一株铜绿微囊藻溶藻菌的分离鉴定和溶藻特性

以铜绿微囊藻为溶解对象,从富营养化水体中分离到1株溶藻菌H1,通过形态特征及16S rDNA序列分析,该菌株属寡养单胞菌属(Stenotrophomonas sp.),GenBank登录号为KU359254。探讨了菌株H1对铜绿微囊藻(FACHB-1326)的溶藻方式,菌藻浓度、菌的生长时期及光照、pH、温度等环境因子对铜绿微囊藻溶藻效果的影响。结果表明,菌株H1溶藻方式主要是间接作用溶藻。处于对数期的菌株H1抑藻效果最高,溶藻率达77.9%;菌液浓度达10~8 CFU·mL~(-1)以上,溶藻率最高,为81.8%;在pH7、30℃条件下,活性较强;pH7时30℃条件下,溶藻率为72.5%,63.2%;菌株H1对微囊藻生长的抑制效果是全黑条件光循环条件全光条件,全黑条件下溶藻率最高为59.9%。     

一株具有溶藻特征的假单胞菌分离鉴定及其溶藻动力学研究

从田螺内脏中分离获得一株溶藻菌株(命名为W10),利用16S rDNA序列分析及生理生化特征对该菌株进行了鉴定,探究了其对铜绿微囊藻的作用方式、菌液及其无菌上清液在不同条件下的溶藻特性,并构建了溶藻动力学模型。结果表明:菌株W10归属于假单胞菌属(Pseudomonas sp.,GenBank ID为MN688696);W10溶藻式是通过分泌某些热稳定性差的溶藻物质间接作用于铜绿微囊藻,使其裂解、溶解;NA和淀粉培养基对W10菌株的培养效果无显著差异(P0.05),二者显著优于改良基础培养基(P0.05),但因NA培养基成分复杂,故确认淀粉培养基适宜于菌株W10培养;同一生长时期的菌液及其无菌上清液溶藻效果无显著差异(P0.05),二者均表现为稳定期与衰亡期最高,二者无显著差异(P0.05),然后依次是对数期和延滞期;当菌液与藻液体积比为1∶10时,W10菌液溶藻率最高为80.05%,而无菌上清液的溶藻效果与投加量呈正相关,在1∶2处理溶藻率最高为92.15%;当菌藻比1∶10以铜绿微囊藻为降解底物时,菌株W10的溶解作用遵循一级反应动力学。     

海河流域溶藻菌Q1的溶藻效果分析及鉴定

从天津市海河富营养化的水域中分离到1株具有溶藻能力的细菌,将其命名为Q1,对该菌株进行生理生化鉴定及提取16SrRNA分子鉴定,将Q1以10%接种量接入铜绿微囊藻(Microcysis aeruginosa)、水华鱼腥藻(Anabaena flosaquae)和斜生栅藻(Scenedesmus obliquus)的纯培养藻液中,研究Q1对不同微藻的专一性及不同生长时期Q1的菌液对铜绿微囊藻生长的影响、作用方式。结果表明:菌株Q1属于苏云金芽孢杆菌属(Bacillus thuringiensis),该菌株稳定期的滤液溶藻效果最佳,菌株Q1能溶解水华鱼腥藻和铜绿微囊藻,对斜生栅藻也有促进作用。该菌株的无菌滤液经高温处理后,对铜绿微囊藻的溶藻效果没有影响,推断菌株Q1分泌的可耐高温的胞外物质。该菌株与藻体细胞相互抑制,存在竞争共栖的生态关系。     

小麦内生溶藻细菌ZB1的分离鉴定及其溶藻特性

【目的】为蓝藻水华的生物防治提供依据。【方法】以小麦中分离到1株内生细菌ZB1为研究对象,通过混菌法、平板溶藻法及液体溶藻法,考察了该菌株对铜绿微囊藻的溶藻活性。【结果】经形态学特征、生理生化特性及16S r DNA同源性序列分析,鉴定菌株ZB1为纺锤形赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillus fusiformis)。菌株ZB1对铜绿微囊藻具有强烈的溶藻作用,且溶藻活性随菌液浓度的升高和作用时间的延长而增加;菌株ZB1的发酵原菌液、无菌上清液和高温处理液对铜绿微囊藻均具有溶藻作用,但菌体重悬液无溶藻作用;藻液中加入10%的无菌上清液,受试藻的叶绿素a含量由3.85 mg/L降至0.29 mg/L,除藻率为92.5%;溶藻物质具有热稳定性。【结论】菌株ZB1在蓝藻水华防治方面具有一定的应用价值。     

1株铜绿假单胞菌JM1的溶藻特征

富营养化水体的水华爆发严重影响了水环境质量,成为急需解决的环境问题。该文研究了1株水体土著菌Pseudomonas aeruginosa JM1在不同条件下的生长和溶藻特征。结果表明:菌株JM1的牛肉膏蛋白胨发酵液在一次性投加时溶藻效果明显好于少量连续滴加方式,即添加量一定时溶藻活性物质对铜绿微囊藻的累积毒性小于急性毒性。菌株JM1发酵液不仅可快速杀死铜绿微囊藻细胞,还可分解利用藻细胞的残体及其分泌物,从而能够将藻细胞快速从水体中去除。菌株JM1发酵液对铜绿微囊藻的溶解作用随着藻细胞初始密度的增加而下降。以牛肉膏蛋白胨为培养基时,适宜菌株JM1生长的pH为5~9,而且在pH为10时仍可生长,但pH4和11时菌株JM1无法生长,菌株JM1在生长过程中能够将培养液的pH主动调节成适宜生长的中性或偏碱性。菌株JM1发酵液经过酸碱变化,仍然保持较强的溶藻活性,但与未处理的相比,溶藻效果略有下降,说明发酵液中可能含有微量的其他溶藻或助溶藻物质,在pH变化过程中活性消失。研究结果表明菌株Pseudomonas aeruginosa JM1在水体的水华控制和应急除藻方面具有较高的应用价值。     

一株溶藻真菌的初步分离鉴定及其溶藻作用研究

从水体中分离得到一株具有溶藻能力的真菌,命名为Am11.经形态学和18S rRNA序列对比分析,表明该菌株属于赤霉菌属(Gibberella).研究了该菌株对湖泊中优势藻的溶藻效果,初步探讨了其溶藻方式及溶藻物质.结果表明,该菌株对小球藻、惠氏微囊藻、栅藻和蛋白核小球藻具有一定的去除效果,对4种藻叶绿素a的去除率分别为82.5％、64.9％、63.5％和85.4％;该菌株对蛋白核小球藻是间接溶藻,且溶藻因子是菌体胞外分泌的具有热稳定性的非蛋白类物质.     

放线菌JXJ-0110对铜绿微囊藻的溶藻活性

为明确放线菌JXJ-0110及其代谢产物对铜绿微囊藻的溶藻活性和藻细胞生长的影响,以及菌株的分类地位,采用热乙醇法测定藻细胞叶绿素a含量,在光学显微镜下计数藻细胞数目,并利用16S rDNA的基因序列分析确定其所在属。结果表明:放线菌JXJ-0110的菌丝体具有很强的溶藻活性,且呈剂量关系。发酵上清液也具有很强的溶藻活性,藻液(1 ml 1.0×107个)中加入2%(体积比)的发酵上清液,3 d后叶绿素a的去除率达到88.4%。溶藻活性成分主要为胞外水溶性物质和胞内脂溶性物质。发酵上清液的溶藻活性对高温、pH值和254 nm的紫外线处理均具有较好的稳定性,90℃水浴处理发酵上清液2 h,叶绿素a的去除率超过82%;pH 6~10处理发酵上清液2 h,叶绿素a的去除率超过82%;紫外线254 nm下照射发酵上清液2 h,叶绿素a的去除率为86.4%。16S rDNA基因序列发育分析表明,菌株JXJ-0110属于链霉菌属成员,与Streptomyces shenzhenensis 172115T的序列相似性最高(99.06%)。放线菌JXJ-0110及其代谢产物在铜绿微囊藻水华防治方面具有潜在应用价值。     

溶藻链霉菌SG-001发酵条件的优化及溶藻活性物质的理化性质

从土壤中分离得到1株对铜绿微囊藻有明显抑制作用的橄榄网状链霉菌SG-001(Streptomyces olivoreticuli SG-001),对其发酵条件进行优化,并对其产生的抑藻活性物质进行了初步研究.结果表明, SG-001菌株发酵的最佳碳源和氮源分别为葡萄糖和氯化铵.SG-001菌株产生抑藻活性物质的最佳条件为葡萄糖10g·L-1,氯化铵1.0 g·L-1,pH值7.0,培养温度28℃,发酵时间4d.优化后铜绿微囊藻的叶绿素a去除率为67.23%,较之基础培养基提高了26.29%.SG-001菌株发酵液所产生的抑藻活性物质具有较好(121℃)的热稳定性,pH值8.0时活性最强.     

响应曲面法优化溶藻细菌发酵条件的研究

[目的]为探讨溶藻细菌对水华蓝藻的去除效应,为溶藻细菌规模化发酵提供理论基础和技术依据,对一株溶藻细菌R2的发酵条件进行了优化。[方法]采用响应曲面法对该试验室分离的一株溶藻细菌R2的发酵条件进行了优化。首先通过全因子试验分析了培养温度、初始pH、摇床转速、装液量、接种量对溶藻细菌生长的影响;用最陡爬坡实验逼近最大响应区域,利用中心组合设计及响应面分析确定主要影响因子的最佳水平。[结果]确定的溶藻细菌R2最优化发酵条件为：温度31.8℃、pH 7.21、摇床转速180 r/m in、装液量60%、接种量10%。在优化的发酵条件下,培养24 h溶藻细菌OD600增加值可达2.310。在优化条件下发酵的溶藻细菌进行溶藻效果检测,72 h后铜绿微囊藻叶绿素a去除率达78%。[结论]采用响应曲面法能够有效的优化溶藻细菌的发酵条件,在最优化发酵条件下溶藻细菌生长情况良好,其溶藻效应也可达到一定水平。     

溶藻细菌H5对汉斯冠盘藻的溶藻特性研究

为了进一步研究溶藻细菌H5的溶藻特性,采用透析、乙醇沉淀、有机溶剂萃取、酸碱稳定性分析等方法探讨了H5溶藻活性物质的特性.结果表明,H5的溶藻活性物质的相对分子质量在3.5～7.0 ku之间,不能用乙醇沉淀法完全分离,具有较好的亲水性,在pH 4～7的酸性范围内溶藻能力较强.H5无菌滤液使汉斯冠盘藻(Stephanodiscus hantzschii)藻细胞丙二醛含量显著上升,SOD活力在处理0～196 h内急剧上升,随后下降,由此推测该活性物质能使藻细胞发生膜脂过氧化,从而破坏了膜的完整性.     

一株水华鱼腥藻溶藻菌的分离鉴定及菌藻关系初探(英文)

[目的]研究溶藻特性及菌藻关系,为进一步研究溶藻细菌对水华的治理作用提供帮助。[方法]从富营养化水体中分离得到一株有高效溶藻效果的菌株(S7),研究了其对水华鱼腥藻(Anabaena flosaquae)的抑制效果、作用方式和不同环境因子对溶藻效果的影响,以及菌藻关系,并对菌株进行了菌体Poly-p的染色、革兰氏染色和分子鉴定。[结果]菌株投加量为藻液量的30%时,7d叶绿素a的去除率达到90%以上。pH为9,温度35℃下藻的去除率最高。S7菌株与水华鱼腥藻形成竞争共栖的生态关系,并通过分泌溶藻物质间接抑制水华鱼腥藻生长,且该物质具有一定的热稳定性。根据生理生化及16SrDNA序列分析鉴定,S7属于金黄杆菌属(Chryseobacterium)。[结论]该菌对水华鱼腥藻有较强的溶藻效果,且为聚磷菌。     

一株高效溶藻放线菌的分离及溶藻特性的研究

[目的]为了寻找抑杀微囊藻的放线菌,对烟台海区潮间带沉积物中分离到的放线菌进行了筛选,获得了一株具有强溶藻能力放线菌,命名为G-57。[方法]在实验室条件下,采用涂布法和血球计数板法,研究了该菌的代谢产物对铜绿微囊藻的溶藻活性以及活性成分的溶藻特性。[结果]放线菌G-57对铜绿微囊藻具有很好的溶藻效果,且在传代5次后能够保持稳定的溶藻效果,按1%的体积比接种4 d后溶藻效率达98.31%。溶藻的活性成分来自胞外代谢产物,对高温和pH均具有较好的稳定性。[结论]放线菌G-57在蓝藻水华防治方面具有潜在的应用价值。     

一株溶藻细菌溶藻活性物质的初步研究

溶藻细菌A1是通过分泌胞外物质对青苔起到防除作用的。为进一步研究其防除机制,通过温度和pH值的单因素试验,活性炭吸附、有机溶剂萃取以及活性物质粗提等试验探讨活性物质的性质。研究结果表明：A1菌株溶藻活性成分具有很强的热稳定性,经过121℃处理后仍有很好的溶藻效果;发酵液的pH值分别调至2.0和4.0时,活性物质失活,而中碱性条件下活性物质防除青苔能力会增强;该活性物质不能被活性炭吸附;有机溶剂乙酸乙酯、石油醚和氯仿萃取后,该溶藻活性物质表现出强亲水性,由此可以初步推测活性物质属于糖类。溶藻活性成分粗提结果表明,A1菌株分泌的活性成分应由多种溶藻活性物质组成。     

药用植物浸提液溶藻效果和溶藻机理的研究

研究了9种药用植物浸提液对水华藻种小球藻、铜绿微囊藻、惠氏微囊藻的影响,并对筛选出的药用植物对铜绿微囊藻、惠氏微囊藻抗氧化酶体系活性的影响进行了研究.结果表明,黄连、重楼2种药用植物的浸提液均有明显抑藻效应,当黄连、重楼药用植物浸提液的质量浓度为4 g·L-1时,所产生的化感物质对铜绿微囊藻、惠氏微囊藻的溶藻率达到70%~80%;对铜绿微囊藻、惠氏微囊藻的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)活性都低于对照组,进一步印证了黄连、重楼药用植物浸提液对铜绿微囊藻、惠氏微囊藻的抑藻效果.     

一株水华鱼腥藻溶藻菌的分离鉴定及菌藻关系初探

[目的]研究溶藻特性及菌藻关系,为进一步研究溶藻细菌对水华的治理作用提供帮助。[方法]从富营养化水体中分离得到一株有高效溶藻效果的菌株（S7）,研究了其对水华鱼腥藻（Anabaena flosaquae）的抑制效果、作用方式和不同环境因子对溶藻效果的影响,以及菌藻关系,并对菌株进行了菌体Poly-p染色、革兰氏染色和分子鉴定。[结果]菌株投加量为藻液量的30%时,7 d叶绿素a的去除率达到90%以上。pH为9、温度35℃下藻的去除率最高。S7菌株与水华鱼腥藻形成竞争共栖的生态关系,并通过分泌溶藻物质间接抑制水华鱼腥藻生长,且该物质具有一定的热稳定性。根据生理生化及16S rDNA序列分析鉴定,S7属于金黄杆菌属（Chryseobacteriumsp.）。[结论]该菌对水华鱼腥藻有较强的溶藻效果,且为聚磷菌。     

一株水华鱼腥藻溶藻细菌的分离鉴定和溶藻特性

从不同来源的水体和土样中,筛选出对水华鱼腥藻具有溶藻作用的溶藻菌株SLW6。对菌株SLW6进行形态特征分析和生理生化鉴定,及16S rDNA序列分析,并研究了溶藻菌在不同培养时期、不同pH条件下对菌株SLW6溶藻效果的影响,探究了该菌株对水华鱼腥藻的溶藻方式。结果表明：菌株SLW6呈革兰氏阴性,V-P试验、明胶液化试验、甲基红试验为阴性,过氧化氢试验、硝酸盐还原试验都为阳性,菌株SLW6与产碱杆菌属的Alcaligenes faecalis(NR113606.1)的同源性达到99.65%,结合形态学特征,生理生化鉴定和16S rDNA序列分析,初步判断溶藻菌株SLW6为产碱菌属（GenBank登录号为OP363821）。超声辅助热乙醇提取叶绿素a,分光光度法测定叶绿素a含量,用叶绿素a含量变化计算溶藻率,结果表明SLW6处于对数期时的溶藻效果最好,溶藻率达89.45%;在pH=7条件下,溶藻效果较好,溶藻率为47.03%;溶藻菌SLW6对水华鱼腥藻的作用方式是直接溶藻为主间接溶藻作用为辅。     

一株溶藻菌的分离及其溶藻特性分析

[目的]为微生物溶藻工程的实施提供较好的材料。[方法]以淮北水华严重地点作为取样点,筛选到溶藻效果明显的一菌株Q6,通过显微观察和叶绿素a下降率的测定等方法,研究其溶藻效果。[结果]该菌无菌滤液作用3 d,使藻培养液出现黄化,叶绿素a的下降率达70%;5 d时泛白,叶绿素a的下降率达85.6%;Q6菌株无菌滤液具有明显的溶藻效果,证实Q6是通过分泌胞外物质进行溶藻的。经高温、蛋白酶和乙醇处理后的上清液均能溶解水华鱼腥藻,溶藻物质应为具有热稳定性的非蛋白类、核酸和糖类等物质,推测为某种抗生素。[结论]该菌来源于池塘,菌体呈环形,革兰氏染色阴性,菌落有浅玫瑰红色,结合形态观察和生理生化特性分析,初步鉴定Q6为微环菌属。     

溶藻细菌H5的分离、鉴定及溶藻特性研究

[目的]分离和鉴定溶藻细菌,研究其溶藻特性,为进一步研究溶藻细菌对水华的治理作用提供帮助。[方法]从香溪河春季水华集聚区水体中分离得到1株有高效溶藻效果的菌株(H5),采用16S rDNA序列相似性分析和Biolog微生物自动鉴定系统等对细菌进行鉴定。采用直接计数法,研究了其对汉斯冠盘藻(Stephanodiscus hantzschii)、倪氏拟多甲藻(Peridiniopsis niei)、具尾逗隐藻(Komma cau-data)的抑制效果,及对汉斯冠盘藻的溶藻作用方式。[结果]根据生理生化及16S rDNA序列分析鉴定,H5属于纺缍形赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillus fusiformis)。该菌对汉斯冠盘藻、倪氏拟多甲藻、具尾逗隐藻的溶藻率最高为71.3%,最低为57.4%。培养滤液、热处理培养滤液对汉斯冠盘藻的生长具有明显抑制作用,而细菌无细胞提取物无溶藻能力。[结论]该菌对汉斯冠盘藻有较强的溶藻效果,且是通过分泌溶藻物质溶藻。     

超声-纤维素酶法提取狐尾藻抑藻成分的工艺优化

研究了超声波-纤维素酶法和水浸提法提取狐尾藻抑藻成分对铜绿微囊藻的抑制作用。以提取液对铜绿微囊藻的生长阻碍率为评价指标,通过单因素和正交试验获得超声波-纤维素酶法提取狐尾藻化感物质的最优工艺条件:酶解时间为4 h,最适pH为3.0,温度为30℃,酶用量(纤维素酶质量/藻粉质量)为21%,超声波功率为120 W,超声时间为1 h。超声波-纤维素酶法所得狐尾藻提取液对藻细胞的生长阻碍率远远高于水浸提法,两者存在显著性差异(P0.05)。随着反应时间延长,超声波-纤维素酶提取液对铜绿微囊藻的生长阻碍率持续降低,在提取液浓度为40 g/L,反应时间为24 h时,其对铜绿微囊藻的生长阻碍率为271.74%,反应时间为13 d时,对铜绿微囊藻的生长阻碍率仍达20%以上,显著高于其他组别(P0.05)。     

球形棕囊藻溶藻菌的分离鉴定及溶藻作用研究

【目的】从广西北部湾海域分离筛选和鉴定针对球形棕囊藻的溶藻细菌，研究其溶藻特性。【方法】采用梯度稀释和平板划线法从海水水样中分离纯化溶藻菌，菌藻共培养后，通过观察颜色和测定叶绿素a含量筛选溶藻菌，形态观察和细菌16S rDNA测序鉴定溶藻菌；通过光学显微镜观察溶藻菌的溶藻过程，测定溶藻菌菌液、菌体重悬液、无菌滤液的溶藻率，分析其主要溶藻方式，通过测定菌藻共培养后藻液的叶绿素a含量，研究溶藻菌的生长时期、菌液添加量、球形棕囊藻的生长阶段、光照等对溶藻效果的影响。【结果】分离筛选出一株具有高效溶藻作用的溶藻菌PG47，鉴定为高地芽孢杆菌。PG47间接抑藻，溶藻活性物质可以破坏藻细胞的细胞壁和细胞膜。对数期以后的菌液均具有较好的溶藻活性，且当菌液与藻液体积比达到5%以后，溶藻率就高达80%，对处于延迟期、对数期、平台期的球形棕囊藻均具有高效的溶藻效果，在不同光照条件下，溶藻率均维持在60%以上，适用性广。【结论】筛选得到高地芽孢杆菌PG47是一株高效溶球形棕囊藻菌，为治理球形棕囊藻赤潮提供了一种新思路。