高原牦牛肺脏组织iNOS基因表达的增龄性变化特点

为了阐明高原牦牛肺脏组织iNOS基因表达随年龄增长的变化趋势及特点,试验以1日龄、30日龄、180日龄和成年四个发育阶段的高原牦牛为研究对象,采用qRT-PCR及Western-blot方法对不同发育阶段牦牛肺脏组织iNOS mRNA及蛋白相对表达进行测定。结果表明:从出生至成年,高原牦牛肺脏组织iNOS mRNA及蛋白表达水平均表现为先增高后降低的趋势,这可能是高原牦牛肺脏组织在生长过程中为适应高原低氧环境而形成的适应策略。     

诱导型一氧化氮合酶与动物疾病

一氧化氮（nitric oxide,NO)是近年来引起人们特别注意的无机气体自由基，有独特的理化性质和生物学活性，几乎对全身各个系统都有影响，其中诱导型一氧化氮合酶及其催化产生的NO在动物疾病的发生、发展过程中都起着重要的作用。     

不同年龄高原牦牛肺脏的组织结构特征

为了研究牦牛肺脏对高原低氧的适应性过程的结构基础,通过多种组织化学方法和透射电镜技术对1日龄、5月龄和成年牦牛肺脏显微结构和超微结构进行研究。研究发现：1日龄、5月龄和成年组牦牛肺动脉中膜肌层所占管径的比例（MT%）均较高,分别为10.71%、12.53%和11.18%;1日龄牦牛细支气管管壁已形成一层完整的平滑肌层。牦牛呼吸道杯状细胞的分泌颗粒电子密度高,在颗粒中心有低电子密度的区域;Clara细胞的分泌物是有膜包裹的致密分泌颗粒、少量致密分泌颗粒和灰白色物质混合的分泌滴。1日龄、5月龄牦牛肺动脉受低氧的影响较大,内皮细胞增殖明显,呈立方状,突入管腔呈栅状排列;平滑肌细胞肥大呈立方状、细胞器显著增多;各年龄组牦牛血-气屏障厚度均很薄,与低海拔地区大鼠接近,1日龄、5月龄和成年组厚度分别为0.445、0.506和0.423μm。以上结果表明,低氧对肺动脉内皮细胞、平滑肌细胞和细支气管平滑肌有明显的影响,这种影响在5月龄牦牛表现最为显著,但随着年龄的增长,低氧对牦牛肺脏结构的影响逐渐减弱。这种结构与年龄相关的变化表明牦牛在生长发育过程中其肺脏逐渐适应了高原低氧的环境。     

高原牦牛肺脏iNOS基因克隆及序列分析

为了阐明高原牦牛诱导型一氧化氮合酶(inducible NOS, iNOS)在基因水平上对肺脏低氧适应的作用,试验以高原牦牛为研究对象,采用PCR扩增方法克隆了高原牦牛iNOS基因cDNA序列,并对iNOS基因的CDS序列及其编码的蛋白结构进行生物信息学分析。结果表明:高原牦牛iNOS基因的CDS序列全长为3 471 bp,共编码1 156个氨基酸;iNOS蛋白分子质量约为131.03 ku,信号肽预测显示为胞内蛋白,其氨基酸序列具有多个功能域位点,在iNOS蛋白的二级结构中,α-螺旋占37.28%、β-转角占7.27%、无规则卷曲占37.46%、延伸链占17.99%,且核苷酸序列与黄牛、马、犬、人和小鼠的同源性分别为99.45%、78.05%、85.81%、80.84%和80.73%,氨基酸序列与黄牛、马、犬、人和小鼠的同源性分别为99.57%、76.28%、84.18%、79.67%和80.54%。说明iNOS基因在进化过程中相对保守,其编码的氨基酸序列在高原牦牛与黄牛间具有较高的一致性,但与其他物种相比一致性较低。     

高原牦牛隐睾组织结构特征

观察成年牦牛隐睾的组织结构特点,分析高原环境对其生殖微环境的影响。应用HE、Masson’s、Gomori’s特殊染色以及免疫组织化学方法和透射电镜观察比较成年牦牛隐睾与单侧正常睾丸、正常睾丸组织结构特点,进而用IPP图像分析软件进行定量统计。与正常组睾丸相比,隐睾生精小管管径极显著减小(P0.01),基膜增厚,腔内生殖细胞丢失,散在少数幼稚型Sertoli细胞,胞内线粒体变性且含有大小不等的脂褐素颗粒;间质内胶原纤维增生,间质/管腔面积比极显著增大(P0.01),Leydig细胞数量减少,胞内线粒体肿胀,间质血管数量减少,管壁增厚皱缩,血管内皮细胞内含大量脂褐素颗粒;睾丸实质部分钙化。单侧正常组睾丸生精上皮细胞为3~4层,Sertoli细胞发育成熟,少见初级精母细胞及精子;间质/管腔面积比与正常睾丸无明显差异(P0.05),Leydig细胞数量较多,内质网丰富呈一定扩张状态,线粒体减少。免疫组织化学显示,VEGF及VEGFR2在隐睾组与单侧正常组、正常组睾丸均表达于Sertoli细胞、Leydig细胞及各级生精细胞,血管内皮细胞偶见表达;隐睾组VEGF表达量较正常组、单侧正常组睾丸明显下降(P0.05),VEGFR2表达量明显高于正常组与单侧正常组(P0.05);单侧正常组VEGF及VEGFR2表达量较正常组均无明显差异(P0.05)。高原低氧环境,牦牛隐睾血管发育受阻,组织出现不同程度的纤维化和局部钙化,Sertoli细胞发育异常严重影响生精功能;单侧正常睾丸Leydig细胞数量增加,而其中线粒体数量减少,发育程度较正常组织有所降低,隐睾组织中VEGF与VEGFR2可能参与调节双侧睾丸生精抑制作用。     

牦牛不同组织SREBP-1基因表达差异分析

在不同季节分别采集青海省祁连县、大通县和湟中县牦牛的肝脏、肾脏和结肠,提取Total RNA,在逆转录聚合酶的作用下生成cDNA,利用Real-time PCR检测牦牛甾醇类调控元件结合蛋白1(SREBP-1)基因mRNA的表达水平。结果显示,牦牛不同组织中SREBP-1基因相对表达量由大到小顺序为,肝脏、肾脏、结肠。SREBP-1基因在不同季节中除了2016年春季的牦牛,其他的均以肝脏样品中的SREBP-1 mRNA相对定量拷贝数最高。不同季节间SREBP-1基因在2015年春季和2016年春季中相对表达量差异极显著。3个组织间SREBP-1基因在结肠和肝脏中相对表达量差异呈极显著(P<0.01),在肾脏和肝脏中相对表达量差异显著(P<0.05)。     

Balb/c小鼠肺组织一氧化氮及一氧化氮合酶的动态变化

为探讨Balb/c小鼠正常生理状况下肺组织中一氧化氮自由基含量以及一氧化氮合酶活性的动态变化,采用电子自旋共振法直接测定了一氧化氮自由基含量,采用分光光度计法测定了一氧化氮合酶的活性.结果表明:在第3,6,7,12天Balb/c小鼠肺组织的一氧化氮自由基含量、一氧化氮合酶活性均无显著性差异(P＞0.05).说明生理状态下,Balb/c小鼠肺组织一氧化氮自由基的产生维持动态平衡.     

一氧化氮／一氧化氮合酶与血吸虫感染

一氧化氮合酶（NOS）家族中诱生型一氧化氮合酶（iNOS）在细胞因子或脂多糖刺激下,催化合成的一氧化氮（N0）对多种寄生虫具有杀伤作用。因此,认识一氧化氮在抗血吸虫感染中的作用,有着重要的理论意义和潜在的临床应用价值。本文就一氧化氮的生物学特性、生物合成、作用机制以及近年来一氧化氮／一氧化氮合酶在血吸虫学研究中的应用作一综述。     

一氧化氮合酶与动物生殖

一氧化氮合酶（nitric oxide synthase,NOS）在氧气存在下能催化精氨酸分解生成一氧化氮（nitric oxide,NO）,同时产生L-瓜氨酸。NOS有以下几种形式：神经型NOS（neuronal NOS,nNOS,又称Ⅰ型NOS）、诱导型NOS（inducible NOS,iNOS,又称Ⅱ型NOS）、内皮型NOS（endothelial NOS,eNOS,又称Ⅲ型NOS）,其中nNOS和eNOS又被称为组成型NOS（constitutive NOS,cNOS）。cNOS为Ca^2＋依赖型,主要位于内皮细胞（eNOS）及脑（nNOS）;iNOS为非Ca^2＋依赖型,主要位于巨噬细胞、嗜中性白细胞、内皮细胞及上皮细胞。     

一氧化氮合酶与寄生虫感染

一氧化氮(NO)在体内由L-精氨酸在一氧化氮合成酶(NOS)的催化下生成。它是一种重要的信使分子,参与血管、气道平滑肌的调节,神经递质的传递,细胞杀伤,肿瘤细胞的溶解及内分泌激素的释放过程,与许多疾病的发生、发展密切相关;既在机体多个系统多种细胞中具有广泛的生理功能,又可能参与多种疾病的发生过程。寄生虫感染时,动物机体内由其诱发产生各种细胞因子。细胞因子激发一氧化氮合酶基因,其转录产生iNOS(induciblenitricoxidesynthase)mRNA,由iNOSmRNA指导一氧化氮合酶(iNOS)生成。iNOS以精氨酸为底物合成NO。本文就NOS的结构、生成和NO对寄生虫的作用以及影响NO抗寄生虫感染的因素作了综述。     

一氧化氮及其合酶的研究进展

<正>一氧化氮(NO)是迄今为止生物体内发现的第一个气体信息分子,作为新型神经递质和信息分子,NO参与了许多神经生理过程。随着人们对NO研究的深入,其研究领域已涉及神经解剖学、生理学、分子生物学、分子遗传学等学科。NO与动物生长、繁殖、神经系统、疾病等密切相关。本文对NO及其合酶的研究进展综述如下。1 NO和一氧化氮合酶(NOS)的生物特性     

高原牦牛育肥经济效益分析

在大通县逊让乡逊布村华鑫肉牛养殖场选择育肥的100头高原牦牛作为试验牛群,冬春季利用暖棚对刚察牧区的牦牛进行短期育肥,采用一定混合精料加小麦秸秆,育肥4个月。结果表明,经冷季育肥后的大通县牦牛反季节出栏后经济效益显著,利用暖棚季节出栏是提升大通县高原牦牛经济效益的良好方法之一。     

牦牛血清和组织中一氧化氮含量测定

动物机体中一氧化氮是一种重要的信使分子，参与血管舒张，抗血小板凝集，调控促性腺激素的分泌、参与神经调节、炎症和免疫反应和性成熟等，在许多疾病尤其是高原疾病的治疗中有重要作用。生物医学研究表明NO通过激活血管平滑肌细胞内可溶性鸟苷酸环化酶，使细胞内cGMP含量增加，从而引起血管扩张。     

高原牦牛与普通家畜肺组织结构的差异分析

无论是在海拔3000米以上的严寒低氧高原还是在炎热干燥的西北内陆,都有多种多样的动物在其中健康的生长.长期的进化使得他们在组织结构、生理结构等方面有着显著的变化,从而使其更好地适应所生存的特殊环境.曾有资料证实,牦牛的胸腔、心、肺较普通牛发育好,红细胞和血红蛋白含量高于黄牛.本文以生活在高原地区的牦牛与普通的家畜为对象,对其肺组织中肺胸膜的厚度、肺泡管数量、气-血屏障等方面内容进行差异性分析.     

植物纤维素合酶结构与基因表达研究进展

纤维素作为具有重要经济价值的生物多聚体,对人类的衣、食及新型能源的发展具有深刻的影响。近年来,关于纤维素的研究热点依然是合酶蛋白的提纯及纤维素体外合成,为此对于纤维素合酶（Cellulose synthase,CESA）及其复合体（cellulose synthase complex,CSC）结构和功能的掌握尤为重要。结晶学和3D建模技术在蛋白结构预测上的应用,推翻了原有的微纤丝合成模型,并依据数据提出了新的猜测。本文总结了最新CESA蛋白生化结构、功能、转录及翻译后修饰的调控,为后续的研究提供新的依据。     

高原牦牛肺泡组织结构的观察和比较

为了探讨高原牦牛肺泡组织结构特点与高原低氧的关系,试验采用常规组织学方法,利用光镜、透射电镜和计算机图像分析系统观测高原牦牛和平原黄牛肺泡的组织结构.结果表明:高原牦牛单位面积内肺泡数(MAN)、单个肺泡平均面积(MSAA)、单位面积内总肺泡面积(TAA)与平原黄牛相比差异均不显著(P＞0.05),但高原牦牛肺泡隔厚度...     

高原牦牛呼吸系统常见病分析和防治

牦牛是高原牧区的主要畜种,其健康状况直接影响牦牛的生产性能,但是高原地区气候恶劣,牧民科学养殖的观念落后,在环境改变和气候骤变的情况下容易引发呼吸系统疾病,造成较为严重的经济损失,现将高原牦牛呼吸系统常见的疾病进行分析和研究,旨在为牦牛疾病防治提供理论依据.     

高原牦牛呼吸系统常见病分析和防治

高原地区的地理环境特殊,作为高原牧区主要畜种的牦牛,气候的骤变和环境的改变极易引发牦牛呼吸系统疾病.常见的高原牦牛呼吸系统疾病有感冒、支气管炎、咽喉炎等,高原牦牛呼吸系统疾病具有发病快,传播速度迅速等特点,直接影响着牦牛的健康生长.引发牦牛呼吸系统疾病的原因多样,在对病症预防和治疗的过程中需要结合发病原因和临床表现综合...     

一氧化氮合酶在水产动物免疫中的研究

NO除了在中枢神经系统中作为重要的信息传递物质外,还广泛参与机体多系统的生理和病理过程,是目前学术界研究的热点。     

一氧化氮合酶阳性神经元在大鼠体内的分布与一氧化氮的功能

一氧化氮 (ＮＯ)是一种最新发现的、哺乳动物中最小、最轻并具有独特理化性质和生物学活性的信息和效应分子 ,能激活靶细胞中的鸟苷酸环化酶 (ＧＣ) ,提高环一磷酸鸟苷(ｃＧＭＰ)浓度 ,发挥一系列生物学作用 ,现已成为研究热点之一。ＮＯ广泛存在于神经系统、心血管系统、免疫系统、消化系统、生殖系统与呼吸系统等的细胞内 ,是传递神经信息、调节血压以及机构防御等一系列生命活动必不可少的生物信使。因此 ,内源性ＮＯ的生物学研究、ＮＯ在动物模型大鼠体内的分布及其功能的确定 ,将有助于在动物医学和人类临床医学领域进一步阐明机体某些…