日本血吸虫多价核酸疫苗的构建及免疫保护试验

利用PCR技术获得日本血吸虫GST抗原基因,通过分子克隆技术将GST、FABP基因克隆至pVAX1载体,并将其克隆至舍有Sj23基因表达核的plRESneo栽体,构建重组质拉pVAX-GST、pVAX-GST-FABP、pIRESneo-Sj23和pIRESneo-GST-FABP-Sj23.将50只昆明小鼠随机分成5组,每组10只,分别以肌肉注射质粒pIRESneo-GST-FABP-Sjz3、plRESneo-Sj23、pVAX-GST、pVAX-GST-FABP和空白质粒plRESneo,50μg/只,免疫2次,每次间隔21 d.测定小鼠免疫前后血清抗体水平,30 d经腹部皮肤感染血吸虫尾蚴,45 d后剖杀小鼠,计数各组小鼠虫卵数及成虫数.结果表明.重组质粒pVAX-GST、plRESneo-Sj23、pVAX-GST-FABP和pIRESneo-GST-FABP-Sj23均能诱导小鼠产生特异性的IgG抗体,plRESnecrGST-FABP-Sj23免疫组所诱导的IgG水平最高;减虫率分别为26.1%、30.8%、33.2%和47.5%,减卵率分别为25.4%、45.0%、48.4%和69.8%.pIRESneo-GST-FABP-Sj23的减卵率和减虫率明显高于其他DNA疫苗.结果表明,日本血吸虫多价核酸疫苗能产生较强的免疫反应,并能获得较好的免疫保护效果.     

核酸疫苗的研究进展

核酸疫苗是当今研究的前沿领域，与传统疫苗相比具有很多优点，被誉为第３代疫苗革命。本文就核酸疫苗的作用机理、方法、医学上的研究进展及前景做一综述。     

核酸疫苗研究进展

核酸疫苗是将编码某种抗原蛋白的外源基因（ＤＮＡ）与质粒重组后,直接导入动物细胞内,并通过宿主细胞的转录系统合成抗原蛋白,诱导宿主产生对该抗原蛋白的免疫应答,以达到预防和治疗疾病的目的。因此,核酸疫苗又称基因疫苗。由于其不需要任何化学载体,故又称裸ＤＮ...     

核酸疫苗研究的新进展

核酸疫苗是当前研究的前沿领域。本文就核酸免疫的作用机理、 影响因素和核酸疫苗在医学上的研究进展及前景做一综述。     

核酸疫苗最新研究进展

核酸疫苗是利用DNA重组技术、基因免疫技术等分子手段制成的新一代疫苗,其与传统疫苗相比,能更加安全、高效、迅速地使机体产生免疫应答。核酸疫苗在人类各种疾病的防控以及动物免疫接种等方面,特别是在畜牧防治领域做出了杰出贡献。本研究主要从核酸疫苗的免疫机制、构建、接种、优缺点和影响核酸免疫效果的因素等方面,针对核酸疫苗领域的最新研究进行整理分析,旨在为核酸疫苗的进一步研究与应用提供参考。     

核酸疫苗研究现状

核酸疫苗是当前研究的前沿领域,它能诱发机体产生体液免疫和细胞免疫,作者就核酸疫苗的概念、载体、作用机理、影响因素、安全性和在畜禽传染病领域中的应用作一综述,希望为动物疫病防治提供参考.     

核酸疫苗研究进展

核酸疫苗是当今研究的前沿领域 ,与传统疫苗相比具有很多优点 ,被誉为第 3代疫苗革命。文章就核酸免疫的发展、特点、免疫机理、安全性问题、影响核酸疫苗免疫效果的主要因素、核酸免疫方法及应用前景做一综述     

日本血吸虫蛋白质组学研究

蛋白质组学是研究一种细胞、组织或完整生物体在特定时空上全部蛋白质及其存在方式的学科。近年来,应用蛋白质组学技术开展了日本血吸虫尾蚴、童虫、成虫蛋白质组,成虫性别差异和排泄分泌物蛋白质组,体被蛋白质组,与药物和诊断相关的蛋白质组等多方面的研究,增加了人们对日本血吸虫的生长发育、免疫逃避等机制的了解,为发掘血吸虫病疫苗、诊断和药物靶点提供了新的线索。     

家鸭具有作为血吸虫转运宿主的可能性

为研究日本血吸虫(Shistosomia japonicum)卵通过家鸭消化系统后的孵化能力,将人工感染血吸虫尾蚴45 d的小鼠剖杀,取肝脏和小肠制成匀浆,并进行虫卵计数,将带有虫卵的肝脏及小肠匀浆液分别灌喂家鸭,观测不同时间收集鸭粪的毛蚴孵出情况。结果显示,经过家鸭体内2 h后,粪便中孵化率达到峰值,相对孵化率分别为0.61%和4.066%;7 h后,没有虫卵能孵化出毛蚴。同一批次的虫卵所孵化的毛蚴中,大约经过4 h后其孵化率达到峰值。结果表明,日本血吸虫虫卵通过家鸭消化系统后仍有部分依然保持孵化能力,家鸭具有可能作为血吸虫的转运宿主,拥有传播血吸虫有效虫卵的能力。     

东方田鼠重复感染日本血吸虫试验研究初步

本试验以1000条日本血吸虫尾蚴同时攻击感染东方田鼠洞庭湖种群和东方田鼠宁夏指名亚种进行重复感染对比试验，并在攻击后不同天数分别同时解剖相数目的两种群东方田鼠，收集其体内不同时段，不同部位的日本血吸虫童虫，比较结果证实东方田鼠对日本血吸虫具有天然的抗性，其抗性是可遗传的，不以东方田鼠的地域分布不同、生活环境的差异或传代数目的变化而有所不同，与获得必免疫无关。     

云南日本血吸虫群体生物学的研究

本文报告了我国云南南涧地区日本血吸虫群体生物学的特性。将捕获的该地区光壳钉螺，经人工逸蚴，尾蚴感染实验家兔和小鼠，其平均虫卵开放前期、成虫回收率，两性虫体体长、性腺发育，血吸虫卵引起宿主肝脏组织的病理变化及幼虫大小和毛蚴感染异地钉螺的发育特点作了观察。并进行了11种同工酶电泳图谱和蛋白质组分的分析。     

中国大陆日本血吸虫同工酶谱的研究

本文报告应用酶泳技术检测中国大陆云南、四川、湖北、湖南、江西、江苏、安徽七地自然隔离群日本血吸虫的ＬＤＨ、ＭＤＨ、ＭＥ、６ＰＧ、６ＧＰ、ＧＩ１、ＩＤＨ、ＰＧＩ、ＡＤＫ、ＨＥＸ和ＥＳＴ１１种同工酶酶谱情况。其中七地自然隔离群日本血吸虫的ＭＤＨ、ＭＥ、６ＰＧ、Ｇ６Ｐ、ＧＤ１、ＩＤＨ、ＰＧＩ、ＡＤＫ及ＨＥＸ９种同工酶图谱相同，说明我国大陆七地自然隔离群日本血吸虫结构基本相同，其亲缘关系密切。在ＬＤＨ说明     

日本血吸虫GSK3蛋白编码cDNA的克隆、表达及其重组蛋白的免疫保护研究

本研究利用生物信息学分析了日本血吸虫(Schistosoma japonicum,sj)Glycogen synthase kinase 3(GSK3)蛋白,并对其中一个GSK3蛋白的编码cDNA进行了克隆和原核表达,制备了特异性的多克隆抗体.同时,还初步评估了重组蛋白的免疫保护效果.生物信息学分析表明在日本血吸虫数据库存在两种GSK3蛋白,且其中一个SjGSK3在日本血吸虫不同发育时期均有转录.Western blot结果表明本研究制备的抗体能特异性识别日本血吸虫SjGSK3重组蛋白,表明该重组蛋白具有良好的免疫原性.动物实验表明免疫SjGSK3重组蛋白的动物与佐剂对照组比较分别获得了平均10.6％减虫率和40.5％肝脏减卵率.     

单克隆抗体对日本血吸虫尾蚴钻穿小鼠皮肤能力的影响

用抗日本血吸虫单克隆抗体,在室温下与血吸虫尾蚴作用90分钟。将尾蚴分别经腹部皮肤和腹腔注射感染昆明系小鼠,4周后剖杀集虫。实验结果表明。经单克隆抗体(McAb)处理后,腹腔注射组的载虫数明显高于腹部皮肤感染组(P<0.01)。从而说明,高特异性的单克隆抗体处理能够影响尾蚴钻穿小鼠腹部皮肤的能力。     

东方田鼠抗日本血吸虫抗体水平检测与分析

东方田鼠具有抗日本血吸虫病的特性，观察东方田鼠感染日本血吸虫尾蚴后的特异性抗体水平变化，可为阐明其抗病机制提供依据。本试验用间接ELISA方法检测东方田鼠抗成虫可溶性抗原（SWAP）和几种日本血吸虫基因重组抗原（Sj28-GST、LHD-SjTP1、C-SjParamyosion）的特异性抗体水平动态变化，并检测东方田鼠感染日本血吸虫尾蚴前、后的IgG3亚类特异性抗体水平。结果东方田鼠在攻击日本血吸虫尾蚴后，抗SWAP的特异性抗体水平有所升高，而抗几体基因重组抗原的特异性抗体水平低，没有显著变化。东方田鼠正常血清中抗SWAP和IgG3亚类抗体的OD值是牛血清白蛋白（BSA）对照的31倍。结果表明，在东方田鼠血清中有较高水平的SWAP的IgG3亚类抗体，值得进一步深入探讨。     

日本血吸虫还原性辅酶I(SjNADH)基因的克隆表达及其免疫保护效果分析

为了评估日本血吸虫还原性辅酶I(SjNADH)在小鼠体内诱导的免疫保护效果,应用PCR获得SjNADH基因片段,其开放阅读框为474 bp,编码157个氨基酸,并在大肠杆菌中成功表达,纯化得到该重组蛋白。Western blot结果显示,SjNADH在日本血吸虫童虫和成虫中的表达量稳定,SjNADH融合蛋白也能被免疫血清识别,具有较好的免疫原性。应用重组蛋白免疫小鼠能诱导产生较高的特异性抗体水平,并诱导了20.13%的减虫率和23.06%的肝脏减卵率。结果表明,获得的SjNADH重组蛋白在小鼠体内诱导产生了部分免疫保护,有作为血吸虫疫苗候选抗原分子的潜力。     

日本血吸虫童虫冷冻保藏复苏后生活史循环的研究

本文报告了日本血吸虫童虫经液氮冻藏复苏后的生活史循环的情况。童虫冻藏３６天和５０天后腹腔注射感染小鼠，亲代成虫回收率为９．０和８．９％。感染鼠肝内的子代虫卵孵出的子１代毛蚴感染钉螺，感染率为５９和６７％；平均每个钉螺第１次逸出的子１代尾蚴数为８００～９００条。子１代尾蚴感染小鼠后，其子１代成虫回收率为５５和５６％。合抱雌、雄成虫的体长、性腺的发育和虫体对宿主的致病力与正常途径感染者无明显差异。