金沙柚及其近缘种的SSR分子标记分析研究简报

应用SSR分子标记对8份江西不同来源的金沙柚及其近缘柚类品种的遗传多样性进行分析。从41对引物中筛选了26对引物,共检测到等位基因92个,平均每对引物扩增出3.54个等位基因,多态性为53.68%。每对引物可检测到的等位基因数目为2～8个不等。 NTSYS 软件分析,8份材料的相似性系数为0.729～0. 924。聚类分析结果显示材料可以被划分为金兰柚和沙田柚两个组。结果表明,金沙柚与其近缘柚类亲缘关系较近,但近缘种间存在一定的遗传变异。为金沙柚的种质保存、育种和生产提供了分子水平上的依据。     

紫花地丁的有效成分分析及抗菌作用研究

采用试管法和圆形滤纸层析法分析鉴定了紫花地丁的化学成分.结果表明:紫花地丁含有机酸、黄酮及其甙类、酚性成分、糖类、氨基酸、多肽及蛋白质、皂甙、植物甾醇、鞣质等十种有效成分.采用有机溶剂提取法分离提取其抗菌有效成分--黄酮甙类及有机酸,用其对几种家畜常见病原微生物进行体外抑菌试验,结果表明:紫花地丁所含黄酮甙类及有机酸对金色葡萄球菌、猪巴氏杆菌、大肠杆菌、链球菌和沙门氏菌都有较强的抑菌作用,黄酮甙对各种病原菌的抑菌圈直径(mm)分别为36.85±1.04、13.01±0.55、12.42±0.32、12.81±1.04、16.83±3.21;有机酸分别为35.83±1.76、12.77±0.76、12.34±0.77、11.52±0.50、18.24±3.55.     

紫花地丁总黄酮体外抗炎活性研究

试验研究了紫花地丁总黄酮（TFV）对脂多糖（LPS）诱导的小鼠RAW264.7巨噬细胞活力、细胞中炎症介质含量以及相关基因表达的影响,以期探讨其体外抗炎活性的作用。试验采用MTT法筛选出TFV对小鼠RAW264.7巨噬细胞活力具有促进作用的最佳添加浓度;用酶联免疫吸附法（ELISA）检测了TFV对LPS诱导的小鼠RAW264.7巨噬细胞释放到细胞培养液中NO、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白介素1β（IL-1β）、白介素6（IL-6）含量的影响;运用实时荧光定量PCR法检测了TFV对LPS诱导的炎性小鼠RAW264.7巨噬细胞TNF-α、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）和环氧合酶2（COX-2）相对表达水平的影响;研究并分析了TFV的体外抗炎活性。试验结果表明,TFV在5~50 μg/mL浓度范围内能提高小鼠RAW264.7巨噬细胞的活力（P<0.05）;与LPS模型组比较,TFV能显著降低LPS诱导的小鼠RAW264.7巨噬细胞产生NO、TNF-α、IL-6、IL-1β的含量,并能显著降低LPS诱导的小鼠RAW264.7巨噬细胞内TNF-α、COX-2等炎症因子的mRNA表达量（P<0.05）。综上,TFV能显著下调LPS诱导的小鼠RAW264.7巨噬细胞IL-1β、IL-6、TNF-α等细胞因子的释放量和下调TNF-α、COX-2 mRNA的表达量,说明抑制促炎性细胞因子基因的表达可能是实现其抗炎作用的原因之一。     

紫花地丁-芦荟紫花地丁-双花连翘提取物对大肠杆菌O_2的联合抑制作用研究

为了研究紫花地丁-芦荟、紫花地丁-双花连翘提取物两个药物对大肠杆菌的联合抑制作用,采用微量棋盘法对已知血清型大肠杆菌O_2进行了单独与联合抑菌对比试验。结果显示,紫花地丁、芦荟、双花连翘提取物,MIC分别为1/4原液、原液和1/4原液;当紫花地丁-芦荟、紫花地丁-双花连翘提取物两两相互配伍时,紫花地丁的MIC分别为单用时的1/16倍和1倍,芦荟和双花连翘提取物的MIC分别降为单用时的1/32倍和1/4。结论:紫花地丁与芦荟和双花连翘提取物分别联合应用时,FIC值分别为0.09375和1.25,相互作用分别为协同作用和无关作用。     

两种草坪地被植物紫花地丁和早开堇菜的同工酶研究

利用聚丙烯酰胺垂直平板胶电泳技术,对紫花地丁和早开堇菜的种子、叶片及地下茎进行ＰＯＤ和ＳＯＤ同工酶分析。结果表明,紫花地丁和早开堇菜种子ＳＯＤ、ＰＯＤ同工酶谱相近,而叶部ＰＯＤ同工酶、根部ＳＯＤ和ＰＯＤ同工酶又存在明显差异,说明这两种植物亲缘关系很近,仅在遗传特性上有差别     

紫花地丁二型性种子的萌发特性及其生态意义

紫花地丁(Viola philippica)具有开放花(CH)和闭锁花(CL)形成的二型性种子。在对紫花地丁CH种子和CL种子形态观测的基础上,比较了这两种类型种子在不同温度、光照以及贮藏时间下的萌发特性。结果表明,1)CH种子长、宽以及千粒重显著大于CL种子(P0.05)。2)CH种子和CL种子最适萌发温度均为20℃,萌发率均在95%以上,在10℃条件下均不萌发,但在高温(30℃)条件下CL种子的萌发率显著高于CH种子(P0.05),其它温度下,两者萌发率均无显著差异(P0.05)。3)CH种子对光照条件敏感,黑暗条件对其萌发具有极显著的抑制作用(P0.01),而CL种子在12h光照和全黑暗条件下萌发差异不显著(P0.05)。4)CH种子贮藏210d后,萌发率显著降低(P0.05),而CL种子则在贮藏510d后萌发率才显著下降(P0.05)。CH种子于春季成熟后即可迅速萌发,CL种子一部分于之后的季节萌发,另一部分成为短暂土壤种子库于次年春季萌发。紫花地丁通过二型性种子更好地适应时空异质性环境,提高了其适合度。     

分子标记技术在寄生虫分类鉴定上的应用

分子标记与形态标记、细胞学标记和生化标记3类遗传标记技术相比,具有直接以DNA的形式表现,在动物的任何生长阶段都可检测,遍布整个基因组,多态性高,检测手段简单迅速,无基因多效性,能够明确辨别等位基因,试验重复性好等优点.目前,在寄生虫分类鉴定上常用的分子标记技术有RFLP,PCR-RFLP,RAPD和AFLP.文章综述了4种分子标记技术的基本原理、主要优缺点以及在寄生虫分类鉴定中的应用情况.     

紫花地丁活性成分、药理作用及其在畜禽生产方面的应用前景

紫花地丁作为我国传统的药食同源的多年生草本植物,主治目赤肿痛、疔疮肿毒、乳房炎、毒蛇咬伤的疾病,内含丰富的黄酮苷类、香豆素类化合物,具有抗炎抗菌,抗病毒等多种药理活性。本文主要就近年来国内外对紫花地丁的物质基础及应用于畜禽生产上的研究成果进行综述,为下一步提取紫花地丁有效成分以及用于家禽养殖创新用药的试验研究、开发和利用提供参考依据。     

复方紫花地丁对鸭大肠杆菌MIC逆转效果的影响

以恩诺沙星人工诱导鸭大肠杆菌耐药菌株,原始菌株和诱导株经不同浓度的复方紫花地丁溶液处理,检测其MIC及菌体药物蓄积浓度.结果表明,经复方紫花地丁溶液处理的菌株,MIC显著降低,且与紫花地丁溶液呈浓度依赖关系.研究结果提示,一定浓度的紫花地丁溶液可以逆转鸭大肠杆菌的耐药性.     

紫花地丁香豆素类提取物体外对新城疫病毒抑制作用的研究

试验旨在探究紫花地丁香豆素类提取物体外对新城疫病毒的抑制作用。试验以紫花地丁为材料,制备紫花地丁香豆素提取物体,利用高效液相色谱法检测提取物中秦皮甲素和秦皮乙素的含量,利用CCK-8方法检测紫花地丁香豆素类提取物对新城疫病毒（NDV）感染鸡胚成纤维细胞的影响。结果表明,紫花地丁中秦皮甲素和秦皮乙素的含量分别为2.58、7.66 mg/g;紫花地丁香豆素类提取物在DF-1细胞中的半数致死浓度为185.2 mg/L。紫花地丁香豆素提取物浓度以剂量依赖的方式抑制NDV的复制,当提取物浓度为100 mg/L时,对NDV的复制抑制率最高,为74.31%。在NDV吸附抑制中,当紫花地丁香豆素类提取物作用浓度为100 mg/L时,对NDV吸附抑制率最高,为67.4%。研究表明,紫花地丁香豆素类提取物在体外具有明显的抗NDV感染作用。     

玉蜀黍属物种间遗传关系的RAPD分析

用136个RAPD引物对玉蜀黍属大刍草和玉米种质基因组DNA的多态性进行检测,共得到5 303条条带,其中多态性带4 500条。遗传相似系数分析结果表明,玉米与大刍草种质遗传相似性系数变幅为0.585～0.809,相同种遗传相似性系数为0.767～0.809,而种间或亚种间的相似性系数为0.585～0.745,表明利用RAPD技术能准确地揭示出玉米与大刍草种间的遗传关系。聚类结果表明,玉蜀黍属内所有大刍草和玉米可分类为繁茂亚属和玉蜀黍亚属,繁茂亚属包括四倍体多年生类玉米种、二倍体多年生类玉米种、繁茂类玉米种和尼加拉瓜类玉米种;玉蜀黍亚属包括小颖类玉米亚种、墨西哥类玉米亚种、委委特南戈类玉米亚种和玉米。运用RAPD技术证实在玉蜀黍属中尼加拉瓜类玉米种与繁茂类玉米种亲缘关系最近。     

应用RAPD标记对高粱属两物种之间遗传差异的研究(简报)

本研究选用了32个栽培高粱品种、10个苏丹草品种及2个高粱近缘种进行了RAPD分析。结果表明,1)12对引物产生的68条DNA扩增片段中,52条(76.5%)具有多态性。2)高粱之间的相似系数从55%到95%;苏丹草之间的相似系数从52%到84%,因此选择的品种之间的多态性高,具有代表意义。高粱不育系和保持系之间的相似度很大,为89%以上,但通过RAPD标记能够将其区分。3)以0.66为阈值将44个品种分为10个类群。第1类群中全部为苏丹草;在2,3,4群中既有苏丹草也有高粱;5,6,7,8群中则全部为高粱。因此,使用RAPD分子标记进行聚类不能将高粱和苏丹草区分开来。     

麦洼牦牛的随机扩增多态性DNA遗传多样性分析

利用随机扩增多态性DNA(RAPD)分子标记对麦洼牦牛粉嘴和纯黑2个选育群共100头个体进行遗传多样性分析,并用DCFA、Popgen1.32等软件分析了群体间和群体内的基因频率、群体分化指数(Gst)和基因流(Nm)等参数。结果表明:8个RAPD随机引物共检测到65种清晰谱带,其中具有多态性的谱带57条,多态频率为87.7%。在粉嘴群中,多态位点有45个,多态频率为69.23%,Nei氏基因多样性指数(H)为0.245;纯黑群中,多态位点有52个,多态频率为80.00%,H为0.260,显示2个群体遗传多样性均较丰富,且多样性相近。麦洼牦牛2个群体总的多样性指数(Ht)为1.877,有效等位基因数(Ne)为1.455,H为0.280,表明麦洼牦牛的遗传多样性较丰富。纯黑群体与粉嘴群体间的遗传距离(D)为0.073,群体内遗传变异大于群体间。     

利用RAPD标记分析狼尾草属牧草品种间的遗传关系

采用RAPD分子标记技术对狼尾草属8个品种(品系)间的遗传关系进行了分析,结果发现,19个引物共扩增出169条带,其中111条带为多态性带,占总带数的65.7%,表明在这8个品种(品系)间具有较高的遗传多样性,存在有一定的遗传分化.从UPGMA聚类分析的结果来看,象草、象草新品系、矮象草、N51、王草和桂牧1号作为一个谱系群的bootstrap值为73%,反映了它们之间较为密切的亲缘关系;同时发现,杂交狼尾草与其他7个草种间存在有较明显的遗传分化,表明Pennisetum americanum遗传成分的多少及有无在这8个品种(品系)间遗传关系的调节中起着重要的作用.另外,相对于其他6个草种,象草新品系与矮象草具有最小的遗传距离(0.130),从而为象草新品系与矮象草之间亲缘关系的确定提供了重要证据.     

紫花苜蓿品种鉴定的RAPD分子标记技术研究

试验分别以中苜一号(Medicago sativa L. cv.Zhongmu No.1)、肇东(M.sattva L. cv.Zhodong)、甘农三号(M.sativa L. cv.Gannong No.3)、公农一号(M.satzva L. cv.Gongnong No.1)紫花苜蓿品种的混合DNA(由各品种60个单株的DNA等量混合)为模板筛选RAPD特异性引物,分析比较品种鉴定的特异性谱带.结果表明:从120条随机引物中筛选出S1、S78、S89和S¨5共4条随机引物,可以通过特异性分子标记位点反映品种间的差异;另外,筛选出的RAPD标记引物对各品种60个单株DNA的测试显示品种内部存在特异性标记的单株比例较高;通过RAPD分子标记引物的筛选、标记程序的完善,确定品种特异性标记谱带,可以进行紫花苜蓿(Medicago sativa)品种的鉴定.     

RAPD标记技术及其在牧草研究中的应用

介绍了RAPD标记的发展、原理、方法、特点和不足，并且对它在遗传图谱的构建、基因定位、品种和品系的分类及鉴定、作物育种等研究领域中的应用作一简述。     

青龙本地山羊随机扩增多态DNA与体重体尺相关性研究

利用９种随机引物研究了青龙本地山羊的随机扩增多态ＤＮＡ,并利用ＳＰＳＳ程序对多态标记进行了方差分析。结果表明：青龙本地山羊基因组ＤＮＡ多态频率为４８．６５％,多态标记Ｋ０９Ｂ,Ｐ１４Ｄ和Ｑ１４Ｄ及其互作效应对体重和体尺有显著影响。     

柞蚕杂交及回交后代的RAPD分析

本文采用RAPD分子标记技术对柞蚕品种选大1号和沈黄1号及其F1、F2代、回交F1代共13个群体的基因组DNA进行了分析,探讨了柞蚕品种的分子遗传机制。运用8个RAPD引物进行扩增,共扩增出74条清晰稳定的条带,其中有65条具有多态性,多态性位点比率为87.84%,其中也出现了特异性扩增位点。     

RAPD技术及其在动物医学中的应用

RAPD技术即随机扩增多态性DNA技术，是一种建立在PCR基础上的新的DNA多态性检测技术，其主要特点是利用随机寡核苷酸引物扩增基因组DNA片段，通过凝胶电泳分析其指纹图谱特征。该技术具有快速灵敏，程序简便等优点，现已经广泛应用于多个领域，此文综述了RAPD技术的原理、优缺点、影响因素及其在动物医学中的应用。     

黄羽肉鸡遗传变异RAPD分析及其与体重杂种优势的关系

试验利用RAPD标记,选用20个随机引物,分析了黄羽肉鸡K、F、A三个品系的遗传差异,计算遗传距离,并对其与K×F、K×A杂交后代的初生重及2、4、6、8周龄体重的杂种优势和杂种优势率进行相关分析。试验结果表明,RAPD分子标记都表现出多态性。亲本个体间的遗传距离与后代杂种优势率之间大多数为弱的正相关或负相关,只有K×F亲本个体间RAPD遗传距离与初生重杂种优势和杂种优势率显著相关。