酶免疫技术(EIA)和检测单克隆抗体

一、前言现代免疫学的三大标记技术:免疫荧光技术(IFA)由Coons在1942年建立;放射免疫技术(RIA)由Yalow在1959年建立;酶免疫技术(EIA)由Nakane和Avrameas在1966年建立。酶免疫技术由于具有免疫学抗原抗体的高特异性反应,又具有酶学催化活性的高灵敏反应,以及其精     

酶联免疫法检测饲料中氯霉素的探讨(续)

4 结果与分析 4.1 检测数据 4.2 饲料样品的检测数据分析 参照农业部所指定的方法GB/T 8381.9-2005,饲料中氯霉素的测定中规定的最低检测限为0.005 mg/kg,当测定结果小于0.005 mg/kg时,判定为阴性,检测结果按未检出计,反之按GB/T8381.9-2005处理.     

南农大畜牧系举办首届酶免疫测定(EIA)技术讲习班

<正> 为了在国内畜牧兽医有关领域尤其是在家畜繁殖方面迅速推广HIA新技术,南京农业大学畜牧系家畜繁殖研究室于1986年12月中旬举办了首届EIA技术讲习班。学员来自全国各农业院校、研究所和畜牧兽医基层单位;聘请南农大杜念兴教授、中科院上海生化研究所姚连生副研究员及本校畜牧系、兽医系和值保系一些资历较深的讲师等为教员;印发了二十六万一千字的讲义和资料。讲习班日程安排紧凑集中,分为三部分:理论课部分三天半,实验二     

酶免疫分析法诊断家畜妊娠研究进展(续上期)

1．2水牛黄右军等（1994）采用EIA法测定了87头杂种水牛，对头摩拉水牛的脱胎乳孕酮含量，初步掌握了水牛发情、配种、妊娠、空怀和流产等不同生殖状态孕酮变化规律。将配种后第21d和27d次取奶样测定孕酮浓度均达到或超过1．7×10~(-9)g／mL者判为妊娠牛，前高后低者（不达者）为空怀牛，对64头配种水牛进行测定，1个月后直检复查，空怀确诊率为97.390（36／37），妊娠确诊率为88．9％（24／27）。与国内外EIA法诊断奶牛妊娠结果基本一致。[11]1．3羊李学斌等（1993）应用ELISA法测定绵羊血清中干扰体液免疫反应的因子，发现在配种后48…     

中兽医学免疫(续)

3.3　免疫抑制类中草药现代研究表明 ,中草药除直接抑制细胞毒性 T细胞(CTL)的杀伤活性外 ,还通过抑制 IL- 2及激活抑制性 T细胞 (Ts)而抑制 CTL 的活性 ,还可通过抑制巨噬细胞、NK细胞活性和抑制抗体的产生而发挥作用。雷公藤总苷的免疫抑制作用是通过多个环节实现的 ,如抑制非特异性免疫反应、细胞免疫功能、体液免疫功能以及抑制免疫应答的早期活化阶段和效应阶段等。益母草对小鼠抗体产生具有明显抑制作用 ,不仅能减少已生成的抗体 ,且能抑制抗体生成细胞。丹参、红花、鸡血藤等对已沉积的抗原 -抗体复合物有促进吸收和消除的作用…     

中兽医学免疫(续)

3.3　肾在生理上 ,肾能促进红细胞的生成。其机理在于肾能产生一种促红细胞生成因子 ,该因子以酶的方式 ,作用于血浆中无活性的促红细胞生成素原 ,使它转变为具有活性的促红细胞生成素 ,这种生成素刺激骨髓的造血功能 ,加速红细胞的生成和释放。《素问·脉要精微论》说 :“肾藏精……。”精是畜体生命活动的基本物质 ,在正常情况下 ,精血之间可以转化 ,精可以化血 ,如《张氏医通》说 :“气不耗 ,归精于肾而为精 ,精不泄 ,归精于肝而化清血”。关于“精可以化血”的理论已被临床实践所证实 ,如运用补肾益精方法治疗再生障碍性贫血及其他严重…     

中兽医学免疫(续)

4　经络气血与免疫经络是经脉和络脉的总称 ,有机体内经络纵横交错 ,网络全身。经络是运行气血 ,联系脏腑肢节 ,沟通上下内外 ,调节体内各部分的通路 ,有规律性的循行和错综复杂的联络交会 ,把畜体的五脏六腑、四肢百骸、五官九窍、皮肉筋脉等组织器官联成一个有机的整体。经络的功能活动称为“经气”。全身各个脏器靠着经气的沟通、联络 ,使其生理活动保持协调统一。卫气、元气、气血、脏腑之气要发挥作用 ,都须依赖经络传注。《灵枢·本脏篇》说 :“经脉者 ,所以行血气而营阴阳”。《灵枢·九针十二原》说 :“通其经脉 ,调其气血”。说明…     

中兽医学免疫(续)

3　中药与方剂3.1　中草药对免疫的影响在正常情况下 ,机体受抗原刺激后 ,产生抗体和致敏淋巴细胞 ,对该抗原的再次侵入有特异的防御作用 ;但在另一种情况下 ,被某些抗原物质致敏的动物 ,在再次接触该抗原时 ,可以发生对机体有损害的免疫反应 ,这种引起病理过程的免疫反应称为变态反应。根据造成免疫病理的不同机理 ,变态反应可分为四型 ,即 : 型 (过敏反应型 )、 型 (细胞毒型 )、 型 (免疫复合物型 )和 型 (迟发型、细胞型 )。 型变态反应是临床上常见的一种变态反应 (与免疫球蛋白 Ig E有关 ) ,有过敏性休克、支气管哮喘、枯草热、荨麻…     

中兽医学免疫(续)

1.1　猪1.1.1　仔猪黄白痢　 (1)紫苏 ,黄芩 ,白术 ,党参 ,白芍 ,当归 ,菟丝子 ,续断 ,砂仁 ,黄连 ,金银花 ,甘草。怀孕母猪产前一周 ,水煎或为末喂服 ,连服 3～ 5天 ,预防产后仔猪黄白痢、缺乳。 (2 )党参 ,黄芩 ,桂枝 ,柴胡 ,白芍 ,大枣 ,苍术 ,川芎 ,荆芥 ,防风 ,白头翁 ,木香 ,甘草。水煎 ,母猪产后饲喂 ,预防缺乳、感冒 ,通过乳汁传递 ,预防仔猪黄、白下痢。1.1.2　仔猪水肿病　荆芥 ,防风 ,川芎 ,柴胡 ,金银花 ,连翘 ,茯苓 ,泽泻 ,白术 ,桂枝 ,黄连。水煎或为末 ,30～ 5 0日龄仔猪口服 ,预防仔猪水肿病。1.1.3　消化不良　苦参 3kg,苍…     

中兽医学免疫(续)

3　脏腑中兽医学中的脏腑与现代解剖生理学讲的内脏器官 ,虽然名称相同 ,但在生理、病理上的含义却不完全相同 ,它除了代表现代解剖学中实质器官外 ,更重要的是概括了本系统及相关系统的生理功能和病理概念。这里谈到与免疫密切相关的脏腑有肺、脾、肾、心、肝。3.1　肺前面讲到了卫气在非特异性免疫中的作用 ,卫气“开发于上焦”,主要是指肺的宣发作用。皮毛位于体表 ,是畜体抗御外邪的屏障 ,通过肺的宣发功能 ,使皮毛得到卫气和津液的滋润与温养 ,才能发挥其抵抗外邪的作用 ,所以《素问·五脏生成论》说 :“肺之合皮毛也 ,其荣皮毛”。由…     

酶产品的选择(续)

4节约使用酶制剂,使饲料价值最大化饲料是养猪生产中最大的一个单项成本,许多北欧国家主要以小麦配制猪饲料。然而,研究表明,不同小麦样本的饲料价值存在巨大的差异,造成猪的生长性能出现20%～30%的差别(图3)。饲料中添加合适的酶制剂,可以确保小麦中的     

用单克隆抗体检测猪瘟病毒特异性抗体的酶免疫试验

以往检测猪瘟病毒抗体用的间接荧光抗体法、间接过氧化物酶抗体法、补体结合法、琼脂凝胶双扩散法或免疫电泳法不能区别SFV抗体和与之有亲缘关系的BVD抗体,阳性结果必须由中和试验证实。Have(1984)描述了一种测SFV的ELISA法,敏感     

动物胃肠道黏膜免疫简述(续)

制病原体在黏膜表面的黏附及减少病原体的着生,并在黏膜腔内和黏膜下参与行使效应功能.IgA经肠上皮细胞间隙内与上皮细胞产生的分泌片段结合,形成分泌型免疫球蛋白(S-IgA).     

动物免疫的生物学基础(续)

二、免疫反应调节及其耐受与抑制 (一) 免疫反应调节 1、免疫细胞间的调节: 机体对抗原的特异免疫反应,不会无限制增强,在正常情况下都是适量而止。自然,抗体的产生也可能遇到过多的情况,为此则需要机体免疫系统的调节与控制。此种调节机制是T细胞、B细胞和巨噬细胞及其产物综合作用的结果,免疫细胞的协调合作,可使过渡的或有害的免疫反应受到抑制,而对其正常的免疫功能不发生影响。免疫细胞调节以T细胞为中     

酶标免疫测定法（EIA）在检测动物性食品中氯霉素残留的应用

酶标免疫测定法（ＥＩＡ）在检测动物性食品中氯霉素残留的应用刘智宏（中国兽药监察所，北京１０００８１）众所周知氯霉素（ＣＡＰ）是较有效的广谱抗生素，它常用于动物各种传染性疾病的治疗。但是氯霉素有着严重的副作用，它能引起人类的再生障碍性贫血、粒状白细胞缺...     

饲料卫生标准及其检测(续)

四 饲料中的微生物毒素及致病菌饲料中的微生物毒素一般指霉菌毒素。霉菌属真菌中的丝状菌类,在自然界中分布很广,种类繁多,目前已发现和记载的霉菌,超过30000种,它们以寄生和腐生方式存在。因其防腐营养物质主要是糖及少量的氮和无机盐,故极易在富含淀粉的粮食和饲料中生长。污染谷物后主要是曲霉和青霉,而饲料主要污染曲霉、青霉和枝孢霉等。     

饲料卫生标准及其检测(续)

饲料中有毒有害的化学物质饲料中有毒有害的化学物质主要有六六六、滴滴涕(DDT)等,一般来源于农药污染。各种谷物饲料在种植、施肥除草、防治病虫害及收割过程中,动物饲料原料在动物的饲养、屠宰,以至加工、包装、运输、贮藏、保管、销售等各个环节,都存在化学污染的因素。其中最主要是环境(包括空气、土壤、水域)长期受到化学物质的污染,使用被有毒有害化学物质污染的饲料饲喂畜禽时,轻则影响畜禽正常生长,造成慢性中毒;重则引起各种疾病,甚至死亡。同时由于有些农药可在动物体内及畜产品肉、蛋、奶中蓄积而使人间接中毒,因此应引起极大的重视。     

免疫酶技术(直接法)诊断猪瘟的应用

在农牧渔业部兽药监察所直接指导下,应用免疫酶技术(直接法)对我省进行猪瘟诊断试验,证明此法是目前对猪瘟较好的快速诊断手段。现报告如下:材料和方法(一)被检样品的选择及处理：1.猪瘟病猪