烟草K326叶片愈伤组织诱导及继代的初步研究

以烟草K326叶片为外植体,采用MS基本培养基,研究了不同激素组合对愈伤组织的诱导效果,以及继代培养过程中不同浓度的NAA和6-BA对愈伤组织生长的影响。研究结果表明:2.4-D2.0 mg/L,6!BA0.5 mg/L组合诱导效果最好,7d后叶块边缘长出愈伤组织,诱导率为100%。不同浓度NAA和6-BA组合的愈伤组织生长速度、结构、质地和颜色有显著差异。以NAA0.1 mg/L+6-BA3.0mg/L、NAA2.0mg/L+6-BA0.5 mg/L和NAA1.5 mg/L+6-BA0.5mg/L3种培养基组合的愈伤组织生长较快。其中前一组合愈伤组织为绿黄色,结构致密,质地硬;后两种组合愈伤组织为黄白色,结构疏松,质地脆。     

珍珠黄杨愈伤组织诱导的研究

[目地]探讨珍珠黄杨愈伤组织的诱导条件。[方法]以MS为基本培养基,采用2.0、1.6、1.2和0.8 mm 4种不同直径茎段为外植体,采用NAA和6-BA 2种激素不同浓度组合诱导愈伤组织;采用2,4-D、NAA和6-BA 3种激素的不同浓度组合对珍珠黄杨愈伤组织进行继代培养。[结果]使用珍珠黄杨茎段为材料时,最佳愈伤组织诱导激素组合为1.0 mg/L NAA+2.0 mg/L 6-BA,出愈率为69.84%;最佳取材直径为1.2~1.6 mm;最佳愈伤继代激素组合为2.0 mg/L 2,4-D+1.0 mg/L 6-BA。[结论]该研究为珍珠黄杨的高速繁殖研究奠定了基础。     

一种适于小麦愈伤组织诱导与继代培养的培养基

培养基是植物离体培养体系中最能体现人为调控作用的因素.N6培养基的出现曾极大地推动了禾本科植物组织和花药培养的进步,并且至今仍在许多重要作物组织及细胞培养中发挥着重要作用.     

胡芦巴愈伤组织诱导培养的初步研究

进行胡芦巴愈伤组织诱导，在MS培养基上，附加不同种类和浓度配比的植物激素，及在光培养和暗培养两种不同的培养方式下对愈伤组织的诱导率、性状和生长量等进行了比较。其中当BA1mg/L 2，4-D0.5mg/L时，愈伤组织诱导率和生长量最好，为疏松型愈伤组织系结果表明：不同激素配比和不同的培养方式对愈伤组织诱导率、生长量和发生的性状有明显的影响。本研究结果为筛选胡芦巴薯皂甙元高产细胞株及其细胞悬浮培养提供了参考。     

山茱萸疏松愈伤组织诱导及培养条件优化的研究

以山茱萸的叶片,茎段,种子胚等不同部位材料作为外植体进行了山茱萸不同外植体的离体培养研究,比较了不同培养条件对山茱萸疏松愈伤组织诱导和生长效果的影响,并就继代培养过程中,不同培养基组分及培养条件对其生长的影响情况进行了试验与比较分析。结果表明:KT(3 mg/L)+2,4-D(1 mg/L)对嫩叶的诱导效果最好;在光照强度1 500～2 000 lx,3%蔗糖,pH值为5.8左右时,山茱萸细胞生物量的增长率达到最大;合适的继代周期为20～25 d。     

黄芪愈伤组织的诱导及分化培养

通过对黄芪叶片和茎段愈伤组织进行诱导及分化培养,确定黄芪愈伤组织诱导和分化培养最佳培养基分别为MS+2.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L 2,4-D+1.0 mg/L NAA和MS+2.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L IBA+0.5 mg/L NAA,选择叶片作为外植体优于茎段,愈伤诱导率和直接分化出...     

孜然芹子叶愈伤组织诱导及继代培养研究

探讨孜然芹种子表面消毒的适宜方法,以孜然芹无菌苗子叶为外植体,研究最适宜愈伤组织诱导及继代培养的激素种类及浓度.结果表明:孜然芹种子经70;酒精10 s+0.1;升汞50 s,20 d萌发率可达97.70;,污染率11.11;;子叶切段在光照时间16 h/d,MS+2,4-D 2 mg/L的愈伤组织诱导启动培养基中,30 d愈伤诱导率达100;, 继代培养在MS+NAA 0.5 mg/L+6-BA 0.2 mg/L培养基中光照16 h/d培养20 d,愈伤组织增殖率达67;,愈伤组织在同种继代培养基中暗培养20 d,增殖率达80;.     

茉莉花愈伤组织的诱导及其继代保持

以福州茉莉花茎段或花器官组织为外植体,进行愈伤组织诱导、继代增殖和长期保持等方面的研究。结果表明,在光照条件为1 500~2 000 lx下,能够诱导获得6种类型的愈伤组织,愈伤组织诱导适宜培养基为MS＋BA 2.0 mg·L-1 ＋NAA 0.2 mg·L-1 ＋蔗糖30 g·L-1,诱导率可达100%;同时在MS＋BA 2.0 mg·L-1 ＋NAA 0.2 mg·L-1 ＋蔗糖30 g·L-1培养基中,能长期继代保持茉莉花愈伤组织,并维持旺盛的生长能力。     

山核桃愈伤组织诱导的初步研究

采用正交设计研究了不同植物激素配比、蔗糖质量浓度、外植体取材部位以及单宁含量等因素对山核桃组织培养中愈伤组织形成的影响。结果表明：WPM＋BA8．0mg.L^-1 IB2.0mg.L^-1 GA1.0mg.L^-1＋蔗糖30mg.L^-1是最适培养基；顶芽和第4芽段为较适宜的山核桃愈伤组织诱导的取材部位；不同芽段愈伤组织的形成率与其单宁含量不相关，而与芽段愈伤组织形成的部位有关，且随着单宁含量的减少。愈伤组织形成的部位向切口上升。选取1年生实生苗茎尖和茎段，配比合理的植激素加以诱导，可提高山核桃嫁接成活率。表5参11。     

四季桂愈伤组织诱导与继代培养

为提高四季桂的愈伤组织诱导率，以四季桂为材料，对影响四季桂愈伤组织形成和继代培养的几个主要因素进行了研究．结果表明：采用四季桂花梗作外植体，在MS BAl．5mg/L 2，4—D0．1mg/L培养基上，暗处理7d，愈伤组织质量高且诱导串可达85．71％．用2，4—D诱导四季桂愈伤组织效果较NAA显著．继代培养以0．1mg/L NAA为生长素时，褐变致显著低于2，4—D，当2ip质量浓度为1．5mg/L时褐变致最低，为15．0％．     

三尖杉无菌增殖培养技术的研究

对同一时期三尖杉(Cephalotaxus fortunei)取材以及不同时期取材的灭菌效果进行对比试验,结果表明带芽茎段取材时期以3月中旬为最佳,此时萌发的新梢污染率较低、存活率较高,以75%酒精浸泡1 min,0.1%HgCl2灭菌12 min处理,存活率最高为63.3%,达到较好的灭菌效果。不同培养基与激素组合对三尖杉茎段腋芽诱导及增殖培养效果的试验,结果表明:6-BA质量浓度对带芽茎段启动速度、芽体诱导率影响极显著,改良MS+6-BA3.0 mg.L-1+IBA0.5 mg.L-1为三尖杉带芽茎段启动培养芽体分化的最佳培养基组合,芽体诱导率为82.8%;改良MS+6-BA2.0 mg.L-1+IBA0.2 mg.L-1为增殖培养最佳培养基组合,增殖系数为3.9。     

2年生三尖杉生长和2种酯碱种源变异及初步选择

为了探讨三尖杉Cephalotaxus fortunei幼龄收获阶段生长、干物质积累和药用成分等种源变异和地理模式,并为福建明溪选育出多个药用优良种源,在福建明溪、浙江淳安和安吉等3个地点开展种源区域试验。研究结果表明,2年生三尖杉树高、地径、分枝数、各器官干物质积累量以及枝、叶药用成分均存在显著的种源变异。三尖杉生长和干物质积累量的种源分化可较多地归因于长叶和短叶类型间的差异。较之于短叶类型三尖杉种源,长叶类型三尖杉种源的生长和干物质积累量大,其种源间分化也较大。除种源效应外,栽植地条件对三尖杉生长影响显著。测定结果表明,不同类型间叶片三尖杉酯碱和高三尖杉酯碱质量分数差异较小,而枝条2种酯碱质量分数差异却较大,且长叶类型枝条的2种酯碱质量分数均值高于短叶类型。相关分析发现,种源干物质积累量和枝叶2种酯碱质量分数较多地受其产地经度的控制,而与产地纬度的相关性较小。根据福建明溪点的测试结果,以枝叶三尖杉酯碱和高三尖杉酯碱产量为选育指标选择出福建武夷山、柘荣等优良药用种源。表8参14     

史密斯桉愈伤组织诱导与分化的进一步研究

为了优化史密斯桉愈伤组织诱导与分化系统,为史密斯桉的无性繁殖和转基因研究提供参考。通过建立无菌苗,研究不同品种、外植体部位、激素种类及其配比、不同质量浓度2,4-D与NAA对史密斯桉愈伤组织诱导的影响,激素种类及配比、基本培养基种类、6-BA质量浓度、NAA质量浓度、不同转种周期对史密斯桉愈伤组织分化成芽的影响以及激素种类及其质量浓度对史密斯桉不定芽分化成根的影响。结果表明,使用1.54 mol/L NaClO对史密斯桉种子消毒30~50 min建立的无菌苗效果较好;史密斯桉形成愈伤组织的能力在品种间有显著差异,品种9的愈伤形成率最高;不同外植体部位形成愈伤组织的能力从大到小依次为:子叶、真叶、下胚轴、来源于种子的幼茎、种子、老树幼茎、根;0.5~1.0 mg/L 2,4-D对史密斯桉愈伤组织的形成是必要的,1.0 mg/L 2,4-D+1.0 mg/L NAA组合对史密斯桉愈伤组织诱导效果最好,愈伤形成率最高;NAA与6-BA的质量比为1∶1时,有利于史密斯桉愈伤组织的形成,质量比为1∶5时有利于茎段的快速生长,质量比为1∶10时有利于不定芽的形成;单独使用0.5~1.0mg/L 2,4-D或2,4-D与NAA组合有利于愈伤组织的形成;单独使用0.5 mg/L的NAA或IBA有利于史密斯桉根的形成,其中NAA的效果较好;在MS培养基中苗高、苗的长势及腋芽萌发成苗的能力均较其他培养基有显著优势;转种20 d的愈伤分化成芽率相对较高。说明史密斯桉愈伤组织诱导与分化系统易于优化。     

三尖杉内生真菌S19次生代谢产物的结构与活性

为探明三尖杉内生真菌S19的次生代谢产物的结构与活性,采用形态学特征和ITS序列鉴定菌株,利用硅胶柱层析、Sephadex LH-20柱层析和重结晶等方法对该菌株的发酵产物进行分离、纯化,并结合所得化合物的理化性质和波谱数据鉴定其结构,通过测试菌对其次生代谢产物进行活性测试。结果表明：菌株 S19为黄曲霉（Aspergillus flavus ）,从其发酵产物中分离得到6个化合物,分别为5-羟甲基呋喃-3-羧酸（1）、麦角甾醇（2）、β-谷甾醇（3）、豆甾-7,22-二烯-3β,5α,6α-三醇（4）、胶霉毒素（5）和丁二酸（6）。黄曲霉（S19）可以大量产生5-羟甲基呋喃-3-羧酸（1）。化合物1对大肠杆菌抑菌活性较好,其 MIC 值为15．6μg／mL;化合物5对测试菌均有很好的抑菌活性。     

小麦胚性愈伤组织诱导研究

研究了不同基因型、低温处理时间、激素和蔗糖浓度及生根条件等对小麦幼胚培养再分化能力的影响。结果表明:在该体系优化的条件下,诱导胚性愈伤组织的频率为80.88 %,胚性愈伤组织分化的频率为97.30 %,分化芽的生根率为90.00 % 以上;筛选出栽培品种(系)6-90可以作为遗传转化的良好受体。     

南方红豆杉愈伤组织诱导和继代培养体系的建立

以南方红豆杉为材料,建立了其愈伤组织诱导与保持的技术体系,主要为:(1)南方红豆杉侧芽是诱导愈伤组织的最佳外植体;(2)南方红豆杉愈伤组织诱导的最佳培养基为:B5+2.0 mg.L-12,4-D+1.0 mg.L-1NAA+0.2 mg.L-1IAA;(3)南方红豆杉愈伤组织增殖的培养基为:B5+4.0 mg.L-1NAA+0.5 mg.L-12,4-D+0.2 mg.L-1GA+500 mg.L-1AC+2000 mg.L-1LH.并在培养基中同时添加AC、LH和GA33种抗褐物质,取得较好的抗褐化效果.     

低温引发处理过程中三尖杉种子生理变化及产地差异

选用对低温引发处理反应差异显著的贵州黎平、福建明溪和四川盐源3个产地的三尖杉Cephalotaxus fortunei种子，设置不同的低温引发处理，研究它们在低温引发处理过程中的生理变化及产地差异。结果表明，经低温引发处理后上述3个产地种子发芽率差异巨大，分别为30．86％，9．90％和1.91％，而在不同处理中则以10d冷藏引发处理的种子发芽率较高。三尖杉种子在低温引发处理过程中代谢活跃，脂肪和淀粉质量分数不断下降，氨基酸质量分数大量增加，过氧化物酶（POD）和过氧化氢酶（CAT）活性显著增强。低温引发处理效果较好的福建明溪产地种子，其胚乳脱落酸（ABA）质量分数在处理前较高，处理后则显著降低，赤霉酸（GA3）／ABA变化较小或略有提高，这可能是解除该产地种子休眠的原因之一。四川盐源三尖杉种子在低温引发处理前胚乳ABA质量分数很低、GA3／ABA较高，但不能发芽，而在低温引发处理后种子胚乳ABA质量分数保持不变或有较大幅度的升高，说明另有原因控制其种子的休眠。四川盐源三尖杉种子对低温引发处理反应较小，应与它长期适应冬暖气候有关。此外，福建明溪三尖杉种子直接沙藏种子发芽率较低似与种子胚乳ABA水平较高有关。表5参8     

非洲菊愈伤组织诱导和不定芽分化研究

以非洲菊深圳5号为材料,研究了几种因素对非洲菊花托愈伤组织诱导和不定芽分化的影响,结果表明,花托在1/2MS 6-BA 10 mg/L NAA 0.2 mg/L IAA 0.3 mg/L培养基中诱导愈伤组织的速度最快,诱导率达100%;花托在在1/2MS基本培养基中诱导出的愈伤组织较少褐变,且易分化不定芽;将愈伤组织转接到1/2MS 6-BA 3 mg/L NAA 0.2mg/L IAA 0.1 mg/L培养基中进行继代增殖培养可有效降低褐化率,不定芽分化率达67.5%、不定芽平均数为2.3株,指出高效的愈伤组织和不定芽再生频率为非洲菊基因转化体系的建立奠定了基础。     

不同外植体类型诱导岩黄连愈伤组织和再分化的初步研究

为探讨不同外植体对岩黄连在组织培养中愈伤组织诱导和植株再生的影响,从而筛选出较适合岩黄连组织培养的外植体材料,为建立岩黄连无性繁殖体系提供参考。以岩黄连的茎尖、茎节（带侧芽）、叶柄、叶片为试验材料,采用不同方式进行消毒,并接种于不同配方培养基上进行培养。结果表明：岩黄连不同类型外植体在诱导愈伤组织和植株再生上有较大的差异,叶柄和叶片的愈伤组织诱导率明显高于茎节和茎尖,其中叶片诱导率最高,为46.67%,而茎尖愈伤组织的再分化率最高,为66.7%。叶片为岩黄连诱导愈伤组织较好的外植体材料,茎尖较适合于诱导岩黄连植株再生。     

抗生素对玉米愈伤组织生长和分化的影响

以继代培养的玉米胚性愈伤组织为材料,研究了不同质量浓度的卡那霉素(Kan)、遗传霉素(G418)和头孢霉素(Cef)对胚性愈伤组织继代生长和分化的影响.结果表明:(1)当质量浓度大于3 mg.L-1时,Kan对愈伤组织的生长具有一定抑制作用,其抑制作用在不同继代次数和不同基因型间具有明显差异;Kan明显降低了愈伤组织的分化出苗率;(2)G418具有显著抑制愈伤组织生长的负向效应.当G418的质量浓度大于25 mg.L-1时,愈伤组织就丧失了再生能力;(3)Cef质量浓度为100 mg.L-1时,对愈伤组织的生长无显著影响,随着质量浓度的增加,对愈伤组织的生长开始具有抑制作用,Cef对愈伤组织生长的抑制作用具有一定的累加效应.Cef对愈伤组织的分化再生能力具有一定的正向效应,但其临界质量浓度在基因型间和继代次数间存在差异.