江西省猪源粪肠球菌毒力基因及耐药性分析

通过选择性培养基、PCR技术分离鉴定粪肠球菌,采用PCR技术检测agg、clyA、efaA、esp、ace和gelE基因,使用K-B法测定分离株对红霉素、多西环素、环丙沙星和氟苯尼考的敏感性。结果共分离并鉴定出226株粪肠球菌。98.23%的粪肠球菌至少携带1种毒力基因,各基因检出率由高到低依次为efaA、ace、gelE、agg、esp和clyA。有75.22%分离株携带3~5种毒力基因。分离株对红霉素和多西环素耐药率较高,分别为97.35%和92.48%,对环丙沙星和氟苯尼考耐药率相对较低,分别为65.04%和61.95%,但没有统计学上的区别。因此,携带毒力基因数的多少与抗菌药物的耐药性之间不存在统计学上的关联。     

粪肠球菌生物膜的形成及影响因素

本试验研究了不同的培养时间、培养温度、生物膜引导材料和葡萄糖浓度对生物膜形成的影响,发现培养时间为36h,培养温度为37℃,生物膜引导材料为乳胶时生物膜内活菌数最多。在不影响细菌活力的条件下,糖浓度越高,生物膜内活菌数越多;刚果红-阿利新兰对不同培养时间的生物膜染色后,用高倍镜对其形成过程进行动态观察,发现8h时出现少量的细菌黏附;24h时开始形成一些微菌落;36h时开始大量黏附形成明显的微菌落;72h时膜细胞脱落,微菌落开始减少;通过光密度测定法测定生物膜形成过程中胞外多糖的含量,证实其分泌量与生物膜内细菌增长周期时间一致。研究探讨了细菌粘附和细菌生物膜的形成机理,为阻断细菌生物膜形成提供实验依据。     

鸡源粪肠球菌的分离鉴定

试验选择9日龄健康肉仔鸡的肠道内容物,利用肠球菌琼脂培养基分离获得12株疑似肠球菌的细菌。通过对12株菌的生态特征、培养和生理生化特征的测定,筛选3株疑似粪肠球菌的菌株进行16S rDNA分子鉴定,最终获得3株粪肠球菌,命名为HEW-S05、HEW-S09和HEW-S12。为禽用微生态制剂的研制提供菌种来源。     

鸡源粪肠球菌对雏鸡致病力试验和毒力基因gelE及efaA的检测

为了解凉山地区鸡源粪肠球菌毒力基因gelE和efaA的基因表达情况,对毒力基因进行检测和致病力试验。通过实验室提供的粪肠球菌10株,进行致病力试验,结果显示,雏鸡死亡率为0～100%,存在较大差异;进行毒力基因gelE(432 bp)、efaA(591 bp)的检测,10株粪肠球菌阳性率均为100%。根据NCBI的基因序列进行粪肠球菌毒力基因gelE、efaA的同源性比对结果均为100%。     

肠球菌生物膜形成及与esp基因关系的研究进展

肠球菌属（Entemcoccus spp）是定居在人和温血脊椎动物肠道内的革兰阳性共栖菌,它在整个成人肠道微生物系中所占的比例相对较少（少于1％）,但它却有重要的医学意义。肠球菌是重要的条件致病菌,当机体免疫力低下时可引起严重感染。另外,它是导致医院内感染的重要病原菌之一,在需氧革兰阳性球菌中,它是仅次于葡萄球菌的重要院内感染致病菌。     

鸡源气载大肠杆菌生物膜形成与耐药相关性研究

为了探讨鸡舍环境中大肠杆菌生物膜形成与耐药性及消毒剂抗性之间的关系,试验采用96孔微量板法对鸡舍空气中分离鉴定的114株大肠杆菌测定其体外生物膜的形成能力和耐药情况。结果表明:114株气载大肠杆菌生物膜阳性率为34.21%,以弱阳性为主;形成生物膜的菌株呈现多重耐药性,生物膜阳性菌株对β-内酰胺类、氨基糖苷类药物的耐药率均高于阴性菌株,阳性菌株的消毒剂耐药性也高于阴性菌株。说明气载大肠杆菌生物膜形成和β-内酰胺类、氨基糖苷类药物耐药率及消毒剂的耐药性具有相关性。     

某养殖场鸡源粪肠球菌分离鉴定及耐药性研究

本文从辽宁某鸡场100份肉鸡盲肠拭子中分离获得粪肠球菌24株,通过ATB细菌鉴定仪进行鉴定确认为粪肠球菌,并对这24株粪肠球菌进行了14种抗生素的药敏试验。结果显示,粪肠球菌对青霉素、万古霉素、氨苄西林和替拉考宁敏感;对红霉素、氯霉素、环丙沙星、四环素、左氧氟沙星和奎奴普汀/达福普汀耐药,耐药率均达到100.0%,养殖场抗菌药物耐药严重。     

乌鲁木齐市宠物源粪肠球菌和屎肠球菌耐药性及耐药基因检测

为了解乌鲁木齐市宠物源粪肠球菌和屎肠球菌对临床常用抗菌药物的耐药性及其耐药基因携带情况,在乌鲁木齐市多家宠物医院、警犬基地、犬养殖基地采集宠物(犬和猫)直肠粪样449份进行粪肠球菌和屎肠球菌的分离鉴定,通过琼脂稀释法测定10种抗菌药物的最小抑菌浓度,利用PCR方法检测11种耐药基因.结果分离鉴定出宠物源粪肠球菌和屎肠球...     

猪源鹑鸡肠球菌的分离鉴定、耐药性和毒力基因分析

<正>鹑鸡肠球菌为肠球菌属的革兰氏染色阳性、触酶阴性的兼性厌氧菌。自1984年从临床样品分离得到以来,至今对其相关报道仍然较少。但近年来,研究人员发现该菌与人的感染密切相关,国内外报道病例逐渐增加。在美国和欧洲地区,耐万古霉素肠球菌（Vancomycin resistant enterococci,VRE）的出现,给治疗和控制此类病原引起的感染带来了前所未有的挑战。鹑鸡肠球菌（Enterococcus gallinarum,EG）是临床中一种重要的人兽共患条件致病菌。对首都医科大学宣武医院的临床样本进行EG分离,其中泌尿道占57.14%,其次是下呼吸道占28.57%,EG感染可引起泌尿、呼吸道感染甚至引发败血症。当前,     

一株具有多种毒力基因的粪肠球菌噬菌体的研究分析

以之前分离出的奶牛乳房炎源粪肠球菌SL22为宿主菌,从临床型乳房炎乳样中分离纯化噬菌体,对其进行生物学特性分析、小鼠治疗试验及毒力基因与耐药基因检测。结果分离到1株噬菌体,该噬菌体形成的噬菌斑如针尖状,电镜下发现该噬菌体无尾,头部呈对称多面体,直径约66 nm,将其命名为vB＿Eco T＿PSL22（简称PSL22）;只裂解其宿主菌,核酸类型为dsDNA;最佳感染复数为0.1,裂解量约为52 PFU/cell;在p H4.0～12.0时活性稳定,能耐受60℃左右高温。对小鼠治愈率为33.33%(2/6),含有2个耐药基因（Acc和aac(3)-Ⅳ）和4种毒力基因（gelE、cylA、ace和efaA）。通过本次试验,可为临床型乳房炎奶牛乳房中噬菌体的多样性研究提供参考,也可为研究奶牛乳房中的微生态系统提供依据。     

犬源粪肠球菌生物学特性的研究

试验分析犬源粪肠球菌EF-19的耐酸性能、耐胆盐性能、犬小肠上层细胞黏附性及抑菌物质耐温性等生物学特性。结果表明:该菌株耐受高达0.5%的胆盐时,仍有50%以上的存活率;p H 2.0和9.0处理3 h仍有80%以上的存活率;对犬小肠黏膜上皮细胞有较强的黏附性;且其代谢产物中含有抑菌物质,并有一定的热稳定性。     

猪肠源粪肠球菌的体外耐受性研究

对仔猪直肠内容物分离的粪肠球菌进行体外耐受性研究。以粪肠球菌体外存活率为考察指标,通过耐酸性、耐胆盐、耐高温试验来研究菌株的体外培养特性。耐酸性试验采用pH为2.0、3.0和7.0培养基培养菌株3h,其存活率分别为2.18%、121.01%和134.02%;胆盐浓度在0.1%~0.3%培养菌株,生长良好且存活率均在70%以上;耐高温实验是在50℃和60℃处理30min后存活率菌小于50%,菌株对高温敏感。结果表明,仔猪肠源粪肠球菌有较好的耐酸性及耐胆盐能力,但对高温敏感。     

猪源粪肠球菌的分离与鉴定

从新鲜仔猪粪便中分离益生菌,筛选出适合养猪生产的益生菌株,为进一步开发猪用微生态制剂奠定基础。采集长春市双阳地区某猪场健康仔猪新鲜粪便,分离纯化粪肠球菌,通过形态学观察、体外耐酸耐胆盐性能和抑菌能力试验,筛选出益生特性的候选菌株,16S rDNA序列分析方法鉴定其种属,并对候选菌株生长情况及其对抗菌药物敏感性进行评价。成功筛选出2株(S-50、和S-4)耐酸、耐胆盐和抑菌能力较强的粪肠球菌,且具有较好的生长性能,为研发微生态制剂提了供理论依据。     

致羔羊脑炎粪肠球菌生物被膜形成能力及相关基因检测研究

为观察致羔羊脑炎粪肠球菌XJ05株生物被膜（BF）的形成能力并检测致羔羊脑炎粪肠球菌BF形成相关基因的携带情况,本研究以XJ05为研究对象,运用96孔板建立不同时间BF模型,染色后酶标仪测定D_{595 nm}值,并用倒置显微镜观察BF形态。同时检测11株菌中与BF形成相关基因（gelE、esp、ace、asa1、asa373、efaA、ef0591、ef3314、ahrc、eep）的携带情况,并对相关基因片段做同源性分析。结果显示,在不同时间段XJ05株BF的生成量与空白对照组相比差异显著（P<0.05）,24 h时D_{595 nm}值最高且与其他各个时间段相比均差异显著（P<0.05）。显微镜下观察6 h时BF初具规模,可见散落的网状结构,12~24 h矩阵网格结构明显,24 h时形成高度有序的网格结构,24 h后网状结构逐渐脱落,BF开始降解。11株菌中10种相关基因的携带情况不同,有6株携带8种基因,1株携带7种基因,1株携带6种基因,1株携带2种基因,有2株未检测到10种基因的任何一种。检出的基因片段同源性均在93.3%~100.0%之间。结果表明,XJ05株能形成完整的BF,11株分离的致羔羊脑炎粪肠球菌中有9株携带部分与BF形成相关的基因。     

鸡源肠球菌的分离与鉴定

本研究对１９５份死鸡胚和１日龄弱死雏鸡的病样,进行了链球菌和肠球菌的分离,并对所分离菌的某些生物学特性进行试验研究。结果共分离到１２０株目的菌,随机取４５株进行鉴定,皆属肠球菌,其中４３株能确定为肠球菌属中的已知菌种。     

猪源粪肠球菌的分离鉴定

对来自四川地区送检病猪采样分离到2株致病性革兰氏阳性球菌进行分离纯化,根据培养形态、理化特性和16SrRNA序列同源性分析,综合判定所分离菌株为粪肠球菌,采用纸片扩散法进行药物敏感性实验,结果显示分离的致病菌均对供试的头孢唑啉钠、利福平药物高度敏感,对氨苄西林、红霉素、氧氟沙星等药物不同程度耐药,根据结果制定相应防治措施,经处理后,病情得到控制。     

湖南省猪源粪肠球菌耐药性分析

为了解湖南省猪源粪肠球菌临床分离株的耐药性及各耐药基因的分布情况,使用K-B法检测了42株猪源粪肠球菌对11种抗生素的敏感性,采用PCR方法检测了粪肠球菌中8种耐药基因的分布情况。结果显示,湖南省临床分离的42株粪肠球菌对大部分的抗生素高度耐药,对四环素、氯霉素、苯唑青霉素、红霉素、米诺霉素、左氧氟沙星、高浓度庆大霉、高浓度链霉素、环丙沙星、万古霉素、青霉素G的耐药率依次为100%、92.9%、88.1%、83.3%、81%、57.1%、52.4%、47.6%、45.2%、31%、11.9%;耐药基因的检出率为Aac(6)'/aph(2')97.6%、ant(6)'-Ⅰ90%、aph(3)'-Ⅲ76.2%、tet M 90.5%、erm B 73.8%、Van A 4.8%、Van B 54.8%、Van C 88.1%。从表型与基因型共同分析粪肠球菌的耐药性,发现粪肠球菌的多耐药性严重,其耐药表型与耐药基因并不完全一致。     

猪源粪肠球菌的分离鉴定

对来自四川地区送检病猪采样分离到2株致病性革兰氏阳性球菌进行分离纯化,根据培养形态、理化特性和16S rRNA序列同源性分析,综合判定所分离菌株为粪肠球菌,采用纸片扩散法进行药物敏感性实验,结果显示分离的致病菌均对供试的头孢唑啉钠、利福平药物高度敏感,对氯苄西林．红霉素、氧氟沙星等药物不同程度耐药,根据结果制定相应防治措施,经处理后,病情得到控制。     

鸡源弯曲菌毒力基因和耐药性的相关性

为了解鸡源弯曲菌分离株中毒力基因携带情况和耐药现状,探讨毒力基因的存在与耐药性的关系,本试验通过PCR方法对贵州省9个市(州)禽类养殖场分离的96株弯曲菌进行毒力基因检测,采用琼脂稀释法进行药敏试验,通过分类变量的关联性分析,计算关联系数(Cramer’s V)后分析毒力基因与耐药性的相关性。结果显示,在弯曲菌分离株中携带率位于前3名的毒力基因是sodB、cheY、fur(99.0%、96.9%、96.9%),ciaB、virB11的携带率均为0;空肠弯曲菌优势毒力基因谱为flaA-cadF-cheY-cdtA-cdtB-cdtC-fur-katA-sodB,结肠弯曲菌优势毒力基因谱为flaA-cadF-cheY-fur-katA-sodB,结肠弯曲菌毒力基因谱型多于空肠弯曲菌。空肠弯曲菌和结肠弯曲菌分离株耐药率位于前3名的抗菌药均为萘啶酸(88.2%、93.5%)、四环素(85.2%、90.3%)和环丙沙星(73.5%、87.0%);结肠弯曲菌对红霉素、阿奇霉素、链霉素、氯霉素、泰利霉素和克林霉素的耐药水平高于空肠弯曲菌。红霉素与cdtC基因,阿奇霉素与cdtA、cdtB基因,环丙沙...