垂直平板聚丙烯酰胺凝胶电泳分离茶酯酶同工酶

同工酶研究是生物化学与遗传学交叉领域中一门新的边缘科学。国内外学者应用同工酶技术对茶叶加工过程中的生化成分变化、品种间亲缘关系分析等方面都做了大量工作。近年来的研究发现茶酯酶同工酶有较稳定的遗传传递规律,可为茶树种质资源分类和亲缘关系的推测提供较为可靠的依据。几年来,笔者在用聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳分离茶多酚氧化酶和过氧化物酶同工酶方法的基础上,对茶酯酶同工酶进行了研究,并取得了一些成果,现仅就分析方法作一介绍。     

水稻同工酶聚丙烯酰胺凝胶电泳方法探索

 对同工酶聚丙烯酰胺凝胶电泳方法进行了探索，在同工酶的提取、电泳、染色等几个方面做了尝试。建立了一套适合水稻的同工酶聚丙烯酰胺凝胶电泳分析方法。分析了８种同工酶，１８个位点。发现4个新的位点Amp-y,Amp-x,Mal-2, Mal-3。所分析位点绝大多数表现出较强的多态性。     

垂直平板凝胶电泳“分割法”测定多酚氧化酶同工酶分子量

茶树鲜叶中所含的酶类一般为多谱带同工酶,如现已分离的酯酶、过氧化物酶、多酚氧化酶等,这就给测定其分子量带来较大的困难,首先是需用多柱串连分离洗脱,且所得的酶活力低,不利下一步测定,也很难把同工酶分开;其次是在用圆盘电泳或柱洗脱体积计算法及平衡密度梯度离心法等方法测定分子量时工作繁杂。因此,在高压液相色谱分离检测方法还不能普及之时,用聚丙烯酰胺凝胶垂直平板“分割法”测定同工酶的分子量值得探讨。此法可将酶的分离与分子量测定一步完成,方法简单,设备易得,结果也较理想。本文介绍采用此法测定鲜叶和萎凋叶的多酚氧化酶分子量。     

玉米盐溶蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳谱带分析

玉米盐溶蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳技术的工作原理,是从玉米种子中提取的盐溶蛋白在聚丙烯酰胺凝胶的浓缩效应、分子筛效应和电泳分离的电荷效应作用下得到良好分离,通过染色显示蛋白质谱带类型;根据分子遗传学的理论,     

种子蛋白乳酸尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳技术及其对向日葵自交系和杂交种的鉴定

在对已报道的酸性和碱性两大电泳系统多种方法的比较研究中,我们利用国产仪器和试剂,研究出了一项利用种子蛋白乳酸尿素聚丙酰胺凝胶电泳鉴定向日葵自交系和杂交种纯度的技术。该技术主要包括（１）改进了单粒种子脱脂程序,（２）筛选出有效的向日葵种子蛋白提取剂,（３）确定了凝胶制备的国产丙烯酰胺和亚甲基双丙烯酰胺的新配比,（４）优化了新的酸性凝胶聚合催化系统“Ａｐ－Ｖｃ－ＦｅＳＯ４ 的配比,（５）筛选出新的电极缓冲液,明确了最佳条件。该技术用于向日葵品种鉴定效果良好     

棉花SSR-PCR过程中聚丙烯酰胺凝胶电泳操作常见问题的解决与优化

在大批量聚丙烯酰胺凝胶电泳过程中,难免会出现条带空白、弯曲或者拖尾等各种异常现象。本文以棉花DNA为例,综述了多年实验操作中遇到的突发情况及解决方法,为广大科研工作者提供参考。     

新聚丙烯酰胺凝胶电泳快速检测大豆脂氧酶缺失方法

通过对传统SDS-PAGE电泳技术中样品前处理及制胶技术的改进,开发出了一种能够清晰鉴别Lox-1与Lox-2同工酶的SDS-PAGE电泳快速检测新技术.利用新改进的方法,在289个CS8000(9)×FJ307(♂)F2杂交后代中,选拔出Lox-1,-2,-3同工酶完全缺失的个体27株,以及Lox-1,-3和Lox-...     

聚丙烯酰胺凝胶银染技术的优化

通过配制固定液、渗透液和显色液中主要成分的梯度浓度,依次处理凝胶,对比显色效果,从而对银染过程中各个试剂的配方进行了探讨和优化。并通过大量的实验验证,在不影响染色质量的前提下缩短了3种处理液的处理时间,明显提高了实验效率。     

聚丙烯酰胺凝胶电泳快速检测大豆过敏原蛋白Gly m Bd30K缺失方法

通过对现有SDS-PAGE电泳技术的样本前处理和制胶技术的改良,开发出了一种能够同时清晰鉴别7S球蛋白组分亚基(α',α,β-Subunit)和Gly m Bd 30 K谱带的SDS-PAGE电泳快速检测新技术.利用该方法对PI603570A×0329F6杂交组合F2群体的116个样本进行了7S球蛋白组分亚基(α',α...     

马铃薯SSR标记聚丙烯酰胺凝胶电泳分析

以马铃薯品种早大白、黄麻子、克新13、荷兰15、大西洋为试验材料,提取基因组DNA,进行SSR标记,并将标记产物进行聚丙烯酰胺凝胶电泳,比较不同电泳参数(聚丙烯酰胺凝胶的浓度、电泳电压、染色方法)对电泳结果的影响。确定了适合马铃薯SSR标记的电泳检测体系,即聚丙烯酰胺凝胶的浓度为12%,电泳电压为170V,染色方法为溴化乙锭染色。     

聚丙烯酰胺凝胶电泳方法检测马铃薯类病毒技术的改进

利用往复聚丙烯胺凝胶电泳方法进行类病毒的检测 ,通过对电泳技术的改进和使用液氮研磨、加入皂土等方法改变核酸的提取 ,使该方法在检测灵敏性、准确性、操作性和可行性上都得到了提高 ,更有益于该技术的普及     

基于GIS组件技术的热带作物气候区划系统研究

介绍了地理信息系统(GeographicInformationSystem,GIS)组件技术的特点,充分利用GIS在管理空间数据和属性数据上的优势以及强大的空间分析能力,开发热带作物气候区划系统,并用气温数据对系统推算的可靠性进行检验。     

多种小麦蛋白质酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳方法研究

研究了离子强度、缓冲液 p H、慢离子浓度、凝胶浓度等因素对小麦蛋白质 APAGE分离效果的影响 ,采用 L1 6 ( 41× 2 1 2 )正交试验进行了条件优化 ,所建立的甲酸盐 APAGE方法 ,具有分辩率高、重复性好的特点 ,可通过改变凝胶浓度实现不同蛋白的分离研究。因而此法在小麦蛋白分离、遗传研究、品种鉴定等方面具有广阔的应用前景     

超临界流体萃取技术及其在热带作物香辛料,色素研究中的应用

综述了超临界流体萃取技术的原理、工艺与设备及国内外在热带作物研究中的应用。     

应用反向聚丙烯酰胺凝胶电泳检测马铃薯纺锤块茎类病毒

1 前言马铃薯纺锤块茎类病毒(PSTV)在马铃薯上广泛存在,目前几乎遍及世界各地,对马铃薯生产威胁极大。     

椰子叶片过氧化物酶和酯酶同工酶测定技术的研究

椰子叶片的过氧化物酶可能部分酯酶可能绝大部分与细胞或在匀浆时与纤维或其它物质结合。椰子叶片的酚和酚氧化形成的醌完全抑制酶酶活性。ＰＶＰ吸附酚，但不能有效地抑制酯氧化；过量的ＰＶＰ影响提取液的离心澄清度。巯基乙醇等巯基化合物和抗坏血酸及偏重亚硫酸钠都能有效地抑制酚氧化变褐。