成都地区畜禽嗜肺军团菌抗体水平检测报告

1988年初,对成都地区510份畜禽嗜肺军团菌(Lp-1)血清抗体水平检测结果,鸭、鹅、鸡、猪总的感染率为1.96％,其中猪为3.33％,鸭为2.14％,鹅为1.48％,鸡为0.95％,经x~2检验,P>0.05。     

微量间接血凝试验检测特种经济动物嗜肺性军团菌抗体的研究

应用嗜肺性军团菌(Lp)共同抗原建立了微量间接血凝试验(MPHA),并以此方法对马鹿、梅花鹿、紫貂、水貂、貉、獭兔、熊、蓝狐、银狐及雉鸡等10种特种经济动物的830份血清样本进行了Lp抗体水平的检测。结果表明,紫貂和水貂血清的Lp抗体滴度1:32为阻抑试验阳性,而梅花鹿、马鹿、貉等8种特种经济动物血清的Lp抗体滴度1:64为阳性。按此标准,獭兔血清Lp抗体的阳性率为30.0％(9/30),梅花鹿15.3％(19/124),紫貂8.7％(2/23),马鹿8.45％(6/71),貉2.94％(6/204),水貂1.1％(8/273)。熊、蓝狐、银狐及雉鸡等血清样本全部呈阴性反应。     

马军团菌感染的血清学依据

本文报告了应用间接荧光抗体试验检测了109例随机抽样马的混合血清。结果与微凝试验所得效价进行了比较,发现两种试验检测血清效价有较高相关性。从研究所农场156匹马中连续获得血液样本,应用微凝法对嗜肺性军团菌1～4血清群进行了试验,29匹马(19%)血清转变至少有一个嗜     

绵羊肺炎支原体抗体ELISA检测方法的建立

为了建立特异性好和敏感性高的绵羊肺支原体抗体ELISA检测方法,以绵羊肺炎支原体Y98标准菌株的全菌蛋白作为抗原,进行了反应体系和反应条件的优化筛选。结果显示:最佳蛋白抗原包被浓度为1.52μg/mL,最适封闭液及其稀释浓度为1%BSA,血清样品的稀释度为1/50,兔抗山羊IgG的最适稀释浓度为1/4 000,一抗和二抗的最佳作用时间为37℃60 min,底物显色的最佳时间为10 min;通过与绵羊肺炎支原体抗体间接血凝试验(IHA)检测结果相比,60份羊血清样品中Y98 ELISA检出阳性为33份,阴性为20份,二者的检测符合率可达到88.33%,相对特异性达90.90%。提示:建立的绵羊肺炎支原体血清抗体检测方法具有较高的检测敏感性和特异性,为绵羊肺炎支原体的抗体检测及其感染的流行病学调查提供了一种快速简便的检测工具。     

猪伪狂犬病血清抗体gE-ELISA检测方法的建立

以纯化的猪伪狂犬病病毒gE蛋白为抗原建立了检测猪伪狂犬病血清抗体的间接gE-ELISA方法。最佳反应条件为，抗原包被浓度为1．7μg／mL，待检测血清1：40稀释。与伪狂犬病阳性血清反应为阳性，与猪瘟、猪细小病毒病、猪繁殖与呼吸综合征（猪蓝耳病）、猪乙型脑炎、猪布氏杆菌病5种疾病阳性血清和猪伪狂犬病gE缺失疫苗接种的猪免疫血清及SPF猪阴性血清均无交叉反应。批间、批内试验变异系数分别不超过5％和9％。用该方法与Ingezim ELISA试剂盒和HerdChek ELISA试剂盒同时对172份血清进行了平行检测，总符合率分别达93．6％和83．7％。试验结果表明：猪伪狂犬病血清抗体间接gE-ELISA检测方法具有较高的敏感性和特异性，且重复性好，可用于猪伪狂犬病野毒感染猪的血清抗体检测。     

马的嗜肺军团杆菌实验感染

作者试图用嗜肺军团杆菌感染马,以测定其病原性和评价马作为本菌的带菌者的作用。以前的研究表明,马群中普遍存在抗嗜肺军团杆菌抗体,在检查过的600份血清中,存在此抗体者超过30％。通过静脉注射和气溶胶接种法给马实验感染嗜肺军团杆菌philadelphja 1株     

应用荧光抗体检测马鼻肺炎病毒的实验研究

用自然感染马阳性血清及兔免疫血清制备的马鼻肺炎荧光抗体(EHV_1·FA),和马鼻肺炎病毒(HEV_1)不同毒株以及从匈牙利引进的Bartha株标准毒均产生特异性荧光。通过对不同滴度地鼠肾细胞培养液内抗原的测定,表明EHV_1·FA法比补结反应及细胞病变法敏感,高1～2个滴度,应用冰冻切片直接荧光染色检查乳地鼠31份,肝阳性率为83.8％,肺阳性率为77.4％,对照10份均为阴性。检查人工感染HEV_1流产胎儿5份,肝阳性率为100％,肺阳性为80％,检查2份健康驴胎儿,均为阴性。表明应用冰冻切片、直接荧光染色检查马鼻肺炎病毒具有较高特异性和检出率。     

尼日利亚流行的嗜皮菌病中对绵山羊刚果嗜皮菌抗体的检查

1980年12月至1981年5月,对Kaduna中央屠宰场屠宰的绵羊93只,山羊107只及一牧场的绵羊30只,均采取血清样本,进行间接血凝反应以检查刚果嗜皮菌的抗体,结果滴度1.16,估计还高于此。其中屠宰羊的阳性率绵羊为28％,山羊为23.2％。牧场的38只羊为阴性。     

猪细小病毒病血清抗体VP2-ELISA检测方法的建立

利用纯化的猪细小病毒VP2蛋白为抗原,建立检测猪细小病毒血清抗体的间接VP2-ELISA。最佳反应条件为:抗原包被浓度300 ng/孔,4℃过夜,待检测血清1:50稀释。与猪细小病毒病阳性血清呈阳性反应,与猪瘟、猪伪狂犬病、猪繁殖与呼吸综合征、猪日本脑炎和猪圆环病毒病等5种疾病的阳性血清均无交叉反应。批间、批内试验变异系数均小于10%。用该方法与Ceditest PPV猪细小病毒抗体检测试剂盒对102份血清进行平行检测和比较,间接VP2-ELISA的敏感性为93.8%,特异性为81.1%,符合率为89.2%。结果表明,猪细小病毒血清抗体间接VP2-ELISA检测方法具有较高的敏感性和特异性,且重复性好,可用于猪细小病毒感染的血清抗体检测。     

乳胶凝集试验检测猪场猪PPV、JBEV和PrV血清抗体

用乳胶凝集试验（LAT）对两个规模化猪场的后备母猪进行猪细小病毒病（PPV）、猪乙型脑炎（JBEV）和猪伪狂犬病（PrV）血清进行流行病学调查，共检查血清样本67头份，结果检出PPV抗体阳性血清28份，阳性率为41.79％；JBEV抗体阳性血清18份，阳性率为26.87％；PrV抗体阳性血清19份，阳性率为28.63％；但两个规模化猪场的PPV、JBEV和PrV阳性率不一致，甲猪场的PPV、JBEV和PrV的阳性率分别为51.2％、30.2％和39.5％，乙猪场为25.0％、20.83％和8.32％。对3种病毒阳性血清进行抗体滴度测定，其抗体滴度在甲猪场均不高于1：16，乙猪场不高于1：8。     

细粒棘球绦虫排泄分泌抗原的研究——绵羊免疫后或感染后的抗体应答及细胞应答

绵羊用六钩蚴排泄分泌抗原(ES)，原头节ES抗原、原头节可溶性粗抗原，绵羊棘球蚴囊液(SHCF)或囊壁抗原免疫后，和攻击感染虫卵后，应用ELISA，酯酶染色法及瑞氏-姬拇萨染色法研究了血清抗体、T、B淋巴细胞、嗜酸性粗细胞及淋巴细胞的应答反应。初步结果表明，绵羊在感染细粒棘球绦虫虫卵后或抗原免疫后、攻击感染后都表现明显的血清抗体应答反应，T淋巴细胞、嗜酸性粒细胞及淋巴细胞数量增加，免疫应答依不同的抗原而具有不同性质。     

我国部分地区牛羊弓形虫血清流行病学调查

为了解我国牛羊弓形虫病流行情况,应用间接血凝试验（IHA）对河南、山东、山西、内蒙古、云南、贵州6省区151份牛血清、50份奶样、490份羊血清进行了弓形虫病血清流行病学调查。结果显示：151份被检牛血清和50份牛奶样品,弓形虫抗体均为阴性。490份羊血清弓形虫抗体总阳性率5.71％,其中母羊、公羊血清阳性率分别为4.03％和9.79％;山羊、绵羊、杂交羊血清阳性率分别为6.58％、4.81％和5.13％;阳性率最高的为公山羊（13.2％）,最低的为母绵羊（2.96％）。28份阳性羊血清中,75％的抗体滴度为1：64,25％的抗体滴度为1：256。1岁后的羊,随年龄增长,血清阳性率升高。     

应用斑点酶联免疫吸附试验快速检测猪弓形虫抗体

将斑点酶联免疫吸附试验(Dot—ELISA)用于检测猪弓形虫抗体,并与常规ELISA和IHA法进行了比较。结果,对102份滴度下降的猪阳性血清检测,弓形虫抗体阳性检出率,Dot—ELISA为66.67％(68/102),常规ELISA为48.04％(49/102),IHA为27.45％(28/102);对675头商品猪血清检测,弓形虫抗体阳性检出率,Dot—ELISA为48.15％(325/675),常规ELISA为41.93％(283/675),IHA为33.80％(228/675);与3种寄生虫(猪囊虫、猪旋毛虫、住肉孢子虫)阳性血清无交叉反应;对123份弓形虫抗体阳性和158份阴性猪血清进行3次重复性试验,结果完全一致。结果证明,该法敏感性高,特异性强,操作简便快速(于接到病料后2h报告结果),便于在基层推广使用。     

应用ELISA间接法检测猪流行性腹泻抗体的研究

应用猪流行性腹泻病毒(PEDV)吉(J)毒株猪胎肠单层细胞培养物,以冻融法制备抗原,建立了酶联免疫吸附试验(ELISA)间接法检测PED抗体的方法。对30头份经直接免疫荧光技术证实的PED病猪群血清测定,97％为阳性;检测32头份无PED猪场猪血清,93％为阴性。对1份PED“华毒株”,1份“川毒株”以及3头份“吉毒株”PED免疫血清测定,均为阳性。对猪传染性胃肠炎血清、猪轮状病毒病血清、疑似猪血球凝集性脑脊髓炎血清、鸡传染性支气管炎血清及猪梭菌性肠炎血清共16头份检测均为阴性,证明PEDV不与TGEV等其它3种冠状病毒血清发生交叉反应。89头份疫区猪血清的区域性试验阳性率为75％(67/89);对82头份屠宰猪血清测定,53％阳性。抗原包被板保存期试验表明,包被板在-20℃可保存2个月。     

马细胞巨化病毒在马群中污染情况的调查——关于补体结合反应抗体的调查

1980年自本所临床健康马群分得一株马细胞巨化病毒(0229株),以此毒株制成补体结合反应(简称补结)抗原,对国内9个省(区)19个马场、部队的3087份马、骡、驴血清作了补结抗体调查。结果:马血清的阳性反应率为74.70％,骡、驴血清的阳性反应率为64.75％。     

四种试剂盒检测猪口蹄疫O型合成肽疫苗抗体的对比试验

使用国产的4种猪口蹄疫病毒VP1结构蛋白抗体ELISA诊断试剂盒(VP1-ELISA)、猪口蹄疫O型液相阻断ELISA检测试剂盒(LB-ELISA)、猪口蹄疫正向间接血凝试剂盒、猪O型口蹄疫病毒ELISA抗体检测试剂盒(O-ELISA)同时检测猪口蹄疫O型合成肽疫苗免疫后的50份血清样品,阳性率分别为98.0%、94.0%、54.0%、90.0%。同时使用农业部规定的3种试剂盒分别检测20份血清样品的抗体滴度发现,VP1-ELISA试剂盒和LB-ELISA试剂盒阳性符合率为95%,平均抗体滴度相差0.7,与IHA试剂盒符合率为55%,平均抗体滴度相差3.8,故LB-ELISA试剂盒可以用来评价合成肽疫苗免疫的抗体,而IHA试剂盒不能用来检测合成肽疫苗免疫的抗体。     

猪瘟间接血凝抗体与猪瘟病毒感染的相关性分析

运用猪瘟间接血凝方法和猪瘟抗原ELISA方法对广西6个规模猪场送检的1614份血清进行猪瘟免疫抗体滴度和猪瘟病毒的检测,观察不同间接血凝抗体与感染猪瘟病毒是否存在一定关系。结果发现在任何一个免疫抗体滴度,都有可能有感染猪瘟病毒,二者无明显相关性,当间接血凝抗体滴度过低(小于1:16)或过高(大于1:512)时猪感染猪瘟病毒的机会相对大一些。     

用间接血凝试验检测猪传染性胸膜肺炎

经戊二醛化－鞣酸化处理的绵羊红细胞用胸膜肺炎嗜血杆菌（ＨＰ）抗原致敏,以间接血凝试验（ＩＨＡ）检测猪传染性胸膜肺炎病血清抗体。致敏红细胞抗原的最佳浓度为１００－１５０μｇ／ｍＬ,超免疫血清的抗体效价达１：５１２－１：１０２４,对人工感染１４ｄ的猪血清阳性检出率达８０％,与猪瘟、猪肺疫、喘气病、猪萎缩性鼻炎阳性血清无效叉反应。     

间接荧光抗体试验诊断马骡伊氏锥虫病的研究

以人工感染伊氏锥虫的小鼠血液涂片为抗原,建立了IFA试验检测马骡伊氏锥虫抗体的方法,并对伊氏锥虫病马、同群马、健康马、非伊氏锥虫病马血清作了检测。伊氏锥虫病马和无症状同群马的抗体阳性率分别为97％(33/34)和12％(18/150);25匹健康马血清伊氏锥虫抗体均为阴性;84份非伊氏锥虫病马血清的IFA试验均为阴性,未出现交叉反应。多数病马发病一周内的血清IFA试验即为阳性。3匹病马血清抗体消长动态观察结果表明,病马于治疗后110天,血清IFA试验仍为阳性。本试验表明,IFA试验检测马骡伊氏锥虫抗体,敏感性高、特异性强,对无症状的感染马也能检出,可用于本病的早期诊断和血清流行病学调查。     

酶标抗体反应诊断旋毛虫病

酶标抗体反应广泛用于医学、工业和农业的许多部门。该反应的原则系统如下:在聚乙烯制的免疫试验反应板的圆孔或小试管中(它们起抗原和抗体的载体作用),先后加入液体抗原、假定存在抗体的被检血清、结合物和底物。结合物乃是酶(辣根过氧化氢酶)标记的抗猪球蛋白抗体,而底物则是0.08%5-氨基水杨酸与0.05%过氧化氢的9:1混合物。构成的抗原抗体结合过程,根据底物被结合物的分解而查明,特征是被染成暗褐色,或通过被检血清的滴度和测定底物的光密度(用光比色计、分光光度计)来确定。