黄瓜子叶组织培养再生植株

将６个黄瓜品种的子叶和下胚轴培养于添加ＢＡ１．０～２．０ｍｇ／Ｌ＋ＩＡＡ（或ＮＡＡ）０．０１～０．０２ｍｇ／Ｌ的ＭＳ培养基中，子叶能够直接分化出芽，出芽率随品种的不同而有差异，下胚轴只长愈伤组织，没有见到芽的分化。将子叶分化的芽切割下来，转入含ＩＢＡ０．１或０．２ｍｇ／Ｌ的１／２ＭＳ培养基中，可长出良好的根系，经移栽，即可成活。     

油桃子叶再生植株影响因子研究

以早熟油桃华光和曙光为材料,研究了培养基(MS,G,WPM)、细胞分裂素(BA,TDZ,ZT,KT)、生长素(NAA)、子叶发育的不同时期(花后30,40,50,60d和采收期)等因子对早熟油桃子叶再生植株的影响。结果表明,华光花后60d为最佳取材时期,其子叶在MS+TDZ2mg/L+NAA0.04mg/L培养基上的再生率为75%;而曙光的最佳取样时间为采收期,其子叶在MS+BA8mg/L+NAA0.04mg/L培养基上的再生率为66.7%。子叶暗培养28d后转入光下进行光暗交替培养,华光、曙光子叶再生率均达到最高。     

枣未成熟胚高效再生体系研究

以枣树雄性不育3号(JMS3)和金芒果枣为材料,建立了枣树未成熟胚高效再生植株体系。对枣未成熟胚高效再生体系研究结果表明:枣未成熟胚可以通过直接萌发和经子叶发生愈伤两条途径再生完整植株,冷藏处理是促进未成熟胚直接成苗的有效方法。枣未成熟胚经0～4℃冷藏60d,接种在MS+蔗糖30g.L-1+琼脂3.3g.L-1培养基上,胚直接成苗率高达93.3%。将去除核壳时受损伤胚的子叶接种到MS+麦芽糖20g.L-1+琼脂3.3g.L-1+TDZ 1.0mg.L-1+NAA 0.2mg.L-1培养基上,40d后出愈率为98.9%。所得愈伤经MS+麦芽糖20g.L-1+琼脂3.3g.L-1+TDZ 1.0mg.L-1诱导40d后出芽率可达74.1%,丛生芽率达70.4%。在生根培养基1/2MS+蔗糖20g.L-1+琼脂3.3g.L-1+IBA1.0mg.L-1+IAA0.01mg.L-1上40d后生根率为80.8%。     

辣椒子叶离体培养及植株再生

对5个辣椒品种进行了子叶离体培养试验，筛选出两种较适粗的培养基为：MS IAA0.2mg/L 6-BA2mg/L 30g蔗糖和MS ZT5mg/L 16g蔗糖。子叶于25℃下光照培养，21d后可陆续分化出芽，芽伸长形成茎芽约2-3cm高时移入生根培养基MS NAA0.5mg/L中，可发育为植株。     

无籽西瓜子叶离体培养及植株再生研究

以无籽西瓜黑蜜5号无菌苗子叶为材料,对组织培养植株再生的条件进行了详细的研究。研究结果表明:子叶芽诱导的最佳培养基配方为MS 6-BA3.0mg/L NAA0.1mg/L。芽的诱导需要先在黑暗条件下启动,生长分化则须在光下进行。适宜的生根培养基配方为1/2MS IAA0.4mg/L和1/2MS IBA0.3mg/L。试验初步建立了适用于无籽西瓜遗传转化和快速繁育的子叶再生系统。     

小白菜子叶诱导不定芽再生植株

以小白菜带柄子叶为外植体，通过四种细胞分裂素ＢＡ，ＫＴ，ＺＴ，２ｉＰ的不同浓度及配比，诱导带柄子叶直接产生了不定芽。结果表明，单独使用较高浓度的各种细胞分裂素都能诱导不定芽的形成。     

花生子叶的高频植株再生和基因转化

花生子叶的高频植株再生和基因转化李岩，李兴汉，白世枝，欧阳文军，陈章良（丹东市农科所）（北京大学生命科学学院）植物基因转化技术是植物基因工程必不可少的一环，这一技术首先必须以高频的植株再生系统为基础。现代植物基因工程的转基因手段目前最常用的有两种，即...     

保加利亚尖辣椒子叶离体组织培养与植株再生的研究

以保加利亚尖椒为试验材料,探索子叶离体组织培养与植株再生体系的建立。结果表明：诱芽率达到100％,不定芽伸长率达83％,生根率达到100％,从不定芽诱导到完整植株获得仅需约60d。     

不结球白菜子叶原生质体培养再生植株

用 1 0g/ 10 0mL纤维素酶 (OnozukaR 10 ) ,0 1g/ 10 0mL果胶酶 (MecerozymeR 10 )及 10mmol/LCaCl2 ·2H2 O ,0 7mmol/LKH2 PO4 和 0 5mol/L甘露醇的混合酶液 ,从 14～ 18d苗龄的不结球白菜子叶上分离出高产率的原生质体。原生质体培养在KM8P1附加 2 ,4 D 0 5mg/L、 6 BA 0 2 5mg/L、NAA 0 5mg/L、葡萄糖 9 0g/ 10 0mL、蔗糖 1 0g/ 10 0mL、半乳糖0 0 3g/ 10 0mL液体培养基上 ,分裂旺盛。形成愈伤组织后经芽诱导和生根培养 ,获得了再生植株。     

甜瓜‘黄蛋子’子叶再生完整植株研究

为了通过不定芽发生途径建立甜瓜‘黄蛋子’体细胞再生完整植株的技术体系,并了解掌握该品种的再生能力和再生特点,以‘黄蛋子’的幼龄子叶作为外植体,进行了组织培养条件下的再生试验。试验结果表明,在MS+6-BA2.0mg/L不定芽诱导培养基上外植体发出的再生芽(丛)为不定芽来源。58块外植体的不定芽分化频率平均为44.8%,并产生质地、数量不等的愈伤组织。在MS+6-BA0.05mg/L不定芽伸长培养基上,分化的不定芽(丛)能够伸长长大,但存在程度不同的玻璃化现象。在1/2MS+IAA0.5mg/L生根培养基上无根苗发根,生根率可达99%。与相关文献中报道过的其他甜瓜厚皮品种相比较,‘黄旦子’属再生能力弱的品种,但品种内个体之间存在再生能力上的明显差异,通过选择自交技术有可能获得再生能力得到提高的纯化株系。     

结球白菜高效离体子叶不定芽再生的研究

以 2个日本优质结球白菜爱知结球白菜 (C1 ) 和新理想白菜 (C2 ) 的子叶为外植体, 研究了不同激素配比、AgNO3浓度和苗龄对不定芽再生的影响。结果表明, 与 6 BA相比, TDZ对子叶不定芽再生的效果更好。在MS 0 5mg·L-1 NAA 1mg·L-1 TDZ培养基中, 2个品种的子叶不定芽再生率分别达到 75 0%和 55 0%。在此基础上, 添加 5mg·L-1 AgNO3 时, C1 和C2 子叶不定芽再生率分别达到 96 7%和 80 0%, 并以 5~8d为子叶不定芽再生的最佳苗龄。     

青菜子叶离体再生体系的建立

以子叶为外植体,研究了苗龄、培养基中Agar浓度、BA与NAA的组配和添加AgNO₃、GA3对子叶产生不定芽的影响.结果表明,5～9d苗龄的外植体最易诱导出不定芽;培养基中BA浓度是影响不定芽形成的关键,BA浓度低于2mg/L,不定芽难以发生,BA6mg/L与NAA0.05mg/L的搭配有利于不定芽形成;在一定范围内不定芽发生频率随着Agar浓度的提高而提高;培养基中添加5mg/L AgNO₃,2～3mg/LGA3可以提高不定芽的发生频率;在此基础上建立了青菜离体再生体系,利用该体系能够获得较高的芽苗再生频率,但存在着青菜基因型间的差异.     

甘蓝CMS下胚轴和子叶的离体培养与植株再生研究

【目的】探索一种利用甘蓝胞质雄性不育系(CMS)下胚轴和子叶进行快速扩繁的技术,为利用CMS大量繁制甘蓝杂交种提供一条新途径。【方法】以甘蓝CMS 05-2-10为试材,将苗龄5~7 d无菌苗的下胚轴和子叶切下,接种于MS培养基上,45~50 d后统计再生芽数,比较6-BA与NAA不同质量浓度配比对不定芽的诱导情况;将诱导出的不定芽接种于添加不同质量浓度(0,0.1,0.3,0.5 mg/L)NAA的MS生根培养基上,20 d后比较生根率和根的长势。【结果】在对下胚轴和子叶进行不定芽诱导时,MS培养基中分别添加1.0和4.0 mg/L的6-BA对下胚轴、子叶的诱导效果较好,其芽再生频率和分化系数分别为83.3%,53.0%和3.6,3.0。在MS培养基中添加1.0mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA,其对下胚轴不定芽的诱导效果较好,芽再生频率为80.7%,分化系数为3.4,褐化率为1.5%;在MS培养基中添加4.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA,其对子叶不定芽的诱导效果较好,芽再生频率为50.0%,分化系数为3.2,褐化率为3.4%;二者的褐化率均明显低于仅添加6-BA的处理。在MS生根培养基中添加0.3 mg/L NAA时,不定芽的生根效果较好,生根率达100%,且根系生长健壮。【结论】利用甘蓝胞质雄性不育系CMS 05-2-10的下胚轴和子叶作为外植体进行不定芽的诱导,对于下胚轴,其适宜培养基为MS+1.0 mg/L6-BA+30 g/L蔗糖+8 g/L琼脂;对于子叶,其适宜培养基为MS+4.0 mg/L 6-BA+30 g/L蔗糖+8 g/L琼脂。不定芽诱导生根的最适培养基为MS+0.3 mg/L NAA+30 g/L蔗糖+8 g/L琼脂。     

辣椒子叶高效再生体系的建立

以保加利亚尖椒(Capsicum annuum L.Bulgaria pointed pepper)为试验材料,探讨了有机成分、激素组合、辣椒幼苗提取物、AgNO3、脱落酸和亚精胺等因素对子叶离体培养的影响.结果表明,辣椒幼苗汁液对不定芽的诱导分化及伸长有明显的促进作用,添加脱落酸和亚精胺可促进不定芽的伸长;采用优化的培养基培养,不定芽诱导率达到100%,不定芽伸长率达83%,生根率达到100%.在此基础上建立了保加利亚尖椒的子叶离体高效再生体系.     

抗生素对根癌农杆菌抑制作用及对大豆子叶节再生的影响分析

以周豆12大豆子叶节为材料,研究了头孢呋辛钠、头孢曲松钠、头孢噻肟钠和头孢唑林钠4种抑菌抗生素对农杆菌的抑制作用和对大豆子叶节再生的影响,以及卡那霉素对大豆子叶节再生的影响。结果表明:随着卡那霉素浓度的增加,子叶节分化率逐渐降低,当浓度达到45 mg/L时,分化芽的生长几乎完全受到抑制,植株出现白化现象;4种抑菌抗生素中,头孢曲松钠对农杆菌的抑制作用最好,头孢呋辛钠和噻肟钠抑菌效果次之,结合抑菌抗生素对子叶节再生的影响作用,确定在大豆子叶节的遗传转化中,使用头孢曲松钠或头孢噻肟钠作为抑菌抗生素,临界浓度分别为200 mg/L和300 mg/L。而卡那霉素使用的临界浓度为45 mg/L。     

西瓜植株再生优化体系的研究

为了将重组基因转入西瓜体内,首先需要建立植株再生体系.以甜王七号﹑超甜京欣王和早佳3个西瓜品种幼苗为材料,研究培养基种类、6-BA与NAA浓度组合、苗龄、外植体类型以及光暗条件对组织再生的影响,提出西瓜植株再生优化体系.结果表明,西瓜组织不定芽诱导率约为 67%～87%,MS培养基能较好地满足西瓜不定芽诱导,1～2 mg·L-1 6-BA与0.1～0.3 mg·L-1 NAA配合有利于不定芽再生.西瓜组织再生以子叶近胚端较好,苗龄以淡黄色转为淡浅绿色为好.研究发现,下胚轴可以直接诱导不定芽产生,其诱导率为 63%,远远高于从愈伤组织再分化的诱导率.不定芽置于1/2MS+NAA 0.1 mg·L-1中生根可形成为完整再生植株.     

提高甘蓝型油菜离体培养再生频率的研究

以甘蓝型油菜为材料,研究了不同外植体、基因型以及Ag+和赤霉素(GA3)等对甘蓝型油菜离体再生的影响,建立了甘蓝型油菜高频率的离体再生体系.不同基因型品种以4 d苗龄的无菌苗子叶作为外植体,培养在MS培养基上并附加BA 3.0 mg/L,NAA 0.15 mg/L,GA3 1.00 mg/L,AgNO₃2.5mg/L,在23～25 ℃、16 h光照(2 00O～3 000 lx)下培养27 d以上即可实现不同基因型品种子叶外植体高频率芽的再生.