柱前衍生RP-HPLC法测定犀牛角中氨基酸的含量

[目的]建立柱前衍生法测定犀牛角中氨基酸含量的方法。[方法]犀牛角以酸水解法制备水解氨基酸样品溶液,采用柱前衍生-液相色谱法(RP-HPLC)法测定氨基酸含量。色谱条件为:色谱柱为Waters Nova-Pak C18柱(150 mm×3.9 mm,5μm),以乙腈-缓冲盐为流动相进行梯度洗脱,流速为1.0 ml/min,紫外检测器检测波长为248 nm,柱温为37℃。[结果]17种氨基酸在0.003 4～0.191mg/ml范围内有良好的线性关系(r0.999 4),平均回收率(n=6)为97.8%。[结论]犀牛角中含有大量的氨基酸,其总氨基酸含量高达41.3%。该方法对研究犀牛角的药用价值与寻找犀牛角药用替代物有积极意义。     

氨基酸分析中的柱前衍生技术

介绍了以邻苯二甲醛、氯甲酸芴甲酯、异硫氰酸苯酯、丹酰氯、二甲胺偶氮苯磺酰氯和6-氨基喹啉-N-羟基琥珀酰亚胺基氨基甲酸酯等作为衍生试剂的柱前衍生与反相高效液相色谱法相结合分析氨基酸的原理及特点。     

龙牙百合花氨基酸含量的柱前衍生OPA-HPLC法测定

[目的]测定龙牙百合花中的氨基酸含量。[方法]以邻苯二甲醛（OPA）与9-芴基羰酰氯（FMOC—C1）作衍生剂,利用VWD检测器可变波长检测程序,采用柱前衍生OPA—HPLC法测定邵阳龙牙百合花中的17种氨基酸含量。[结果]邵阳龙牙百合花中含有苏氨酸、丝氨酸、脯氨酸、蛋氨酸、谷氨酸、甘氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、天门冬氨酸、丙氨酸、组氨酸、半胱氨酸、异亮氨酸等17种氨基酸。其中必需氨基酸的含量为49．7mg／g,占氨基酸总量的31．20％;儿童必需氨基酸的含量为30．6mg／g,占氨基酸总量的19．20％;含量最高的是谷氨酸（28．7mg／g,占氨基酸总量的18．03％）;其次是精氨酸（27．5mg／g,占氨基酸总量的17．30％）。[结论]该方法操作简便,灵敏度高,结果准确,可靠。龙牙百合花中氨基酸的种类齐全,含量丰富,具有很高的开发利用价值。     

OPA柱前衍生法测定饲料中的氨基酸含量

在ＫＮＡＵＥＲ－８３０型氨基酸全自动分析仪上ＯＰＡ柱前衍生法能快速,准确地测定饲料中的氨基酸含量,色谱条件为：流量１ｍｌ／ｍｉｎ,反应时间５ｍｉｎ柱温４５℃,洗脱液为醋酸钠和甲醇混合液,采用梯度洗脱,饲料中氨基酸含量的变异系数在０．３７％～７．０３％之间,氨基酸回收率除蛋氨酸外,其余都在９５％～１０５％之间,氨基酸含量与峰面积的相关系数在０．９３２９～０．９９９７之间。     

柱前衍生HPLC测定阿胶中17种水解氨基酸含量

目的:建立柱前衍生高效液相色谱法(HPLC)同时测定阿胶中17种水解氨基酸含量的方法。方法用6 mol/L盐酸溶液水解阿胶中的氨基酸,以异硫氰酸苯酯为柱前衍生试剂;用Hypersil BDS C18柱(200 mm×4.6 mm,5μm),梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,检测波长为254 nm,柱温为30℃。结果 17种氨基酸在60 min内均可得到很好的分离,回收率为97.4%～100.1%,RSD为1.6%～3.4%。结论建立的方法可靠,可用于阿胶中17种水解氨基酸的含量测定。     

柱前衍生高效液相色谱法测定糜子发芽过程中氨基酸变化

采用柱前衍生高效液相色谱法测定了糜子发芽过程中氨基酸的变化规律。以6-氨基喹啉基-N-羟基琥珀酰亚氨基甲酸酯(AQC)为衍生试剂,以磷酸盐缓冲液为流动相A,乙腈/水(6∶4)为流动相B进行梯度洗脱;在柱温37℃条件下用紫外检测器在波长248 nm下进行测定。结果表明,糜子中谷氨酸(Glu)含量最高,其次是亮氨酸(Leu)、丙氨酸(Ala);发芽时间为48 h时,总氨基酸含量和必需氨基酸含量达到了最大;在发芽过程中氨基酸含量增加30%以上的有甘氨酸(Gly)、组氨酸(His)、苏氨酸(Thr)、酪氨酸(Tyr),其中,组氨酸(His)的增幅最大,为51.36%;天冬氨酸(Asp)、丝氨酸(Ser)、精氨酸(Arg)、丙氨酸(Ala)在发芽过程中含量变化不显著。     

OPA柱前衍生法测定饲料中的氨基酸含量

在ＫＮＡＵＥＲ－８３０型氨基酸全自动分析仪上,ＯＰＡ柱前衍生法能快速、准确地测定饲料中的氨基酸含量．色谱条件为：流量１ｍｌ／ｍｉｎ,反应时间５ｍｉｎ,柱温４５℃,洗脱液为醋酸钠和甲醇混合液,采用梯度洗脱．饲料中氨基酸含量的变异系数在０．３７％～７．０３％之间．氨基酸回收率除蛋氨酸外,其余都在９５％～１０５％之间．氨基酸含量与峰面积的相关系数在０．９３２９～０．９９９７之间．     

基于柱前衍生高效液相色谱法的食药用虫草菌丝体中氨基酸含量的测定

以3种食药用虫草资源(江西虫草、戴氏虫草和古尼虫草)为研究材料,首次利用异硫氰酸苯酯柱前衍生高效液相色谱法分析其菌丝体中氨基酸成分。结果表明,参试的3种虫草的菌丝体均含有较高的氨基酸总量,尤其是江西虫草菌丝体的氨基酸总量高达19.86%。在所测定的17种氨基酸中,这3种虫草富含谷氨酸、丝氨酸和苏氨酸,其含量均超过1%,其中江西虫草菌丝体中谷氨酸的含量高达2.38%。总之,这3种食药用虫草菌丝体,尤其是江西虫草菌丝体,其氨基酸种类齐全,含量丰富,有较高的开发利用价值。     

柱前衍生反相液相色谱法测定饲料中氨基酸含量

采用邻苯二甲醛-氯甲酸芴甲酯(OPA-FMOC)柱前衍生反相高效液相色谱法测定饲料中17种氨基酸含量,以C18柱为分析柱,采用荧光检测器,25min内17种氨基酸得到了分离.氨基酸浓度在10-1000pmol/ul范围内,其峰面积与氨基酸浓度的线性相关系数均大于0.996,17种氨基酸的加标回收率在83.9%-109.8%范围内.试验结果表明本方法具有操作简单、灵敏度高,适用于饲料中氨基酸的测定.     

柱前衍生高效液相色谱法测定食品中的氨基酸含量

采用柱前衍生高效液相色谱法，测定了3种食品中天冬氨酸、赖氨酸、亮氨酸等17种氨基酸的含量．以6-氨基喹啉基-N-羟基琥珀酰亚胺基甲酸酯（AQC）为衍生试剂，醋酸盐-磷酸盐缓冲液、乙睛、水为流动相，梯度洗脱．AccQ^＊Tag（Waters）氨基酸分析柱为色谱柱，紫外检测．结果显示，氨基酸浓度与峰面积呈良好的线性关系，线性范围10～80μmol／L，最小检出限为0．23μmol／L，相关系数均在0．998以上，相对标准偏差在1．8％～4．9％之间，回收率在89．3％～115．8％之间．     

一种新的柱前衍生RP-HPLC法测定渔产品中的生物胺

采用一种新的柱前衍生-反高效液相色谱法对15种水产品中的8种生物胺进行检测。利用C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以乙腈和水混合液进行梯度洗脱,流速为0.8 mL/min,在254 nm波长下进行生物胺含量的测定。结果表明,在1.0～100 mg/L浓度范围内,8种生物胺的分离呈现良好的线性相关(R~2≥0.998),方法的检出限及定量限均低于国标方法,加标平均回收率为90%～110%,该方法操作简单,衍生物稳定,杂质少,结果准确可靠,能对鱼及鱼类制品中的生物胺进行检测。     

反相HPLC法测定杨梅和黄皮果肉中的氨基酸

应用反相HPLC法对杨梅和黄皮果肉中的氨基酸进行了测定．结果表明,从杨梅和黄皮果肉中分别检测出天门冬氨酸、谷氨酸、丝氨酸、精氨酸、甘氨酸、苏氨酸、脯氨酸、丙氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸和酪氨酸等14种氨基酸．其中每1g杨梅鲜果肉中的氨基酸含量为0．0379～1．7326mg;每1g黄皮鲜果肉中的氨基酸含量为0．0050～3．7692mg．两类水果不同品种之间的氨基酸含量在0．05水平上差异显著．     

RP-HPLC法测定薏苡中薏苡素的含量

采用HPLC法,以Diamonsil(R)C_(18)为色谱柱,乙睛-水(50∶50)为流动相,流速1 mL/min,柱温25℃,检测波长232 nm,建立了薏苡非种仁部位中薏苡素的高效液相含量测定方法.结果表明:薏苡素在0.096～1.92μg范围内呈良好的线性关系,该方法的平均回收率为99.12%(n=5),相对标准偏差(RSD)为0.89%,用此条件测得成都华西植物园中薏苡全草中薏苡素的含量为8.3078 mg/g.从成分薏苡素和资源综合利用的角度考虑,建议薏苡根、茎和叶可以入药.

Abstract：

To establish an RP-HPLC procedure for determining the content of coixol in the root,stem and leaf of Coixlacryma-jobi L.var.mayuen(Roman.) Stapf. Methods The Diamonsil(R)C_(18) col-umn was used with the mobile phase of acetonitrile-water (50: 50), a flow rate of 1 mL/min, a tempera-ture of 25℃and a wavelength of 232 nm. Results The linear range of coixol was 0.096-1.92μg. The av-erage recovery was 99.12% (n=5, RSD is 0.89 %). Coixol in the herbal of C. Lacryma-jobi L. Var. Mayue in the Botanical Garden of West China was 8.3078 mg/g. Conclusion This method proved to be simple, accurate,well replicable, and suitable for the determination of C.lacryma-jobi L.var.mayuen(Roman.) Stapf.     

Effect of Toxins Isolated from Exserohilum monoceras （Drechsler） Leonard and Suggs on Echinochloa crus-galli （L.） Beauv.

Exserohilum monoceras （Drechsler） Leonard and Suggs is a potential biocontrol agent for the control of Echinochloa species. This fungus causes leaf blight in Echinochloa species, but does not damage rice. Phytotoxicity of the fungal fermented broth was evaluated through the bioassay and the active ingredients were preliminarily isolated by using silica gel column chromatography （CC） in this study. The most active fraction 5-Ⅲ was obtained and analyzed by gas chromatography-mass spectrometry （GC-MS）. The results show that 5-Ⅲ consisted of many compounds, in which 36 compounds accounted for 94.24% of total peak area. Di-n-butyl phthalate （DBP） displayed the highest activity accounted for 9.24% of the total peak area, suggesting that DBP may be one of the main active compounds produced by E. monoceras.     

不同生长期续断菊中氨基酸柱前衍生RP-HPLC同时测定及营养特性比较

为比较不同生长期的续断菊中氨基酸含量分布及其营养特性,合理、科学地利用该野生食品资源,以郑州市龙子湖同一位置不同月份采集的续断菊为样品,采用柱前衍生反相高效液相色谱法同时测定17种氨基酸.结果表明:样品中必需氨基酸含量分布合理,适宜人体吸收利用,相对标准偏差(RSD)为0.3％～3.2％,加标平均回收率为97.1％～ 102.6％.对不同月份采集样品中的必需氨基酸总量、氨基酸总量、必需氨基酸指数进行比较分析得知,3月下旬采集的样品中必需氨基酸指数(Essential Amino Acids Index,EAAI)和营养价值相对较高,最适于采集食用.     

应用机器视觉技术筛选射干种子精选指标的研究

为提高射干种子活力,利用Seed Identification(种子形态自动化识别软件)快速获取300粒射干种子的物理特性(颜色信息、长度、宽度、投影面积),并确定出适宜的种子精选参数。结果表明:射干幼苗苗长与种子颜色信息R(Red,红基色)、S(Saturation,饱和度)、I(Intensity,亮度)、a(从红色至绿色的范围)值呈显著相关,鲜重与种子R、S、I、a值呈极显著相关。经计算得出按R≤40、S≤5、I≤17、a≤0对射干种子进行精选,最多可将发芽率提高9.9%。验证试验结果表明:按以上指标精选后的射干种子发芽率由初始的56.0%分别提高至65.0%、62.0%、64.0%、59.0%;简易活力指数由初始的0.010 9分别提高到了0.016 1、0.017 8、0.015 6、0.012 7。研究表明按R≤40、S≤5、I≤17、a≤0对射干种子进行精选可提高射干种子活力。     

谷子 SWI3基因鉴定及其在盐和干旱胁迫下的表达分析

SWI/SNF染色质重塑因子在植物的生长发育及逆境应答过程中起重要作用。本研究首先通过序列比对,从谷子基因组中鉴定出6个候选SiSWI3基因,分别命名为SiSWI3A、SiSWI3B、SiSWI3C1、SiSWI3C2、SiSWI3D1和SiSWI3D2。然后对上述基因的结构、编码蛋白、启动子元件、亚细胞定位等进行生物信息学分析和预测,结果表明：SiSWI3蛋白都含有SANT Motif,且亚细胞定位预测显示SiSWI3成员主要被定位在细胞核中;SiSWI3基因启动子区域含有大量与光响应、激素类应答、逆境应答、代谢调控等相关的顺式作用元件。最后采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测这些基因在谷子苗期盐胁迫和干旱胁迫下的表达量变化,检测结果表明：SiSWI3基因受盐和干旱不同程度的诱导,说明SiSWI3基因参与谷子苗期盐胁迫和干旱胁迫应答。本研究所得结论为进一步探究SiSWI3染色质重塑因子在抗逆作物谷子的逆境响应中的功能和机制奠定了基础。     

柱前衍生HPLC法检测罗非鱼肌肉中的硫酸新霉素

硫酸新霉素本身没有紫外吸收,必须通过柱前衍生来进行荧光榆测.建立合适的衍生方法是提高检测灵敏度的关键,通过对硫酸新霉素衍生方法的优化,确定衍生化学试剂氯甲酸戊甲酯乙腈溶液的浓度为8 mmol/L,存pH值为7.8的硼酸缓冲液中衍生反应15 min,10 h内检测可得到理想的结果.对硫酸新霉素检测方法优化后,该药物在罗非鱼肌肉中检测限可达到0.02mg/kg.定量限为0.05 mg/kg,在0.05～5 mg/kg浓度范围内有良好的线性关系(r2=0.9956),在肌肉中分别按照0.10、0.50、1.00 mg/kg的标准添加硫酸新霉素,回收率分别为76.43±1.46%、79.47±1.71%、86.82±1.13%.