猴头菌浸膏多糖及蛋白质含量测定方法的比较

为了更好地控制猴头菌浸膏的质量,试验分别采用3,5-二硝基水杨酸法、蒽酮-硫酸法和苯酚-硫酸法测定猴头菌浸膏中多糖的含量,分别采用福林酚法和考马斯亮蓝法测定猴头菌浸膏中蛋白质的含量,从中筛选出适合猴头菌浸膏的多糖及蛋白质含量的测定方法。结果表明:用蒽酮-硫酸法测定多糖含量时,结果高于其他两种方法,且稳定性、精密度、加标回收率、重复性的相对标准偏差(RSD)均小于5. 00%;用福林酚法测定蛋白质含量时,结果高于考马斯亮蓝法,且稳定性、精密度、重复性及加标回收率的RSD均小于5. 00%。说明蒽酮-硫酸法操作简便、稳定可行,是最适合测定猴头菌浸膏中多糖含量的方法;福林酚法操作简便、稳定可行,是最适合测定猴头菌浸膏中蛋白质含量的方法。     

贞苓增免散的质量标准研究

通过对贞苓增免散进行定性鉴别、定量分析,建立该制剂的质量控制方法。本研究采用薄层色谱法对女贞子、茯苓进行定性鉴别;采用高效液相色谱法测定贞苓增免散中特女贞苷的含量,条件为:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂、甲醇-水(40:60)为流动相、检测波长224 nm、流速1.0 mL/min、柱温室温、进样量10μL;同时采用硫酸-蒽酮法测定贞苓增免散中茯苓多糖的含量,以葡萄糖为对照品,硫酸-蒽酮溶液为显色剂,在620 nm处测定OD值。结果显示:薄层色谱斑点清晰、无阴性干扰、专属性强、分离度高,能有效鉴别女贞子、茯苓;加样回收试验测得特女贞苷与茯苓多糖的含量分别在0.03~0.30 g/L、0.052~0.100 g/L呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为98.28%、99.20%,RSD分别为2.17%、2.22%;高效液相法测得贞苓增免散中特女贞苷含量为12.3 mg/g;硫酸-蒽酮法测得0.1 g/L中贞苓增免散中茯苓多糖含量为0.077 8 mg。本研究建立的方法简便易行、稳定性、重复性好,可有效控制贞苓增免散的质量。     

蒽酮-硫酸法测定酵母多糖的含量

用蒽酮-硫酸法测定多糖含量的方法被各种测糖的专著收载，而文献报道的酵母多糖含量的测定一般采用的都是苯酚显色法。作者旨在采用蒽酮 硫酸法测定酵母制品多糖的含量，为酵母多糖含量的测定提供一种新方法。结果，摸索出一套适合酵母多糖含量测定的蒽酮 硫酸比色法，采用本方法对酵母培养液进行测定，得到了准确的多糖含量，且本方法具有简单、易掌握、快速等优点，对生产上检测多糖含量具有实用价值。     

蒽酮-硫酸比色法检测多糖条件的优化

本研究通过单因素实验和L9(33)正交实验优化蒽酮-硫酸比色法检测多糖含量的条件,研究反应温度、反应时间、蒽酮-硫酸液的体积对吸光度值的影响。结果表明,蒽酮-硫酸比色法检测的糖含量的最优条件为蒽酮-硫酸2 mL,于100℃反应10 min。验证实验结果表明,总标糖获得的标准曲线方程A=0.005W-0.0162,r=0.9998,优于葡萄糖标准曲线方程。在620 nm下测定,能得到较高的吸光度值,重现性好。     

超微粉碎技术对黄芪多糖、淫羊藿多糖溶出的影响

用蒽酮-硫酸法测定了黄芪，淫羊藿普通粉和超微粉对其多糖溶出量的影响，结果表明，在相同的条件下，超微粉中黄芪多糖，淫羊藿多糖提取量较普通粗粉分别提高了117.13%和315.15%。     

不同采收期对甘草中甘草苷、甘草酸及甘草多糖含量的影响

目的:建立测定甘草中甘草苷、甘草酸及甘草多糖的方法,并比较不同采收时期甘草中甘草苷、甘草酸及甘草多糖的差异。方法:采用HPLC法测定甘草中甘草苷和甘草酸含量,色谱柱为Kromasil C_(18)柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为乙腈-0.05%磷酸溶液,梯度洗脱;体积流量为1 m L/min;检测波长为252 nm、276 nm;柱温为28℃;进样量为10μL,并采用紫外吸收光谱法测定甘草中甘草多糖。结果:甘草苷和甘草酸获得良好分离,在0.116 8-1.168 0μg及0.039 3-0.235 0μg与峰面积积分值呈良好线性关系,平均加样回收率分别为98.45%、98.34%,RSD分别为1.52%、1.78%,重现性试验RSD分别为0.35%、0.59%。甘草多糖分离良好,其重现性、稳定性亦良好,回收率较高。结论:本方法操作简便、结果准确、精密度好、分离度良好,为甘草药材的合理应用及其质量控制提供了依据。     

复方中药芪苓制剂多糖超声提取工艺研究

研究超声波辅助法提取中药芪苓制剂多糖的工艺。通过正交试验设计L9（3^4）提取多糖,以蒽酮-硫酸法测定多糖含量,得出优化工艺的条件为：提取时间60min,提取温度80℃,料液比1：10,超声功率300W。超声波辅助提取芪苓制剂多糖,能耗低,用时短,多糖得率5．96％,是传统方法的3倍,可以作为提取芪苓制剂多糖或其它中药多糖的首选方法。     

米糠多糖的微波提取工艺优化

为了充分利用米糠多糖资源,本试验采用苯酚-硫酸法测定其多糖含量。比较了不同方法提取米糠多糖的效果,筛选出微波提取米糠多糖为最佳方法。在单因素试验设计基础上,通过正交设计优化了提取工艺。验结果表明最佳工艺条件为:微波温度80℃,料液比1:25 g/mL,微波时间7 min,微波功率400 W,此条件下的提取率达1.5733%;提取到的米糠多糖回收率均在98%以上,微波提取重复性好、稳定性高。     

恩诺沙星纳米乳的含量测定及稳定性考察

利用高效液相色谱法(HPLC)建立了恩诺沙星纳米乳制剂的含量测定方法,通过强光照射试验及加速试验考察了制剂的稳定性。结果表明:建立的恩诺沙星纳米乳含量测定的HPLC法标准曲线方程为:A=637 343C+60 527(r=0.999 8),恩诺沙星在0.1~10μg/m L浓度范围内线性关系良好;恩诺沙星纳米乳的保留时间为9.09 min;平均回收率为(99.72±0.88)%,RSD为0.88%;日内精密度的RSD为2.24%,日间精密度的RSD为3.31%;利用建立的HPLC法,测得恩诺沙星纳米乳的含量为98.8%;恩诺沙星纳米乳的稳定性好,但光照对其有一定影响。结果说明:方法的专属性好,回收率和精密度均符合要求,为恩诺沙星纳米乳在兽医临床中的应用建立了质量控制标准。     

氯甲酚纳米乳消毒剂含量测定方法的建立及稳定性考察

为了测定氯甲酚纳米乳消毒剂(CND)的含量和考察其稳定性,试验采用紫外-可见分光光度仪建立了CND含量的测定方法,并利用该方法和加速试验研究了其稳定性能。结果表明:建立的CND含量测定的标准曲线方程为Y=0.010 2 X+0.005 2,r=0.999 8,氯甲酚在20~90μg/m L检测浓度范围内线性关系良好;精密度试验的相对标准偏差(RSD)为1.07%;加样回收率试验的平均回收率为(100.27±1.46)%,RSD为1.46%;CND在37℃条件下贮存90天时,氯甲酚平均含量的下降率为6.83%。说明该消毒剂含量测定方法的线性关系良好,精密度和准确度高,消毒剂稳定性好,贮存有效期可定为2年。     

白僵蚕多糖的含量测定方法

为推进白僵蚕的药用开发,研究了白僵蚕多糖含量的测定方法.结果将白僵蚕粉过160目筛,在超声波处理50 min后于100℃下水回流60 min,重复提取2次,可有效地提取白僵蚕多糖.以蒽酮-硫酸试剂显色,用紫外分光光度仪于620 nm波长下比色,可精确、稳定、快速地测定出白僵蚕中多糖含量.     

吡喹酮注射液的含量测定及稳定性研究

本试验旨在建立吡喹酮注射液中吡喹酮含量的测定方法,并考察其稳定性。采用高效液相色谱(HPLC)法测定吡喹酮注射液中吡喹酮含量。色谱条件:Diamonsil C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),柱温25℃,流动相为乙腈-水(60:40),流速1.0 mL/min,检测波长210 nm,进样量20μL。通过影响因素试验、加速试验及长期稳定性试验考察吡喹酮注射液的稳定性。吡喹酮在6.037~90.555μg/mL范围内与峰面积呈良好的线性关系(R²=0.9993),平均加样回收率为99.24%,RSD为0.77%,吡喹酮注射液的平均含量为标示量的100.3%。在影响因素试验10 d后吡喹酮注射液对高温(60℃)稳定,但对强光照射(4500 lx±500 lx)有一定的敏感性。在加速试验6个月及长期稳定性试验24个月后,吡喹酮注射液的性状、含量等指标均无明显变化。试验结果表明,所建立的含量测定方法简便、可靠、灵敏、重复性好,可用于吡喹酮注射液的质量控制;吡喹酮注射液在室温、避光条件下存放稳定,有效期暂定为2年。     

黑曲霉发酵茯苓添加剂的工艺优化

研究黑曲霉发酵茯苓饲料添加剂的最佳发酵工艺。采用单因素和响应面相结合的试验设计,利用蒽酮-浓硫酸法测定发酵后茯苓多糖含量,以茯苓多糖含量为指标,选择最佳的发酵工艺。结果表明:最佳发酵工艺为含水量52%,发酵时间7.4 d,接种量4%,发酵温度32℃,初始pH 5.5。经5次验证试验,测得茯苓多糖平均值为90.36%,与预测值91.00%接近,此工艺条件下相较于未发酵茯苓中15.62%的茯苓多糖,发酵后茯苓多糖增加了4.78倍。结果提示,此发酵工艺操作简单,能显著提高多糖含量,可为发酵中草药饲料添加剂替代抗生素类添加剂提供参考。     

刺五加多糖含量测定方法的建立

通过建立刺五加药用植物多糖含量的测定方法,为刺五加质量控制和资源开发提供科学依据。以葡萄糖为对照品,采用苯酚—硫酸法测定刺五加药用植物多糖的含量。结果表明,葡萄糖标准曲线为A=0.0133C-0.0025,R2=0.997 5,刺五加多糖含量为2.40%。该方法精密度良好,反应产物在2 h内吸光值稳定,平均回收率为99.1%。     

HPLC法测定植物源杀螨浴剂(外用)中氧化苦参碱的含量

[目的]建立HPLC法测定植物源杀螨浴剂(外用)中的氧化苦参碱含量。[方法]采用Waters XBridge C18(4.6mm×150mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇-0.05mol/L磷酸二氢钠(含0.5%高氯酸钠)(15∶85),流速为1.0mL/min,检测波长为220nm,进样量为10μL,柱温为30℃。[结果]氧化苦参碱质量浓度在0.020592~0.45747mg/mL(Y=5.72e+006X+1.13e+004,R^2=0.9998)与峰面积积分值呈良好的线性关系;精密度试验RSD为0.3%(n=6);重复性试验RSD为1.0%(n=6);回收率试验RSD为1.6%。[结论]该法测定氧化苦参碱含量简便、快捷,稳定性好,重复性高,可用于控制植物源杀螨浴剂(外用)的质量。     

无乳链球菌荚膜多糖的粗提及多糖含量测定条件优化

为提取无乳链球菌荚膜多糖,并对苯酚-硫酸法测定多糖含量条件进行优化。离心收集发酵上清液,超滤浓缩,经800mL/L乙醇沉淀提取无乳链球菌荚膜多糖;采用单因素试验对苯酚硫酸法测定条件进行优化,并对测定方法的可靠性进行验证。结果表明,从1L发酵液中提取到含量为38.51%的荚膜多糖0.36g;测定的最佳条件为:2mL样品液中,加入1 mL 50 mL/L的苯酚,5 mL浓硫酸,混匀后80℃作用20min,在1.5h内测定485nm处的光密度。在该条件下,平均加样回收率为99.96%,相对标准偏差为0.40%。说明从无乳链球菌发酵上清液中成功提取到荚膜多糖,建立了苯酚硫酸法测定荚膜多糖的最优条件。     

超微粉碎技术对芪苓制剂总多糖溶出的影响

将芪苓制剂通过加工制成普通粉（65—100目）、超微粉（300目）,以水提醇沉法提取芪苓制剂普通粉和超微粉中的总多糖,采用蒽酮-硫酸法对其粗多糖进行了含量测定,研究超微粉碎技术对芪苓制剂总多糖溶出度的影响。结果如下：在相同条件下,100g芪苓制剂普通粉中所提粗多糖为1．2608g,芪苓制剂超微粉中所提粗多糖为6．0030g,上述粗多糖样品中多糖的含量分别为44．71％、75．03％;即100g芪苓制剂普通粉中总多糖含量为0．5637g,超微粉中多糖的含量为4．5040g。上述结果表明,超微粉碎技术能显著提高芪苓制剂总多糖的溶出度。     

中药复方粗多糖提取参数研究

本试验采用四因素三水平正交设计研究了提取温度（A）、料液比（B）、提取时间（C）及提取次数（D）对中药复方粗多糖得率的影响。采用苯酚-硫酸法测定多糖含量。结果最佳提取条件参数为A3B1C3D3,即浸提温度80℃,料液比1∶10,浸提时间3 h,提取次数3次。中药复方多糖提取物GCPS中多糖含量为43.45%。苯酚-硫酸法是目前测定多糖含量较可靠的传统方法之一,本法简单快速,结果稳定可靠,灵敏度高,重现性好。     

蒽酮-硫酸比色法测定天然鸽乳中可利用糖含量的研究

采用蒽酮-硫酸比色法测定玉米中的可利用糖含量以确定试验测定的最佳条件,并以此条件为对照测定天然鸽乳中可利用糖含量.玉米及天然鸽乳可利用糖溶液经乙醚去脂,高峰氏糖化酶水解,乙醇提取,饱和乙酸铅脱色后制得.结果表明,葡萄糖标准溶液的测定量在0.1～0.6 mg/mL的浓度范围内有良好的线性关系,其回归方程为y=1.6771x 0.0737,相关系数R=0.9987.测定不同的天然鸽乳样品,试验精密度高,重复性好,其可利用糖含量,0～3日龄天然鸽乳为7.45%～7.64%,4～6日龄天然鸽乳为32.08～60.28 %.     

桃色欧文氏菌Cp2胞外多糖测定方法及培养条件的优化

【目的】明确紫花苜蓿(Medicago sativa)种带桃色欧文氏菌(Erwinia persicina)Cp2胞外多糖(exopolysaccharides,EPS)的含量测定方法及其最佳培养条件,获得更高产量的胞外多糖。【方法】采用单因素试验优化Cp2 EPS的测定方法和培养条件。【结果】优化后的苯酚硫酸法测定条件为最大吸收波长490 nm、显色时间20 min、显色温度100℃、苯酚质量分数5%、苯酚用量0.80 mL、浓硫酸用量5.00 mL;优化后的最适培养基为大豆蛋白胨20.00 g、K₂HPO₄ 1.50 g、MgSO₄·7H₂O 1.50 g、淀粉25.00 g、蒸馏水1.00 L,pH值7.0～7.2,121℃灭菌15 min;富集培养温度30℃。【结论】苯酚硫酸法较蒽酮硫酸法更适于测定Cp2 EPS。采用优化后的培养条件桃色欧文氏菌Cp2 EPS产量较优化前增加了365.91%。同时本研究结果将为桃色欧文氏菌Cp2胞外多糖的功能研究及产品开发提供理论基础。