14株芽胞杆菌菌株的分子鉴定及其促生机理分析

以前期筛选的14株植物促生细菌为实验材料,运用16S rRNA基因序列同源性对菌株进行分子鉴定,通过生物测定评价菌株对番茄的促生效果,并对其促生机理进行初步分析。实验结果表明,促生菌株来自芽胞杆菌科的2个属、9个种。对番茄种子促生特性研究表明,14株芽胞杆菌均能提高种子发芽率,增长率为0.74%~11.85%;其中12株芽胞杆菌能促进胚根生长,增长率为4.03%~65.33%;而8株芽胞杆菌促进胚芽生长,增长率为1.24%~18.17%。对不同芽胞杆菌的促生因子相关分析结果表明,芽胞杆菌的6个促生因子（解无机磷、解有机磷、固氮效能、吲哚-3-乙酸含量、植酸酶活性、吡咯喹啉醌浓度）之间无相关关系（P>0.05）,与活菌数无相关关系（P>0.05）,与种子发芽率、胚根长、胚芽长也无显著相关关系（P>0.05）。种子发芽率与胚根长、胚芽长无相关关系（P>0.05）,而胚根和胚芽长之间具有显著性相关（P<0.01）。室内番茄盆栽实验表明,试验的6株芽胞杆菌对番茄幼苗均有促生作用,不同芽胞杆菌对番茄促生特性存在差异,如图瓦永芽胞杆菌FJAT-47648能显著增加根长,提升地上部与地下部干重,而暹罗芽胞杆菌FJAT-47226的促生效果则主要表现在增加株高和地上部生物量上。     

巨大芽胞杆菌(A6)在红黄壤中对油菜的促生作用

在有效磷缺乏的鄂东南红黄壤稻田土壤条件下，接种巨大芽胞杆菌A6，研究其对油菜生长发育和盆栽产量的影响。试验结果表明，A6能促进油菜生长，表现不同程度地增加植株的叶面积、干重、全磷含量和盆栽产量。这一结果揭示了利用油菜促生根际细菌A6的可能性。     

枯草芽胞杆菌TR21叶腋喷施防治巴西蕉枯萎病

枯草芽孢杆菌TR21是一株植物内生菌,能够通过叶腋接种在香蕉体内定殖。采用叶腋接种法研究TR21对盆栽巴西蕉枯萎病的防治效果,并在大田采用随机区组试验设计,研究叶腋喷施TR21对巴西蕉枯萎病的防治效果和对巴西蕉挂果情况的影响。盆栽试验结果表明,按每次5.0×108 cfu/株的接种量,每隔10 d使用1次,连续使用4次,以地上部分萎蔫程度统计,30 d防效为(89.42±7.81)%,40 d防效为(85.95±2.77)%;结合地上部分萎蔫程度和球茎解剖结果统计,40 d防效为(79.32±4.49)%。从2008年4月至2009年2月进行田间试验,每次按1.8×108 cfu/株的用量,每隔10 d喷施1次,连续处理的植株到收获结束后,香蕉枯萎病发病率为(20.27±7.02)%,显著低于清水处理,防效达到61.92%。处理区2008年9月份的总挂果率达到25.00%,显著高于对照(3.13%),10月份的总挂果率为62.75%,高于对照(56.52%),但差异不显著。说明枯草芽孢杆菌TR21可以通过叶腋喷施接种防治巴西蕉枯萎病。     

酸碱条件对枯草芽胞杆菌FJAT-14254代谢物产生的影响

为考察酸碱条件对枯草芽胞杆菌FJAT-14254代谢物产生的影响,采用气相色谱-质谱联用分析枯草芽胞杆菌FJAT-14254菌株的胞内成分。结果表明：通过谱库扫描得到32种高匹配率代谢物的初步鉴定结果,主要包括氨基酸类、酸类、烷烃类等,其中含量相对较高的有7种;枯草芽胞杆菌FJAT-14254代谢物的种类和含量与其培养环境的酸碱度变化呈一定的相关性,强酸性(pH＝3)条件下培养的胞内代谢物具有特异性,而接近中性(pH＝5、7)条件及碱性(pH＝9、11)条件下培养胞内代谢物则相似。由此推断,不同pH条件影     

枯草芽胞杆菌在油菜根茎叶的定殖动态和生防作用研究

采用常规方法跟踪枯草芽胞杆菌Tu-100在缩影系统油菜根际的定殖情况。Tu-100在油菜不同根段部位的定殖密度从上到下呈现了逐渐递减的规律。随着接种后时间的延长而逐渐下降。在根段8cm以外的根区几乎检测不到接种菌。在油菜播种后3d,定殖密度可达最高水平（8.3×105 个/g）,然后急速下降,30d后保持相对稳定的较低水平（1.3×102 个/g）。 在油菜三片真叶时喷雾接种一次,20d后,在茎和叶上不能检测到所接种的Tu-100,并且抗菌核病的能力也逐渐减弱。     

油菜根圈枯草芽孢杆菌Tu-100抗真菌范围和防治作用

枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)具有抗胁迫生长和强竞争性等优势,是一种具有应用潜力的农作物病害生防细菌。本研究以来源于油菜根际、具有促生作用的枯草芽孢杆菌Tu-100为材料,研究了其抑制农作物真菌病原菌的作用范围和效果。结果证明：Tu-100对供试的12种真菌均有明显抑制作用。对峙培养试验结果显示：直接用Tu-100的发酵菌液与供试的10种病原真菌形成了明显的抑菌圈,浓缩10倍后对供试的12种真菌均形成直径27～40mm的抑菌圈。离体叶片上防治菌核病（Sclerotinia sclerotiorum）的试验结果显示：Tu-100菌液对油菜、大豆菌核病和玉米小斑病（Bipolaris maydis）均有显著防治作用。该菌株防治植物根部病害的进一步研究将具有实际应用意义。     

培养条件对枯草芽胞杆菌TU100产生抗菌物质的影响

以在油菜根际高效定殖的枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）TU100为材料，研究了其主要抗菌物质的代谢条件。证明其主要拮抗物质属胞外分泌型，释放到培养液中，具有耐高温特性；对油菜菌核病菌（Sclerotinia sclerotiorum）具有较高的抑制活性。细菌在28-30℃生长旺盛，产抗菌物质也较多；培养48h细菌数量达最大值，培养72h抗菌物质的产生量达高峰。培养液的初始pH值6-8有利于细菌的增殖，抗菌物质活性也最强；通气良好的条件下菌株生长好、产抗菌物质量多；培养基C/N比对菌株生长也有重要影响， C/N比为15时有利于细菌生长以及抗菌物质的积累。     

芽胞杆菌JK05的鉴定及其对香蕉、玉米的促生和生防潜能研究

解淀粉芽胞杆菌、枯草芽胞杆菌和苏云金芽胞杆菌等是重要的有益微生物,被广泛应用于植物病虫的生物防治。前期分离获得1株芽胞杆菌JK05,对其形态、生理生化特征、16S rRNA和gyrA基因序列进行分析,将其鉴定为解淀粉芽胞杆菌植生亚种Bacillus amyloliquefaciens subsp. plantarum。对峙培养实验结果显示,JK05菌株对多种植物病原镰刀菌具有拮抗作用。植物生长促进实验表明,JK05菌株对香蕉和玉米生长具有明显促进作用。盆栽实验结果显示,JK05菌株对香蕉枯萎病具有良好的防治效果。采用特异引物对JK05菌株基因组DNA进行PCR扩增,其可扩增到表面活性素（surfactin）、丰原素（fengycin）、伊枯草菌素A（iturin A）等抗生素合成基因。综上,JK05菌株具有良好的生防潜力,有望应用于生物农药和微生物肥料。     

培养条件对枯草芽胞杆菌TU100生长和产生抗菌物质的影响

以在油菜根际高效定殖的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)TU100为材料,研究其主要抗菌物质的代谢条件。证明其主要拮抗物质属胞外分泌型,释放到培养液中,对油菜菌核病菌(Sclerotinia sclerotiorum)具有较高的抑制活性。TU100在28-30℃生长旺盛,产抗菌物质也较多;培养48h数量达最大值,培养72h抗菌物质的产生量达高峰。培养液的初始pH值6-8有利于TU100增殖,抗菌物质活性也最强;通气良好的条件下TU100菌株生长好、产抗菌物质量多;培养基C/N比对菌株生长也有重要影响,C/N比为15时有利于TU100生长以及抗菌物质的积累。     

华重楼根际土芽胞杆菌多样性研究

为了解华重楼根际芽胞杆菌种群多样性信息,本研究采用稀释平板法分离福建省光泽县华重楼品种根际的芽胞杆菌,并对其进行16S rRNA序列分析。结果表明：从华重楼根际共分离到17个形态差异的芽胞杆菌菌株;16S rRNA序列分析表明,17个菌株鉴定为8个种,归属于4个属,芽胞杆菌属(Bacillus)、赖氨酸芽胞杆菌属(Lysinibacillus)、类芽孢杆菌属(Paenibacillus)和绿芽胞杆菌属(Viridibacillus),其中芽胞杆菌属的种类和数量最多。经抑菌试验分析,芽孢杆菌属的特基拉芽孢杆菌FJAT-43012对尖孢镰刀菌具有抑制作用。本研究结果表明,华重楼根际芽胞杆菌种群多样性较为丰富。本研究对芽胞杆菌资源的开发和利用提供良好的实验材料和理论基础。     

磁处理水对枯草芽孢杆菌生长的影响试验

采用分光光度法、平板菌落计数法,研究不同磁场强度的磁处理水对枯草芽孢杆菌生长的影响。结果表明,磁场强度为0.05 T磁处理水对枯草芽孢杆菌生长有一定促进作用(P＜0.01); 0.10﹑0.25 T的磁处理水对枯草芽孢杆菌的生长有非常明显的抑制作用(P＜0.01);0.08 T的磁处理水对枯草芽孢杆菌的生长没有影响(P＞0.05)。磁处理水对枯草芽孢杆菌的生长具有一定影响,其生长情况与磁场强度有关。     

枯草芽孢杆菌在农作物生产上的应用研究进展

综述了枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)在土壤提质改良、促进作物生长发育及产质量的提高、耕作土壤降害与修复等方面的研究成果,并对作物生产上枯草芽孢杆菌与环境相关影响因子间其专业化功能开发研究及其分子生物学水平上的作用机理等进行了展望。     

枯草芽孢杆菌防治大豆菌核病效果初报

本文应用枯草芽孢杆菌ZH-2菌株的发酵菌剂,在桦南县进行了生防菌剂防治大豆菌核病的田间防效试验,结果表明生防菌剂100倍稀释液浸种和喷洒处理对大豆菌核病的田间防效达67.9%。     

枯草芽孢杆菌防治草莓白粉病的田间试验

草莓白粉病是琼海草莓生产中的常发性主要病害,严重影响草莓的生产。琼海草莓种植期间低温、高湿气候情况频发,有利于草莓白粉病的发生。通过不同配方组合发现：枯草芽孢杆菌按4 050 g/hm2用量单独使用,预防草莓白粉病防效达92.09%,发病后混合化学药剂露娜森做治疗,具有防效快、持效期长等优点。     

茶园芽孢杆菌QM7促生特性及耐酸铝机制初步研究

目前含芽孢杆菌等微生物制剂的有机肥料在酸性茶园土壤中的生物活性不高,难以起到有效的促生作用,达到部分替代和减少化肥使用量的目的。本实验分离得到1株耐酸铝芽孢杆菌,命名为QM7。试验发现菌株促生能力受到铝离子浓度的影响,在无铝条件下菌株生长素(IAA)的分泌量为85.6 mg·L~(-1),当铝离子浓度为1 mmol·L~(-1)时IAA分泌量为36.8 mg·L~(-1);盆栽结果表明,在6周内菌株可以增加茶苗根系表面积56.8%,根尖数27.3%;蛋白电泳分析发现高浓度的铝胁迫会导致菌株胞内64种与转录、翻译和代谢相关蛋白的表达发生差异,使得菌株生长受到抑制。     

枯草芽孢菌株TL2在茶树体内的内生定殖

枯草芽孢菌株TL2接种茶树后,可以从茶树不同组织分离到细菌,其细菌种群数量随着时间逐渐减少,其细菌多样性系数也随着时间有所降低。其菌体主要分布在根部厚壁组织的细胞间隙,茎部厚角组织的细胞间隙、维管束等组织的细胞间隙、叶片的气孔器附近、上下表皮细胞间隙、厚角组织细胞间隙以及内皮层组织细胞间隙等。     

Efficacy of Bacillus subtilis MBI 600 Against Sheath Blight Caused by Rhizoctonia solani and on Growth and Yield of Rice

Rice sheath blight disease(ShB),caused by Rhizoctonia solani,gives rise to significant grain yield losses.The present study evaluated the efficacy of Integral?,the commercial liquid formulation of Bacillus subtilis strain MBI 600,against rice ShB and for plant growth promotion.In greenhouse studies,four log concentrations of Integral(from 2.2×106 to 2.2×109 cfu/mL) were used as seed treatment(ST).After 25 d,seedlings were dipped(SD) into Integral prior to transplanting.At 30 d after transplanting(DAT),leaf sheaths were inoculated with immature sclerotia of the pathogen.At 45 DAT,a foliar spray(FS) with Integral was applied to some treatments.The fungicide control was 50% carbendazim at 1.0 g/L,and a nontreated control was also included.Overall,there were 10 treatments,each with five replications.ShB severity was rated at 52 DAT,and seedling height and number of tillers per plant were rated at 60 DAT.In 2009,two field trials evaluated Integral at 2.2×108 and 2.2×109 cfu/mL.Integral was applied as ST,and seedlings were produced in a nursery bed.After 32 d,seedlings were treated with Integral as SD and transplanted into 10 m2 blocks.Foliar sprays were given at 45 and 60 DAT.There were seven treatments,each with eight replications arranged as a factorial randomized complete block design.At 20 DAT,the plots were broadcast inoculated with R.solani produced on rice grains.Seedling height before transplanting,ShB severity at 90 DAT,and grain yield at harvest were recorded.Integral at 2.2×109 cfu/mL provided significant increase of seedling heights over other treatments under greenhouse conditions.The Integral treatments of ST + SD + FS at 2.2×109 cfu/mL significantly suppressed ShB over other treatments.In field studies,Integral provided significant increase of seedling height in nursery,and number of tillers per plant,compared with the control.ShB severity was significantly suppressed with higher concentrations of Integral compared to lower concentrations.Grain yield were the highest at an Integral concentration of 2.2×109 cfu/mL.Overall,Integral significantly reduced ShB severity,enhanced seedling growth,number of tillers per plant and grain yield as ST + SD + FS at the concentration of 2.2×109 cfu/mL under the conditions evaluated.     

一株源于红树林根际土壤的枯草芽孢杆菌产淀粉酶条件及酶学性质研究

从三亚红树林保护区中筛选出一株产淀粉酶枯草芽孢杆菌,通过改变培养温度、初始pH值和盐浓度等因素研究该菌株的最适产酶条件,同时也分析了该菌株所产粗酶的热稳定性及pH稳定性。结果表明：该菌株属于中温产酶菌,产淀粉酶的最适温度为40℃,最适pH值为8,盐耐受能力可达到4%。酶学性质分析发现,该菌株产生的淀粉酶在40℃保温150 min后仍有70%以上的相对酶活力,在pH为9的环境中孵育1 h,相对酶活力可达到90%以上。这些结果表明,该产淀粉酶菌株对热带地区海水环境具有较好的适应性,其作为消化酶类饲料添加剂具有广阔的应用前景。