免疫亲和柱荧光光度法和高效液相色谱法测定饲料中黄曲霉毒素

利用免疫亲和柱荧光光度法和高效液相色谱法测定饲料中黄曲霉毒素。免疫亲和柱—荧光光度法测定饲料中的黄曲霉毒素的测定范围0～50μg/kg;线性相关系数0.99;检测灵敏度1μg/kg;变异系数<18%;回收率82%～120%;分析时间20min,不需要剧毒的黄曲霉毒素标准品。免疫亲和柱-高效液相色谱法测定可以分别定量地检测饲料中黄曲霉毒素B1,B2,G1,G2,在黄曲霉毒素B1为0～50μg/kg测定范围内其线性相关系数0.91;检测灵敏度1μg/kg;变异系数<10%;回收率81%～110%。     

免疫亲和-光化学柱后衍生高效液相色谱荧光法测定花生粕中黄曲霉毒素的研究

研究建立了光化学柱后衍生-高效液相色谱(HPLC)-荧光检测器测定花生粕中黄曲霉毒素B1、B2、G1和G2的方法。甲醇/水提取样品中黄曲霉毒素B1、B2、G1和G2,Afla-P黄曲霉毒素免疫亲和柱净化,经高效液相色谱分离后,由光化学柱后衍生,通过荧光检测器测定。结果表明:在优化条件下,黄曲霉毒素B1、B2、G1和G2的检出限分别为1.0、0.3、1.0μg/kg和0.3μg/kg,回收率为67.0%～117%,相对标准偏差(RSD)低于18.2%。该方法简便快速、灵敏度高、重现性好,满足饲料用花生粕中黄曲霉毒素检测的需要。     

免疫亲和柱净化-高效液相色谱法测定饲料中的黄曲霉毒素

建立免疫亲和柱净化-高效液相色谱法测定饲料中的黄曲霉毒素(AF)B1、B2、G1和G2。该方法样品用甲醇-水提取,稀释后经免疫亲和色谱柱纯化,应用高效液相色谱法检测。以Cloversil C18柱为分离色谱柱,甲醇-水(45∶55,体积/体积)溶液为流动相梯度洗脱,流速0.8 m L/min,柱温30℃,进样量20μL,荧光检测器检测,激发波长360 nm,发射波长440 nm。试验结果表明:空白样品分别按照1、10、20和50μg/kg添加黄曲霉毒素,平均回收率在85.9%~113.2%,精密度10%,4种毒素在标准溶液为0、1、5、10和50 ng/m L的条件下呈良好的线性关系,相关系数分别为0.999 8、0.999 9、1.000 0和0.9998,根据3倍信噪比的峰响应值,确定黄曲霉毒素B1、B2、G1和G2的检测灵敏度分别为0.2、0.2、0.3和0.3μg/kg。该方法简单快速、灵敏度高和溶剂用量少且环保,适用于饲料中的黄曲霉毒素总量的测定。     

饲料中黄曲霉毒素检测及其对牛奶品质的影响

黄曲霉毒素是一种霉菌产生的毒素，易存在各类饲料和食品中。本研究采用免疫亲和柱-荧光光度法对牛奶中的黄曲霉毒素M1进行测定，而饲料中的黄曲霉毒素B1采用酶联免疫法检测，研究结果发现：本实验中的黄曲霉毒素M1的荧光光度计的最佳光谱发射波长为450 nm，分析阴性牛奶产品的黄曲霉毒素M1含量，确定数据的精确性，牛奶回收率为76.67%～93.33%，变异系数为0.45%～2.8%，满足我国制定的检测标准，该方法操作简单、快速和安全。奶牛饲料中青绿饲料、粗饲料、能量饲料和蛋白饲料样品的黄曲霉毒素B1的测定率为100%，奶牛饲料中被检测的青绿饲料、粗饲料、能量饲料和蛋白质饲料阳性样品中黄曲霉毒素B1的含量分别为11.45、4.25、5.24和7.58 μg/kg，均小于20μg/kg（国家卫生部门制定标准），属于轻度污染|不同类型牛奶样品中阳性最高值为0.201 μg/kg，阳性最低值为0.004 μg/kg，平均值最大为0.084 μg/kg，严重超过我国卫生部门制定的标准。 [关键词]饲料|黄曲霉毒素|牛奶品质     

高效液相色谱法测定饲料中的黄曲霉素B1

试验建立了免疫亲和色谱-高效液相色谱法（HPLC）测定饲料中黄曲霉素B1，采用甲醇-水提取饲料中的黄曲霉素B1，用免疫亲和色谱柱净化，以甲醇和水为流动相，反相高效液相色谱荧光检测法进行测定，激发波长为365nm，发射波长为435nm。方法的检测限为0．01μg／kg，定量限为0．03μg／kg，平均回收率为77．5％，变异系数为0．03％。     

免疫亲和柱净化高效液相色谱法测定饲料中黄曲霉毒素

试验建立了测定饲料中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的高效液相色谱法。该方法以甲醇-水(8+2)提取,免疫亲和层析柱净化,碘液柱后衍生,荧光检测器进行检测。检测限最低达到0.5μg/kg,线性在2～50μg/kg良好,平均回收率较高。该方法具有准确度高、精密度好、检测限低、检测快速的特点。     

高效液相色谱法测定饲料中黄曲霉毒素含量的研究

旨在建立检测饲料中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2含量的高效液相色谱分析方法。样品用甲醇溶液提取,利用免疫亲和柱净化,以C18反相色谱柱分离,光化学衍生器衍生后应用荧光检测器检测。结果表明:4种黄曲霉毒素在0.5~20ng/mL范围内呈现良好的线性关系,回收率为71.6%~89.0%。采用该方法检测5种饲料样品中的黄曲霉毒素总量,检出率范围在74.0%~86.7%,检出值的范围为0.5~4.3μg/kg。建立的方法精密度高、重复性好,为监测饲料中黄曲霉毒素含量水平提供了有效的分析方法。     

超高效液相色谱-串联质谱法检测饲料中黄曲霉毒素B_1的比较研究

利用免疫亲和柱的方法对饲料中黄曲霉毒素B_1进行检测。饲料样品经70%甲醇水提取后,用水稀释,过黄曲霉毒素B_1免疫亲和柱、甲醇洗脱、去离子水稀释洗脱溶液,在超高效液相色谱串联质谱仪上进行检测。结果表明:黄曲霉毒素B_1,在2~20μg/kg上呈良好的线性关系,R~20.999;饲料黄曲霉毒素B_1添加浓度在2~20μg/kg上,回收率范围为83.50%~92.40%,RSD值小于2.0%,并用所建方法同标准NY/T 2071—2011的方法进行样品处理对比分析,从而为饲料中黄曲霉毒素B_1检测方法提供更多的选择。     

复合免疫亲和柱净化-UPLC-MS/MS测定饲料中黄曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮和T-2毒素

为建立饲料(浓缩饲料、配合饲料、植物性饲料原料)中黄曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮和T-2毒素残留量的复合免疫亲和柱净化-UPLC-MS/MS检测方法,实验样品经86％乙腈提取,复合免疫亲和柱净化,定容后经液相快速分离,电喷雾离子化,采用MRM监测模式,正负离子扫描,外标法定量.结果表明:黄曲霉毒素B1检测限为0.02μg...     

饲料中真菌毒素含量的分析研究

为了解掌握黄曲霉毒素B1和脱氧雪腐镰刀菌烯醇（呕吐毒素）2种真菌毒素在饲料中的污染状况，对117份饲料样品进行检测。采用免疫亲和柱净化—高效液相色谱法检测，依据《饲料卫生标准》（GB13078—2017）对检测结果进行判定分析。结果表明，黄曲霉毒素B1和脱氧雪腐镰刀菌烯醇平均检出率分别为52.1%和44.4%，最大检测值分别为13.64μg/kg和2.37mg/kg。饲料样品中黄曲霉毒素B1和呕吐毒素均有检出的共24批，检出率为20.5%。从检测结果得出，黄曲霉毒素B1存在超标现象，不合格率为0.85%；在饲料样品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇虽有检出但无超标情况。这表明霉菌毒素在饲料中的污染情况普遍存在，今后应加大对饲料中霉菌毒素的监测力度。     

ELISA和TLC检测饲料中AFB1含量的比较研究

[目的]研究酶联免疫吸附法和薄层色谱法的特点,比较2种方法检测黄曲霉毒素B1含量的优缺点.[方法]酶联免疫吸附法采用黄曲霉毒素B1酶联免疫定量测试盒对饲料中黄曲霉毒素B1的含量进行测定;薄层色谱法应用薄层荧光扫描测定黄曲霉毒素B1的含量,并用薄层色谱进行确证试验.[结果]酶联免疫吸附法测定黄曲霉毒素B1含量的标准曲线r值为0.999 3～0.999 9,变异系数为0.3％～0.6％,回收率在94.0％ ～105.0％之间.薄层色谱为半定量色谱,但该试验利用荧光扫描法测定黄曲霉毒素B1的含量,标准曲线r值为0.998 1,回收率在84.60％～90.08％之间.[结论]2种方法相比较,薄层色谱法是传统经典的方法,具有抗干扰能力强、离线检测可反复测试的优点,但TLC法前处理较为麻烦,精密度、回收率均没有酶联免疫吸附法高;ELISA法是目前国际检测AFB1的先进方法,具有灵敏度高、干扰少、简便快速、操作安全等优点.     

饲料中玉米赤霉烯酮快速定量检测方法的研究

利用免疫亲和柱荧光光度法测定了饲料中玉米赤霉烯酮,检测灵敏度为0.1mg/kg,检测范围为0~5mg/kg,变异系数为3.3%~13.3%,在其检测范围内的回收率为97%~106%,分析1个样品的时间只需25min。     

高效液相色谱法测定饲料中黄曲霉素B1

试验建立了免疫亲和色谱-高效液相色谱法(HPLC)测定饲料中黄曲霉素B1,采用甲醇-水提取饲料中的黄曲霉素B1,用免疫亲和色谱柱净化,以甲醇和水为流动相,反相高效液相色谱荧光检测法进行测定,激发波长为365nm,发射波长为435nm。方法的检测限为0.01μg/kg,定量限为0.03μg/kg,平均回收率为77.5%,变异系数为0.03%。     

酶联免疫吸附法和免疫亲和柱-高效液相色谱法在检测饲料中黄曲霉毒素B1含量中的比对研究

为了探讨酶联免疫吸附法检测饲料中黄曲霉毒素B1含量的可行性,试验采用酶联免疫吸附法(ELISA法)比对免疫亲和柱-高效液相色谱法(IAC-HPLC法),对饲料中黄曲霉毒素B1含量进行了检测,对检测结果的准确度、精密度和样品加标回收率进行了分析.ELISA法线性方程相关系数为0.9952,相对标准偏差(RSD)为1.6％...     

高效液相色谱法测定饲料中的黄曲霉毒素

目前对饲料中的黄曲霉毒素的检测一般采用酶联免疫法、薄层色谱法等半定量方法,笔者采用高效液相色谱法进行定性定量分析,其中黄曲霉毒素B1和黄曲霉毒素G1线性范围为5～50 μg/mL,黄曲霉毒素B2和黄曲霉毒素G2线性范围为1.5～15 μg/mL,平均回收率为80%～110%,RSD为5.00%～10.00%.结果表明采用HPLC法测定操作简便,定性准确,定量精确.     

用MycoSepTM净化柱和高效液相色谱法对谷物中黄曲霉毒素B1、G1、B2、G2的测定

用一种快速方便的MycoSep^TM净化柱和高效液相色谱法对谷物中黄曲霉毒素B1、G1、B2、G2进行测定。样品经乙腈-水（体积比84：16）提取，提取液通过MycoSep^TM净化柱净化、浓缩，三氟乙酸（TFA）柱前衍生，C18色谱柱分离，荧光检测器检测，外标法定量。对添加两个浓度黄曲霉毒素的玉米样品进行加标回收实验，4种毒素的回收率均在90．44％-101．23％之间，B1、G1、B2、G2的最低检测限分别为2．0、1．0、0．5、0．5ng／kg。实验结果表明，此法不仅定量准确，精密度高而且操作极为方便。     

光化学衍生法测定玉米及玉米制品中的黄曲霉毒素B1

为研究玉米及玉米制品被黄曲霉毒素B1污染的情况,确保市场上玉米及玉米制品的食用安全,本文旨在建立免疫亲和柱净化-高效液相色谱-柱后光化学衍生-荧光法测定玉米和玉米制品中黄曲霉毒素B1含量的方法。将玉米和玉米制品试样粉碎后,试样粉末在甲醇-水溶液（体积比为55:45）条件下提取,经免疫亲和柱富集和净化后,以甲醇-水溶液（体积比45:55）为流动相,采用XDB-C18色谱柱（5 μm×4.6 mm×250 mm）,由光化学柱后衍生,荧光检测器检测（Ex：360 nm,Em：440 nm）。结果表明：黄曲霉毒素B1的最低检出限和定量检出限分别为0.009 μg/kg和0.03 μg/kg,标准曲线的线性范围为0.1 ~ 0.5 mg/L（R=0.9990）,2个不同水平的加标平均回收率为88.4% ～ 90.1%,RSD值为0.47% ～ 1.07%。该方法具有操作简便、灵敏度高、重现性佳等特点,适用于玉米和玉米制品中黄曲霉毒素B1的检测。 [关键词] 免疫亲和柱|高效液相色谱|柱后光化学衍生|黄曲霉毒素B1     

ELISA法检测黄曲霉毒素的关键控制点

目前黄曲霉毒素检测的主要方法有：薄层法（TLC）、高效液相色谱法（HPLC）、免疫亲和柱荧光光度法、酶联免疫吸附法（ELISA）、快速荧光法。酶联免疫吸附分析法（ELISA）是测定饲料中黄曲霉毒素含量的常用方法,所涉及的仪器及试剂比较少,操作比较简单,被很多企事业单位所采用。但在应用ELISA法检测黄曲霉毒素时如果不注重操作细节问题,就可能出现假阳性,从而难以很好地监控饲料品质。     

饲料中糖皮质激素类药物含量的UPLC—MSJ／MS检测方法的研究

试验建立了饲料中9种糖皮质激素类药物含量的UPLC—MS／MS检测方法。饲料中的糖皮质激素类药物经甲醇振荡提取，浓缩蒸干，溶解后用碳黑固相萃取柱串接氨基固相萃取柱净化后，液相色谱一串联质谱法测定，外标法定量。9种药物在2～100．g／ml浓度范围内呈线性相关，相关系数在0．997～0．9995，方法在饲料中最低检测限（LOD）为2μg／kg；定量限（LOQ）为5μg/kg。此方法在空白饲料中添加5～20ng／g浓度范围内，平均回收率在55．1％～88．2％，批内变异系数为3．3％～19．1％，批间变异系数为4．2％～13．5％。该方法具有较好的灵敏度、准确度和精密度，能完全满足饲料中此类药物含量的检测，可以作为此类药物的标准化检测方法。     

高效液相色谱紫外法测定饲料中的T-2毒素

研究了用免疫亲和柱净化—高效液相色谱法测定饲料样品中T-2毒素的方法。样品用甲醇-水(体积比80∶20)提取,提取液用免疫亲和柱净化,CloversilC18色谱柱分离,紫外检测器检测,外标法定量。对添加不同浓度的T-2毒素进行了多次重复实验,平均回收率为75.9%～90.3%,变异系数为13.06%,检测限为0.1mg/kg。