应用对流免疫电泳诊断鸡传染性法氏囊病的初报

对流免疫电泳试验(CIEP)是七十年代以来发展起来的一项免疫学技术。它是在免疫沉淀反应的基础上结合免疫电泳通以电流,使抗原、抗体在电场中定向移动,限制了双向免疫扩散时抗原、抗体多方向自由扩散,从而提高了试验的敏感度。CIEP具有方法简便、敏感性高、结果迅速等优点。早在1971年Dorff等即成功地用CIEP诊断某些细菌感染。不少国家(包括我国)已经在许多动     

火箭免疫电泳对猪瘟诊断的研究

综合诊断为猪瘟的59例病科,经电泳全部出现阳性反应;已确诊为其他疫病的病猪10例及屠宰的健康猪19例,全部为阴性结果。火箭电泳诊断与兔交互免疫诊断的符合率达84.21％。火箭电泳是免疫扩散与免疫电泳相结合的一种检测方法,我们将其试用于猪瘟诊断。三年来,在进行流行病学、临床及剖检综合判定的基础上,将本方法和兔体交互免疫做了对比,认为有一定的实用价值,现报告如下。     

生后未吃初乳羔羊副结核杆菌对应抗体的检出

在母羊产羔后立即采取134份母羊血样和143份新生羔羊血样。用双向免疫扩散试验(ID)和对流免疫电泳试验(CIEP)检测副结核杆菌对应抗体。在血清学上证明感染副结核杆菌的127只母羊所产的135只羊羔中有4只羔羊的血清检出     

猪伪狂犬病实验室诊断技术研究进展

本文概述了伪狂犬病的生物学试验、血清学诊断技术与分子生物学诊断技术。在生物学诊断技术方面,其诊断方法主要有动物实验、细胞培养等。血清学诊断技术包括补体结合试验、血清中和试验（SN）、凝集试验、免疫扩散试验、酶联免疫吸附试验（ELISA）、颗粒浓缩免疫荧光试验（PCFIA）、对流免疫电泳（CIE）、放射免疫试验（RIA）等。随着分子生物学的发展,对伪狂犬病的诊断从细胞水平发展到分子水平,国内外相继建立了伪狂犬病核酸杂交、聚合酶链反应（PCR）、核酸序列分析等分子生物学诊断方法。     

用含多糖抗原的琼脂凝胶免疫扩散试验检测牛对布氏杆菌的体液免疫

牛感染布病往往难以诊断,这是因为感染牛型布氏杆菌(Brucella abortus)牛的血清学反应受多种因素影响。本试验采用了含可溶性多糖组分(Poly—B抗原)的琼脂凝胶免疫扩散试验(AGID)进行检测。Poly—B抗原的特点是在免疫电泳和AGID中有显著的扩散性且碳水化合物含量高。用感染布氏杆菌或接种疫苗的牛、感染布氏杆菌     

泰氏锥虫抗原制备及实验室诊断研究

应用体外培养的泰氏锥虫制备可溶性抗原Ⅰ、抗原Ⅱ和代谢抗原.经测定,其蛋白含量每毫升分别为6.5mg、7.4mg和7.1mg.薄层等电聚焦电泳测定结果表明,抗原Ⅰ出现22条区带,抗原Ⅱ21条区带,代谢抗原28条区带,对照的伊氏锥虫琼脂免疫扩散抗原14条区带.经分析,泰氏锥虫抗原和伊氏锥虫抗原有4条区带在同一迁移率上.琼脂免疫扩散反应中,3种泰氏锥虫抗原均与相应免疫兔血清发生沉淀反应,抗原Ⅰ出现1条致密沉淀线,抗原Ⅱ和代谢抗原出现2～3条沉淀线,抗原效价为1:4～16.免疫电泳显示了类似的结果,抗原Ⅰ与免疫兔血清出现1条弧形沉淀线,抗原Ⅱ和代谢抗原与免疫兔血清出现了3条弧形沉淀线.间接血凝试验结果表明,泰氏锥虫自然感染牛血清效价为1:20～40,免疫兔血清为1:1280～5120.所制泰氏锥虫抗原对伊氏锥虫和媾疫锥虫血清也能很好地发生交叉反应,3份伊氏锥虫病马血清和3份伊氏锥虫人工感染兔血清血凝效价分别为1:10～40和1:8～1024;5份媾疫马血清有4份血凝效价为1:20～320.4份环形泰勒虫病牛血清均为阴性.     

用对流免疫电泳试验检测鸡传染性法氏囊病血清抗体

利用自制传染性法氏囊病抗原,采用对流免疫电泳试验检测鸡ＩＢＤＶ抗体。结果表明,该方法能在３０－６０ｍｉｎ内使阳性血清和抗原之间出现明显的沉淀反应,且能被特异性抗原阻断;用ＮＤＶ,ＩＢＶ和ＥＤＳ７６Ｖ等血清代替ＩＢＤＶ血清无交叉反应,对同一批样品进行两次检测,结果具有良好的重复性,同琼脂免疫扩散方法比较,ＣＩＥ法需时短,敏感性高。     

制备抗免疫球蛋白的特异血清

从出生后第一天开始,不同年龄动物血清免疫球蛋白种类的数量关系是生物体在不同发育阶段或在各种病理状态下免疫生物学性状的指标。测定免疫球蛋白IgG、IgM、IgA,主要是应用同类特异性血清。本实验目的是改善分离纯净免疫球蛋白和制备相应抗血清的方法。为了分离单一种类的免疫球蛋白,采用下述的物理一化学方法:用硫酸钠沉淀血清中球蛋白;用分子量为6000的聚乙二醇(—6000)沉淀方法,初步分离出单一的免疫球蛋白;用免疫电泳法测定已分离的免疫球蛋白纯度,用免疫扩散试验鉴定所制备的抗血清特异性;用家兔同类特异性抗血清     

布氏姜片虫排泄分泌抗原的提取及其免疫化学特性研究

利用体外无菌培养技术，制备了布氏姜片虫的排泄分泌抗原(ES)。经梯度PAGE和SDS-PAGE分别分离出7条蛋白质区带和9条多肽区带，其中包括1条糖蛋白和1条糖脂蛋白，说明布氏姜片虫ES含复杂的蛋白组分。免疫电泳、免疫扩散即迹试验表明，布氏姜片虫ES含有较多与虫体抗原相同的抗原成分，也含有少数与虫卯抗原相同的抗原成分。     

鸡血清载脂蛋白AⅠ的分离纯化及其抗血清的制备

用磷钨酸沉淀制备鸡血清HDL，乙醇-丙酮混合液(体积比为1：1)脱脂后采用DEAE Sepharose CL-6B离子交换柱层析法分离鸡血清apoAⅠ，分离获得的apoAⅠ在尿素-SDS-PAGE电泳中呈现单一条带，其分子质量约为27788u。将提取的apoAⅠ对新西兰雄兔进行多次免疫，制备得兔抗鸡apoAⅠ抗血清，其效价为1：16。在免疫电泳和双向免疫扩散试验中抗血清均只呈现1条清晰沉淀带。试验结果表明，用磷钨酸沉淀法制备兔抗鸡apoAⅠ抗血清，过程简便，时间短且分离效果好。     

水牛盱眙病血清学研究

从水牛盱眙病病肝和淋巴结提纯病毒抗原，用双层间接ＥＬＩＳＡ和免疫扩散（ＩＤ）检测盱眙病抗体，结果在２９头病牛血清中ＩＤ阳性率为８％，ＥＬＩＳＡ阳性率为９３．１％；５４头疫区牛血清中，ＩＤ阳性率为１．９％，ＥＬＩＳＡ阳性率为１１．１％；非疫牛则两法均为阴性。以淋巴细胞免疫吸附试验证实病牛淋巴细胞的细胞膜上存在有病毒抗原。以病水牛血清和健康水牛对比作免疫电泳，发现病牛血清中缺少ＩｇＭ带     

羊进行性肺炎诊断的微量免疫扩散试验

本文论述检查和测定羊进行性肺炎抗体的二种微量免疫扩散试验(MIDT)、用含有各种盐的浓度和不同 pH 值的底物来测定本试验的最适条件。应用淘汰母羊血清,将两种微量免疫扩散试验和一种宏量免疫扩散试验进行比较。微量免疫扩散试验比宏量免疫扩散试验所需试剂少且反应敏感。延长试验物感作时间后,三种试验结果相近。     

用免疫扩散试验鉴定猪瘟防疫效果

免疫扩散试验检测猪瘟抗体,具有快速、准确、经济、简便的特点,在对425份注苗猪血清用免疫扩散试验和1:16倍稀释血清所做中和试验的对比检测中,取得了基本一致的结果。在此工作基础上,我们进一步验证了免疫扩散试验的特异性,检测了猪瘟沉淀抗体的产生动态和持续时间,并对27个施行季节防疫的县和一个坚持常年注射的     

用对流免疫电泳诊断猪瘟的试验

对流免疫电泳技术是 Graber 氏等(1953)将琼脂扩散和免疫电泳结合进行抗原抗体的检测。它具有方法简便,特异性强和出现结果快速等优点。其原理是溶液中的带电质点,在电场的作用下向着相反的电极移动称为电泳。由于抗原在偏碱的溶液中带负电荷,在电场中向正极移动;而抗体球蛋白由于接近等电点,借内渗流的作用与抗原相反缓慢的移向负极。通过将抗原抗体孔作以适     

传染性法氏囊病的对流免疫电泳诊断

对流免疫电泳以灵敏、快速、简单及准确的优点广泛应用于畜禽疾病的诊断。本试验探求用对流免疫电泳法诊断鸡法氏囊病,现将结果报告如下:     

酶对流免疫电泳对家蚕浓核病的早期诊断技术

研究胃酶对流免疫电泳(ELCIEP)对家蚕浓核病进行早期定性诊断的技术和实际效果,并与对流免疫电泳进行了实际检测效果和灵敏度的比较。结果表明,酶对流免疫电泳特异性强,灵敏度高,重复性能好;标记后的抗体(2.1毫克/毫升)最适稀释倍数为1:400:待测材料的稀释倍数以1:4或1:8为好;对纯化浓核病毒(DNV)的最小检出量为0.016O.D,灵敏度比对流免疫电泳高8倍;对DNV病蚕肠组织研磨澄清液发生阳性反应的平均最大稀释倍数为1:137.6,是对流免疫电泳的16倍;最早检出时间是感染后16小时,半数检出时间是感染后21小时,均比同等感染条件下的对流免疫电泳提早检出8小时左右;用酶对流免疫电泳法检测后,可立即用酶底物显色判别诊断结果,为DNV的早期、快速、准确诊断提供了一个新方法。     

家蚕核型多角体病毒主要结构组分的血清学关系研究

用蔗糖密度梯度离心与琼脂糖凝胶柱层析相结合的方法,分离纯化家蚕核型多角体病毒的多角体蛋白和病毒粒子。用非离子型去污剂NP—40脱除病毒粒囊膜,制备核衣壳。经用多种方法对这三种主要结构组分进行纯度鉴定。制备相应的兔抗血清。用双向免疫扩散和免疫电泳对三者之间的血清学关系进行了比较。试验结果表明,家蚕核型多角体病毒的多角体蛋白与病毒粒子和核衣壳之间无交叉反应,核衣壳与病毒粒子囊膜之间亦无血清学关系。     

猪细小病毒的研究 Ⅲ.对流免疫电泳检测PPV抗原和抗体

利用对流免疫电泳技术检测猪细小病毒(PPV)抗原和抗体的结果初步表明,该法具有较强的特异性和可重复性,在pH8.6、离子浓度0.1mol、电流强度4mA的条件下,于琼脂凝胶中1～1.5小时、于琼脂糖凝胶中1.5～2小时,抗原和抗体孔间可出现了3条清晰沉淀线。中间一条沉淀线粗而致密。琼脂凝胶优于琼脂糖凝胶检测效果。与现有方法相比,对流免疫电泳的突出特点是简便、快速、稳定、省力,抗原和血清不需作任何处理,因此可望代替现有的常规检测方法即血凝(HA)和血凝抑制(HI)法而应用于生产实际。对一些有关问题进行了讨论。     

琼脂凝胶免疫扩散试验诊断鸡马立克氏病(MD)

鸡马立克氏病(MD)的血清学诊断,目前大家常用的有琼脂凝胶免疫扩散试验、间接萤光抗体试验及间接血球凝集试验。在这些方法中,琼脂凝胶免疫扩散试验比较简便,易于推广应用。我们应用这一技术对我省某鸡场进行了MD病的诊断性调查,现将结果报告如下:     

琼脂凝胶免疫扩散和粪便培养对山羊副结核诊断的比较

在自然感染副结核分支杆菌的一大群山羊中,应用琼脂胶凝胶免疫扩散和粪便的细菌培养来监视新患者已近达两年半之久。基于死后感染情况的确定,这两种方法都具有相同的诊断敏感性和特异性。琼脂凝胶免疫扩散试验提供了明显的优势,它操作简便,试验结果迅速。从而推断,重要的问题应该把免疫扩散试验当作控制山羊副结核病计划中的一个诊断工具。