虫、第二期膜内蚤状幼虫等阶段,最后破膜,孵出第一期蚤状幼虫。水温23．4－26．3℃,从卵子产出到破膜孵出,历时约13d（天）。