草菇多酚氧化酶及过氧化物酶特性的研究

草菇多酚氧化酶（ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｏｘｉｄａｓｅ）与过氧化物酶（ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ）的最适ｐＨ分别为６０～６８、６７～７４,最适温度分别为３０～３２℃、２５～２８℃在最适条件下,前者的活性远高于后者,当ｐＨ８６及温度４３℃或４８℃处理１ｍｉｎ,二者活力显著降低;但是,先在３５～３８℃保温１ｈ再测定,发现二者的最适温度分别达４０～４１℃、５２～５３℃,升温至８０℃１０ｓ,过氧化物酶仍表现活性Ｏ２对多酚氧化酶活性影响极大,而对过氧化物酶活性影响较小金属离子Ｍｎ２＋、Ｚｎ２＋、Ｍｇ２＋对二者均有强烈激活作用,Ｃａ２＋对二者的作用都很弱,Ｆｅ２＋、Ｃｕ２＋对前者作用明显强于后者二者的反应进程及酶浓度与反应速度的关系,表现出较大的差异     

贮藏荔枝果皮多酚氧化酶及过氧化物酶与褐变的研究

以“淮枝”的材料,着重研究了分析了荔枝（ＬｉｃｈｉｃｈｉｎｅｎｓｉｓＳｏｍ）贮藏过程中果皮多酚氧化酶及过氧化物酶的活性及其同工酶谱的变化,结果发现,荔枝果皮多酚氧化酶（ＰＰ）和过氧化物酶（ＰＯＤ）均具有游离态和结合态两种形式,它们在果皮褐变过程中活性的变化规律有所差别,随着果皮的褐变,ＰＰＯ和ＰＯＤ均有新的同工酶带出现,新酶带与酶活性的变化和果皮褐变程度有关。     

丝瓜多酚氧化酶及过氧化物酶酶学特性的研究

应用分光光度法研究丝瓜多酚氧化酶及过氧化物酶酶学特性的影响因素,为丝瓜酶促褐变的研究提供基础。以普通丝瓜果肉为材料,PPO以邻苯二酚为底物,POD以愈创木酚为底物,研究分析反应温度、反应时间、pH及测量波长、底物的浓度、PPO提取酶液添加量对丝瓜PPO、POD活性的影响。丝瓜褐变相关酶提取和测定方法的优化:(1)PPO最佳反应体系:测定波长408nm、反应温度是35℃、pH为6.0、酶液用量0.15mL,最适底物为邻苯二酚,底物浓度为0.056mol·L~(-1);(2)POD最佳反应体系:测定波长410nm,反应温度为40℃,最佳pH为5.5,酶液用量0.1mL,底物是愈创木酚,浓度为0.067mol·L~(-1)。     

泡桐丛枝病过氧化物酶和多酚氧化酶研究

对泡桐正常植株和丛枝病异常植株的过氧化物酶和多酚氧化酶进行比较分析。结果表明,丛枝病植株两种酶活性加强,并且多酚氧化酶有新的同工酶区产生,而过氧化物酶同工酶扫描曲线Ｃ区谱带活性降低,甚至消失。     

斑竹丛枝病过氧化物酶和多酚氧化酶的研究

斑竹正常健叶(用A表示)、病枝健叶(用B表示)、丛枝(用C表示)的过氧化化物酶(POD)和多酚氧化酶(PPO)进行比较分析,结果表明健叶(A)与丛枝(C)的酶活性有显著差异,健叶(A)的POD活性总是低于丛枝(C)对照,健叶与丛枝达0·01显著差异;而PPO活性健康叶片明显高于丛枝活性,达0·01显著差异。病健叶(B)的两种酶的活性很不稳定,测定值时高时低,但在总体趋势上,病健叶(B)POD、PPO活性处于健叶(A)和丛枝(C)两者中间;在0·05水平,病健叶POD活性与健叶之间无差异,病健叶PPO活性与丛枝之间无差异。     

华北落叶松多酚氧化酶和过氧化物酶的研究

本文对华北落叶松多酚氧化酶和过氧化物酶活性及其同工酶进行研究。结果表明：根的多酚氧化酶活性最高,二年生枝中最低;电泳法和分光光度法测得多酚氧化酶活性的相关系数为０９９;体内多酚氧化酶和过氧化物酶活性之间的相关系数为０８８;对苯二胺和邻苯二酚混合对多酚氧化酶活性染色效果较好;茎和根中分别有６,７条多酚氧化酶同工酶条带,１０,１１条过氧化物同工酶条带。     

草菇多酚氧化酶基因的克隆与表达分析

【目的】解析草菇多酚氧化酶基因家族序列信息,明确其特征和表达模式。【方法】通过转录组测序找出含有酪氨酸酶结构域的基因,并根据搜索得到的序列设计引物,以不同发育时期的草菇 v26 菌株,以及草菇蛋形期外菌膜、菌盖、菌柄等不同组织为材料提取 RNA,经反转录为 cDNA,扩增获得草菇多酚氧化酶基因序列。采用在线生物信息学网站预测草菇多酚氧化酶的理化性质。采用 RT-PCR 的方法,检测草菇不同发育时期和不同组织部位多酚氧化酶的表达模式。【结果】获得 4 个草菇多酚氧化酶基因家族的 CDS 序列,依次命名为 VvPPO1、VvPPO2、VvPPO3、VvPPO4,其中 VvPPO1 CDS 全长 1 596 bp、编码 531 个氨基酸,VvPPO2 CDS 全长 2 685 bp、编码 894 个氨基酸,VvPPO3 CDS 全长 1 593 bp、编码 530 个氨基酸,VvPPO4 CDS 全长2 067 bp、编码 688 个氨基酸。生物信息学分析表明,4 个基因编码的蛋白均含有 2 个铜离子结合区,为亲水性蛋白;RT-PCR 结果显示,4 个基因在草菇发育的菌丝期、原基期、蛋形期、成熟期均有表达,VvPPO1、VvPPO3 和VvPPO4 的表达量在子实体时期高于菌丝期,在蛋形期 VvPPO1 和 VvPPO4 在外菌膜的表达量比在菌柄和菌盖中的表达量高。【结论】在草菇中搜索得到 4 个多酚氧化酶基因,均含有 2 个铜离子结合区,4 个基因在各个发育时期均有表达。     

赤桉组培苗生根与多酚氧化酶,过氧化物酶活性的关系

用由一个赤桉芽培育成的芽丛作为实验材料，在无菌条件下进行扦插，对扦插苗不定根的发生与多酚氧化酶、过氧化物酶活性变化的关系进行了研究。结果表明，组培芽丛在未切割扦插之前，其多酚氧化酶活性最高，扦插后其活性下降，且生根少者，多酚氧化酶活性下降最多，生根多者，多酚氧化酶活性次之，只长愈伤组织而未生根者，多酚氧化酶活性下降最多，过氧化物酶活性则不然，以生根多者，活性最大，活性次之，只长愈伤组织而未生根者，     

果蔬多酚氧化酶的抑制及褐变的防治因素

多酚氧化酶(Polyphen oloxidase,PPO)广泛存在于自然界,在果实和蔬菜收获后,PPO所引起的反应常常会使果肉发生褐变、产生异味和损失营养.前文论述了PPO的作用[1],本文就PPO的抑活和影响该酶作用的因素进行阐述,为果蔬贮藏和加工中酶促褐变的防治提供思路.     

草菇杂交育种及同工酶分析

选用 10个草菇菌株作为亲本 ,相互交配获得 4 5个杂交菌株 .品比试验结果表明 :大多数高产杂交组合的两个亲本都具有较高的一般配合力 ,双亲间又具有较高的特殊配合力 ;单孢菌株普遍表现为出菇晚、产量低 ;不论是亲本、单孢菌株还是杂交菌株 ,出菇早的菌株普遍产量较高 ,出菇晚的产量低 .同工酶分析结果表明 ,h0 4、h32、h33是杂交种     

百合褐变与多酚氧化酶和过氧化物酶活性关系的研究

研究了百合褐变与PPO(多酚氧化酶)、POD(过氧化物酶)活性变化的关系.试验发现,百合在贮藏过程中褐变度与PPO、POD活性变化均趋于上升,且褐变度的变化规律与PPO、POD活性变化呈正相关;百合不同鳞片层的PPO和POD活性差异较大,外2层的活性明显低于内3层.运用灰色关联度分析方法研究了影响百合褐变的主要因素.结果表明,百合组织内的PPO和POD参与了褐变过程,且POD活性变化是引起百合褐变的主要因素.     

抑制物对草菇生长的影响

为了解决草菇低产问题,参考同是草腐菌的双孢蘑菇文献,对造成草菇低产因素之一的抑制物采用液体培养,并逐步排除。有目的地将培养料分为A、B、C 3组,经过一个栽培周期后,将3组培养料制备成提取液,并将提取液分为T1、T2、T3、T4处理,分别接草菇菌种,观察生长情况和记录生物质量。结果显示:各组以20 g/L的T1、T2、T3处理均不抑制草菇的生长,各组不处理的提取液(T4)均抑制草菇生长,其中BT4和CT4有未知物生长,各组的生物量均以T3处理的最高;将不同质量浓度梯度的(100、250、500 g/L)CT1处理提取液加到液体培养基中,均不抑制草菇的生长,生物量随着质量浓度的增大而增大;将1 000 g/L CT1和CT2处理加到液体培养基中,均不抑制草菇的生长,生物量以CT1处理的最高;进一步对BT4和CT4的未知物进行分子检测,得到肉座菌属和烟曲霉。说明界定在本栽培环境中影响草菇生长或产量的抑制物为肉座菌属和烟曲霉。     

草菇中水不溶性膳食纤维的提取研究

采用酸-碱浸提法提取草菇水不溶性膳食纤维,并研究了料液比、NaOH浓度、处理温度及浸提时间等因素对草菇水不溶性膳食纤维产率的影响.结果表明,草菇中水不溶性膳食纤维最佳提取工艺条件为料液比1:11,NaOH浓度为0.25 mol/L,提取温度为55℃,浸提时间为2 h;在此条件下草菇水不溶性膳食纤维的最大产率可达59.6%;水不溶性膳食纤维膨胀力为2.153 g/g,溶胀度为4.1 ml/g.研究证实草菇是提取膳食纤维的良好原料.     

草菇不同发育时期子实体菌柄细胞形态变化研究

测量了草菇子实体不同发育时期菌柄细胞的长与宽,同时通过对蛋形期菌柄标记,观察了菌柄不同部位的伸长速率,结果显示：菌柄细胞从蛋形期开始伸长,在伸长期的伸长速度显著高于其它发育时期,同时菌柄中上部的细胞伸长远多于菌柄底部细胞的伸长,并决定着整个菌柄的生长。     

甘蔗渣熟料袋栽草菇组合配方的研究

研究不同甘蔗渣栽培料配方熟料栽培对草菇产量和品质的影响。采用甘蔗渣为主要原料部分代替稻草熟料栽培草菇,设置6个栽培料配方,观察记录草菇菌丝生长情况及草菇产量和质量。结果表明:甘蔗渣替代稻草做20%处理(配方1)是理想的草菇熟料栽培配方,草菇在此配方上的菌丝生长速度稍低于全稻草配方(CK),但在长势、产量、生物学转化率及投入产出比都强于对照(CK)和其他处理配方。     

草菇核不对称分裂与菌种退化的相关性

[目的]探讨草菇细胞核不对称分裂与菌种退化的相关性,揭示草菇菌种退化机理.[方法]根据草菇菌落形态观察并结合RAPD技术筛选出退化的草菇菌株,通过细胞核DAPI染色,观察其细胞核大小、数目,比较正常菌株与退化菌株细胞核的异同.[结果]草菇菌丝细胞为多核,在有丝分裂过程中存在核不对称分裂.退化菌株细胞中形成染色体的数量不同,同一个细胞中可观察到大小不一的细胞核;正常菌株PY与3个退化菌株PYb5、PYb6、PYb7平均每个菌丝细胞的细胞核数目分别为12.78、10.06、8.88和7.26个,不对称分裂核分别占总核数的2.5％、10.5％、15.3％和23.7％.[结论]草菇细胞核不对称分裂可能是引起草菇菌种退化的一个重要因素.     

三种接种材料对草菇生长及产量的影响

为研究不同接种材料及配比对草菇生长和产量的影响,以草菇为试材,采用正交试验设计,在高温条件下,研究接种底料、播种量、栽培料量及出菇处理对草菇产量的影响。结果表明:处理木薯酒精渣作接种材料,播种量8%时产量最高为2 620.53g;并且采用木薯酒精渣做接种材料可以使经济效益达到最高,投资回报率可以达到548.48%。     

草菇褐腐病综合防治效果研究

以疣孢霉Mycogone perniciosa Magn.引起的草菇褐腐病为试验对象,采用化学和物理相结合方法对该病害进行综合防治措施研究。药剂筛选结果表明:药后5d和10d,50%施保功WP 1 500倍对草菇褐腐病的防效分别为90.70%和89.66%,均优于45%噻菌灵WP 1 200倍、50%福美双WP 1 000倍和50%多菌灵WP 800倍的处理。物理措施结果表明:在培养料堆制前对相应环境进行全面清扫及冲洗,并用50%施保功WP 1 500倍进行喷雾消毒,防效最高达87.97%;二次发酵时,利用蒸汽对菇房和培养料进行灭菌,当灭菌时间为24h、灭菌温度60℃时防效最高,达92.47%;采用物理和化学防治相结合的综合措施结果表明,该方法对草菇褐腐病防效达97.97%,可以有效控制草菇褐腐病。