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山葡萄基因组DNA提取及RAPD鉴定 总被引:26,自引:0,他引:26
以雌花山葡萄(73064)冷藏幼叶,香妃葡萄新鲜幼叶为试材,分别采用修改的CTAB法,高盐法、SDS法提取基因组DNA。结果表明,三种方法所提的DNA纯度及产率有差别,从综合结果看,以CTAB法为好,所得DNA不需经氯化铯梯度离心或柱层析,可直接用于RAPD分析。 相似文献
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高质量枣基因组DNA提取方法 总被引:11,自引:2,他引:11
主要针对枣组织中多糖严重干扰基因组DNA提取质量的问题,比较了常规CTAB法、TE3D法和改良CTAB法3种方法的处理效果。结果表明:常规CTAB法提取DNA难以除去多糖类杂质;TE3D法提取的DNA多糖杂质少,但产率低,易降解,褐化严重;改良CTAB法提取DNA产率高,无明显降解,杂质少,D260nm/D280nm比值1.80左右,通过基因组DNA-AFLP指纹图谱分析,完全满足实验要求。并对改良CTAB法的关键步骤作了具体分析讨论。 相似文献
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CTAB法高效提取苹果叶片DNA的研究 总被引:9,自引:0,他引:9
为研究CTAB法在正常条件和逆境条件下,从富含多酚和多糖等多种次生代谢物质的苹果树叶片中分离出高质量的基因组DNA,以抗旱能力较强的八棱海棠(Malus micromalusRehd. )和抗旱性较弱的平邑甜茶(Malus hupehensis pamp Reld.)幼苗为试验材料.用20%聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG6000)模拟干旱,采取CTAB提取缓冲液,按一定比例加入PVP和β-巯基乙醇,用Tris平衡酚-氯仿-异戊醇除去蛋白质及杂质,在粗提时用异丙醇沉淀DNA,并用DNA洗液(10 mmol/L醋酸铵,75%乙醇)洗涤DNA,在纯化时用乙醇沉淀DNA,且没有加入RNase去除RNA的方法,分别提取2个品种正常和干旱胁迫的苹果属叶片总DNA,并对提取的DNA进行琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测.结果表明:此方法可有效去除次生物质对DNA的干扰,得到高质量、特征带形清晰的大量DNA.并就提取过程中遇到的问题,提出了相应的解决办法. 相似文献
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以天竺葵为试材,比较分析了CTAB法、简单法、高盐低pH值法、CTAB-SDS法、SDS法对天竺葵叶基因组DNA提取的效果。结果表明:5种方法提取的天竺葵总DNA在纯度上有很大的差别。所得到的DNA提取纯度依次为简单法、CTAB-SDS法、CTAB法、高盐低pH法、SDS法。酶切结果为简单法、CTAB法效果最好,其次SDS法,高盐低pH法、CTAB-SDS法不能被EcoRI酶完全消化。经综合的比较分析,认为简单法是最佳的提取方法。因其步骤简单、快捷,得到的基因组DNA降解少、杂质含量少,能获得高质量的DNA模板,可以用于分子生物学试验研究。 相似文献
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山葡萄基因组DNA提取及RAPD鉴定 总被引:4,自引:1,他引:3
以雌花山葡萄(73064)冷藏幼叶、香妃葡萄新鲜幼叶为试材,分别采用修改的CTAB法、高盐法、SDS法提取基因组DNA。结果表明,三种方法所提的DNA纯度及产率有差别,从综合结果看,以CTAB法为好,所得DNA不需经氯化艳梯度离心或柱层析,可直接用于RAPD分析。 相似文献