鸡肉质鲜味特性相关基因的克隆及序列分析

本研究对泰和乌骨鸡、隐性白羽肉鸡腺苷琥珀酸裂解酶基因的cDNA进行了克隆,并对序列进行了分析,共发现有6处碱基突变249 G→A(TH)、717 C→G(TH)、985 A→G(TH)仅在泰和乌骨鸡中出现;992 T→C(RW)、1400 C→T(RW)仅在隐性白羽肉鸡中出现;而在泰和乌骨鸡和隐性白羽肉鸡中均检测到突变1179 A→C(TH,RW).其中985 A→G(TH)、1400C→T(RW)处突变导致两处氨基酸突变Thr→Ala(305)、Ala→Val(443),其它4处碱基突变均为同义突变.另外对几种脊椎动物Adsl基因核苷酸序列水平、蛋白质水平同源性进行了比较分析.     

5个鸡种腺苷琥珀酸裂解酶(ADSL)基因外显子9 SNP及其与鸡肉肌苷酸含量的相关分析

根据腺苷琥珀酸裂解酶（Adenylosuccinate lyase，ADSL）基因外显子9的序列设计引物，用PCR—SSCP的方法对隐性白羽鸡、丝羽乌骨鸡、萧山鸡、白耳鸡、藏鸡进行了单核苷酸多态性分析，并检测到了多态性，表现为3种基因型，对两种纯合子进行直接测序，结果发现9839位碱基发生了突变，由C突变为A，将核苷酸序列翻译成氨基酸序列后，发现突变后引起ADSL基因第273位氨基酸由Pro突变为Thr，为错义突变。经独立性检验，发现基因型频率和基因频率分布与品种有关，但进一步方差分析并没有显示出该位点的多态性与胸肌的IMP含量之间存在关联。     

鸡腺苷琥珀酸裂解酶基因适用性进化分析

采用反转录-聚合酶链式反应（RT—PCR）方法，以肝脏总RNA为模板，对泰和乌骨鸡、隐性白羽肉鸡腺苷琥珀酸裂解酶基因（ADSL）编码区序列进行克隆和测序；并结合Gen—Bank中已提交的家鸡、鱼类、哺乳动物和人类等ADSL基因序列，采用基于最大似然法的密码子置换模型分析ADSL基因编码区序列在进化过程中承受的选择压力。结果RT—PCR方法准确获得了泰和乌骨鸡和隐性白羽肉鸡ADSL基因编码区序列，全长为1380bp。“分支特异模型”检验结果表明，ADSL基因在不同物种进化过程中较为保守，未受到正选择作用。鸡ADSL基因序列的“位点特异模型”检验未发现正选择位点。研究结果有助于了解鸡ADSL基因的结构及进化历程。     

猪脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白基因Bsm Ⅰ位点多态性与肌内脂肪含量的相关研究

本研究利用PCR—RFLPs标记技术，对中国地方猪种雅南猪、大河猪、培育品种大河乌猪以及三元杂交群体DLY共113头个体的脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白基因的内含子Ⅰ区域进行了分析研究，发现BsmⅠ酶切位点具有多态性，并分为3种基因型（即AA、BB和AB型），通过构建固定效应模型，分析了基因型与肌内脂肪含量的关系。结果表明：基因型从的肌内脂肪含量极显著的高于基因型AB和BB（P〈0．01）。     

猪脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白基因BsmI位点多态性与肌内脂肪含量的相关研究

本研究利用PCR-RFLPs标记技术,对中国地方猪种雅南猪、大河猪、培育品种大河乌猪以及三元杂交群体DLY共113头个体的脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白基因的内含子Ⅰ区域进行了分析研究,发现BsmΙ酶切位点具有多态性,并分为3种基因型(即AA、BB和AB型),通过构建固定效应模型,分析了基因型与肌内脂肪含量的关系。结果表明:基因型AA的肌内脂肪含量极显著的高于基因型AB和BB(P<0.01)。     

猪H-FABP基因多态性及其与肌内脂肪含量的相关研究

旨在研究猪H-FABP基因的遗传多态性及其与肌内脂肪含量的遗传效应。利用PCR-RFLP(HinfⅠ、MspⅠ、HaeⅢ、Hinf*Ⅰ4种限制性内切酶)分子标记技术检测了中国地方猪种雅南猪、大河猪,培育品种大河乌猪以及杜洛克与长白和约克三元杂交商业群体共148头猪心脏型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)基因5′-上游区和第二内含子的遗传变异,并利用固定效应模型分析了H-FABP基因在杜洛克与长白和约克三元杂交商业群体中对肌内脂肪含量的遗传效应。结果表明:(1)在HinfⅠ和MspⅠ位点上,所有4个猪群都存在多态;在HaeⅢ位点上,除雅南猪只出现单态外,其余3个猪群都出现多态;在Hinf*Ⅰ位点上,除杜洛克与长白和约克三元杂交商业群体出现多态外,其余3个猪群只表现单态。(2)4个位点对肌内脂肪含量的影响差异显著,各基因型肌内脂肪含量最小二乘均值关系即HhHH,bbBbBB,AaAA,DDDddd。结合H-FABP基因的生理功能和已有的研究结果来看,可在特定的群体中将其作为影响猪肌内脂肪含量的候选基因。     

基于连接酶检测反应的并行分型系统检测鸡肉风味相关候选基因多态性

旨在建立一个基于聚合酶链反应—连接酶检测反应(LDR)的基因多态性并行检测系统,检测鸡肉风味相关候选基因脂肪型脂肪酸结合蛋白(A-FABP)基因、细胞外脂肪酸结合蛋白(Ex-FABP)基因和腺苷琥珀酸裂解酶(ADSL)基因的多态性,并分析其在优良地方鸡种——清远麻鸡和快大型隐性白羽鸡中的分布差异。采集165只隐性白羽鸡和185只清远麻鸡母鸡的血液并提取DNA,应用PCR-LDR方法检测A-FABP51C/T、Ex-FABP1011T/C和ADSL3484C/T的基因型。结果,所得分型结果同直接测序分型结果一致。3个多态位点在2个品种鸡中均表现为中度多态,并且在不同品种中的分布均存在差异,在A-FABP51C/T位点上达到显著水平。结果表明,建立的基于连接酶检测反应的基因多态性并行检测系统是一种准确、灵敏的SNP检测方案,为鸡肉风味性状相关基因的多态性研究提供了基础。     

鸡ADSL基因和GARS-AIRS-GART基因对鸡肉肌苷酸(IMP)含量的影响

以鸡ADSL基因、GARS-AIRS-GART基因为侯选基因,以隐性白羽鸡、丝羽乌骨鸡、萧山鸡、白耳鸡、藏鸡为试验材料,采用PCR-SSCP方法对ADSL外显子2、GARS-AIRS-GART基因5′侧翼序列进行SNPs检测。结果各发现了一个单核苷酸多态性位点。各种基因型与胸肌IMP含量的最小二乘分析结果表明:ADSL基因TT型个体的胸肌肌苷酸含量极显著地高于CC型、显著地高于CT型个体,CT型个体也高于CC型,但差异不显著;GARS-AIRS-GART基因TT型个体的胸肌肌苷酸含量极显著地高于CT型和CC型个体,CT型个体也高于CC型,但差异不显著。ADSL和GARS-AIRS-GART基因的合并基因型对IMP含量也有显著的影响,合并基因型为TTTT的个体IMP含量显著高于CCCC合并基因型的个体,高出1.584 mg/g,因此可以利用该合并基因型对鸡的肉质风味性状进行标记辅助选择。     

鸭脂肪酸结合蛋白基因的克隆和序列多态性分析

根据鸡脂肪型脂肪酸结合蛋白（A-FABP）基因序列设计1对引物对鸭基因组进行PCR扩增，将扩增出的475bp片段进行克隆和测序，序列分析表明该基因片段包含部分外显子2、3和完整的内含子2序列，与鸡、鹅、猪的A-FABP基因分别有84％、94％和77％的同源性。在此基础上又设计3对引物利用PCR—SSCP方法对获得的序列进行多态性研究。结果引物P3在樱桃谷鸭、山麻鸭等品种中发现4处单碱基突变，分别为：241处“A～T”突变；243处的“T—C”突变；258处的“T—C”突变；299处的“C—T”突变。这些点突变共产生了3种基因型，且基因型分布在各鸭品种间有显著差异。     

影响肉质嫩度的主效基因

文章对影响肉质嫩度的两个主效基因,即脂肪酸结合蛋白（Fatty acid-binding proteins,FABP）基因和钙蛋白酶（Calpain）基因的研究概况及与肉质嫩度的关系做一综述。     

文昌鸡生长模型拟合的研究

试验旨在通过生长曲线的拟合来了解文昌鸡生长发育的规律。用Logistic、Gompertz和Bertallanffy 3种非线性生长模型对公母文昌鸡的生长发育进行拟合。3种模型均能较好地拟合文昌鸡生长曲线,但是Gompertz模型在公母鸡上拟合效果均最佳。公母鸡在4周前生长较一致,4周后,公鸡生长速度明显快于母鸡。运用3种模型对文昌鸡进行生长曲线的拟合和分析是可行的,对及时了解文昌鸡的生长发育规律提供了参考。     

鸡HSP90AA1基因SNP检测及启动子区CpG岛的甲基化研究

试验旨在获得鸡热休克蛋白90α(HSP90AA1)基因序列并分析其基因结构和相关遗传变异,检测HSP90AA1基因启动子区CpG岛的甲基化状态,初步探索HSP90AA1基因在肌肉组织生长发育中的作用。以文昌鸡和北京油鸡为试验材料,利用PCR扩增鸡HSP90AA1基因组序列;通过基因测序寻找该基因中的单核苷酸多态性(SNP)位点;使用在线软件MethPrimer预测鸡HSP90AA1基因中CpG岛的位置;应用MassArray质谱法检测鸡胸肌中HSP90AA1基因启动子区CpG岛的甲基化水平,比较分析文昌鸡和北京油鸡HSP90AA1基因的甲基化差异。结果显示,在鸡HSP90AA1基因组中共发现7个SNPs位点,分别位于启动子区(A-189G,C-109T)、第1外显子(A+6G)、第2外显子(C+343T)、第2内含子(A+634G、A+836G)和第7内含子(A+3449G);鸡HSP90AA1基因包含10个外显子和9个内含子,其启动子区存在1个CpG岛,位于-1 802～-469bp处;在HSP90AA1基因启动子区共检测了42个CpG位点的甲基化水平,文昌鸡和北京油鸡中分别有9个(CpG_16.17.18、CpG_21.22.23、CpG_32.33和CpG_57)和4个CpG位点(CpG_1、CpG_5.6和CpG_57)在胸肌生长发育过程中发生甲基化改变。结果表明,文昌鸡与北京油鸡HSP90AA1基因序列信息和启动子区CpG岛的甲基化水平不同,这可能导致两种鸡对于应激反应具有不同的耐受程度。以上试验结果将为文昌鸡和北京油鸡生长发育规律、系统选育等方面的研究提供表观遗传学依据。     

文昌鸡肌肉脂肪酸组分的气相色谱—质谱联合分析

应用气相色谱—质谱联合技术对文昌鸡肌肉脂肪酸组分进行分析,并以面积归一法,计算各脂肪酸的相对百分比含量。结果表明,文昌鸡肌肉中共分离和鉴定出16种脂肪酸,其中饱和脂肪酸7种,包括n-十二烷酸、n-十四烷酸、十五烷酸、n-十六烷酸、十七烷酸、n-十八烷酸和二十烷酸,其含量分别为0.75%、1.23%、0.43%、23.86%、2.04%、11.18%、0.13%,占总脂肪酸的39.63%;不饱和脂肪酸9种,包括11-十四碳烯酸、9-十六碳烯酸、9-十八碳烯酸、9,12-十八碳二烯酸、6,9,12-十八碳三烯酸、11-二十碳烯酸、10,13-二十碳二烯酸、7,10,13-二十碳三烯酸及5,8,11,14-二十碳四烯酸,其含量分别为0.15%、1.79%、25.84%、21.99%、0.48%、0.32%、0.45%、0.61%、8.75%,占总脂肪酸含量的60.37%。多不饱和脂肪酸占总脂肪酸含量的32.29%,而必需脂肪酸占总脂肪酸含量的31.23%。这一结果为家禽肌肉中脂肪酸成分分析及营养价值的评定提供了基础依据。     

文昌鸡生长曲线拟合的研究

本研究用Logistic、Gompertz和Bertallanffy 3种非线性生长模型对文昌鸡母鸡的生长发育进行拟合.研究结果表明,3种模型均能较好地拟合文昌鸡生长曲线,但是Gompertz模型拟合效果最佳.运用3种模型对文昌鸡进行生长曲线的拟合和分析是可行的,对及时掌握文昌鸡的生长发育规律提供了参考.     

贵州小香鸡生长激素基因单核苷酸多态性分析

本研究采用直接测序法对贵州小香鸡生长激素(growth hormone gene,GH)基因的2~3外显子区域进行多态性分析。结果显示,在第2内含子处出现4个SNPs位点:G47A、T170C 、T334C和G393A。卡方检测结果表明,T33C处显著偏离了Hardy-Weinberg平衡(P＜0.05),其它3个SNPs位点均处于Hardy-Weinberg平衡状态(P＞0.05)。     

文昌鸡GnRHR基因在不同组织中差异表达的研究

采用半定量RT-PCR方法检测文昌鸡处于性腺轴(下丘脑-垂体-性腺)的不同组织中GnRHR基因的表达水平,结果表明:GnRHR基因mRNA表达于鸡的3种组织--下丘脑、垂体和卵巢;GnRHR mRNA在3种组织中的表达量不同:下丘脑和垂体中表达量较高,卵巢中表达量较弱.     

檀香树叶和种子对文昌鸡肉品质的影响

试验旨在研究檀香树叶和种子对文昌鸡肉品质的影响,选择180只体重为1.05 kg左右的70日龄文昌母鸡,随机分为4个处理,每个处理3个重复,每个重复15只。对照组饲喂玉米—豆粕型基础日粮,试验1、2、3组分别在基础日粮中添加8%发酵檀香树叶和1%檀香种子、4%檀香树叶和1%檀香种子、3%檀香树叶和2%檀香种子。结果表明,与对照组相比,除试验1组腿肌红度有所下降、亮度有所增加外,其他试验组腿肌的颜色(红度和黄度)均有增加的趋势,但色泽有所减弱;嫩度呈升高的趋势,但失水率和蒸煮损失率略有降低;pH差异不显著。试验1组胸肌校正肌苷酸含量显著高于对照组(P＜0.05),肌苷酸含量比对照组高9.2%(P＞0.05),胸肌K值比对照组低26%(P＞0.05);试验1组胸肌不饱和脂肪酸、油酸C18∶1、亚油酸C18∶2、胸肌必需氨基酸、游离氨基酸和鲜味氨基酸含量与对照组相比均有升高的趋势。因此,日粮中添加发酵处理的檀香树叶和种子能提高文昌鸡肌肉品质,改善肉质风味。     

文昌鸡适宜能量水平研究

为了研究能量水平对文昌鸡部分生产性能的影响,确定适宜的能量水平,选择600只文昌鸡健康母雏为研究素材,按照能量水平的不同随机分成三组(低能Ⅰ组、中能Ⅱ组和高能Ⅲ组),饲养至300日龄,同时测定了开产日龄、开产体重、开产蛋重、300日龄体重、300日龄蛋重和300日龄产蛋数等6项重要生产性能指标.结果表明,能量水平对这6项生产性能均无显著影响(P＞0.05),高能组开产日龄＜中能组开产日龄＜低能组开产日龄,高能组和低能组300日龄的体重和蛋重均低于中等能组.结论,本次试验设定的三个能量水平对所测定的生产性能无显著影响,且权衡整体性能指标来看,中等能量水平为最适宜能量水平.