一氧化氮（NO）在山羊感染肝片吸虫过程中作用

8～12月龄雄性山羊(n=5)人工感染肝片吸虫后,每周定时颈静脉采血1次,用硝酸还原酶法检测血清中一氧化氮(NO)的动态变化,并观察了NO与IgG抗体、嗜酸性粒细胞(EOS)之间的相关性.结果,山羊在感染后第1周,NO含量明显低于对照组,第2～6周或高或低呈波动趋势,自第6周后明显高于对照组,其中第7～8周达高峰,即(93.73±17.233)μmol/L,第7周与对照组相比P<0.01,第8、10周P<0.05;IgG抗体用间接ELISA最早在感染后第2周就可检出,并从第4周起保持高水平,第8～9周达到最高峰,血清中NO含量与IgG水平的相关系数为r＝0.511(P<0.05),而对照组的NO与IgG相关系数为r＝0.25(P>0.05);感染山羊在整个试验期间的EOS明显升高,其中第8周达峰值(P<0.01).本试验结果表明,NO、IgG和EOS在山羊感染肝片吸虫过程中的变化趋势基本一致并呈正相关,且与虫体在宿主体内的移行、发育密切关联,显示NO、IgG和EOS共同参与宿主抗肝片吸虫感染的作用.     

实验感染肝片吸虫山羊的病理生理学Ⅰ．血液生理生化指标及抗体动态

给山羊分别实验感染肝片吸虫囊蚴200、500个／只，感染后每周颈静脉采血1次，测定血液生理生化指标和抗体动态的变化。结果表明，山羊实验感染肝片吸虫后，血液中RBC、Hb明显下降；WBC和嗜酸性粒细胞数显著增加；血清中谷－草转氨酶（AST）从第2周开始上升，第8周和第9周达到峰值；γ-谷氨酰转肽酶（GGT）于感染后第7周和第8周开始升高，第10周和第11周达高峰；以ELISA检测抗体表明，2个试验组山羊感染后血清中IgG分别在第9周和第6周达峰值，随后均稍有下降，一直呈波动趋势，但在整个试验期内，一直高于对照组（P＜0．05或P＜0．01）。分析认为，山羊感染肝片吸虫后表现的贫血是正细胞正色素型，伴有低白蛋白性，肝脏损伤明显，体液免疫反应增强。     

肝片吸虫感染对山羊机体自由基代谢影响的研究

实验选择9只健康、6－10月龄雄性白山羊，经粪便学检查和Dot-ELISA检测，确认无肝片吸虫感染，随机分成感染组（n=5)和对照组（n=4)，试验组每只1次口服接种150个肝片吸虫囊蚴，每周定时从颈静脉采集感染前（0周）和感染后15周血液1次分离血清。测定血清谷胱甘肽过氧化物酶（GSH－Px)活性、超氧化物歧化酶（SOD）活性、过氧化物酶（CAT）活性、丙二醛（MDA）和一氧化氮含量的变化，结果表明肝片吸虫感染后血清中GSH－Px活性除第8周试验组显著高于对照组，其他各周无显著差异；在整个实验期间，试验组山羊血清中SOD活性在1－5周呈波动状，以后两组基本处于同一水平；试验组山羊血清CAT活性在感染后第3周显著低于对照组，第6－15周时，试验组始终高于对照组，但各周差异均不显著；试验组山羊血清中MDA含量在整个实验期间始终呈波动状，而在第8、9周试验组显著高于对照组，中周与对照组相比无显著差异；感染后试验组血清中NO开始下降，并且显著低于对照组，至第3－6周时试验组显著高于或低于对照组，第6－15周，试验组一直高于对照组，并在第7、10周时显著地高于对照组。提示山羊感染肝片吸虫后，机体发生多种功能的改变，机体的自由基产生与清除处于相互对抗之中，机体的自由基代谢参与了肝片吸虫病的发展过程。     

实验感染肝片吸虫山羊的病理生理学.血液生理生化指标及抗体动态

给山羊分别实验感染肝片吸虫囊蚴 2 0 0、50 0个 /只 ,感染后每周颈静脉采血 1次 ,测定血液生理生化指标和抗体动态的变化。结果表明 ,山羊实验感染肝片吸虫后 ,血液中 RBC、Hb明显下降 ;WBC和嗜酸性粒细胞数显著增加 ;血清中谷 -草转氨酶 ( AST)从第 2周开始上升 ,第 8周和第 9周达到峰值 ;γ-谷氨酰转肽酶( GGT)于感染后第 7周和第 8周开始升高 ,第 1 0周和第 1 1周达高峰 ;以 ELISA检测抗体表明 ,2个试验组山羊感染后血清中 Ig G分别在第 9周和第 6周达峰值 ,随后均稍有下降 ,一直呈波动趋势 ,但在整个试验期内 ,一直高于对照组 ( P<0 .0 5或 P<0 .0 1 )。分析认为 ,山羊感染肝片吸虫后表现的贫血是正细胞正色素型 ,伴有低白蛋白性 ,肝脏损伤明显 ,体液免疫反应增强     

小鼠感染肝片吸虫早期IL-4/IFN-γ及M2巨噬细胞标记分子的变化

为弄清肝片吸虫感染早期的主要细胞免疫类型及选择性激活巨噬细胞(M2或AAMΦ)标记分子的变化,本试验采用肝片吸虫囊蚴为感染源,经口分别感染雌性BALB/c野生型小鼠,运用特异性PCR鉴定成功感染小鼠后用间接ELISA对腹腔中IL-4和IFN-γ的水平进行测定,并对细胞因子IL-4、转录因子GATA3和M2的标记蛋白Relm a、Ym1分子的mRNA进行荧光定量PCR检测.结果显示,在感染后1,3,5,7周,从所获取肝脏组织中扩增的ITS2片段条带清晰,大小正确,测序后确定为肝片吸虫ITS2序列,表明肝片吸虫感染成功.对腹腔中IL-4和IFN-γ的水平测定表明感染组IL-4在感染后1,3,5周比对照组的显著增加(P=0.013,P＜0.01,P=0.02),但在第7周时无显著差异.IL-4的水平显著高于IFN-γ(P=0.011),而在第7周两者间无显著差异；对腹腔中IL-4、GATA3、Relm α和Ym1 mRNA水平的测定结果表明,感染后IL-4和GATA3 mRNA水平在第3周达到最高峰；于感染后1,3,5,7周,IL-4和GATA3 mRNA水平都分别显著高于对照组(IL4:P=0.01,P=0.012,P=0.023,P=0.014;GATA3:P=0.011,P＜0.01,P=0.032,P=0.014),但IL-4和GATA3间无显著差异；Relm α和Ym1mRNA水平都分别显著高于对照组(Relm α:P＜0.01,P＜0.01,P＜0.01,P=0.011;Ym1:P＜0.01,P＜0.01,P＜0.01,P=0.012),且二者间无显著差异,并随时间推移mRNA水平都呈下降趋势,于第7周达到最低水平.本研究成功利用肝片吸虫-小鼠模型研究蠕虫感染早期细胞免疫类型及M2标记分子的变化,发现在肝片吸虫感染小鼠早期主要引起Th2为主的细胞免疫.IL-4和M2巨噬细胞标记分子Relm α和Ym1在感染后1,3,5,7周都显著增加且具有相似的变化趋势,但nelmα和Ym1在第1周的高表达可能受诸多因素的影响还有待深入研究.     

实验感染肝片吸虫山羊的病理生理学——Ⅲ.细胞因子水平的变化

试验选择6只健康白山羊（经粪便学检查和Dot-ELISA检测，确认无肝片吸虫感染）随机分成Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组，其中Ⅰ、Ⅱ组山羊每只分别1次口服接种200、500个肝片吸虫囊蚴，Ⅲ组作为不感染对照组，每周颈静脉采血1次，连续11周，检测肝片吸虫感染后山羊血清中IL-2、TNF-α水平的变化和外周血淋巴细胞分泌IL-2的能力。结果表明，山羊试验感染肝片吸虫后，Ⅰ组山羊血清IL-2水平在感染后有所下降，而Ⅱ组山羊血清IL-2水平在感染后有所升高；感染不同剂量肝片吸虫的山羊血清TNF-α水平和淋巴细胞IL-2分泌水平均有不同程度的升高，在感染后第1周淋巴细胞就有反应，并且对非特异性刺激原和特异性刺激原的应答都有显著升高。这一结果提示，TNF-α可能参与肝片吸虫对肝的损伤过程，肝片吸虫感染剂量对宿主的IL-2含量影响较大，同时IL-2在宿主防御免疫中有重要作用。     

急性感染肝片吸虫水牛血中几种花生四烯酸代谢物及激素动态变化

选择12头健康、2～3岁、体重300～400kg雄性去势水牛，粪便检查和Dot—ELISA检测确认无肝片吸虫感染，随机分成感染组(n=9)和对照组(n=3)。感染组每头经口一次性感染1600个肝片吸虫囊蚴。研究了水牛急性感染肝片吸虫后血中几种花生四烯酸代谢物及激素动态变化。结果表明：水牛在急性感染肝片吸虫后整个实验期里没有明显的临床症状，具有较大的耐受力和抵抗力；水牛感染后，PGE2在16周前高于或明显高于对照组，以后两组相近；6—keto—PGF1α在整个实验期感染组与对照组无明显差异；TXB2在第1—10周低于或明显低于对照组。血浆Cort在第4—10周高于或明显高于对照组；T4在第4—22周总体水平高于或显著高于对照组；Ins和T3在整个实验期两组比较未见明显差异性变化。结果提示：水牛在急性感染肝片吸虫后，血中一些花生四烯酸代谢物变化明显，参与病理生理发生发展过程。     

实验感染肝片吸虫山羊的病理生理学Ⅱ.血清NO和花生四烯酸代谢物的变化

选择 9只 6～ 10月龄健康雄性白山羊 ,经粪便检查和 Dot- EL ISA检测 ,确认无肝片吸虫感染 ,随机分成感染组(n=5 )和对照组 (n=4 ) ,试验组每只一次性口服接种 15 0个肝片吸虫囊蚴 ,感染前 (0周 )至感染后 2 3周每周从颈静脉采集血液 1次 ,分离血清 ,测定一氧化氮含量和花生四烯酸代谢物 6 -酮 -前列腺素 F1α(6 - keto- PGF1α)和血栓素 B2(TXB2 )的变化。结果表明 ,肝片吸虫感染后第 6～ 2 1周试验组血清中的 NO一直高于对照组 ,并在第 7、10周时显著地高于对照组 ;血浆中 TXB2 水平变化较为明显 ,在 1～ 3周与对照组相比无显著差异 ,从第 5周开始到试验结束 ,试验组血浆中 TXB2 水平均显著或极显著地高于对照组 ;在整个试验期间 ,血浆中 6 - keto- PGF1α水平变化不显著。这一结果提示 ,NO及花生四烯酸代谢物可能参与山羊肝片吸虫病的发生发展过程。     

实验感染肝片吸虫山羊和大鼠血清花生四烯酸代谢物的变化研究

实验一选择9只健康、6-10月龄雄性白山羊，经粪便学检查和Dot-ELISA检测，确认无肝片吸虫感染，随机分成感染组（n=5)和对照组（n=4)，试验组每只一次口服接种150个肝片吸虫囊蚴，每周定时从颈静脉采集感染前（0周）和感染后23周山羊血液一次，分离血浆，实验二将60只大鼠随机分成感染组（n=30)和对照组（n=30)，感染组大鼠一次口服25个囊蚴，对照组不感染，于感染前（0周）和感染后（1，3，5，7，9周）采集血样，分别测定试验组和对照组羊和鼠花生四烯酸代谢物6-酮-前列腺素F1α（6-keto-PGF1α）和血栓素B2（TXB2）的变化。结果表明肝片吸虫感染后，山羊血浆中TXB2水平变化，在1-3周与对照组相比无显著差异，从第5周开始到实验结束，试验组血浆中TXB2水平均显著或极显著地高于对照组，大鼠血栓素水平在感染后前5周逐步下降，以后急剧上升，至实验结束时显著高于对照组；而整个实验期间，两种动物血浆中6-keto-PGF1α水平变化不显著，提示肝片吸虫感染后，机体发生多种功能的改变，花生四烯酸代谢物参与了肝片吸虫病的发展过程。     

Closantel缓释剂驱除山羊实验感染肝片吸虫的效果

选用 5只实验感染肝片吸虫山羊进行 Closantel(氯氰碘柳胺 )缓释剂驱虫试验。试验用山羊每只一次性口服肝片吸虫囊蚴 15 0个 ,感染后第 15周随机将山羊分成对照组 (n=2 )和驱虫组 (n=3) ,驱虫组每只羊口服 2丸 Closantel缓释剂 (含 15 .5 % Closantel,每丸 7.6 g) ,每周定时采集颈静脉血和进行粪便检查 ,每月称重 ,试验结束时剖检测量肝重和计数肝内虫体数 ,以驱虫前后山羊的红细胞、白细胞、嗜酸性粒细胞、血清抗体和一氧化氮的变化、体重变化、剖检时肝重 /体重之比、虫卵的变化以及虫体减少率作为衡量驱虫效果的指标。结果表明 ,投药后嗜酸性粒细胞在第 1、2、3周与对照组相比有显著下降 ,其他各项指标与对照组相比虽有一定差异但不显著。虫体减少率为 4 1.2 2 %。提示Closantel缓释剂对驱除实验感染肝片吸虫有一定效果 ,在虫体感染前投药会起到预防作用。     

捕食线虫性真菌的分离鉴定

本文报道首次从我国内蒙古土壤中分离出一株捕食线虫性真菌,该菌株适宜在２０℃,ｐＨ６,玉米粉浓度０．４ｇ／Ｌ的玉米粉琼脂（ＣＭＡ）培养基中生长。通过对其菌丝、孢子及捕食性结构的形态学观察,鉴定其为节丛孢属的少孢节丛孢菌ＣＩＭＨＩ株（Ａｒｔｈｒｏｂｏｔｒｙｓｏｌｉｇｏｓｐｏｒａ,ｓｔｒａｉｎＣＩＭＨＩ）。     

广西水牛类圆线虫病的病原体形态

类圆线虫病是广西水牛的常见寄生虫病之一,本文作者通过光镜观察,我们确认广西水牛类圆线虫病的病原体即为乳突类圆线虫。本文首次记述该虫种第四期幼虫的形态。在扫描电镜下,虫卵表面光滑,近似椭圆形。丝状蚴头端钝圆,口孔裂隙状,左右为2唇片,每唇片似分3小叶;体表两侧自劲部开始,各有2条纵嵴,延续至尾端,称为双翼膜(double alae),这是该期虫体独有的构造;丝状蚴尾端分叉。自由生活成虫具6片唇,各唇上有1个唇乳突;口孔内沿有一排锥状齿,共9枚;头端两侧各具1个半球形的头感器;头端背腹面的两侧各具1个头乳突,共4个,锥形。自由生活雄虫的泄殖腔处明显地突出于虫体表面,其周围有7对性乳突。自由生活雌虫的阴门横裂,肛门呈半月形。寄生生活雌虫头端截平,4个唇片由口缘伸向口孔,唇片近口孔中央向上翻卷,唇片上各有1个唇乳突;口孔呈倾斜(45°)的马耳他“十”字形;头感器1对,头乳突4个;阴门横裂,阴门部有1对阴侧感觉窝和1对阴后乳突;肛门横裂,突起;尾部自肛门后突然收缩,呈指状。在宿主体内未见到寄生生活雄虫。     

工程量清单计价模式实施探析

实行工程量清单计价是一种既符合我国市场竞争规则，又符合与国际惯例接轨的造价模式，是我国建设市场发展需要的必然结果。阐述了在我国实行工程量清单计价的重大意义，探讨了现阶段实施工程量清单计价中遇到的问题，并提出了完善措施。     

《证券法》的修改与上市公司信息披露的规范

上市公司信息披露关系到市场的健康发展，但目前上市公司信息披露存在着许多问题，如信息披露制度不完善，信息披露质量难言满意等。根据证券法修订草案中对上市公司信息披露的相应修改内容，应用XBRL技术加速上市公司信息披露规范，多管齐下改善披露质量：引入做空机制是一个优选；加重违反信息披露法律法规上市公司的法律责任；加大信息披露监管力度。     

鸡胚法氏囊的组织发育

本试验通过对孵化至１３－２１日龄的鸡胚法氏囊进行组织学的连续性动态观察,较为详细地描述了早日龄鸡胚法氏囊的组织学分化发育过程。实验结果显示,直至出壳胶鸡胚法氏囊尚未形成较完整的能组织起 体液免疫促进作用的组织基础结构,其完善的形态结构需在后天环境中分化和发育。     

家兔四肢动脉解剖

家兔四肢动脉的分布情况,国内外文献均十分简单,特别是缺少一张完整的图。前、后足部的血管图,大部分文献中均略去。本文对此进行了研究,绘出了完整的模式图,可供参考。     

日本血吸虫重组IAP蛋白的免疫保护效果评估

为研究日本血吸虫凋亡蛋白抑制因子（inhibitor of apoptosis protein of Schistosoma japonicum,SjIAP）重组蛋白诱导BALB/c小鼠的免疫保护效果,利用PCR技术扩增SjIAP基因,构建重组表达质粒pET-28a（＋）-SjIAP,诱导表达重组SjIAP蛋白,并利用重组蛋白制备兔源多克隆抗体血清。然后,选用SjIAP重组蛋白免疫BALB/c小鼠,利用ELISA检测免疫小鼠血清中的特异性抗体水平,以及免疫小鼠脾脏淋巴细胞在SjIAP重组蛋白刺激后产生的细胞因子水平。强化免疫后,将小鼠进行血吸虫尾蚴攻虫试验,感染38 d,进行剖杀,计算虫体减虫率及肝脏减卵率。Western blot结果表明本研究制备的兔源多抗血清能特异性识别SjIAP重组蛋白。ELISA检测表明免疫SjIAP重组蛋白可诱导较高水平的IgG及IgG亚型（IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3）抗体和IFN-γ、IL-2及IL-4细胞因子。动物试验表明,免疫SjIAP重组蛋白的小鼠与PBS组相比分别获得了31.5%的减虫率和37.2%的肝脏减卵率。免疫SjIAP重组蛋白能诱导小鼠获得一定减虫和减卵保护效果,提示血吸虫凋亡蛋白抑制因子可作为抗血吸虫病的疫苗候选分子。     

高剂量锌促进猪生长的机理探讨

选用42头“杜长大”三元杂交猪，分为2组（每组3个重复），分别饲以添加100mg/kg和3000mg／kg锌（氧化锌）的相同饲粮，进行了为期30d的饲养试验，然后屠宰取样，研究高剂量锌促进猪生长的作用机理。结果显示：饲粮中添加300mg/kg锌显著提高了日增重（P＜0.01)和采食量（P＜0.01）；饲料干物质、粗蛋白的消化率明显上升（P＜0.01）；肝脏组织中金属硫蛋白含量增加（P＜0.01），铜，锌－超氧化物歧化酶活力增强（P＜0.01);肝脏RNA含量和RNA／DNA值显著上升（P＜0.01）；血清胰岛素、胰岛素样生长因子I水平明显升高（P＜0.01）。试验结果提示，高剂量锌似通过有效清除体内自由基的不良影响，增强DNA转录RNA，促进胰岛素、胰岛素样生长因子I的合成和分泌，加强合成代谢，而产生促生长效果。