红茶添加对灵芝菌液态发酵产胞外多糖的影响

通过添加红茶对灵芝菌液态发酵产胞外多糖(EPS)影响的研究表明,培养基中添加红茶对灵芝菌液态发酵的菌体干重和EPS产量均有显著影响。当红茶添加量为2.5%时,对EPS产量的提高有显著的促进作用,为0.985 g獉L-1,比对照组增加80.2%;而菌体干重为7.818 g獉L-1时,比对照组下降43.6%。同时研究了在最适红茶添加量条件下,灵芝菌发酵菌体干重和胞外多糖EPS产量的变化过程,验证了其生物量与产物生成呈部分偶联型的代谢规律。     

低档绿茶驯化灵芝菌实验研究

研究了灵芝菌经过低档绿茶茶汁、茶粉多次驯化后，平板培养时菌丝增殖速率和摇瓶发酵时茵体生物量与胞外粗多糖(EPS)的变化情况。实验结果表明，驯化种在茶汁平板和普通平板上，茵丝平均增殖速率分别提高了30．7％、8．0％；驯化种在茶培养基中发酵时，最大菌体生物量和胞外粗多糖产量分别提高了119．87％、69．39％，显然，驯化种发生了部分遗传特性良性改变。     

鸡油菌菌丝体培养技术研究

[目的]为鸡油菌的驯化和推广提供理论依据。[方法]野外采集鸡油菌,分别配制10种不同pH值和活性碳添加量的培养基对其进行培养,25℃连续培养45d,通过测定不同处理菌丝体的生物量,研究培养基pH值和活性碳添加量对鸡油菌菌丝体生长的影响。[结果]培养基过酸、过碱都会抑制鸡油菌菌丝体生长,培养基pH值为6.0时,鸡油菌菌丝体干重最大,为40.3mg/瓶,增殖倍数为26.85倍;活性碳对鸡油菌菌丝体生长具有明显的促进作用,当培养基中活性碳含量为0.03%时,鸡油菌菌丝体干重最大,为65.7mg/瓶,增殖倍数为43.77倍。[结论]鸡油菌生长的最适培养基pH值为6.0,活性碳添加量为0.03%。     

黄芪多糖-枯草芽孢杆菌合生元菌液的研制

研究黄芪多糖-枯草芽孢杆菌合生元菌液制备过程中,黄芪多糖的最适添加量以及合生元菌液的最适培养时间。将活化后的枯草芽孢杆菌ACCC11025菌液以1%的接种量分别加入含黄芪多糖浓度为0,0.5,1,1.5,2,2.5,3,6,10mg.mL-1的液体培养基中,分别置37℃、120r.min-1以及32℃、120r.min-1培养箱中培养,每隔0.5h检测菌液OD值。结果表明:添加浓度为1.5mg.mL-1黄芪多糖的培养基中,枯草芽孢杆菌ACCC11025菌液浓度达到最高,分别比对照组和10mg.L-1组提高13.8%和148.8%(p<0.05);在5.5h代时最小,为1.22h,黄芪多糖-枯草芽孢杆菌合生元黄芪多糖最适添加量为1.5mg.mL-1,最适培养时间为5.5h。     

鸡Cong菌的液体培养及菌体成分分析

研究了鸡Cong菌（Terminomyces albuminusos)液体培养过程中4种不同培养基对菌体得率、菌体多糖和菌体氨基氮含量的影响，并进行进行了力学研究。测定了菌体体中蛋白质和氨基酸和含量，结果表明：以菌体得率为指标，最适培养基为：蔗糖20g.L^-1，黄豆粉g.L^-1，酵母粉15g.L^-1，菌体得率为23．73g.L^-1。以菌体多糖为指标，最适应基为：花生粉20g.L^-1，葡萄糖20g.L^-1，酵母粉15g.L^-1，菌体多糖为14．28％；深层培养72h，菌体多糖含量最高达10．35％，培养至96h，菌体得率、菌体氨基氨含量最高，分别为23．73g.L^-1和1．25％，菌体蛋白质含量为28．28％，氨基酸含量为17．78％。     

红豆杉中产紫杉醇及其类似物内生菌的分离与筛选

为了从红豆杉中分离筛选可以产紫杉醇及其类似物的内生菌，本研究以红豆杉为试验材料，对其针叶和枝条通过划线分离法共筛选得到9株内生菌，对所得菌株用不同发酵培养基进行摇瓶发酵培养，发酵液及菌体经乙酸乙酯萃取浓缩后以紫杉醇标准品为对照进行薄层层析（TLC）检测。试验发现9株内生菌中有4株可以产生紫杉醇及其类似物，其中内生真菌有3株，内生细菌有1株。通过细菌16S rDNA扩增测序和真菌Its扩增测序分析可知，3株内生真菌初步确定为1株链格孢菌（Alternaria sp.）和2株Paraconiothyrium brasiliense,1株细菌为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）；相同菌株用不同发酵培养基时，样品Rf值不同，表明培养基成分会影响菌体进入次级代谢的时间，并进一步影响前体物质向紫杉醇的转化。试验结果为后续紫杉醇这一天然中药成分的生物合成及其代谢调控奠定了基础。     

10种中药成分对单层鸡胚成纤维细胞增殖的影响

将安全浓度范围内的黄芪多糖、当归多糖、蜂胶多糖、淫羊藿多糖、板蓝根多糖、黄芪黄酮、蜂胶黄酮、淫羊藿黄酮、黄芪皂苷和人参皂苷等 10种中药成分分别加入已培养 2 4h、刚形成单层的鸡胚成纤维细胞 (CEF)中 ,在加药后12 ,2 4 ,36 ,4 8和 6 0h用MTT法测定它们对CEF增殖的影响。结果表明 ,黄芪皂苷、黄芪多糖、板蓝根多糖和蜂胶黄酮主要表现为促进增殖 ;淫羊藿多糖主要具抑制效应 ;其他 5种中药成分在某些浓度和时间点能促进增殖 ,而在某些浓度和时间点则抑制增殖 ,并有一定的量效和时效关系。     

土壤食细菌线虫的分离和富集培养方法

从小麦根际土中分离得到一种能取食B1和B2两种细菌的土壤食细菌线虫，并在马铃薯蔗糖培养基上富化培养成功。经鉴定该线虫为原小杆线虫属（Protorhabditis sp.）,B1为假单胞菌属（Pseudomonas sp.),B2为醋杆菌属（Acetobacter sp.)。用牛肉膏蛋白胨细菌培养基培养B1和B2两种细菌时细菌无多糖发生，线虫不能取食细菌而生长繁殖；当用马铃薯蔗糖真菌培养基培养B1和B2两种细菌时，细菌分泌丰富的多糖，线虫生长繁殖较好。多糖是线虫生长繁殖的重要外部环境。     

山西黄芪根际固氮菌的分离与应用

[目的]对黄芪道地产区山西浑源的黄芪根际固氮细菌进行了分离鉴定,并应用于黄芪栽培中以观察其固氮能力,旨在筛选并获得能够促进黄芪生长的固氮菌,为降低黄芪生产成本提供依据。[方法]采用Ashby无氮培养基初筛获得了120个自生固氮菌株;进一步用固氮培养基对初筛所得菌株进行复筛,根据固氮能力、菌落生长速度等特征,获得了2株具有较强固氮能力的菌株t16和t21;通过细菌鉴定系统和16SrRNA序列分析对其进行分类鉴定。另外还用全N差值法检测了t16和t21浸泡黄芪种子后的固氮活性。[结果]t16和t21分别属于Rhizobiumsp.和Sinorhizobiumsp.。经两株菌发酵液浸泡后,培养30d分别能够增加黄芪幼苗含氮量14.23%~18.67%和13.10%~18.77%。其中含菌量为106个·mL-1的t16发酵液和含菌量为108个·mL-1的t21发酵液效果最好,折算每公顷30d的固氮量达2.25kg。[结论]山西黄芪根际固氮菌具有较大的开发利用潜力。     

毛酸浆果醇提物抑菌机理的初步研究

通过观察大肠埃希菌标准菌株、金黄色葡萄球菌标准菌株生长曲线和菌体超微结构的变化,探讨毛酸浆果醇提物的可能抑菌机理。以金黄色葡萄球菌标准菌株和大肠杆菌标准菌株作为指示菌,在分别绘制细菌生长曲线的基础上,于不同时间点蜕察加药后细菌生长曲线的变化,并以透射电镜观察细菌菌体超微结构的改变。在毛酸浆果醇提物最低抑菌浓度作用下,大肠埃希菌标准菌株生长曲线的各时间点菌体浓度OD值始终保持在0．5以下。透射电镜下可见：大肠埃希菌标准菌株生长0h时,细菌出现明显的分裂相;4h后,大肠埃希菌菌体内部出现许多空泡,分裂相明显减少;8h后,出现较多死亡菌体。毛酸浆果醇提物能有效地抑制大肠埃希菌的生长,使大肠埃希菌的菌体结构出现质壁分离、空泡样变和死亡现象。     

黄芪多糖提取及对小叶杨幼苗叶绿素含量的影响

[目的]研究黄芪多糖最佳提取工艺,及其对小叶杨幼苗叶绿素含量的影响.[方法]运用水煎法提取黄芪多糖,采用固液比、提取溶剂、提取温度和提取时间4个试验条件,进行单因素试验,并利用正交试验设计对提取工艺进行优化,所得黄芪多糖处理小叶杨幼苗,探究黄芪多糖对其叶绿素含量的影响.[结果]单因素试验最终获得最佳提取工艺为以5％醇碱为提取溶剂,固液比为1∶15,提取温度为60℃,提取1.5h.正交试验得出优化提取工艺为以5％醇碱为提取溶剂,固液比为1∶10,提取温度为60℃,提取1.0h.10 mg/ml的黄芪多糖能够显著提高小叶杨叶绿素a和总叶绿素的含量,而0.1 mg/ml黄芪多糖能够显著提高小叶杨叶绿素b的含量.[结论]黄芪多糖能够提高植物叶绿素含量,进而促进植物的生长发育.     

新疆维药阿里红液体发酵培养基优化研究

浸粉0.3;、蛋白胨0.75;、酵母浸粉0.5;.经12 d发酵,每50 mL发酵液菌体干重和胞外粗多糖含量最高可达65.4和77.7 mg.     

4种多糖对山羊卵母细胞体外成熟的影响

为优化卵母细胞体外成熟培养液,研究白术多糖、黄芪多糖、灵芝多糖及香菇多糖对卵母细胞体外成熟的作用。利用废弃卵巢收集未成熟卵母细胞,在成熟培养液中添加低（0.01、0.05 mg/mL）、中（0.10 mg/mL）、高（0.15、0.20 mg/mL）5个浓度梯度的4种多糖溶液培养卵母细胞。结果显示,4种多糖成熟培养液均在低浓度添加时对卵母细胞成熟率有明显的促进作用,以白术多糖效果最好,卵母细胞成熟率与对照组相比提高了27.28%,高浓度的多糖培养液对卵母细胞均有不同程度的抑制作用,导致细胞皱缩甚至死亡。低浓度的多糖培养液能够促进卵母细胞的成熟,并能提高卵母细胞进一步发育的能力。     

膜荚黄芪多糖外源因素诱导组合的筛选

利用正交试验设计,以膜荚黄芪(Astragalus membranaceus(Fisch.))生物活性物质——黄芪多糖质量分数为衡量指标,筛选出最佳外界诱导因素组合。结果表明:影响叶、茎多糖质量分数的最佳处理时间是9 d和6d;影响根多糖质量分数的最佳处理时间是6 d。影响叶多糖质量分数的最佳处理组合是培养基处理地下部位9 d,影响茎多糖质量分数的最佳处理组合是硝酸银处理地下部位9 d,影响根多糖质量分数的最佳处理组合是培养基处理地上部位6 d。黄芪多糖代谢途径的最佳外源诱导因素是硝酸银溶液,最佳处理部位是地下部分,最佳处理时间是6~9 d,最佳多糖质量分数变化检测部位是黄芪根部。     

2种常用食用菌所含多糖化合物复配的体外抗氧化活性研究

[目的]研究金针菇、平菇多糖体外复配的抗氧化活性,以羟基自由基（OH?）和超氧阴离子（O2－?）为评价指标,探究多糖复配的可行性和有效性。[方法]以金针菇、平菇为原材料,优化多糖提取条件,然后进行体外抗氧化活性研究,测定其对OH?和O2－?清除率,研究复合多糖对自由基的清除能力,并与单一多糖进行比较。[结果]多糖的最优提取条件为超声时间30 min,热水浸提温度为90℃。在此条件下,金针菇得率为1．25％,多糖纯度为84．3％;平菇得率为1．46％,多糖纯度76．4％。复合多糖清除OH?的能力随着浓度的升高而升高,在金针菇多糖∶平菇多糖＝5∶1的复配比例下会体现良好的协同性,优于单一多糖。复合多糖清除O2－?的能力也随着浓度的升高而升高,尤其在低浓度下,金针菇多糖∶平菇多糖＝3∶1复配时具有比单一多糖更好的协同性。[结论]食用菌多糖的复配能有效提高其抗氧化活性。     

猴头菌多糖热水浸提工艺研究

[目的]优化热水浸提猴头菌多糖的工艺参数。[方法]采用热水浸提法对猴头菌中的多糖进行提取,对影响浸提效果的浸提温度、浸提时间、料液比、浸提次数等因素进行了研究。[结果]试验表明,猴头菌多糖提取的最佳工艺参数为：料液比1∶15 g/ml,浸提温度80℃,浸提时间2 h,浸提次数2次,乙醇沉淀多糖的终浓度为75%,此条件下猴头菌多糖的提取率可达8.87%。[结论]研究可为猴头菌及其他菌类热水浸提多糖提供参考。     

黄芪多糖的提取和纯化方法研究

通过水提醇沉、碱提醇沉及碱醇提醇沉等方法提取黄芪多糖,并用不同的絮凝剂对提取的粗黄芪多糖进行纯化,采用苯酚-浓硫酸法测定多糖含量。结果表明,碱醇提醇沉得到的多糖最多,并且纯度也较高。Ⅱ型ZTC1+1天然澄清剂可以较好地除去黄芪多糖提取液里的杂质,进而提高黄芪多糖的纯度。     

板蓝根多糖的制备及其对鸡新城疫Lasota疫苗的免疫效果研究

[目的]研究自制的板蓝根多糖对鸡新城疫弱毒疫苗的免疫效果.[方法]将120只健康从肉仔鸡随机分为板蓝根多糖组、黄芪多糖组以及生理盐水对照组,研究板蓝根多糖对鸡新城疫Lasota疫苗的免疫增强作用.[结果]板蓝根多糖组和黄芪多糖组鸡NDV血凝抑制抗体滴度差异不显著,而板蓝根多糖组和黄芪多糖组鸡的免疫器官指数都显著高于生理盐水对照组.[结论]制备的板蓝根多糖可以用作鸡新城疫弱毒疫苗的免疫增强剂.     

新型鸡粪发酵提取液对番茄生长及根结线虫病的影响

[目的]研究鸡粪发酵提取液对番茄生长及根结线虫病防治效果的影响,为科学利用鸡粪防治作物根结线虫病提供参考.[方法]设5、10、25、50、100、300、500和1000倍8个稀释倍数的鸡粪发酵提取液处理,以清水为对照,通过浇灌已接种南方根结线虫的盆栽番茄,研究其对番茄植株生长及根结线虫病防治效果的影响;通过室内培养2龄根结线虫和根结线虫卵,研究不同稀释倍数的鸡粪发酵提取液对根结线虫致死和根结线虫卵孵化的影响.[结果]50、100和300倍鸡粪发酵稀释液更有利于番茄植株前期生长;5、10和25倍鸡粪发酵稀释液更有利于番茄植株后期生长,且能显著降低根结线虫发病率,最高防效达72.7%.培养试验结果表明,5、10和25倍鸡粪发酵稀释液能显著抑制根结线虫卵孵化,抑制率在70.0%以上;5和10倍鸡粪发酵稀释液对根结线虫的致死作用明显,处理后24 h即达到100.0%的致死效果.[结论]5~10倍稀释的新型鸡粪发酵提取液能促进番茄植株生长,显著抑制根结线虫卵的孵化,杀死2龄线虫,减少根结线虫病的发生,是一种操作简便且环保安全的根结线虫病防治方法.     

白首乌地上部分多糖的微波提取技术研究

[目的]提取白首乌地上部分多糖并测定含量。[方法]采用微波技术,通过正交试验探讨白首乌(Cynanchum auriculatum Aerial Parts)地上部分多糖提取的最佳工艺,用苯酚-硫酸法在波长490 nm处测定吸光度。[结果]结果表明,用苯酚-硫酸法在波长490 nm处测定吸光度,得白首乌地上部分粗多糖含量为2.57%。微波提取白首乌地上部分多糖的最佳工艺参数为料液比1∶25、微波强度80%、提取时间80 s。[结论]该研究为白首乌地上部分资源的开发提供依据。