人参皂苷Rg3(R),Rg3(S),Rg5/Rk1对乙醇致小鼠记忆阻碍改善作用的影响

采用被动回避穿越法研究了人参皂苷Rg3(R),Rg3(S)和Rg5/Rk1(1∶1)对乙醇致小鼠记忆阻碍改善作用的影响。结果表明:灌服人参皂苷Rg3(R),Rg3(S)和Rg5/Rk110 mg/kg后,显著延长了小鼠避暗的潜伏期,尤其以人参皂苷Rg5/Rk1作用最为显著,Rg5/Rk1处理组的潜伏期是对照组的2.97倍,Rg3(R),Rg3(S)分别为对照组的2.35和2.53倍,差异极显著(P<0.01)。说明这些化合物具有改善乙醇致小鼠的记忆障碍的能力。     

Rg1皂苷单体对人参锈腐病菌(Ilyonectria robusta)的趋化作用及酶活性的影响

收集吉林省人参主产区锈腐病病样，对其进行病原菌的分离鉴定，确定优势病原菌。采用菌丝生长速率法、孢子萌发法、菌丝干质量测量法3种方法相结合，测定Rg1不同质量浓度条件下对人参锈腐病菌(Ilyonectria robusta)的致病力影响。通过测定施加不同质量浓度Rg1后人参粗壮柱孢菌(I.robusta)侵染相关酶活力测定试验确定最佳Rg1添加量。开展了Rg1最适质量浓度条件下，pH值以及碳氮源对人参锈腐病菌菌丝生长的影响。研究结果表明，当Rg1质量浓度为2 mg/L时对粗壮柱孢菌的生长具有较强的促进作用。在此条件下，病原菌最适生长pH值为5.0,最适碳源为葡萄糖，最适氮源为硝酸钾。明确了Rg1对人参锈腐病菌(I.robusta)具有明显的趋化性。     

c-Jun蛋白对A型流感病毒H1N1感染小鼠体内CD4~+和CD8~+T细胞增殖的调节作用

通过构建A型流感病毒H1N1感染小鼠模型,并使用c-Jun蛋白的特异性核酶Dz13抑制该蛋白的表达,探索c-Jun蛋白在流感病毒感染后对T淋巴细胞增殖和炎性反应的调节作用。蛋白质印迹法(Western-blotting)结果表明,核酶Dz13作用后c-Jun蛋白的表达量明显降低,且c-Jun蛋白的活化也随之降低。此外,用流式细胞术测定感染后3 d和6 d外周血内辅助性T细胞(CD4~+T)和杀伤性T细胞(CD8~+T)的增殖情况,同时用实时荧光定量聚合酶链式反应测定外周血内细胞因子IFN-γ、IL-6和IL-10表达。结果显示:小鼠感染病毒后,外周血CD4+和CD8+T细胞明显增多,相关细胞因子的表达量也明显上调;而抑制c-Jun蛋白表达后,CD4~+和CD8~+T细胞的增殖受到抑制,且相关细胞因子IFN-γ、IL-6和IL-10的表达量亦受到抑制。说明c-Jun蛋白参与调节A型流感病毒H1N1感染后引起的T淋巴细胞增殖和相关细胞因子的表达。     

Rg_1联合B族维生素对急性心肌缺血小鼠NO释放及Rg_1入脑量的影响

探究人参皂苷Rg1联合B族维生素使用是否具有协同促进急性心肌缺血小鼠血清一氧化氮(NO)释放的作用,并通过比较Rg1入脑量的不同,从影响药物分布量角度探究协同作用产生的可能机制。将ICR小白鼠随机分成对照组、模型组、Rg1组、B族维生素组和Rg1+B族维生素联合组5组(n=10),灌胃给药10d,腹腔注射盐酸异丙肾上腺素,制备急性心肌缺血模型。试剂盒检测血清NO释放量,液-质联用法(LC-MS/MS)测定脑组织中Rg1入脑量。结果表明,联合组血清NO释放量明显高于Rg1组和B族维生素组(P0.01);并且,联合组脑组织中Rg1含量明显高于Rg1组(P0.01);相关性分析发现,血清NO释放量与脑组织Rg1含量具有极显著正相关。说明人参皂苷Rg1联合B族维生素使用具有协同促进急性心肌缺血小鼠NO释放的作用,提高Rg1入脑量可能是B族维生素与Rg1产生协同作用的一个途径。     

HPLC法测定西洋参果浆及其发酵液中人参皂苷—Rg_3、Rh_2的含量

采用反相高效液相色谱法 (RP -HPLC)测定国产西洋参果浆及其发酵液中人参皂苷—Rg3、Rh2 的含量。其色谱条件为 :Shim PackCLC -ODS柱 ,乙腈 -水 (4 8∶5 2 )为流动相 ,检测波长 2 0 3nm。平均回收率均≥ 95 3 % ,RSD均≤ 2 9%。本方法简便 ,结果准确     

三七须（绒）根的化学成分研究

为分析三七须(绒)根的皂苷成分,本研究将三七的须(绒)根乙醇提取物利用少量水溶解后通过D101大孔吸附树脂柱层析,先用水洗脱,再用70%EtOH洗脱得到三七总皂苷,随后经硅胶柱层析,以氯仿-甲醇-水(体积比∶8.0∶2.0∶0.2～6.50∶3.50∶0.35)梯度洗脱得到4个流份,经正相硅胶柱层析,得到化合物。通过谱学分析鉴定其结构。结果表明,分离得到8个单体化合物分别为胡萝卜苷、人参皂苷Rf、人参皂苷Rh1、20(S)-人参皂苷Rg3、20(R)-人参皂苷Rg3、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re和人参皂苷Rb1。其中人参皂苷Rf和20(R)-人参皂苷Rg3是首次从三七须(绒)根中分离得到的化学成分。     

人参双向固体发酵过程中化学成分的变化

采用紫外分光光度法测定人参双向发酵过程中总皂苷和总多糖含量;采用高效液相色谱法测定人参双向发酵过程中代表性单体化合物Rg1、Re、Rb1含量;通过薄层色谱法鉴定、高效液相色谱法测定人参稀有皂苷Rg3、Rh1、Rh2、人参皂苷CK含量,研究了人参双向固体发酵过程中化学成分的变化规律.在发酵30 d后,人参药材经过生物转化以后总多糖含量增加26.86％,总皂苷含量减少7.70％,人参皂苷Rg1、Re、Rb1含量分别减少52.76％、10.86％、9.82％,Rh1、Rh1含量明显增多,分别达到0.90 mg/g和0.09 mg/g.人参在发酵过程中不仅利用了人参中的多糖,而且还生成了其他种类的多糖;人参皂苷发生了部分的转化,人参皂苷Rg1、Re、Rb1在发酵过程中被转化成了稀有人参皂苷Rg3、Rh1.     

HPLC-ESI-MS法分析蒸参水浓缩物中人参皂苷

研究红参蒸参水浓缩物中人参皂苷类化学成分。采用HPLC-ESI-MS测定蒸参水浓缩物中的人参单体皂苷,测得12种人参皂苷,分别为人参皂苷Ro、Rb1、Rb2、Rc、Rd、Re、Rf、Rh4、Rg3、Rg3异构体、Rg5、Rk1。结果表明,蒸参水浓缩物含有多种具有生物活性的皂苷类化合物,可作为健康食品添加剂、化妆品添加剂及动物饲料添加剂开发产品。     

HPLC法测定人参花茶和人参花红茶中13种人参皂苷含量

建立HPLC法同时测定人参花茶和人参花红茶中人参皂苷Rg1、Re、Rh1、Rg2、Rb1、Rc、F1、Rb2、Rb3、Rd、Rg3、F2、CK的含量。色谱柱:UnitaryC_(18)(250 mm×4.6 mm,5 m);流动相:乙腈-磷酸水,梯度洗脱;流速:1.3 mL/min;柱温:30℃;检测波长:203 nm。13种皂苷在2种茶中均被检出,在2种样品中人参皂苷Rd、Re、Rc、Rg2的含量差异显著,人参花茶中人参皂苷Rd、Re、Rc的含量高,人参花红茶中人参皂苷Rg2的含量高。人参花茶和人参花红茶具有丰富的人参皂苷营养成分及功能因子,而且建立的检测方法简便快捷、精确度高、可靠性强,可用于人参花茶和人参花红茶中人参皂苷类成分的含量测定。     

人参皂苷20(S)-Rg_3,20(R)-Rg_3,Rg_5,Rk_1对照品的制备

为建立一种简单快速、高效制备人参皂苷20(S)-Rg3、20(R)-Rg3、Rg5、Rk1的方法。利用大孔吸附树脂和硅胶柱层析对样品进行预处理,通过反相高效制备液相色谱,从红参的甲醇提取物中快速分离得到目标产物人参皂苷20(S)-Rg3、20(R)-Rg3、Rg5、Rk1,经检测,4种化合物的纯度均98%。色谱柱为Polaris C18(250 mm×4.6 mm,10μm),以V(乙腈)∶V(水)=46∶54为流动相,恒梯度洗脱,流速4.0 mL/min,柱温室温,检测波长为203 nm,在此色谱条件下,它们得率分别为0.012%、0.013%、0.012%、0.013%。该方法操作简便,可重复进样,适用于制备高纯度稀有人参皂苷20(S)-Rg3、20(R)-Rg3、Rg5、Rk1。     

林下参人参皂苷分析

不同的提取方法对皂苷含量影响显著,热回流法与超声波法和微波法相比对人参皂苷的提取率最高,而且在加热过程中丙二酰基人参皂苷分别转化成相应的中性皂苷.对生长在吉林省的栽培参和林下参的6种主要皂苷(Rg1Re,Rb1Re,Rb2Rd)进行高效液相色谱(HPLC)分析,结果显示不同地区栽培的人参主根中皂苷含量存在显著差别,且人参皂苷Rg1和Re的化学型组成比例差异较大.吉林人参明显存在3种化学型,分别为高Rg1低Re化学型,低Rg1高Re化学型,Rg1、Re几乎相等化学型.人参不同种群、不同生长年限、不同栽培方式对人参皂苷含量及组成比例都会产生影响.     

不同时期人参、西洋参根中单体皂苷Rg_1、Re、Rb_1、Rb_2含量的比较

采用超高效液相色谱法测定了不同年生、不同时期的人参和西洋参根中Rg1、Re、Rb1、Rb2 4种主要单体皂苷的含量。结果表明,同年生、同生育期人参根中皂苷Rg1、Rb2的含量均高于西洋参根,皂苷Re、Rb1的含量低于西洋参根;3年生红果期人参根中皂苷Rg1、Rb1、Rb2含量低于3年生绿果期人参根,皂苷Re、Rb1、Rb2含量高于2年生红果期人参。3年生红果期西洋参根中皂苷Rg1、Rb1含量均低于3年生绿果期西洋参根,皂苷Re、Rb2含量高于3年生绿果期西洋参,皂苷Rg1、Rb1、Rb2含量均高于2年生红果期西洋参。     

HPLC-ELSD法测定三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1的含量

采用高效液相-蒸发光散射检测器法(HPLC-ELSD)测定免疫佐剂——三七总皂苷中三七皂苷R1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1的含量,色谱柱Discovery C18(250 mm ×4.6 mm,5μm),采用梯度洗脱,流动相为水-乙腈,流速为1.0 mL/min,柱温30℃.结果显示,三七皂苷R1含量5.19％,人参皂苷Rb1含量32.19％,人参皂苷Rg1含量41.28％,3种皂苷含量之和为78.66％.说明该方法简便、快速、重现性好,可用于控制三七总皂苷的质量.     

HPLC法测定颈康胶囊中人参皂苷Rg1、Rb1和三七皂苷R1的含量

建立测定颈康胶囊中人参皂苷Rg1、Rb1和三七皂苷R1含量的HPLC方法。色谱柱Alltima C18(250mm×4.6mm,5μm),流动相乙腈-水溶液,流速1.0mL/min;梯度洗脱;检测波长203nm;人参皂苷Rg1、Rb1和三七皂苷R1的线性范围0.921～6.103μg、0.634～4.387μg和0.315～2.014μg,相关系数(r)均大于0.999 0。3种皂苷的平均加样回收率在98.9%～100.9%之间,RSD均小于1.32%。本方法简便、快捷、准确,可以用于颈康胶囊的质量控制。     

人参皂苷Rh2葡萄糖基转移酶活性测定体系的建立

[目的]建立人参细胞中尿苷二磷酸葡萄糖（UDPG）：人参皂苷Rh2葡萄糖基转移酶（UGRh2GT）活性测定体系。[方法]以人参皂苷Rh2为底物,以UDPG为葡萄糖供体,选取合适的温度和pH值,用提取的人参细胞酶液催化Rh2生成Rg3,采用高效液相色谱法（HPLC）测定Rg3的生成量,色谱柱为C18柱（150mm×4.6mm）,流动相为乙腈和水,梯度洗脱。[结果]人参细胞中UGRh2GT活性测定体系的最优pH值是9.3,最优温度是34.1℃。[结论]建立的酶活测定体系能够较好较方便地测定UGRh2GT的比活。     

耐PCNB的哈瑞木霉防治杉苗立枯病

本研究表明:利用耐 PCNB(五氯硝基苯)的 Trichodcrmaharzianum(哈瑞木霉)的野生菌株 F060,以玉米粉#石硫酸铵液为载体,与低量 PCNB 联合施入土壤中,能提高防治 Rhizoctonia solani(Rg)引起的杉苗立枯病的效果;而 F060在灭菌士中的群体数量呈现出10~7-10~9-10~5数量级的变化,Rg 的残存一般随时间逐渐下降,RCNB 表现出对 F060增殖和 Rg 残存降低有协同作用;F060群体数量与 Rg 残存及立枯病发生无线性相关,Rg 残存与幼苗生长状况呈负线性相关;F060对一年生杉苗的地径有促生作用,对苗高无影响。     

高效液相色谱法测定心脉素注射液中20(S)-人参皂苷Rg2和20(R)-人参皂苷Rg2构型异构体的含量

建立心脉素注射液中20（S）-人参皂苷Rg2和20(R)-人参皂苷Rg2构型异构体的高效液相色谱测定法。采用YWG-C18分析柱，以甲醇-磷酸溶液(1→25)(7：3)为流动相，在203nm波长处检测。平均回收率分别为99．5％和100．6％。相对标准偏差分别为1．2％和1．4％。该方法准确、简便。     

西洋参果浆发酵液人参皂苷含量的分析

采用反相高效液相色谱法（RP－HPLC）测定国产西洋参果浆发酵液中人参皂苷－Rb1,Rb2,Rc,Rd,Re,Rg1,Rg2和Rh1的含量。其具体含量（mg/100mL)依次为：47．342，44．903，5．109，22．099，34．883，3．815，16．841，13．896。该前处理方法简便，色谱条件适宜，发酵液中分子结构相关的皂苷，有含量消长变化趋势。西洋参果浆发酵液具有开发应用价值。     

人参皂甙酵母菌中β-半糖甙酶诱导的影响

研究了红参皂甙(总皂甙,皂甙组分Rb1和Rg1)对酵母菌(Saccharomyces cere-visiae)中的β-半乳糖甙酶诱导的影响,认为人参皂甙将穿过细胞膜,在细胞核中起甾体激素作用.为了达到这一目的,把包CALI启动子的EcoR I的DNA片段(685bp)插入到质粒YEp356(7.966kb)的LacZ基因上游的多酶切点,假设由此产生的质粒pGAL1-LacZ在半乳糖存在下仅表达β-半乳糖甙酶.将质粒pGALI-LacZ导入酵母菌KY106(a 1eu2 ura3 his3trpl lys2)中,转化细胞在半乳糖存在下,比在葡萄糖存在下生长得缓慢.检测了皂甙对转化酵母细胞中β-半乳糖甙酶特殊活性的影响.在这种条件下,总皂甙对酶活性没有明显的影响,而皂甙组分Rb1、Rg1对酶活性却有明显地促进作用.最大提高幅度以10%～3%浓度的Rb1为35%,10%～1%的浓度的Rg t为75%.这些数据说明人参皂甙可能会进入到细胞核并刺激转录.但是,要确定这种可能性需要在找出假定皂甙受体的进一步研究.     

参乌健脑胶囊中5种人参皂苷的定量分析

为考察参乌健脑胶囊中人参皂苷Rg1、Rb1、Re、Rd和Rf含量,以三氯甲烷为溶剂回流提取法提取人参中的干扰物质,进一步用水饱和正丁醇超声提取人参总皂苷,甲醇定容后采用高效液相色谱法分析人参皂苷Rb1、Rg1、Re、Rf和Rd的含量。其中,色谱条件为Krm asil C18柱(4.6 mm×250.0 mm,5μm),以乙腈(A)和水(B)系统作为流动相,进行梯度洗脱(0~35 min,19%A;35~55 min,19%A→29%A;55~70 min,29%A;70~100 min,29%A→40%A),流速为1.0 m L/min,检测波长203 nm,柱温30℃。结果显示:参乌健脑胶囊中人参皂苷Re、Rg1、Rf、Rd和Rb1的含量分别为(2.43×10-3)%、(3.98×10-3)%、(4.04×10-3)%、(7.54×10-4)%和(1.78×10-4)%。由此表明,该方法可靠、简洁、快速、灵敏度高,具有色谱柱可反复使用、样品不被破坏、易回收等优点,可用于参乌健脑胶囊中人参皂苷的定量分析。