琼脂凝胶免疫扩散试验盒检测绵羊副结核分枝菌抗体效果的评价

本研究旨在确定用于检测牛副结核分枝杆菌抗体的琼脂凝胶免疫扩散试验盒是否有竽检测绵羊的抗体。血清来源于用回肠粘膜涂片的抗酸染色，组织学检查或国学培养证这有副结核病的２７只绵羊，７只有副结核病症的绵羊，５５只分别来自于５群未感染的绵羊。血清用商品性试验和以前已证实的琼脂扩散试验检测。同时多次检测６年以上的１３只感染绵羊的血清以比较每种方法出现阳性的检测效果。两种方法的检测结果表明，５５只未感染绵羊的血     

琼脂凝胶免疫扩散试验盒检测绵羊副结核分枝杆菌抗体效果的评价

本研究旨在确定用于检测牛副结核分枝杆菌抗体的琼脂凝胶免疫扩散试验盒是否可用于检测绵羊的抗体。血清来源于用回肠粘膜涂片的抗酸染色，组织学检查或细菌学培养证实有副结核病的２７只绵羊，７只有副结核病症的绵羊，５５只分别来自于５群未感染的绵羊。血清用商品性试验和以前已证实的琼脂扩散试验检测。同时多次检测６年以上的１３只感染绵羊的血清以比较每种方法出现阳性的检测效果。两种方法的检测结果表明，５５只未感染绵羊的血清均为阴性，有副结核病症的３４只绵羊中的３２只为阳性，２只为阴性。从１３只未感染绵羊收集的５４个样本中有５０个结果一致。两次实验结果不一致的４个样分别是１号绵羊１０份样中的第４，８，９份，２号绵羊６份样中的第１份。所有的４个样，商品性试验产生弱阳性结果。但琼扩免疫试验产生阴性结果。由此可知，检测牛副结核分枝杆菌抗体的琼扩试验可以用于鉴别诊断绵羊的副结核病。     

新疆伊犁地区哈萨克羊与萨福克羊感染支原体肺炎血清学调查与分析

为调查新疆伊犁地区哈萨克羊与萨福克羊感染支原体肺炎的情况，笔者使用绵羊肺炎支原体ELISA检测试剂盒，对新疆伊犁地区部分牧场的哈萨克羊和萨福克羊2个品种羊随机抽查共800份血清样本进行抗原抗体检测。结果显示，新疆伊犁地区的哈萨克羊和萨福克羊2个绵羊品种之间均存在MO感染的现象。哈萨克羊MP-Ab阳性率26.00%，萨福克羊MP-Ag阳性率7.34%；哈萨克羊MP-Ag阳性率22.91%，萨福克羊MP-Ag阳性率19.71%。血清学检测结果表明，新疆本地的绵羊品种（哈萨克羊）抗原抗体的阳性检出率均高于外来引进品种（萨福克羊）。本地绵羊品种抗体阳性率显著高于外来引进品种；不同绵羊品种抗原检测阳性率无显著差异。本试验为探究新疆伊犁地区不同品种绵羊支原体肺炎的诊治方案提供了科学依据。     

绵羊肺炎支原体对肺及肺外脏器影响的研究

绵羊肺炎支原体（M ovipneumoniae）是引起绵羊胸膜肺炎的病原体。一般认为绵羊肺炎支原体可引起羊的胸膜肺炎。通过病原培养和PCR检测，除了肺脏外，在其它脏器也能检测到支原体，特别是危重病羊在肺外其它脏器分离出支原体的几率更高。绵羊肺炎支原体除主要引起肺脏的病变外，还可以造成心、肝、脾、肾、脑、淋巴结的损害。肺脏不是肺炎支原体感染的唯一靶器官。     

中国西南地区5个地方绵羊群体mtDNA遗传多样性及系统进化研究

采用PCR—SSCP技术及mtDNA D-loop序列分析相结合的方法，对我国云南昭通绵羊、腾冲绵羊、宁蒗绵羊及西藏的多玛绵羊、江孜绵羊5个地方绵羊群体共232个个体进行遗传多样性及系统进化分析。PCR-SSCP分析显示，在西藏的多玛绵羊和江孜绵羊中均检测到线粒体编码区的Cytb和ND2基因的3种单倍型A、B和C，且在西藏的多玛绵羊、江孜绵羊中C单倍型比例高于B型；而在云南的昭通绵羊、腾冲绵羊和宁蒗绵羊中只检测到单倍型A和B。根据不同的单倍型从5个群体中筛选出39个样品进行mtDNAD-loop区克隆测序，经过系统进化分析揭示西藏绵羊存在A、B、C3种mtDNA单倍型；而云南绵羊只存在A、B2种mtDNA单倍型。以上基于PCR-SSCP和D-loop区序列的分析结果一致提示西藏绵羊有3个母系来源，云南绵羊有2个母系来源。基于mtDNAD-loop序列的多态性分析结果显示西藏多玛绵羊和江孜绵羊的单倍型多样度（Hd）、核苷酸多样度（Pi）及平均核苷酸差异数（k）均高于云南3个地方绵羊品种，提示西藏绵羊遗传多样性较丰富，云南绵羊遗传多样性相对贫乏。     

绵羊循经声发射检测穴位与传统穴位比较

绵羊循经声发射检测穴位与传统穴位比较罗超应，王云鲜，郑继方（中国农业科学院中兽医研究所，兰州７３００５０）笔者通过对１０２只绵羊的两万多穴次的测试实验，已基本上完成了绵羊１４条经的声发射检测工作。由于古代兽医书籍中只载有“牛马周身有十二道经脉”，在每...     

中亚以东南地区绵羊群体Cat座位遗传多样性的研究

为研究中亚与南亚地区绵羊Cat过氧化氢酶的遗传多样性，采用单向水平板淀粉凝胶电泳检测方法对湖羊、同羊、滩羊、洼地绵羊、小尾寒羊和巴音布鲁克绵羊的Cat座位进行了检测，并引用分布于我国周边国家和地区的10个绵羊品种作为分析背景，计算其平均杂合度以及对其中立性测验的结果进行分析。结果显示：①16个绵羊群体的Cat座位基因分化系数Gst=0．2807，说明有71．93％的变异是由群体内的遗传多态现象引起的，只有28．07％的变异来自于群体间的差异；②中立性检测的观察值均在L95和U95之间，表明Cat位点为中立性位点，其遗传多样性基本上未受选择等因素的影响。     

都兰县宗加镇西西羊场绵羊肺炎支原体的诊断

都兰县宗加镇西西羊场死亡绵羊采集肝脏和肺脏进行组织学检测、细菌学检测、绵羊肺炎支原体检测。结果:组织学检测和细菌学检测未检出致病菌,肺组织进行绵羊肺炎支原体PCR检测为阳性。     

用山羊关节炎—脑炎病毒实验感染绵羊的研究

用山羊关节炎－脑炎病毒（ＣＡＥＶ）接种２只绵羊，３￣４个月后，可观察到接毒绵羊发育迟缓和消瘦，其中１只绵羊在接毒后第８个月出现呼吸困难。未接毒对照绵羊发育正常。用ＣＡＥＶ琼扩抗原检测，２只接毒绵羊于接毒后第７周血清抗体阳转。病理剖检在１只接毒绵羊的多种器官中观察到比较轻微的病变，组织学检查可看到轻微的间质性肺炎、脑膜炎和滑膜炎的病变。实验结果表明，ＣＡＥＶ可感染绵羊，对绵羊有一定的致病性。因此用Ｃ     

新疆绵羊布鲁氏菌外膜蛋白OMP2b的克隆与表达

表达新疆绵羊布鲁氏菌外膜抗原蛋白OMP3b的表达蛋白OMP2b，探索其作为诊断抗原和亚单位疫苗的可能性。采用PCR方法，从新疆绵羊布鲁氏菌基因组DNA中扩增出omp2b基因片段，将该片段克隆于原核表达载体PET-28a（＋），构建成重组质粒，经IPTG诱导，SDS-PAGE检测。结果表明，获得长约1083bp的PCR片段，序列分析结果与已知绵羊布鲁氏菌外膜蛋白OMP2b同源性达89.72％；SDS-PAGE检测表达产物，在相对分子质量39ku处有表达带。获得了新疆绵羊布鲁氏菌外膜蛋白OMP36的表达蛋白omp2b基因片段，并在大肠杆菌中实现了表达。     

聚合酶链反应检测绵羊肺炎霉形体的研究

参照基因库中已发表的绵羊肺炎霉形体Y98株的16SrDNA序列，设计合成了1对引物，建立了聚合酶链反应(PCR)检测绵羊肺炎霉形体的方法。结果显示，所建立的PCR能特异扩增绵羊肺炎霉形体的DNA，而对照的菌株均为阴性；其敏感性可达1Pg。经对绵羊肺炎霉形体分离株HD-1的扩增产物进行测序，并与绵羊肺炎霉形体标准株Y98的16SrDNA序列进行比较，发现有6个碱基的差异。     

青海省海西地区山羊和绵羊犬新孢子虫病的血清学调查

用犬新孢子虫的重组蛋白GST—NcSAG1t作为ELISA诊断抗原，进行了青海省海西地区山羊和绵羊群中犬新孢子虫病的血清学调查。经过对所收集的120份绵羊血清和531份山羊血清抗体的检测，共检出绵羊阳性血清10份，山羊阳性血清36份，其阳性率分别为8．33％和6．78oA。说明青海省海西地区的绵羊和山羊群中存在犬新孢子虫的感染。     

实验感染山羊关节炎—脑炎病毒的绵羊抗体应答反应的研究

本实验用琼脂凝胶免疫扩散试验和免疫印迹试验对实验感染山羊关节炎—脑炎病毒（ＣＡＥＶ）的绵羊抗体应答反应进行了研究，用两种方法都可在接毒绵羊的血清中检测到ＣＡＥＶ的抗体。琼脂凝胶免疫扩散试验最早可于接毒后的第７周时检测到抗体，免疫印迹试验最早可于接毒后的第６周时检测到抗ＣＡＥＶ的ｇｐ１２５、ｇｐ４４、ｐ３５、ｐ２８和ｐ１４的抗体，这说明免疫印迹试验更为敏感一些。本实验的结果表明ＣＡＥＶ可在绵羊体内诱生明显的体液免疫应答反应，因此用ＣＡＥＶ通过绵羊体传代的方法可能会得到具有良好的抗原性的ＣＡＥＶ毒株，这对于人工培养ＣＡＥＶ强毒是非常重要的。此外，本实验还为ＣＡＥＶ通过绵羊体传代的研究提供了非常实用的检测手段     

应用间接ELISA检测绵羊进行性肺炎病毒抗体

应用间接ＥＬＩＳＡ检测绵羊进行性肺炎病毒抗体丁恩雨（复旦大学生命科学学院病毒学研究室，上海２００４３３）相文华（中国农业科学院哈尔滨兽医研究所）绵羊进行性肺炎（ＯＰＰ）是以损害绵羊多种器官为特征的慢性进行性传染病，其病原为反转录病毒科慢病毒亚科的成员...     

天峻县羊传染性胸膜肺炎病的诊治

利用细菌分离培养方法和PCR方法对天峻县快尔玛乡某养殖户中2只病死绵羊组织进行检测,经细菌分离培养未分离到可疑病原,用PCR方法检测2只病死绵羊肺脏及1号羊脾脏,均为绵羊肺炎支原体阳性。综合临床症状、常规检测以及PCR检测结果,诊断为羊群感染了绵羊肺炎支原体,从而导致了传染性胸膜肺炎。     

EPO在高原藏羊和平原绵羊睾丸组织中的差异性表达

为揭示促红细胞生成素（Erythropoietin,EPO）在高原藏羊和平原绵羊睾丸组织中的表达差异，本研究采集藏羊和绵羊的睾丸组织，采用H&E染色法观察二者睾丸组织的形态结构，采用免疫组织化学染色法对藏羊和绵羊睾丸组织中EPO表达分布差异性进行分析。H&E结果显示，藏羊和绵羊睾丸组织结构均正常，绵羊生精小管形状较藏羊更为规则，且生精上皮细胞数量较多。免疫组化结果显示，藏羊和绵羊的睾丸组织中均能检测出EPO，但EPO在藏羊睾丸组织中的表达量高于绵羊睾丸组织。由此看来，藏羊在长期适应高原低氧环境的过程中，生殖器官组织结构发生了一定适应性变化，EPO在藏羊睾丸组织中的表达程度高于绵羊睾丸组织，对藏羊睾丸低氧适应性有重要调控作用，说明EPO可能与藏羊在高原环境下维持正常繁殖性能有关。     

绵羊循经声信号与机体组织关系探讨

通过１１只绵羊１０１５穴次的环切试验及断肢经穴声发射检测观察，证明绵羊循经声发射信号的活动与各种组织都有不同的相关联系，其最主要的是肌肉组织（包括其中的神经、血管组织等），证明了绵羊循经声发射信号是一种伴随生命现象而存在的生物物理信号。     

应用PCR等核酸技术检测动物饲料中牛羊组织成分

为准确鉴别不同品种动物源性饲料，防范疯牛病及羊痒病的传播，建立了检测牛、绵羊和山羊组织种间特异的合酶链反应（PCR）；用Mbo I、Vsp I、Rsa I分别对从动物饲料中检测得到的牛、绵羊和山羊组织的PCR产物进行酶切分析、酶切图谱与序列结构相符；核酸测序结果表明，3种动物组织的PCR产物序列与基因库中检索到的相应序列相吻合。用3种检测方法检测牛、绵羊和山羊组织无交叉反应，检测猪、鸡、兔和鱼等动物组织均呈阴性。PCR检测的敏感性可达0．25％（质量分数），PCR检测全过程包括样品处理，可在3h内完成。     

哈萨克绵羊DRB1基因外显子1和4多态性与布鲁氏菌病的相关性研究

试验旨在对哈萨克绵羊DRB1基因外显子1和4多态性与布鲁氏菌病的相关性进行研究。使用虎红平板凝集试验（RBPT）对试羊的血清进行血清学检测，参考GenBank中绵羊MHC ClassⅡ区DRB1基因序列（登录号：NC_040271.1），对其外显子1和4片段设计引物，采用PCR-SSCP和DNA测序技术对230只哈萨克绵羊的DRB1基因进行多态性检测，分析其多态位点与哈萨克绵羊布鲁氏菌易感性之间的关系。RBPT检测发现66只哈萨克绵羊为布鲁氏菌感染阳性，阳性检出率为28.7%。外显子1片段存在一个SNP位点（F1-G22A），测序确定两种基因型（GG、GA），优势等位基因和基因型分别为G、GG，F1-G22A多态位点的易感基因型为GA。卡方检验表明，哈萨克绵羊DRB1基因F1-G22A多态位点与布鲁氏菌易感性的相关性不显著（P>0.05）。通过生物信息学在线软件分析得出，F1-G22A多态位点导致了RNA二级结构的改变和最小自由能的降低，引起了蛋白质二级结构的改变。DRB1基因外显子4片段未发现SNPs。由此得出，哈萨克绵羊DRB1基因F1-G22A多态位点与布鲁氏菌易感性可能存在一定的相关性。     

绵羊肺炎支原体环介导等温扩增联合横向流动 试纸条可视化检测方法的建立

为建立绵羊肺炎支原体快速检测方法,用环介导等温扩增(LAMP)技术进行核酸扩增,通过横向流动试纸条(LFD)实现可视化检测。针对绵羊肺炎支原体HSP 70基因设计一套特异性引物,其中HSP70FIP由生物素标记进行LAMP扩增反应,产物与生物素标记的探针杂交后,在LFD上完成检测,建立了绵羊肺炎支原体LAMP-LFD快速检测方法,并对其特异性、敏感性及临床应用进行检测。结果表明,LAMP在62℃反应70min,即可特异性的检测绵羊肺炎支原体的存在,最低检测线为1.0×102 CFU/mL,灵敏度是常规PCR检测方法的100倍,且对已知感染绵羊肺炎支原体的羊病变肺组织临床样品的检出率为100%。建立的LAMP-LFD检测绵羊肺炎支原体的方法特异性强、灵敏度高并且操作简便,为羊感染绵羊肺炎支原体的预防和诊断提供了新方法。