蜜蜂高产抗螨杂交种“HYR”和“JYR”的选育

    选取卡尼鄂拉蜂、高加索蜂和平湖意蜂为蜂种选育的主要素材,以闭锁集团繁育和人工授精技术为主,RAPD分析为辅,建立和保持3个纯系,在此基础上选育出"HYR"和"JYR"2个高产抗螨杂交蜂种.这2个杂交蜂种除抗螨能力强外,分别具有蜂蜜高产和蜂蜜、王浆双高产的生产性能.与本地意蜂相比,"HYR"和"JYR"蜂种的蜂蜜平均单产分别提高59.40%(P＜0.01)和32.27%(P＜0.01),"JYR"蜂种的王浆平均单产提高69.95%(P＜0.01);2个蜂种的秋季蜂螨寄生率分别为1.97%(P＜0.01)和2.19%(P＜0.01),均显著低于本地意蜂.     

Venom Collection from Honey Bees

A device that provides an electric shock makes it possible to collect pure venom from several thousand honey bees (Apis mellifera). The collection apparatus fits underneath the brood chamber of a colony of bees and may be moved from hive to hive. Each colony is "milked" for 5 minutes. An average of 20 hives must be "milked" to obtain 1 gram of venom. Under optimum conditions this quantity of venom is produced by 10,000 worker bees.     

蜜蜂高产杂交种“华蜂213”和“华蜂414”的选育

 搜集了西方蜜蜂（Apis mellifera L.）的8个品系的蜂王作育种素材，选用了其中的4个素材作系祖，通过人工授精的方法，采用母子回交等多种近交系统，建立并保持了4个高纯度的近交系。按蜂王是单交种、工蜂是三交种（或回交种）这一蜂群血统构成形式进行系间杂交和筛选，育出“华蜂213”和“华蜂414”两个高产杂交种。与本地蜜蜂相比，“华蜂213”和“华蜂414”的蜂蜜平均单产分别提高70%左右和10%以上，王浆平均单产分别提高20%左右和60%以上。     

东北黑蜂（Apis mellifera ssp.）亲缘关系的分析

 【目的】从分子水平揭示东北黑蜂与欧洲黑蜂、意大利蜜蜂、卡尼鄂拉蜂、喀尔巴阡蜂、安拉托利亚蜂、高加索蜂以及非洲类型的西方蜜蜂的亲缘关系,为东北黑蜂分类地位的正确认识及其合理保护提供参考。【方法】对来自东北黑蜂国家级自然保护区内9个乡镇的东北黑蜂与上述西方蜜蜂的线粒体DNA（mtDNA）tRNAleu～COⅡ序列进行PCR扩增;同时取部分PCR产物进行DraⅠ酶切分析;并根据酶切类型对相应的PCR产物经纯化、克隆和测序后进行序列分析,并构建Neighbor-Joining(NJ)聚类图。【结果】东北黑蜂mtDNA tRNAleu～COⅡ序列长度为526 bp,P序列缺失,Q序列有5个位点出现碱基转换（4T?C、1A?G）,1个碱基颠换（1A?T）;只有一种DraⅠ酶切类型,其酶切片段长度分别为422、64、47和41 bp,同DNAMAN软件分析的酶切位点一致;其序列特征和酶切类型同西方蜜蜂线粒体C、O分支相似,而与A分支的非洲蜜蜂、M分支的欧洲黑蜂存在较大差异;根据NJ聚类图,东北黑蜂属于线粒体O分支。MtDNA tRNAleu～COⅡ的序列特征和DraⅠ酶切分析表明,东北黑蜂属于线粒体O分支,与同一分支的高加索蜂、安拉托利亚蜂亲缘关系最近,与C分支的意大利蜜蜂、卡尼鄂拉蜂、喀尔巴阡蜂亲缘关系次之,而与M分支的欧洲黑蜂和A分支的非洲蜜蜂亲缘关系较远。【结论】根据NJ聚类图,东北黑蜂处于安拉托利亚蜂和高加索蜂之间,东北黑蜂是否是这两个地理亚种的混合种群,或能否算一个新的地理亚种,还有待进一步的研究。     

西方蜜蜂工蜂不同虫态发育的转录组学分析

【目的】基于转录组学对西方蜜蜂工蜂不同虫态间的差异表达基因（DEGs）进行筛选和功能注释分析,揭示与工蜂生长发育相关的信号通路,为深入解析工蜂生长发育的分子调控机理提供基础数据。【方法】以西方蜜蜂工蜂的3日龄幼虫、1日龄蛹和1日龄羽化工蜂3个虫态为研究对象,利用llumina NovaSeq 6000平台进行转录组测序,采用DESeq2筛选不同虫态样品间的表达差异基因,然后分别进行GO功能注释分析及KEGG信号通路富集分析,并通过实时荧光定量PCR进行验证。【结果】经转录组测序,在西方蜜蜂工蜂3日龄幼虫与1日龄蛹间筛选出4823个差异表达基因（51.86%上调,48.14%下调）,在1日龄蛹与1日龄羽化工蜂间筛选出3295个差异表达基因（57.51%上调,42.49%下调）,在3日龄幼虫与1日龄羽化工蜂间筛选出5267个差异表达基因（52.95%上调,47.05%下调）。GO功能注释分析结果显示,3日龄幼虫与1日龄蛹间的差异表达基因注释到43个GO功能条目,1日龄蛹与1日龄羽化工蜂间的差异表达基因注释到45个GO功能条目,3日龄幼虫与1日龄羽化工蜂间的差异表达基因注释到44个GO功能条目,主要涉及细胞过程、细胞部分及结合等。KEGG信号通路富集分析发现,3日龄幼虫与1日龄蛹间有2905个差异表达基因富集到332条KEGG信号通路上,其中17条KEGG信号通路呈显著富集,涉及核糖体、氧化磷酸化和昆虫激素生物合成等;1日龄蛹与1日龄羽化工蜂间有1644个差异表达基因富集到331条KEGG信号通路上,其中45条KEGG信号通路呈显著富集,涉及氧化磷酸化、生热作用和胰岛素分泌等;3日龄幼虫与1日龄羽化工蜂间有2958个差异表达基因富集到337条KEGG信号通路上,其中14条KEGG信号通路呈显著富集,涉及核糖体、蛋白酶体和胰岛素分泌等。6个随机挑选差异表达基因的实时荧光定量PCR检测结果与转录组测序结果相符,即转录组测序结果可靠。【结论】昆虫激素生物合成通路相关差异表达基因调控与西方蜜蜂工蜂各虫态JH滴度变化规律一致,氧化磷酸化信号通路则与各虫态的营养摄入和活动行为相关,而胰岛素分泌通路涉及各虫态的营养调控、脂肪体合成及细胞凋亡。可见,昆虫激素生物合成、胰岛素分泌和氧化磷酸化3种信号通路在西方蜜蜂工蜂幼虫、蛹和成虫的发育调控中发挥着重要作用。     

长白山北坡西方蜜蜂种群分布调查

[目的]调查长白山北坡西方蜜蜂种群分布情况。[方法]对西方蜜蜂在长白山北坡的饲养现状及分布情况进行了调查,并对其在长白山的分布、饲养规模、生产性蜂种的类型及生产性能等进行了分析,探讨了中、西蜂的种间竞争关系。[结果]西方蜜蜂种群在长白山海拔550~1 100 m均有分布,主要分布在各交通要道上。2014—2016年,西方蜜蜂种群共分布4 928群,且有逐年增加的趋势。2016年,在调查的3条公路上分布西方蜜蜂蜂场41个,种群1 930群。定地蜂场仅占调查总蜂场数的12.2%,生产类型主要为蜜型和蜜浆双混型,蜂场规模以中小型居多,蜂蜜产量40~50 kg/群的蜂场为13个,其蜂群数占调查总群数的49.3%。[结论]研究结果可为长白山中华蜜蜂种群恢复及可持续发展提供科学依据。     

Queen honey bee attractiveness as related to mandibular gland secretion

The termination of mandibular gland secretion by gland removal in living mated queen honey bees (Apis mellifera L.) caused approximately 85 percent loss of queen attractiveness to worker bees. The secretion of attractants in virgin queens increased with age. Old virgins were as attractive as mated queens. A rapid assay for queen attractiveness is described.     

RAPD分子标记在蜜蜂遗传育种中的应用

RAPD分子标记在蜜蜂遗传育种中得到较广泛应用 .利用 RAPD分子遗传标记 ,估测蜜蜂性别决定位点 (x)与低幼虫存活率位点的标记序列位置 (STS)之间的遗传距离为 1 .6c M;构建了蜜蜂 (Apismellifera)遗传连锁图 ,确定了蜜蜂性基因位点 (x)、黑色体色基因位点 (blk)、苹果酸脱氢酶 (Mdh-1 )位点分别位于第 3、6、1 8个连锁群 ;确定了影响蜜蜂采粉、报警信息素水平、螫刺行为和体长等数量性状的基因座位 ;筛选出 5种引物 ,这些引物所扩增的 RAPD标记可作为鉴别欧洲蜜蜂和非洲蜜蜂 (A. mellifera L.)的分子标记 .蜜蜂高产性状 RAPD标记的研究已取得一定进展     

胡蜂与蜜蜂的防御行为研究

 在19.4℃气温条件下,选择东方蜜蜂和西方蜜蜂各3群进行蜜蜂激怒时的结团温度的试验研究,刺激物分别为半导体点温仪器的铜线头和活体胡蜂,在蜂群内放入刺激物后每隔15 s做一次温度记录。结果发现,在东方蜜蜂群内,蜂群对两种刺激物的结团蜜蜂数在25～32只之间;温度在210 s左右的时间内分别达到44.6 ℃和45.0 ℃,其中,刺激物为铜线头的结团温度最高可以达到45.0 ℃, 而刺激物为活体胡蜂的结团温度最高可以达到45.6 ℃;在西方蜜蜂群内,蜂群对两种刺激物的结团蜜蜂数在18～26只之间;蜂群对两种刺激物的结团温度在210 s左右的时间内分别达到42.2 ℃和 44.1 ℃,其中刺激物为铜线头的结团温度最高可以达到42.7 ℃,而刺激物为活体胡蜂的结团温度最高可以达到44.4 ℃.在恒温箱的耐温试验里,20 min内,黑盾胡蜂的最高耐温极限温度为46 ℃,而东方蜜蜂和西方蜜蜂的最高耐温极限温度却分别为51 ℃和52 ℃.另外, 选择云南高原温带型东方蜜蜂和云南低海拔热带型东方蜜蜂各2群,在蜂箱门口用活体黑盾胡蜂（Vespa velutina）干扰蜜蜂采集活动,干扰的时间分别为3 min,6 min和12 min. 每 min为一计数单位,记录蜜蜂采集蜂飞出的数量。结果发现:蜜蜂采集蜂飞出的数量随干扰时间的增加而明显下降,干扰的时间越长,蜜蜂采集蜂恢复到正常数量的时间就越长;高原温带型东方蜜蜂和低海拔热带型东方蜜蜂在胡蜂干扰时的在数量变化有着明显的差异,后者对胡蜂的干扰比前者更为敏感(P<0.05）。     

电取毒对蜜蜂个体生物学的影响

电击蜜蜂取毒的最佳电参数 :意大利蜜蜂为 35- 55V方波电压 ,中华蜜蜂为间息 30 - 50 V方波电压 .电取毒极显著地影响蜜蜂的个体寿命 ,加速蜜蜂的新陈代谢和蜂蜜消耗量 ,但巢顶取毒几乎不影响蜜蜂的采集活动 .电击取毒后的蜜蜂趋于温和 ,抗敌害的能力降低 .电取毒生产中移群再取毒时 ,把握好即时通电可避免电取毒对蜜蜂行为的一些不利影响     

Male reproductive parasitism: a factor in the africanization of European honey-bee populations

Africanized drone honey bees (Apis mellifera) migrate into European honey-bee colonies in large numbers, but Africanized colonies only rarely host drones from other colonies. This migration leads to a strong mating advantage for Africanized bees since it both inhibits European drone production and enhances Africanized drone production.     

Colony defense by africanized and European honey bees

Africanized and European honey bee (Apis mellifera) populations showed quantitative differences in colony defensive behavior. Africanized bees responded faster and in much larger numbers than European honey bees and produced 8.2 and 5.9 times as many stings during two different experiments. Times to react to alarming stimuli were negatively correlated with the number of bees responding and to the total number of stings. The number of bees responding was significantly correlated to the total number of stings only for the Africanized population.     

王浆高产蜜蜂和原种意大利蜜蜂雄蜂卵期发育蛋白质组分析

 【目的】比较王浆高产蜜蜂（Apis mellifera L.浆蜂）与原种意大利蜜蜂（Apis mellifera L. 原意）雄蜂卵期3 d发育阶段蛋白质组的特点。【方法】根据双向电泳所得表达谱,对两个蜂种雄蜂卵期发育的蛋白质的种类、等电点、分子量和表达量进行分析。【结果】浆蜂雄蜂卵期所表达的蛋白数（332、377和339）显著的高于相应日龄原意雄蜂卵期3个日龄所表达的蛋白数（283、305和293）（P＜0.05）,其中在两蜂种3个日龄共同表达的蛋白数为254个。通过雄蜂卵期3 d发育过程蛋白质表达谱的比较,两个蜂种分别检测到274、298 和285个共有蛋白。在这些共有蛋白中,浆蜂雄蜂分别有54、42和47个蛋白的表达量显著高于（P＜0.05）原意,18、75和61个蛋白显著低于（P＜0.05）原意。同时,浆蜂还检测到58、79和54个特异蛋白,而原种意大利蜜蜂也分别检测到9、7、8个特异蛋白。【结论】浆蜂和原意雄蜂卵期发育的蛋白质组表达谱存在显著差异,但都在2日龄蛋白表达最活跃;两个蜂种雄蜂卵期发育所表达的共有蛋白可能是其发育所必须的管家蛋白,但它们的表达模式存在较大差异,不同日龄的特异蛋白表明雄蜂卵在不同的发育阶段需要不同的蛋白来调控;浆蜂和原意雄蜂卵期表达的特异蛋白是否是与王浆高产相关的功能蛋白,有待进一步的研究。     

蜂群入场时间对蜜蜂采集梨花粉习性的影响

【研究目的】为了完善梨树蜜蜂授粉配套技术,提高梨树蜜蜂授粉效能,节约成本。【方法】本研究以砀山酥梨和意大利蜜蜂为试验材料,考察了蜂群入场时间对蜜蜂采集梨花粉的影响。【结果】梨树末花期散粉量大,蜜蜂采集的花粉最多;在蜂群入场第一天,采集梨花粉的重量与开花量呈正相关,且初花期、盛花期入场蜂群采集梨花粉的比例高于其它时间入场蜂群;在同一天内,初花期入场蜂群采集梨花粉的重量和比例高于其它时间入场蜂群;蜂群采集梨花粉的高峰在12:00-13:00;初花期、盛花期入场蜂群对梨花粉采集好于其它时间入场蜂群,授粉效能也优于其它时间入场蜂群。【结论】本研究认为蜂群在梨树初花期即开花20%左右入场,可以达到梨树最佳授粉效果。     

人工羽化对蜜蜂的影响

结果表明,人工羽化[温度(34.5±0.2)℃,相对湿度35%-45%]与自然羽化工蜂(ApismelliferaL.)的封盖期、吻长、翅面积和背板长差异均不显著(P>0.05),但初生重差异极显著(P<0.01).     

Extensive volcanism associated with the separation of australia and antarctica

Alternating hard and soft layers characterize the Gull Rock and Tuit Members of the late Eocene Blanche Point Formation, South Australia. Originally the formation was mainly a mixture of volcanic ash, sponge spicules, and calcareous fossil remains, with hard layers produced later by selective silicification. It resembles Cretaceous sediments from western Europe and the eastern coast of the United States, and in each case it appears that alteration of volcanic ash produced smectite and clinoptilolite with release of silica that subsequently crystallized as opal-CT. The occurrence of similar deposits from New Zealand to as far west as Albany, Western Australia, indicates extensive volcanic activity south of Australia in the late Eocene resulting from rifting and separation from Antarctica.     

越夏期蜜蜂肠道细菌种类鉴定

从越夏期意大利蜜蜂(Apis mellifera ligustica)工蜂成虫肠道中分离、纯化、培养,获得9株细菌.通过形态学观察和生理生化特性研究,从9株细菌中鉴定出芽孢杆菌属(Bacillus)、柠檬酸杆菌属(Citrobacter)、沙雷氏菌属(Serratia)、泛生菌属(Pantoea)、肠杆菌属(Enterobacter).     

Preservation of honey bee semen

Fertilized eggs have been obtained from queen honey bees (Apis mellifera L.) inseminated with sperm that had been stored in vitro at above-freezing temperatures for up to 68 days. The effects of various experimental storage treatments on semen are described. Semen shipped by ordinary mail has been successfully used for artificial insemination.     

王浆高产蜜蜂（Apis mellifera L.）工蜂幼虫发育期蛋白质组分析

 【目的】20世纪90年代中国成功培育出的王浆高产蜜蜂（Apis mellifera L.）是当今世界最优良的蜂种,使中国的王浆年产量高达2 600多吨,占世界总产量的90%以上,稳居世界第一,通过对该蜂种不同发育日龄工蜂幼虫的蛋白质组进行研究,以探明其发育机理。【方法】采用双向电泳法对王浆高产蜜蜂（Apis mellifera L.）不同发育期的工蜂幼虫进行蛋白质组研究。【结果】在幼虫期6 d的发育过程中,2日龄、4日龄、6日龄幼虫中分别检测到了262、418、194个蛋白点。这些蛋白的分子量在12.2～88.2 kD的较大范围之间,等电点在pH 4.00～9.24之间。有84个蛋白在幼虫期整个发育过程中均有表达,其中33%呈上调趋势,21%呈下调趋势,46%蛋白的表达没有规律。2日龄、4日龄、6日龄幼虫中分别有88、209、63个特异表达的蛋白。除此之外,有84个蛋白在幼虫发育的6日龄表达关闭,而在2日龄和4日龄幼虫中表达;有41个蛋白在2日龄表达关闭,而在4日龄和6日龄中表达;仅有6个蛋白在4龄日表达关闭,而在2日龄和6日龄表达。【结论】幼虫的发育过程有大量基因参与表达和调控,是一个复杂而动态有序的过程,且发育到4日龄的幼虫蛋白表达最为活跃。幼虫整个发育过程中的共有蛋白是发育必需的保守蛋白。幼虫不同的发育阶段由不同的特异蛋白进行调控。     

蜜蜂消化道酶谱带分布及其糖转化酶活性

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳分离意蜂和中蜂消化道各部分 (前肠、中肠、后肠 )肠液 .结果表明意蜂和中蜂消化酶的种类有明显差别 .它们的前肠均中有 1条酶带 (R1带 ) ,中肠均有 5条酶带 (意蜂为 R1、R3 、R4 、R5、R9;中蜂为 R1、R3 、R4 、R6、R10 ) ,意蜂后肠有 5条酶带 (R1、R2 、R4 、R7、R8) ,中蜂则没有 .意蜂和中蜂的前肠、中肠、后肠的糖化酶活性均依次降低 .前肠和中肠的糖化酶活性意蜂较中蜂低 ,后肠的糖化酶活性则差别不大