勿忘我组织培养繁殖技术的研究

选用勿忘我蓝、紫花色的种子为材料,采用L9(34)正交试验筛选适宜勿忘我丛生芽诱导的培养基,采用两因素随机区组设计筛选适宜勿忘我生根培养基,并对移栽基质也进行了初步试验。试验结果表明:勿忘我蓝紫2个品种适宜的丛生芽诱导培养基为0.2 mg/L ZT+0.4 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA,丛生芽的增殖倍数为9.2和8.8,4种因素对勿忘我丛生芽的诱导作用的顺序为6-BA>ZT>NAA>KT;适宜的生根培养基为1/2MS+NAA 0.45 mg/L,生根率达到80%;适宜炼苗的培养基质为草炭∶珍珠岩=1∶1,成活率达88%。     

金莲花组织培养体系的建立

为了建立金莲花的组织培养技术体系,为金莲花野生资源的保护和开发利用提供理论和技术支持,本试验以金莲花无菌播种苗为基础试验材料,以MS(1/2 MS)为基本培养基,在此基础上添加不同浓度的6-BA、NAA、IAA以及抗氧化剂,筛选适合金莲花组织培养各个阶段的最适培养基配方。结果表明,以金莲花无菌播种苗为初始材料,先经过壮苗培养是最佳的离体培养过程,壮苗培养的培养基配方是MS+6-BA4.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L,丛生芽增殖的最佳培养基配方为MS+6-BA 4.0 mg/L+2,4-D 0.2 mg/L,抑制褐化的培养基配方为MS+6-BA 4.0 mg/L+2,4-D 0.2 mg/L+Vc 0.03 g/L,试管苗生根的最佳培养基配方为1/2 MS+IAA 0.5 mg/L,移栽炼苗的最好基质是草炭土,其移栽成活率达到了94.2%。     

野生珍稀植物虎舌红组培快繁技术研究

以虎舌红带芽茎段为外植体,研究其培养的最佳培养基配方及培养程序,建立虎舌红快繁技术体系.结果表明:芽萌发的最佳培养基为:MS+ 6-BA 2.0 mg/L+ NAA 0.5 mg/L+GA31.0 mg/L,萌发率为73.33％;芽苗增殖最佳培养基为MS+6-BA 1.5 mg/L+ NAA 0.5 mg/L+ GA3 0.1 mg/L,增殖系数可达7.5,且芽苗生长良好;生根培养基以1/2 MS+ IBA 0.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L为最好,生根率达96.67％.在此培养基上添加不同浓度的活性炭,以0.2％ AC效果更好.炼苗以碎树皮的成活率最高,达91％.     

大花蕙兰与墨兰种间杂交种子无菌播种繁殖技术研究

建立杂交兰无菌播种和再生体系,获得一定数量的杂交后代群体,为新品种的选育提供基础材料。以大花蕙兰‘肯尼’为母本和墨兰‘太平洋’进行种间远缘杂交,取其成熟种子进行无菌播种,探讨不同基本培养基、植物生长调节剂和添加物对其种子萌发、根状茎增殖与分化及壮苗生根等的影响。结果表明:种子萌发最适配方为:1/2MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L+活性炭1.0 g/L;根状茎增殖与分化培养基最适配方为1/2MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L,培养70天分化成苗率达88.6%。适宜的壮苗生根培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 2.0 mg/L+香蕉泥90 g/L+活性炭2.0 g/L。室外闭瓶炼苗30~40天,再开盖炼苗3~5天后,以发酵的树皮加碎石子为基质,60天左右种苗成活率达98.62%。     

不同培养基成分对铁皮石斛组织培养的影响

以铁皮石斛无菌苗的茎段作为外植体,讨论MS培养基中添加不同浓度的激素对铁皮石斛的诱导、增殖、分化以及生根的影响。结果表明：最适合铁皮石斛原球茎诱导的培养基为MS+ 6-BA 0.5 mg/L+ NAA 1.5 mg/L,原球茎诱导率为95%;最适合原球茎增殖的培养基为MS+ 6-BA 1 mg/L+ NAA 1 mg/L;最适合原球茎分化的培养基为MS+ 6-BA 5 mg/L+ NAA 1 mg/L,其分化率达80%;最适合铁皮石斛根诱导的培养基为MS+IBA 1.5 mg/L+香蕉泥100 g/L,其生根率为100%。     

不同生长调节剂对金丝梅组培快繁的影响

本研究以云南野生金丝梅(Hypericum patulum)带休眠芽的茎段为外植体,研究了不同植物生长调节剂对其离体培养的影响,以建立金丝梅离体快繁技术体系。研究结果表明,腋芽诱导的适宜培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L,诱导率可达90%;适合腋芽增殖的培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+GA30.1 mg/L,增殖系数可达5.12;最佳生根培养基为1/2MS+IBA 0.5 mg/L+活性炭0.1 g/L,生根率为96.69%。炼苗移栽到草炭土∶珍珠岩=2∶1的基质中,成活率达100%,移栽到苗圃后成活率为100%。研究结果为金丝梅高效快速繁殖以及优良品种选育提供科学依据。     

五种药用石斛快速繁殖的研究

为解决石斛的快速繁殖和提高组培苗的成活率,以MS为基本培养基,把<中华人民共和国药典(2000版)>(以下简称中国药典)收载的5种药用石斛的茎段作为外植体进行了组培和快繁,并根据石斛的生物学特性,配制了多种基质进行炼苗.结果表明:不同种类的石斛在诱导侧芽萌发时所需培养基不同,但是在增殖、壮苗生根以及炼苗移栽时所需基质却具有相似性.环草石斛、铁皮石斛、束花石斛、马鞭石斛和金钗石斛在诱导侧芽萌发时的最适培养基分别为:MS NAA 0.1 mg/L 6-BA 1.0mg/L、MS NAA 0.1 mg/L 6-BA 1.5 mg/L、MS NAA0.5 mg/L 6-BA 2.0mg/L、MS NAA1.0mg/L 6-BA 2.0 mg/L、MS NAA0.1 mg/L 6-BA 2.0 mg/L.这5种石斛增殖、壮苗生根的最适培养基分别为:MS NAA 0.1 mg/L 6-BA 3.0 mg/L、1/2MS NAA 0.7 mg/L.移栽最适基质为:碳酸盐小石子:木屑=1:2,再覆盖1 cm厚的苔藓,幼苗移栽成活率达95%以上.本文首次报道了在实验室里获得马鞭石斛和束花石斛这两个种的组培苗,并初步解决了石斛试管苗脱瓶移栽成活率低的问题,使下一步进行大面积人工栽培成为可能.     

紫叶酢浆草组培快繁技术研究

研究了紫叶酢浆草地下鳞茎初代培养、继代培养和生根培养3个技术环节的激素配比以及生根苗移栽试验。结果表明：以MS为基本培养基，初代培养激素配比以6-BA0.5mg/L+NAA0.5 mg/L+2,4-D0.1 mg/L为宜，诱导率达83%，增殖系数为2.6；在继代培养中，以6-BA0.5 mg/L+NAA0.1 m/L为宜，增殖系数达3以上；以1/2MS为基本培养基，生根激素以NAA0.1 mg/L为宜，可使生根率达92%；生根苗移栽基质为蛭石与细沙按1:1时移栽成活率达90%。     

彩色马蹄莲离体快繁体系的优化

以彩色马蹄莲球茎为外植体,通过不定芽途径建立彩色马蹄莲离体快繁体系。结果表明：采用“二次消毒法”能够明显降低初代培养过程中的污染率;由外植体直接诱导产生不定芽的彩色马蹄莲快繁体系切实可行,最佳不定芽诱导培养基为MS+6-BA1mg/L+NAA0.1mg/L,不定芽增殖培养基为MS+6-BA2mg/L+NAA1mg/L,最佳生根培养基为1/2MS+6-BA0.1mg/L+NAA0.5mg/L+AC0.5 mg/L;炼苗3d后移栽到土壤:河沙:草炭土=1:1:1的土壤中,并进行遮阳处理,成活率90％以上。     

铁皮石斛与钩状石斛杂交及种子无菌播种快繁研究

以铁皮石斛和钩状石斛为研究对象,通过人工辅助杂交获得杂交种子,诱导种子离体萌发,开展无菌播种技术研究.结果表明,铁皮石斛与钩状石斛杂交容易成功,杂交坐果率可达到80％;适宜的种子萌发培养基为MS+ 6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L,培养30 d时的萌发率为89.7％;培养基MS+6-BA 1.5 mg/L+ NAA0.1 mg/L+香蕉100 g/L+ AC 1.0 mg/L对原球茎的增殖最好;培养基MS+ 6-BA 1.5 mg/L+ NAA 0.1mg/L+马铃薯200 g/L+ AC 1.0 g/L对原球茎的分化最好;壮苗生根培养基配方为1/2 MS+ NAA 0.6 mg/L+香蕉100 g/L+AC 1.0 g/L,植株生长健壮,生根率100％,移栽成活率达95％以上.     

栎叶绣球‘雪花’再生体系的建立

为获得大量栎叶绣球的无菌苗,本研究以栎叶绣球‘雪花’(Hydrangea quercifolia’Snow Flake’)的叶片为试验材料,通过不同浓度的激素组合处理。结果表明,最适宜的愈伤组织诱导培养基为:MS+1.5 mg/L6-BA+0.2 mg/L NAA,出愈率约为80.7%;最适宜的不定芽分化培养基为:MS+2 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IBA,诱导率约为90.3%;最佳的增殖培养基为:MS+2.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IBA,增殖率约为5.2;最佳的壮苗培养基为:MS+0.5 mg/L 6-BA+0.15/0.2 mg/L IBA,幼苗平均高度约为4.57 cm;最佳的生根培养基为:1/2 MS+0.4 mg/L IBA,平均生根率约为88.3%,平均根长约为6.5 cm。本研究初步建立了栎叶绣球‘雪花’的再生体系,为其扩大繁殖和之后的遗传转化研究提供了帮助。     

欧李高效再生体系的建立

研究旨在利用植物组织培养技术,筛选出引进资源品种（系）SN6、SN7和自育品系YC24的最适培养基,确定3个欧李品种的再生体系,为欧李高效快速规模化繁殖提供技术性支持。以3个欧李品种（系）为材料,对外植体的消毒方式、分化、增殖和生根培养阶段的最适培养基和激素配比进行研究。结果表明,头孢霉素浓度为100 mg/L时,外植体存活率最高、污染率最低;SN6、SN7的最适分化培养基为MS+ 0.5 mg/L 6-BA+ 1.0 mg/L ZT+ 0.05 mg/L IBA,YC24的最适分化培养基为MS+ 0.5 mg/L 6-BA+ 0.5 mg/L ZT+ 0.05 mg/L IBA;SN6的最适生根培养基为1/2MS+ 0.2 mg/L NAA+ 0.1 mg/L IBA+ 1.0 g/L活性炭,SN7、YC24的最适壮苗生根一步培养基为1/2MS+ 0.05 mg/L NAA+ 0.2 mg/L IBA。本研究建立了欧李嫩枝快速繁殖体系,可为优良种质的后续练苗移栽、扩大培养和推广应用提供参考。     

新疆杨组培再生体系建立

以新疆杨叶片为外植体,研究新疆杨组织培养再生体系建立的主要影响因素。结果表明:诱导愈伤组织的最佳培养基组合为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L 2,4-D;愈伤组织分化的最佳培养基组合为MS+0.1 mg/L TDZ+0.3 mg/L IBA,不定芽增殖的最佳培养基组合为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L IBA,诱导生根的最佳培养基组合为1/2MS+0.5 mg/L IBA,新疆杨组培苗在生根培养基上形成的根条数多,苗体健壮,生根率达到100%。本研究成功建立了新疆杨组织培养再生体系,为其转基因研究工作奠定了基础。     

黄花矶松组织培养及培养基筛选研究

试验选用种子培养的黄花矶松无菌苗的子叶、茎段、下胚轴作为外植体材料,研究不同外植体的离体培养技术及其适宜的培养基。结果表明,生长素2,4-D对不定芽诱导具有明显的促进作用,在其浓度为1.5 mg/L时诱导率最高,子叶是诱导不定芽的良好外植体,最适培养基为MS+ 2,4-D 1.5 mg/L+ 6-BA 2.0 mg/L+ NAA 1.0 mg/L。黄花矶松的最适增殖培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+ NAA 1.0 mg/L,而且是以丛生芽的方式进行增殖的;最适生根培养基是1/2 MS+ KT 1.0 mg/L+ IBA 1.0 mg/L。     

腊花组培快繁体系研究

为探讨最适初代诱导、增殖继代生根的培养基配方,建立腊花的组织培养技术体系,以腊花嫩茎尖为实验材料,采用MS培养基,向培养基中添加不同配比组合的KT和NAA,对腊花进行初代诱导培养;设置6-BA和NAA不同激素浓度组合进行增殖培养;选用1/2MS培养基为腊花生根培养的基础培养基,添加IBA不同浓度配比培养实验。最佳初代诱芽培养基为MS+ KT 3.0 mg/L+ NAA 0.2 mg/L+琼脂6.2 g/L+蔗糖30 g/L,pH 5.8,诱导率达88.8%。最佳增殖培养基为MS+ 6-BA 1.0 mg/L+ NAA 0.1 mg/L+ 琼脂6.2 g/L+蔗糖30 g/L,pH 5.8,增殖系数为3.6。最佳生根培养基为1/2MS+ IBA 0.6 mg/L+琼脂6.2 g/L+蔗糖30 g/L+0.1 g/L活性炭,pH 5.8,生根率100%。     

中国樱桃泰山干樱的组织培养及植株再生研究

以中国樱桃泰山干樱（Prunus pseudocerasus Lindl.）一年生枝的休眠芽为外植体,研究了不同种类和不同浓度生长调节物质对泰山干樱初代培养、增殖和生根的影响。结果表明,泰山干樱的最佳初代培养基为MS+6-BA1.0mg/L+IBA0.2 mg/L;MS培养基中分别加入0.5mg/L 6-BA 和0.1mg/L ZT,增殖效果最好,增殖系数达6.8,有效新梢数可达80.2%;组培苗在1/2 MS+IBA 0.5mg/L培养基上根诱导效果最好,生根率可达80%,平均根长4.54cm;移栽到草炭土和河沙1∶1的混合基质中,温室炼苗后,成活率可达70%以上。     

千层金组培快繁技术研究

以千层金茎段为外植体进行离体培养,通过试验筛选出各阶段适宜的培养基,建立了千层金组培快繁体系。结果表明：在诱导不定芽的培养基中,MS+6-BA 1 mg/L的芽萌发率最高,芽体健壮;丛生芽继代增殖培养基为改良MS+6-BA 1 mg/L+NAA 0.1 mg/L+KT 0.1 mg/L;生根培养基为1/2MS+1号生根剂0.5 mg/L+IBA 0.1 mg/L,生根率达100%,且根系发达;栽培基质以椰糠+腐殖土=2:1较理想,移栽成活率为89.3%。     

香石竹离体组织培养特性的研究

本实验以香石竹当年生带腋芽的茎段为外植体,研究它的诱导分化、继代增殖、生根培养各阶段离体培养的特性.结果表明:附加1.5mg/LBA和0.1 mg/LNAA的MS培养基适合腋芽的萌发诱导,诱导率达100%;附加0.5mg/LBA和0.1 mg/L NAA的培养基适合香石竹的增殖,增殖率达340%;附加1.0mg/L NAA的培养基为适宜的生根培养基.     

金鱼藤的组织培养和快速繁殖体系的建立

以金鱼藤(Asarina procumbens)叶柄为外植体,MS为基础培养基,进行组织培养和快速繁殖,研究不同浓度的植物生长调节剂对金鱼藤快繁体系建立的影响,建立了金鱼藤无性繁殖体系。结果表明,金鱼藤愈伤诱导的最佳培养基为MS+2.0mg/L6-BA+1.0mg/L NAA;不定芽分化最佳培养基为MS+1.5mg/L6-BA+(0.3~0.5)mg/LNAA+0.3mg/L KT;丛生芽诱导的最适培养基为MS+2.0mg/L6-BA+0.2mg/L NAA,最佳生根培养基为MS培养基。     

降香黄檀愈伤组织培养与植株再生研究

为了实现降香黄檀工厂化快速繁殖和扩大栽培,并为降香黄檀抗寒基因导入打下一定的基础,以降香黄檀无菌实生苗茎段、叶片、根尖为外植体,MS为基本培养基,对各器官愈伤组织诱导与分化的最适培养基成分进行了研究。结果表明,可从降香黄檀无菌实生苗茎段、叶片、根尖成功地进行愈伤组织培养和植株再生。茎段、叶片、根尖诱导愈伤组织的最适培养基分别为1/2MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.10 mg/L、1/2MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.10 mg/L和1/4MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.05 mg/L;茎段、叶片、根尖的愈伤组织诱导丛生芽最适培养基分别为1/2MS+6-BA 1.5 mg/L+2,4-D 4.0 mg/L、1/2MS+6-BA 1.5 mg/L+2,4-D 3.5 mg/L和1/2MS+6-BA 1.5 mg/L+2,4-D 3.5 mg/L;茎段、叶片、根尖来源的单芽,其最佳生根培养基分别为MS+NAA 1.5 mg/L、MS+NAA 1.0 mg/L和MS+NAA 2.0 mg/L。比较茎段、叶片与根尖的愈伤组织诱导率、丛生芽诱导率和单芽生根率,得出以无菌实生苗根尖作为外植体是降香黄檀愈伤组织培养和植株再生的最佳选择。