罗非鱼迟缓爱德华氏菌病的分离鉴定

从广西某鱼场的发病罗非鱼(Tilapia nilotica)中分离到1株呈β溶血的革兰氏阴性杆菌,在普通琼脂平板上生长,菌落圆形,边缘整齐,灰白色,湿润菌落,直径为0.5～1.0 mm,有动力,接触酶阳性,赖氨酸及鸟氨酸脱梭酶阳性,还原硝酸盐为亚硝酸盐,发酵葡萄糖、蔗糖、麦芽糖,经细菌形态、培养特征、生化特性测定结果均符合迟缓爱德华氏菌的特征.应用PCR技术扩增出576 bp目的片段,通过PCR产物核苷酸序列测序及Blast比对结果,进一步确定为迟缓爱德华氏菌.致病性试验结果显示分离菌株具有致病性,对氧氟沙星、氯霉素、氟哌酸、恩诺沙星、先锋霉素等高度敏感.     

迟缓爱德华氏菌病

迟缓爱德华菌病,是由迟缓爱德华菌引起鱼类、牛蛙等水生动物疾病的统称,其中鱼类疾病有肠道败血症和肝肾坏死病、鳗赤鳍病、鳗臌胀病、鳗溃疡病、鳗肝肾病、鳗肝肾综合症等。迟缓爱德华氏菌还可引起人体肠炎、腹泻、脑膜炎、蜂窝组织炎、肝脓肿、败血症等症状。为我国的三类水生动物疫病。     

一株血鹦鹉迟缓爱德华氏菌的分离鉴定及药敏试验

为确定天津市某养殖场血鹦鹉(Cichlasoma var.)发病死亡的原因,并对其进行有效的预防与治疗,本试验对患病的血鹦鹉进行病原的分离鉴定、回归感染及药敏试验.从病灶处分离出一株疑似病原菌命名为XYW-1,经人工感染后具有致病性,临床症状与自然发病症状一致,半致死浓度为4.75×105 CFU/mL;经生化鉴定和1...     

养殖杂交鳢迟缓爱德华氏菌的分离鉴定

从患病杂交鳢[斑鳢(Channa maculata)♀乌鳢（C.argus) ♂]体内分离到2株致病菌（ZS201364-1和ZS201364-2）,通过对其生化特性与16SrRNA基因序列进行分析,确定为迟缓爱德华菌（Edwardsiellatarda）。该致病菌兼性厌氧,为革兰氏阴性短杆菌,能运动,能发酵葡萄糖、麦芽糖。吲哚试验和MR试验均为阳性。2株致病菌对杂交鳢的半致死剂量（LD50）分别为7.1105cfug-1和5.6105cfug-1。ZS201364-1最适生长温度为25~35℃、pH为7~8、氧化纳（NaCl）质量分数为1%,对头孢噻肟、环丙沙星、诺氟沙星等抗生素高度敏感。     

柱状噬胞菌与迟缓爱德华氏菌混合感染鳗鱼报告

1995年3月至1997年2月，我们多次从病鳗的鳃、肝、肾、腹水病料中同时检出柱状噬胞菌和迟缓爱德华氏菌，对其生物学特性和病原学进行了初步研究，现报告如下：1病鳗症状初期鳗鱼摄食下降，傍晚和夜间在水面上无力逆游晃动或紧贴池壁或挂在食台上，反应迟钝，2天后每池有死鳗20余尾。捞起病鳗只见腹部各处皮肤出血，一片潮红，肝区肿大，鳍充血，严重的前腹部穿孔。解剖见鳃上粘液很多，鳃丝肿胀，呈暗红色或灰白色，鳃片缺损，有的只剩下鳃柄，指压鳃部有血水流出，肝脏、肾脏肿大，有脓疡病灶，胃内多有积水，有的腹水达20ml。2病原菌分离…     

牛蛙爱德华氏菌病病原菌的鉴定和致病因素的研究

从患爱德华氏菌病的牛蛙肌肉、肝、肾、血液和腹水中分离到8株细菌，根据其形态和生理生化特性鉴定为野生型迟钝爱德华氏菌。人工感染实验均为该病的病原菌，毒素检测试验表明，致病因素主要是内毒素而不是外毒素。分离菌株的主要特性为杆状、革兰氏阴性、周生鞭毛、兼性厌氧。接触酶、甲基红试验和硝酸盐还原均为阳性。在三糖铁琼脂上产H2S。氧化酶、丙二酸盐利用、V．P试验、明胶液化、尿素酶。苯丙氨酸脱氨酶为阴性。分解葡萄糖、甘露糖、麦芽糖，产酸产气，不利用甘露醇、蔗糖和阿拉伯糖。     

大菱鲆迟缓爱德华氏菌福尔马林灭活疫苗研究

以大菱鲆为免疫对象,采用0.5福尔马林灭活的方法,将迟缓爱德华氏菌制成全菌疫苗,验证了其具有可靠的安全性。以浸泡和注射两种免疫接种方法对养殖大菱鲆14d内进行2次免疫,第二次免疫后第10天,对免疫鱼和各自的对照鱼进行爱德华氏菌的人工感染试验,获得注射接种疫苗的大菱鲆对腹水病的免疫保护率为70,浸泡接种疫苗的大菱鲆对腹水病的免疫保护率为35。表明注射和浸泡接种迟缓爱德华氏菌全菌疫苗都能使大菱鲆对腹水病产生免疫效果,并且注射免役效果优于浸泡免疫。     

加州鲈迟缓爱德华氏菌病的检测和防治

以江苏省吴江市八坼镇区域养殖场加州鲈鱼病鱼的细菌性病原体为研究对象。通过分离纯化,形态学观察,结合16S rRNA基因序列同源性检索,对该病原菌进行初步判断。同时进行药敏实验,了解该病原菌对各种抗生素的耐药性和敏感程度。研究结果:分离纯化得到2株纯菌株L2F和L2P2,革兰染色均呈红色,阴性杆状菌。16S rDNA序列分析,L2F和L2P2菌株与迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)的同源性达99%。初步判断该菌为迟缓爱德华氏菌。药敏实验结果,该菌对磺胺异恶唑、链霉素和利福平等药物不敏感或耐药,对左氧氟沙星、诺氟沙星、恩诺沙星、强力霉素、氟苯尼考、头孢哌酮相对敏感。     

中华倒刺鲃迟缓爱德华菌的分离鉴定

从患病中华倒刺鲃(Spinibarbus sinensis Bleeker)肝脏中分离得到1株优势菌,命名为SS01。将分离菌株感染健康中华倒刺鲃,人工试验发现其患病症状与自然发病症状一致,半致死剂量(LD50)为2.88×106CFU。根据分离菌株的形态特征、生理生化特性、16S rRNA序列测定结果及系统发育树分析表明菌株SS01为迟缓爱德华菌(Edwadsiella tarda)。药敏试验表明菌株SS01对氟哌酸、恩诺沙星、氟苯尼考、克拉霉素等9种药物敏感,对青霉素、利福平、强力霉素等13种药物表现出耐药性。     

养殖杂交鳢迟缓爱德华菌的分离鉴定

从患病杂交鳢[斑鳢（Channa maculata）♀×乌鳢（C.argus）♂]体内分离到2株致病菌（ZS201364-1和ZS201364-2）,通过对其生化特性与16S rRNA基因序列进行分析,确定为迟缓爱德华菌（Edwardsiella tarda）。该致病菌兼性厌氧,为革兰氏阴性短杆菌,能运动,能发酵葡萄糖、麦芽糖。吲哚试验和MR试验均为阳性。2株致病菌对杂交鳢的半致死剂量（LD50）分别为7.1×105cfu·g^-1和5.6×105cfu·g^-1。ZS201364-1最适生长温度为25～35℃、pH为7～8、氯化钠（NaCl）质量分数为1%,对头孢噻肟、环丙沙星、诺氟沙星等抗生素高度敏感。     

20种中草药对迟缓爱德华氏菌的体外抑菌试验

用琼脂扩散法和二倍稀释法测定了20种中草药对迟缓爱德华氏菌（Edwardsiella tarda）（GD080715-1、GD080715-2）的体外抗菌活性。结果表明,五倍子、乌梅、大青叶、石榴皮的抑菌作用明显,最小抑菌浓度（MIC）〈6.25 mg/mL,最小杀菌浓度（MBC）〈50 mg/mL;吴茱萸和菖蒲有一定的抑菌作用,MBC为50～100 mg/mL;而苦地丁、栀子的抑菌作用不明显,MBC〉200 mg/mL。     

The macrophage chemotactic activity of Edwardsiella tarda extracellular products

The chemoattractant capabilities of Edwardsiella tarda extracellular products (ECP) were investigated from two isolates, the virulent FL6-60 parent and less virulent RET-04 mutant. Chemotaxis and chemokinesis were assayed in vitro using blind well chambers with peritoneal macrophages obtained from Nile tilapia, Oreochromis niloticus, 5 days following squalene injection. Non-purified ECP derived from both isolates stimulated predominantly chemokinetic migration of macrophages. Additionally, the ECP were semi-purified by high pressure liquid chromatography. The FL6-60 parent ECP yielded higher molecular weight components than did the ECP from the RET-04 mutant. The chemotactic activity of the macrophages for both the FL6-60 parent and RET-04 mutant semi-purified ECP was increased over the non-purified ECP and overall migration was primarily chemotactic. Exposure to ECP derived from virulent and less virulent E. tarda isolates promoted chemokinetic movement of macrophages that may be involved in inflammatory responses of Nile tilapia to E. tarda infection.     

中华鳖爱德华菌病病原菌的分离鉴定及致病因子研究

采用API 20E系列生化鉴定及16S rDNA和gyrB基因序列同源性分析方法,对从患病中华鳖(Trionyx sinen-sis)肝脏中分离到的一株细菌TL5m进行了鉴定,并通过人工感染试验,对该菌株进行了毒力检测;此外分别提取该TL5m株的主要致病因子外膜蛋白、脂多糖和胞外产物,对中华鳖进行毒力和免疫保护率试验。结果显示:菌株TL5m的API 20E鉴定编码为4544000,99.9%为迟钝爱德华氏菌(Edwardsiella tarda);其16SrDNA序列和gyrB基因序列(GenBank登录号分别:EF121756和GU563803)与迟钝爱德华氏菌的同源性最高(分别为94%和98%);菌株TL5m对中华鳖的半数致死量LD50为2.45×106 CFU/ind。药敏感结果显示菌株对磷霉素、菌必治、头孢孟多、头孢噻吩、壮观霉素高度敏感。外膜蛋白攻毒剂量60μg/ind和脂多糖攻毒剂量400μg/ind时,对中华鳖的致死率都为33.3%,胞外产物对中华鳖的LD50为31.73μg/ind;全菌灭活苗、胞外产物、外膜蛋白和脂多糖的免疫保护率分别为75%、62.5%、25%和87.5%。结果表明,发病中华鳖的病原菌为迟钝爱德华氏菌,其分泌的胞外产物对中华鳖具有较高毒力;提取的脂多糖对中华鳖遭受迟钝爱德华氏菌攻击具有较高免疫保护率。     

Isolation and identification of fish pathogen Edwardsiella tarda from mariculture in China

The causative agent was isolated from diseased turbots (Scophthalmus maximus) stricken by a high‐mortality outbreak of bacterial septicaemia occurring in a mariculture farm in Yantai, a northern coastal city of China. Seven pure isolates, namely EH‐15, EH‐103, EH‐107, EH‐202, EH‐203, EH‐305 and EH‐306, belonged to Edwardsiella tarda. The phenotypic features of the cultures were analysed extensively. Three of the isolates showed high 16S rDNA sequence similarities with E. tarda sequence (GenBank accession no. EF467289). However, unlike the E. tarda ATCC 15947, all the isolates, except EH‐15, contained a novel large plasmid sized about 23.7 kb. Furthermore, pathogenicity of the isolates was addressed by experimental challenges with fish models. The isolates exhibited strong virulence to swordtail fish with LD₅₀ ranging between 3.8 × 10³ and 3.8 × 10⁵ CFU g^?1, and EH‐202 displaying the lowest LD₅₀ value among them. Antibiotic susceptibilities of E. tarda isolates were assayed. Compared with E. tarda ATCC 15947, the isolates displayed strong resistance to chloramphenicol, and the probable dominant chloramphenicol resistance determinant was cat III. Depicting the main biological properties of turbot‐borne E. tarda strains in China, the study provided useful information for further unveiling their pathogenic mechanisms.     

牙鲆迟钝爱德华氏菌血清型及荧光抗体检验

以迟钝爱德华氏菌的代表菌株(HC010907-1)为免疫原,制备免疫血清,对分离于牙鲆鱼的130株迟钝爱德华氏菌进行了血清型检定,结果表明:供试的130株迟钝爱德华氏菌均为同种血清型;同时以此免疫血清为第一抗体,以标准羊抗兔IgG荧光抗体为第二抗体,进行了荧光抗体技术检验迟钝爱德华氏菌的可行性试验,表明亦具有较强的特异性。     

20种中草药对迟缓爱德华氏菌的体外抑菌试验

用琼脂扩散法和二倍稀释法测定了20种中草药对迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)(GD080715-1、GD080715-2)的体外抗菌活性。结果表明,五倍子、乌梅、大青叶、石榴皮的抑菌作用明显,最小抑菌浓度(MIC)<6.25 mg/mL,最小杀菌浓度(MBC)<50 mg/mL;吴茱萸和菖蒲有一定的抑菌作用,MBC为50～100 mg/mL;而苦地丁、栀子的抑菌作用不明显,MBC>200 mg/mL。