几种黏膜免疫佐剂对鸡小肠IgA分泌细胞的影响

分别在新城疫Ⅳ系弱毒苗中添加黏膜免疫佐剂乳酸杆菌、CpG DNA、重组IL-2、氟化钠和大豆黄酮，经口免疫鸡后，研究十二指肠、空肠、Peyer’s斑单位面积IgA分泌细胞的变化。首先提纯鸡IgA和制备兔抗鸡IgA血清，然后应用免疫组化技术显示鸡小肠IgA分泌细胞。结果表明，在免疫后第3周、第5周乳酸杆菌组比新城疫组（ND）极显著增加各段小肠IgA分泌细胞的数量（P〈0．01）；CpGDNA、重组IL-2和大豆黄酮在整个免疫期内均明显增加鸡小肠黏膜局部IgA分泌细胞数量；NaF对鸡体黏膜局部IgA分泌细胞数量无明显增加。结果表明乳酸杆菌、CpGDNA、重组IL-2和大豆黄酮是有效的口服黏膜免疫佐剂。     

增免散对鸡脾T淋巴细胞CD4^＋和CD8^＋亚群的影响

将300只1日龄雏鸡随机分为中药增免散组、环磷酰胺组、环磷酰胺＋左旋咪唑组、环磷酰胺＋增免散组和正常对照组，6日龄时用鸡新城疫LaSota疫苗点眼滴鼻免疫，14、21、28、35日龄时测定鸡血液NDV抗体效价，脾器官指数，脾组织中CD4^＋、CD8^＋T淋巴细胞浓度和脾细胞凋亡率，观察脾的组织结构变化。结果显示，14、21日龄增免散组抗体水平高于其他各组（P〈0．01）；14、21、28日龄增免散组脾指数高于其他各组，增免散组脾CD4^＋细胞浓度、CD4^＋／CD8^＋比例高于其他各组，差异极显著（P〈0．01）；14、21、28日龄增免散组脾细胞凋亡率低于其他各组，差异极显著（P〈0．01）；14、21日龄时，增免散组脾白髓和红髓内网状细胞和中淋巴细胞较多，脾小体比对照组略有增加。表明，中药增免散不仅能促进鸡脾的发育，增高脾组织中CD4^＋／CD8^＋比例，而且对环磷酰胺的免疫抑制有一定拮抗作用。     

不同剂量的乳猪壮对仔猪小肠黏膜结构影响的观察

应用组织学和组织化学方法研究庆大霉素和不同剂量的“乳猪壮”对仔猪小肠黏膜结构的影响.试验选用60头刚出生的0日龄的杜×大×长三元杂交健康仔猪,随机分6个处理组,每个处理组设10头(雌雄均有),分别饲喂生理盐水、庆大霉素和4种不同剂量的“乳猪壮”,试验期为7d.结果显示,4 mL“乳猪壮”显著促进仔猪生长,对仔猪小肠黏膜结构及仔猪体重增长方面的影响表现最佳,肠绒毛长度最长、隐窝深度最深、V/C比值最大.因此,4 mL“乳猪壮”对改善和增强仔猪小肠的消化吸收功能,提高仔猪体重的效果最好.     

仔猪小肠黏膜淋巴细胞的分离及表型鉴定

对小肠不同解剖位点分离得到的淋巴细胞进行表型鉴定,将有助于我们掌握猪黏膜免疫系统区分共生菌和致病菌的机理。我们的研究描述了分离空肠和回肠的上皮内淋巴细胞(IELs)和黏膜固有层淋巴细胞(LPLs)以及派伊氏结(PP)淋巴细胞的方法,并对表达CD3、CD4、CD8的淋巴细胞进行三色流式细胞分析。研究结果表明,分离的淋巴细胞活性高达90%以上。IELs和LPLs大部分是CD3+T细胞(67.90%⁸2.44%),少数是CD3-CD4-CD8+NK细胞(<5%)。IELs以CD4-CD8+细胞毒性T细胞(CTLs)占主导(43.61%82.44%),少数是CD3-CD4-CD8+NK细胞(<5%)。IELs以CD4-CD8+细胞毒性T细胞(CTLs)占主导(43.61%⁴8.49%),CD4+CD8-辅助性T细胞(TH)细胞只占10%左右。相反,LPLs中TH细胞占多数,为40%左右,而CTLs细胞占了16.97%48.49%),CD4+CD8-辅助性T细胞(TH)细胞只占10%左右。相反,LPLs中TH细胞占多数,为40%左右,而CTLs细胞占了16.97%¹9.24%。由于解剖位点不同,淋巴细胞的表型分布也不相同,最明显的是空肠和回肠PP结的淋巴细胞。空肠PP结CD3+T细胞的数量(54.08%)明显要多于回肠的PP结(15.26%)。小肠淋巴细胞中也可检测到CD4+CD8+双阳性细胞(DP)以及CD4-CD8-双阴性细胞(主要为γδT细胞),其中7.85%19.24%。由于解剖位点不同,淋巴细胞的表型分布也不相同,最明显的是空肠和回肠PP结的淋巴细胞。空肠PP结CD3+T细胞的数量(54.08%)明显要多于回肠的PP结(15.26%)。小肠淋巴细胞中也可检测到CD4+CD8+双阳性细胞(DP)以及CD4-CD8-双阴性细胞(主要为γδT细胞),其中7.85%²1.50%的肠黏膜淋巴细胞表达CD4-CD8-,但只有0.51%21.50%的肠黏膜淋巴细胞表达CD4-CD8-,但只有0.51%².06%的细胞表达CD4+CD8+。IELs表达CD4-CD8-的细胞要比LPLs多。本试验为研究黏膜免疫反应提供了细胞分离技术以及相关基础知识。     

新生犊牛小肠黏膜结构的早期发育及上皮内淋巴细胞和杯状细胞的数量变化

应用组织学和组织化学方法研究了1日龄和20日龄新生犊牛小肠黏膜结构的早期发育及部分黏膜免疫相关细胞的分布与数量变化规律。结果显示，从1日龄到20日龄，小肠绒毛变短，尤其十二指肠的绒毛长度约缩短了61．58％（P〈0．05），绒毛长度与隐窝深度比值（V／C比值）减小了59．04％～91．32％（P〈0．05）；而黏膜和肌层厚度分别增加了8．66％～41．28％和36．22％～299．10％。小肠各段上皮内淋巴细胞和杯状细胞数量随年龄增长而逐渐增多（P〈0．05），20日龄比1日龄分别增加了78．80％～163．05％和28．23％～101．46％；但比较同一年龄的小肠不同肠段，从十二指肠至回肠，上皮内淋巴细胞的数量逐渐减少，而杯状细胞的数量则呈增多趋势。     

肉犊牛小肠黏膜免疫相关细胞的数量变化研究

分别选择1、4、6月龄各4头利杂犊牛的十二指肠、空肠、回肠,利用组织化学法和图像分析法研究犊牛小肠的上皮内淋巴细胞、杯状细胞和肥大细胞的数量变化.结果显示在同一月龄犊牛的小肠的上皮内淋巴细胞数量由十二指肠向空肠、回肠逐渐减少,而杯状细胞的数量逐渐增加,肥大细胞的密度逐渐降低.在1、6月龄犊牛十二指肠、空肠、回肠的上皮内淋巴细胞数量之间差异极显著(P＜0.01);4月龄十二指肠的上皮内淋巴细胞数量最多(P＜0.01).在1月龄犊牛十二指肠、空肠、回肠杯状细胞的数量差异极显著(P＜0.01);4和6月龄犊牛十二指肠和空肠之间的杯状细胞的数量差异不显著(P＞0.05),但二者与犊牛回肠杯状细胞的数量差异极显著(P＜0.01).各年龄犊牛十二指肠、空肠、回肠的肥大细胞密度差异极显著(P＜0.01),4月龄时犊牛小肠的肥大细胞密度最低.结果提示犊牛的黏膜免疫水平可能与其机体的发育相一致.     

肉苁蓉多糖对鸡免疫ND苗后血液中T淋巴细胞及IFN-γ活性的影响

试验观察了肉苁蓉多糖对肉鸡免疫新城疫苗后T淋巴细胞活性及IFN-γ含量的影响.结果:肉苁蓉多糖使用剂量5、10、20mg,/只时,免疫后15d时,T淋巴细胞转化率分别为1.20±0.11、1.30±0.13、1.79±0.32,对照组为1.22±0.29;免疫后20d时,外周血中IFN-γ含量分别为23.23±6.13、25.95±1.13、29.95±2.23pg/ml,对照组为20.89±5.97pg/mL;肉苁蓉多糖使用剂量10、20mg/只时,试验组T淋巴细胞活性及IFN-γ含量显著或极显著高于对照组((P＜0.05或0.01).表明肉苁蓉多糖可能通过提高T细胞活性及IFN-y含量来增强肉鸡免疫功能.     

重组ChIFN-γ增强鸡球虫细胞免疫作用的研究

初步探讨了重组鸡γ干扰素(rChIFN-γ)对鸡体抗球虫细胞免疫的增强效果,分别给7日龄和14日龄雏鸡邓E.tenella孢子化卵囊免疫并同时肌肉注射500U rChIFN-γ后,于21日龄以同源E.tenella攻虫.试验结果显示:rChIFN-γ处理组的试验雏鸡脾脏和胸腺免疫器官指数显著高于免疫对照组(P＜0.05),在21日龄时的淋巴细胞转化水平(1.14)也显著高于卵囊免疫对照组(0.95)(P＜0.05);ABC染色结果表明rChIFN-γ可以显著增加试验雏鸡脾脏和盲肠的CD4 、CD8 T淋巴细胞数量;Griess(NO2-)结果表明:rChIFN-γ处理组在21日龄的NO2-含量(2.77ug/mL)显著高于免疫对照组(2.14 ug/mL)(P＜0.05);溶菌酶(LSZ)试验表明,21日龄时rChIFN-γ处理组的LSZ含量(22.80ug/mL)显著高于免疫对照组(19.79 ug/mL)(P＜0.05).结果提示rChIFN-γ具有抗球虫免疫的增强效果,能显著提高鸡体抗球虫保护性细胞免疫水平.     

不同月龄山羊小肠黏膜免疫相关细胞的数量变化

为揭示不同发育阶段山羊小肠黏膜免疫特点的内在规律，本试验采用组织学和组织化学方法，对0．5、2和12月龄山羊小肠不同肠段的上皮内淋巴细胞、杯状细胞和肥大细胞的分布和数量变化进行了比较研究。结果显示：随着年龄增长，小肠各段上皮内淋巴细胞和肥大细胞的数量逐步增多（P〈0．05），而杯状细胞却逐渐减少（P〈0．05）。上皮内淋巴细胞数从十二指肠至回肠逐渐减少，0．5月龄的回肠上皮内淋巴细胞数仅是十二指肠和空肠的84．45％和98．14％（P〈0．05），肥大细胞的分布规律与上皮内淋巴细胞相似；相反，杯状细胞数从十二指肠至回肠逐渐增多。以上结果提示，在山羊小肠的早期发育中，杯状细胞起着重要的黏膜屏障功能，随着肠道黏膜免疫系统的发育，上皮内淋巴细胞和肥大细胞的黏膜防御作用进一步增强。     

细胞因子类佐剂在黏膜免疫中的作用

黏膜免疫和黏膜疫苗佐剂的研究是近年来免疫学研究的一个重要方面.由于细胞因子在免疫应答的产生和调节中具有重要作用,可作为免疫佐剂增强疫苗的免疫效果,所以,细胞因子在黏膜佐剂研究中引起了人们广泛的兴趣与关注.文章主要简述黏膜免疫应答的调节及细胞因子类佐剂在黏膜免疫的研究与应用.     

细胞因子类佐剂在黏膜免疫中的作用

黏膜免疫和黏膜疫苗佐剂的研究是近年来免疫学研究的一个重要方面。由于细胞因子在免疫应答的产生和调节中具有重要作用，可作为免疫佐剂增强疫苗的免疫效果，所以，细胞因子在黏膜佐剂研究中引起了人们广泛的兴趣与关注。文章主要简述黏膜免疫应答的调节及细胞因子类佐剂在黏膜免疫的研究与应用。     

黏膜免疫佐剂的研究进展

黏膜免疫在机体抵抗病原入侵时发挥着重要的作用，疫苗通过黏膜免疫可以引起局部和全身的免疫应答。但是疫苗经过消化道黏膜时常受到消化液的降解，而且常常会引起免疫耐受，为了克服这些困难，人们设计了大量的黏膜免疫佐剂以增强机体对抗原的黏膜免疫力和全身的免疫应答水平。作者就近年来黏膜免疫佐剂的研究进展作一综述。     

清凉冲剂对鸡肠黏膜IgA+的动态影响

农大3号1日龄公雏300只，随机分为3组，每组100只。试验Ⅰ、Ⅱ组分别给予清凉冲剂Ⅰ（石膏、藿香、苍术、黄柏按等比例）和清凉，中剂Ⅱ（苍术：黄柏：石膏：藿香=1：1：0．5：1），按饲喂日粮0．1％添加，饮水投药。另一组为对照组。于7、21、35、49日龄剖杀，从十二指肠、空肠、回肠分别采取2cm的肠段，利用免疫组化方法测定肠道中IgA^＋平均阳性表达率。结果表明：试验组肠黏膜中IgA^＋平均阳性表达率均随日龄增加而上升，49日龄时最为明显，其中十二指肠、空肠中IgA含量，试验Ⅱ组高于试验Ⅰ组；回肠中IgA含量，试验Ⅰ组比试验Ⅱ组高，与对照组相比存在显著（P〈0．05）或极显著（P〈0．01）差异。表明清凉冲剂可以提高鸡的黏膜免疫指标IgA的含量。     

黏膜免疫佐剂及免疫途径研究进展

黏膜是病原体入侵的主要门户,黏膜表面有高度集中的淋巴组织,一个黏膜部位的免疫反应可以诱发所有黏膜效应组织免疫反应的出现.黏膜免疫还可以诱导全身免疫应答,是目前疫苗研究的新方向,但黏膜免疫佐剂及免疫途径的发展制约着黏膜免疫的效果.文章对黏膜免疫佐剂及其途径进行了综述.     

3种饲料添加剂对肉鸡小肠形态结构的影响

将32只1日龄健康AA肉鸡随机分为4个处理组：A组（对照组，基础日粮）、B组（抗生素组，基础日粮＋硫酸抗敌素100mg／kg）、C组（中草药组，基础日粮＋幼康宝500mg／kg）和D组（丁酸钠组，基础日粮＋丁酸钠500mg／kg）。试验7周后，采用组织学技术研究肉鸡小肠黏膜结构的形态及其变化。结果显示：（1）各试验组小肠的黏膜结构都比对照组完整；（2）各试验组的小肠各段绒毛高度、V／C值、黏膜厚度及肌层厚度均高于对照组；（3）对照组V／C值由十二指肠向回肠逐渐降低，而各试验组V／C值，十二指肠的最大，回肠的次之，空肠的最小。结论：3种添加剂均可不同程度地改善肉鸡小肠黏膜结构，并且丁酸钠和幼康宝在一定程度上具有替代硫酸抗敌素的可行性。     

糖萜素对固始鸡小肠黏膜结构的影响

本研究旨在探讨饲粮中添加不同水平糖萜素对固始鸡小肠黏膜结构的影响.将300只固始鸡公雏随机分成5组:对照组(饲喂基础饲粮)、300 mg/kg糖萜素组、500 mg/kg糖萜素组、700 mg/kg糖萜素组和金霉素(200 mg/kg)组,每组3个重复,每个重复20只鸡.在21、35、49日龄时,分别从各组随机选取6只...     

丁酸钠对肉鸡小肠黏膜免疫相关细胞的影响

本试验通过日粮中添加丁酸钠研究其对肉鸡小肠黏膜免疫相关细胞的影响.将32只1日龄健康AA肉鸡随机分为4个处理组:A组(对照组:基础日粮)、B组(丁酸钠组:基础日粮 500mg/kg丁酸钠)、C组(丁酸钠 芽孢杆菌组:基础日粮 100 mg/kg丁酸钠 200 mg/kg芽孢杆菌)和D组(丁酸钠 酶制剂组:基础日粮 100 mg/kg丁酸钠 500 mg/kg酶制剂).试验7周后,采用组织学技术研究肉鸡小肠黏膜免疫相关细胞的分布变化.结果显示:(1)与对照组比较,小肠肥大细胞、上皮内淋巴细胞及杯状细胞的形态无明显变化,肥大细胞多存在于肠腺周围和肠绒毛固有层,(2)各试验组的小肠肥大细胞、上皮内淋巴细胞及杯状细胞数均显著高于对照组(P<0.05);(3)各试验组和对照组小肠肥大细胞和上皮内淋巴细胞数均从前向后逐渐减少,十二指肠的肥大细胞最多,空肠的次之,回肠的较少;杯状细胞数则与之相反.由此可知,3种添加剂可不同程度地改善肉鸡小肠黏膜结构,且将丁酸钠分别与芽孢杆菌和酶制剂混合饲喂,效果在一定程度上好于单独饲喂丁酸钠.     

益生菌对肠道黏膜免疫的影响

益生菌作为一类以活菌为主的新型菌制剂,能在肠道内定殖,维护肠道菌群平衡,并刺激肠黏膜免疫组织,对肠道黏膜免疫有重要的影响。益生菌可直接作用于宿主的免疫系统,刺激胸腺、脾脏和法氏囊等免疫器官的发育,促进巨噬细胞活力或发挥佐剂作用,活化肠黏膜内相关淋巴组织,使免疫球蛋白A分泌增加,使免疫球蛋白A生物合成增加,提高消化道黏膜免疫功能。