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相似文献
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1.
以入侵菊科植物微甘菊(Mikaania micrantha Kunth)、紫茎泽兰(Eupatorium adenophorum Spreng)、豚草(Ambrosia artemisiifolia Linn)、飞机草(Eupatorium odoratum Linn)、假苍耳(Iva xanthifolia Nutt)的根、茎、叶及花蕾为试验材料,采用改良的盐酸胍法提取总RNA,通过紫外分光光度计测定RNA样品的得率和纯度,用琼脂糖电泳检测RNA样品的质量和完整性。结果表明:采用新方法提取的总RNA,其OD260nm/OD280nm值为1.8~2.0,且RNA得率较高;琼脂糖电泳出现18S和28S 2条清晰的rRNA条带,而且28S rRNA条带的亮度约为18S的2倍。采用改良的盐酸胍法可以从不同植物组织中提取到高质量、完整性好总RNA。  相似文献   

2.
以野生型和转几丁质酶烟草株系叶片为材料,采用改进的CTAB法对其DNA和总RNA进行同步提取和DNA中RNA的消化以及总RNA中DNA的消化,并分别进行了电泳检测、含量测定和相应的PCR和RT-PCR检测.结果表明:用该法提取的DNA条带清晰、无降解,所提取的DNA浓度在109.20~245.46 μg/mL,OD26...  相似文献   

3.
一种适合香蕉根系总RNA提取的方法   总被引:1,自引:0,他引:1  
利用改良SDS法、改良CTAB法、SDS法和QIAGENR Neasy Plant Mini试剂盒提取法分别提取香蕉幼根和老根的总RNA,并对提取的总RNA的完整性、纯度等进行比较。结果表明:改良的SDS法提取的总RNA在清晰度、纯度、完整性和回收率上均高于其他3种方法所提取的。  相似文献   

4.
利用CTAB改良法,以富含花青素类物质的牡丹花瓣为材料提取总RNA,经紫外光谱分析A260/A280比值为1.9~2.0;电泳检测到28S,18S和5S rRNA3条清晰的带,带的亮度强,且28S是18S亮度的2倍左右,说明提取的RNA完整、未降解。  相似文献   

5.
月季基因组DNA与总RNA提取方法的优化研究   总被引:2,自引:1,他引:2  
[目的]优化月季基因组DNA与总RNA的提取方法。[方法]通过对经典提取方法的改进与筛选,获得月季DNA和总RNA。[结果]经过改进与筛选的方法提取的月季DNA和总RNA可用于酶切、PCR和RT-PCR等一系列分子生物学的研究。[结论]该研究为其他以次生代谢物含量丰富植物为材料的研究提供了技术参考。  相似文献   

6.
植物组织总RNA提取方法的进展研究   总被引:9,自引:0,他引:9  
对植物组织总RNA的提取方法做了简要的介绍,并对怎样消除植物组织中所含有的酚类物质、多糖、蛋白质等对RNA提取的干扰及降低RNase对RNA的降解作用进行系统的阐述。  相似文献   

7.
植物总RNA的提取尽管已成为一种常规的技术,但由于不同植物化学组分的差异,没有一种特定的方法适用于所有植物RNA的提取。该文介绍了异硫氰酸胍法、改进CTAB法、改进SDS法和Trizol试剂盒法提取植物总RNA的特点。  相似文献   

8.
一种适用于动物与植物总DNA提取的方法——改良CTAB法   总被引:1,自引:0,他引:1  
关于动物和植物基因组DNA的提取方法国内外有很多报道,但同一方法通常只能较好的从动物或植物提取总DNA。在前人报道的基础上,该研究对常用的CTAB法进行了适当修改,获得了一种从动物和植物中均能有效提取DNA的方法。  相似文献   

9.
几种植物组织总RNA提取方法的特点及疑难对策   总被引:2,自引:0,他引:2  
植物组织总RNA的提取方法较多,在提取过程中会遇到酚类物质、多糖和蛋白质的干扰及外源RNase污染等问题,笔者对几种植物组织总RNA提取方法的特点、提取过程遇到的问题及解决问题的对策进行了简要介绍。  相似文献   

10.
一种少量提取植物组织DNA的快速方法   总被引:12,自引:0,他引:12  
为了从植物组织中快速提取核酸,从多种DNA提取方法中遴选出2种基本方法。通过优化基本方法的操作步骤、试剂用量与作用时间,建立了一种改良的DNA快速提取方法。在此方法中,用氯仿代替液氮或提取液进行植物组织研磨,之后加入提取液抽提DNA,并用氯仿-异戊醇反复抽提,可显著降低蛋白质含量;通过应用RNA酶可获得纯度较高的DNA。该方法的特点是在室温下即可进行简便操作,快速(提取核酸的过程仅需30min),污染器皿少,实用性强,提取物产量高,纯度好。  相似文献   

11.
[目的]建立一种适用于多种植物组织快速提取基因组DNA的方法。[方法]以水热反应制备出Fe3 O4磁性纳米微球,并对其粒径、形貌、磁学性质等进行表征分析,并以此作为核酸提取载体,对多种新疆特色经济作物和植物的叶片、根、茎、籽粒等组织进行DNA的提取分离,并优化分离纯化过程的各环节。[结果]通过OD260紫外吸收值的检测、琼脂糖凝胶电泳,结果显示,用该方法纯化得到的植物基因组DNA纯度高、完整性好,能够满足下游分子生物学操作对基因组DNA质量的要求。[结论]建立了一种简便、快速、普适的从多种植物组织中获得高产量和高纯度的基因组DNA,为全自动化、规模化提取DNA提供了理论和实践基础。  相似文献   

12.
胡杨、柽柳总RNA提取方法的建立   总被引:39,自引:7,他引:39  
以胡杨和柽柳的叶片为材料,建立了一种从植物组织中快速分离总RNA的方法。该方法具有三个显著的特点:RNA提取周期短,应用改进的LiCl沉淀RNA方法,仅需l0min即可;方法简单易行,仅需要几种常用试剂,操作步骤简单;提取的RNA杂质少,得率高,并能在提取过程中较有效抑制RNA的褐化效应。RNA质量可以满足cDNA文库构建、DDRT—PCR等要求。  相似文献   

13.
[目的]探索可以快速从革兰氏阳性菌微杆菌中提取高质量基因组总DNA的新方法。[方法]采用3种不同方法提取微杆菌基因组DNA,并进行DNA纯度、完整度鉴定及16SrDNA扩增检测。[结果]紫外吸收值表明,采用改良方法所获DNAA260/A280大于1.80,A260/A230为2.0,5ml过夜菌液可得6.5μg基因组总DNA。DNA凝胶电泳结果表明DNA完整度高且无RNA污染。以此方法提取的基因组总DNA样品为模板,可灵敏有效扩增16SrDNA基因。[结论]该方法用时短,操作简易,纯度好、产率高、成本低,适用于革兰氏阳性菌各相关的分子生物学研究。  相似文献   

14.
从植物种子中快速获取高质量DNA的方法(英文)   总被引:1,自引:0,他引:1  
[目的]该研究旨在寻求一种从植物干种子中简单快速提取高质量基因组DNA的有效方法。[方法]将种子打磨成粉,取100mg粉末加入高盐提取液抽提基因组DNA。采用超微量分光光度计检测、PCR及酶切的方法检验DNA的得率和质量。[结果]从100mg7种常见作物种子粉末中可以得到619.67~1811.21ng基因组DNA,A260/A280比值在1.87~2.07之间,其纯度和质量适合进行PCR及酶切分析。通过普通PCR方法分别对7种作物的特异性内源基因片段进行扩增,结果均能扩增到明显的目的条带。用EcoRV和HindIII两种核酸内切酶能对所得的DNA充分酶切。[结论]该方法能快速地从干种子中提取到高质量的DNA。  相似文献   

15.
适宜于实验教学的动物组织总RNA提取的操作方法   总被引:1,自引:0,他引:1  
为探索适宜于实验教学的动物组织总RNA的提取方法,采用氯仿处理实验器皿、耗材和水以降低外源性RNA酶对RNA的降解作用。结果表明,操作过程中合理利用氯仿能够有效降低外源性RNA酶的污染;与DEPC水处理效果相比,提取的总RNA均可用于分子生物学研究和RT-PCR扩增,但使用氯仿处理更为安全。  相似文献   

16.
[目的]研究植物基因组DNA提取方法,为从植物组织中快速提取基因组DNA提供指导。[方法]在已发表的植物基因组DNA提取方法基础上,对SDS提取法的操作步骤、试剂用量及作用时间进行了优化。[结果]初步建立了一种广泛适用于各类植物及植物多种组织器官的基因组DNA提取方法。所提取的基因组DNA质量较好,满足下一步操作的要求。[结论]该研究结果为植物基因组DNA的快速提取提供了指导方法。  相似文献   

17.
木本植物组织总RNA提取的要点与原理   总被引:57,自引:1,他引:57  
根据提取木本植物组织RNA时所获得的知识和经验,对木本植物组织总RNA提取时所遇到的提取产量低、RNA降解、多酚物质干扰、DNA干扰、多糖干扰、蛋白质干扰及杂质干扰等问题进行了探讨,并提出了具体的解决方法。同时,对各种常用的RNA提取方法进行了分类,并对它们的原理及优劣进行了论述与评价。  相似文献   

18.
玉米总RNA的小量快速提取   总被引:1,自引:0,他引:1  
以玉米幼苗的根、茎和叶为材料,采用改良尿素法,分别提取其总RNA。提取的总RNA,经凝胶电泳检测,28SrRNA和18SrRNA带型完整;经紫外分光光度计检测,A260/A280值接近2.0;将RNA反转录合成cDNA,可用于RT-PCR分析。本方法在提取过程中不使用液氮,且提取的玉米总RNA质量好、纯度高。  相似文献   

19.
[目的]设计一种简易安全的从农杆菌和酵母中提取RNA的方法。[方法]利用Triton X-100和SDS作为裂解液的主要成分,通过热激法裂解菌体,然后进行一系列的抽提、沉淀、洗涤,获得纯净的RNA;并用琼脂糖凝胶电泳及核酸检测仪检测总RNA的纯度、浓度及质量。[结果]该方法能高效裂解菌体,有效防止RNase污染,可以获得高质量的RNA。[结论]该研究成功的得到一种简易、安全提取农杆菌和酵母RNA的方法,为后续的基因表达分析奠定了技术基础。  相似文献   

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