淡水养殖鱼类病原菌药敏实验

25种抗菌药物对淡水鱼类6种病原菌分别表现出敏感、中度敏感和耐药3种结果。测定14种抗菌药物对淡水鱼类6种病原菌的最小抑菌浓度，结果显示，不同药物对同一病原菌和同一药物对不同病原菌均具有不同的MIC。在淡水鱼类细菌病防治过程中，应选择药敏反应敏感或MIC较低且吸收较好的抗菌药物，并交替使用，以防止耐药菌株的产生。     

基于药敏试验结果的水产养殖用药指导技术(连载一)

<正>离体抗微生物药物敏感性试验(Antimicrobial Susceptibilit Testing,AST),简称为药敏试验或药物敏感性试验,是指在离体条件下,测定药物抑制或杀灭致病微生物能力的试验;即从鲜活的病鱼等水生动物样本中分离出病原菌,并进行试验,测试抗菌、抑菌类药物在体外对病原菌是否敏感,以指导水产养殖动物病害防治过程中药物的选择和使用,验证药物质量,指导药物研发等,并了解常见疾病病原菌对某种药物的耐药性或抗药性变化。     

叶尔羌鼓鳔鳅烂尾病的研究

对叶尔羌鼓鳔鳅烂尾病的病变器官进行剖检和显微观察 ,并对病原菌进行分离培养、纯化 ,做药敏试验。结果表明 :导致叶尔羌鼓鳔鳅烂尾的病原菌为条件致病菌 ,培养后的菌体呈圆形、无色、半透明、微隆起状。该病原菌对卡那霉素、多黏菌素、庆大霉素、环丙沙星等抗菌素敏感 ,对氯霉素、痢特灵中敏 ,对其余抗菌药物不敏感。感染该病原菌的鱼尾鳍充血、溃烂 ,最后造成鳃、肝脏、肾脏等器官均产生不同程度的病变 ,直至死亡。经联合使用该病原菌敏感的药物防治 ,能收到较好的疗效。     

叶尔羌鼓鳔鳅烂尾病的研究

对叶尔羌鼓鳔鳅烂尾病的病变器官进行剖检和显微观察，并对病原菌进行分离培养、纯化，做药敏实验。导致叶尔羌鼓鳔鳅烂尾的病原菌为条件致病菌，培养后的菌体呈圆形、无色、半透明、微隆起状。该病原菌对卡那霉素、多黏菌素、庆大霉素、环丙杀星等抗菌素敏感，对氯霉素、痢特灵中敏，对其余抗菌药物不敏感。感染该病原菌的鱼尾鳍充血、溃烂，最后造成鳃、肝脏、肾脏等器官均产生不同程度的病变，直至死亡。联合或交替使用该病原菌敏感的药物，能收到较好的疗效。     

药敏试验在水产病害防治中的应用

抗微生物药物敏感性试验（An—timicrobial Susceptibilit Testing，AST），简称药敏试验，是指从鲜活的病鱼等样本中分离出病原菌并进行试验，测试抗菌药物在体外对病原菌是否敏感，以指导水产病害防治过程中选择药物，并了解常见病原菌的耐药性变化，为同一种水产病害的诊断和治疗积累经验。药敏试验是水...     

中华鳖出血性细菌病的初步研究

从1只病鳖体液、咽喉鳃状组织和肠道中分离到3株形态相似的菌株，并选取肠道分离菌进行人工感染试验和药物敏感性试验。初步认为此病是由产气杆菌类病原菌所射起；病原菌有较强致病力，通过人工感染能重复本病病症。病原菌对氯霉素和链霉素高度敏感，对青霉素较敏感，对磺胺不敏感。     

叶尔羌鼓鳔鳅烂尾病的研究

对叶尔羌鼓鳔鳅烂尾病的病变器官进行剖检和显微观察，并对病原菌进行分离培养、纯化，做药敏试验。结果表明：导致叶尔羌鼓鳔鳅烂尾的病原菌为条件致病菌，培养后的菌体呈圆形、无色、半透明、微隆起状。该病原菌对卡那霉素、多黏菌素、庆大霉素、环丙杀星等抗菌素敏感，对氯霉素、痢特灵中敏，对其余抗菌药物不敏感。感染该病原菌的鱼尾鳍充血、溃烂，最后造成鳃、肝脏、肾脏等器官均产生不同程度的病变，直至死亡。经联合使用该病原菌敏感的药物防治，能收到较好的疗效。     

上海地区9株鱼源病原菌耐药性监测与分析

为了解上海地区鱼源病原菌对主要抗菌药物的耐药现状,合理、规范地使用抗菌药物治疗鱼类细菌性疾病,运用K-B纸片法研究了上海地区的9株鱼源病原菌对28种抗菌药物的耐药性,并用PCR法分析了病原菌携带喹诺酮类gyrA、qnrA、qnrS耐药基因情况。结果显示,9株病原菌对青霉素类、磺胺类、红霉素及链霉素高度耐药;对氯霉素、头孢他啶、庆大霉素、妥布霉素的敏感率为100.0%;对氟苯尼考、头孢氨苄、卡那霉素、阿米卡星、阿奇霉素、四环素类、环丙沙星、左氧氟沙星、莫西沙星、呋喃妥因的敏感率为88.9%;对新霉素、恩诺沙星、诺氟沙星的敏感率为77.8%。根据渔药使用标准,可将庆大霉素、氟苯尼考、多西环素、新霉素、诺氟沙星等作为治疗首选药物。9株病原菌中,gyrA基因检出率为66.7%,qnrS基因检出率为22.2%,未检测到qnrA基因,显示上海地区鱼源病原菌对喹诺酮类药物已在基因水平呈现出一定程度的耐药性。     

乌鳢腹水病防治药物的筛选

采用纸片法研究了乌鳢腹水病病原菌对21种药物的敏感性,病原菌对环丙沙星、复方新诺明、诺氟沙星和卡那霉素高度敏感。复方新诺明、诺氟沙星和卡那霉素治疗乌鳢腹水病效果显著．且以药饵和药物浸浴相结合的治疗方式效果最佳。     

暗纹东方鲀烂尾病防治药物的筛选

本文采用纸片法研究了暗纹东方鲀烂尾病病原菌对２０ 种药物的敏感性,病原菌对呋喃妥因、环丙沙星、诺氟沙星高度敏感,采用药液浸浴和药饵投喂相结合的方式治疗效果显著。     

一株大黄鱼致病性溶藻弧菌的耐药性及耐药基因分析

对一株分离自大黄鱼的致病性溶藻弧菌进行耐药性分析,分别用纸片扩散法、倍比稀释法检测了该菌对磺胺甲噁唑、氟苯尼考、盐酸多西环素、红霉素、盐酸环丙沙星、土霉素、恩诺沙星、硫酸新霉素、氨苄西林钠共9种药物的耐药性,同时用PCR法检测了该菌β-内酰胺酶基因bla CTX-M,喹诺酮类耐药基因(qnrVC,qnrVC5),四环素耐药基因(tetS、tetM)等耐药基因的携带情况。结果表明该菌对氨苄西林钠等药物耐药。对氟苯尼考、磺胺甲噁唑高度敏感。同时该菌携带bla CTX-M,qnrVC 2种耐药基因。本研究的结果为溶藻弧菌病的精准用药提供了数据支持。     

类志贺邻单胞菌耐药基因检测与耐药性关系的研究

为研究类志贺邻单胞菌的耐药表型和耐药基因之间的关系,采用K-B纸片扩散法对55株类志贺邻单胞菌进行耐药性鉴定,同时采用PCR方法对相关耐药基因进行检测。药敏试验结果显示,55株类志贺邻单胞菌对30种抗生素药物产生不同程度的耐药性,其中对克林霉素(98.2%)、万古霉素(98.2%)、氨苄西林(90.9%)、麦迪霉素(89.1%)、羧苄西林(89.1%)、苯唑西林(87.3%)的耐药性较高。TEM、gyrB和tetR基因PCR检出率分别为18.2%、67.3%和36.4%,其中39株致病菌至少含有1个耐药基因。试验结果表明,分离所得的全部类志贺邻单胞菌均多重耐药,耐药基因和耐药表型之间呈现一定的相关性,但非一一对应。     

强力霉素壳聚糖纳米粒冻干粉的体内外释药特性

分别采用紫外分光光度法和超高效液相色谱法研究强力霉素原料药与强力霉素壳聚糖纳米粒冻干粉的体内外释药特性。结果表明:强力霉素原料药在人工胃液、肠液和pH7.4磷酸缓冲液中的体外释放均可用零级动力学方程拟合,释放较快,在1h内能完全溶出;强力霉素壳聚糖纳米粒冻干粉具有显著的缓释特性,在各介质中的体外释放均可用双相动力学方程拟合,前期表现为快速释放,后期为缓慢释放,冻干粉在各介质中的释药速率从大到小依次为:pH2.0人工胃液>pH3.0人工胃液>pH4.0人工胃液>人工肠液>pH7.4磷酸盐缓冲液。强力霉素原料药包裹成强力霉素壳聚糖纳米粒冻干粉后,经(25±1)℃20mg/kg单剂量口灌,在斑点叉尾的药—时曲线由双峰变为单峰,在血浆中的血药峰浓度(Cmax)减小,峰值时间(Tmax)和消除半衰期(T1/2β)明显延长,药时曲线下面积(AUC)变大,是一种理想的强力霉素新剂型。     

84株仔猪黄、白痢E.coli的体外药敏试验

从四川省不同规模化猪场临诊发生典型仔猪黄、白痢猪只的肛试粪样及死亡猪只的心血和肝脏中分离出致病性大肠杆菌８４株。用１２种常用抗菌药物对分离菌株进行了体外药敏测定，结果表明：大肠杆菌存在广泛的耐药性，以多重耐药性为主。庆大霉素、链霉素、痢特灵和喹诺酮类（环丙沙星、蒽诺沙星、诺氟沙星）等药物较为敏感。药敏试验结果为规模化猪场合理用药提供了科学依据     

Bioencapsulation of Therapeutic Quantities of the Antibacterial Romet-30 in Nauplii of the Brine Shrimp Artemia and in the Nematode Panagrellus redivivus

Nauplii of the brine shrimp, Artemia , and cultures of the soil nematode, Panagrellus redivivus , were fed a suspension of the water-insoluble antibacterial Romet-30 (sulfadimethoxine plus ormetoprim) to determine if they could be used as a mechanism for delivery of the drug to larval penaeid shrimp.
Romet-30 was added to groups of brine shrimp nauplii and nematodes in 1 L beakers to achieve a concentration of 3 mg of drug per ml of seawater. After a 4 h uptake period, predetermined numbers of organisms were assayed for antibiotic content using the micro-plate diffusion method and a Romet-30 sensitive strain of Vibrio alginolyticus as the indicator. The resulting zones of inhibition were compared to that of a standard Kirby-Bauer sensitivity disc containing 25 μg of the drug that was placed on each plate as standard control. Negative controls consisted of equal numbers of nauplii and nematodes that were not exposed to the antibiotic. Artemia nauplii and nematodes accumulated approximately 0.1 μg of the drug per nauplius and approximately 0.25 μg per nematode. They exhibited no signs of toxicity from exposure to the drug and contained the antibiotic in sufficient quantity to provide a theoretical therapeutic dose of the drug when fed to penaeid larvae.
In subsequent tests, normal and diseased larval Penaeus stylirostris readily accepted Romet-30 enriched Artemia . Diseased larvae fed the drug in this manner exhibited a statistically greater overall survival and a greater survival to the post-larval stage by Student's t -test at the 5% significance level.     

恩诺沙星对小体鲟和史氏鲟体内SOD活力影响的比较研究

在水温23℃、pH值6．5、溶氧10mg／L、氨氮含量小于0．1mg／L和亚硝酸盐含量小于0．001mg／L的条件下,将恩诺沙星按照0、20、40、60、80和100mg／kg浓度,连续口服给平均体重50．0±5．0g的小体鲟（Acipenser ruthenus Linnaeus）及史氏鲟（Acipenser schrenckii Brandt）5d,停药2d后测定其血浆及肝脏组织中过氧化物岐化酶SOD的活力,以期掌握不同恩诺沙星给药浓度下,两种鲟两种组织中SOD活力变化趋势,探讨分析该酶在药物代谢过程中的作用机制。结果表明：两种鲟两种组织内均含有一定量的SOD酶,且在对照组及所有给药组肝脏中酶活力均高于血浆中。不同给药浓度下,两种鲟两种组织中SOD活力均先受诱导升高,而后被抑制降低的变化趋势,且在40mg／kg浓度组达到最大值。血浆中SOD活力受给药浓度影响较小,起伏较平稳,而小体鲟SOD活力始终高于史氏鲟。肝脏中SOD活力变化较剧烈,在低浓度组（〈40mg／kg）史氏鲟肝脏中SOD活力明显高于小体鲟,而在高给药浓度组（〉40mg／kg）则小体鲟略高于史氏鲟。     

双氟沙星与异育银鲫血浆蛋白的结合率

为了研究双氟沙星(difloxacin,DIF)与异育银鲫(Carassais auratus gibebio)血浆蛋白的结合性质,采用平衡透析法测定了DIF与异育银鲫血浆蛋白的体外结合率,并研究了温度、血浆浓度及药物浓度对其的影响。结果显示:DIF血浆蛋白结合率在4℃、15℃、20℃、25℃、30℃、37℃条件下变化差异不显著(P>0.05);药物血浆蛋白结合率显著高于二倍稀释血浆的结合率,也显著高于四倍稀释血浆的结合率(P<0.05)。当DIF浓度在0.5～5μg/mL范围之间时,药物与血浆蛋白结合率在32.4%～19.6%之间,并随着药物浓度的升高而降低,最大结合能力(β)和解离常数(Kdp)分别为3.5×10-7 mol/g和4.04×10-6 mol/L;当DIF质量浓度为5～40μg/mL范围内时,血浆蛋白结合率的变化差异不显著(P>0.05)。此外,游离药物与总药物浓度呈线性关系,关系式为y=0.77x-0.18。结果表明,DIF与异育银鲫血浆蛋白结合率在本实验条件下不受温度影响,且具有浓度依赖性;在0.5～5μg/mL范围内结合率为非线性,而在5～40μg/mL范围内为线性。本研究旨在为DIF药物代谢动力学理论研究及其临床用药提供理论参考。     

鲤鱼细菌性败血症病原菌的研究

从具有典型细菌性败血症症状的病鱼或濒死鱼中分离到2 株优势菌,经分离培养、人工感染试验、毒力因子、16S rRNA基因序列的测定及药敏试验,研究分离菌的生理生化特征、致病性及药物敏感性.根据2 株分离菌的菌落形态、生化特性和16S rRNA基因序列的测定结果(同源性为99%),确定为嗜水气单胞菌.人工感染试验的症状与自然发病相似,且再次感染后又分离到该菌株.2 株菌对阿米卡星、氨曲南、头孢噻肟等15 种药物均敏感,对氨苄西林均耐药,对复方磺胺表现出菌株差异.对其敏感的15 种药物可作为防治鲤鱼细菌性败血症的首选药物.     

豫北地区主要淡水鱼类感染嗜水气单胞菌的流行病学调查

对豫北地区嗜水气单胞菌引起的细菌性败血病进行流行病学调查,分离鉴定致病性嗜水气单胞菌菌株,并对致病性嗜水气单胞菌菌株进行毒力验证和药敏试验。采集4个养殖场病鱼标本及水样,每月进行流行病学调查,利用生理生化及分子生物学方法检测嗜水气单胞菌的分布状况。结果显示,筛选出52株为嗜水气单胞菌,其中32株为致病性嗜水气单胞菌,20株为非致病性嗜水气单胞菌,且致病性嗜水气单胞菌主要分布在7—9月份,毒力验证试验表明,32株致病性菌株的毒力大小差异明显,筛选出强毒株XDMG(4),为后期试验的疫苗株做准备;药敏试验表明,不同菌株对同一种药物的药敏结果不同,但大部分药物的药敏结果基本一致,70%以上的致病性菌株对头孢哌酮、氟本尼考、菌必治、阿米卡星等抗菌药物表现为高度敏感,对青霉素类药物表现为高度耐药性,耐药率达100%,对氨基糖苷类(不包括阿米卡星)、磺胺类、四环素等药物呈现不同程度的耐药性,具有多重耐药性。本试验旨在丰富本地区的鱼类细菌性败血病的病原资料,并为该菌引起的人类疾病的防控提供科学依据。     

海水养殖源弧菌耐药性调查与分析

对2010年收集自上海、江苏、海南等地海水养殖区域内的184株弧菌进行了耐药率测定和分析,绘制了其对常见药物的耐药谱。结果显示,所有弧菌对喹诺酮类、氯霉素类、磺胺类、氨基糖苷类、β-内酰胺类、大环内酯类及利福霉素类等常见药物均有不同程度的耐药,对抗生素耐药率分别为新生霉素64.7%、复方新诺明57.6%、恩诺沙星54.3%、利福平54.3%、卡那霉素45.7%,对诺氟沙星、氯霉素类和红霉素的耐药率则维持在较低水平,分别为8.2%、10.3%和9.2%;菌株交叉耐药和多重耐药现象严重,对1种以上药物产生耐药的菌株占总数的100%;对2种以上药物产生耐药的菌株占总数的93.5%;对3种以上药物耐药的菌株占80.4%;对4种以上药物耐药的菌株占49.5%;对5种以上药物耐药的菌株占26.6%;对6种以上药物耐药的菌株亦有3.8%。由此可见,水产细菌的耐药性十分严重,已成为当前渔业细菌性疾病防控的突出问题。