环丙沙星(ciprofloxacin)在鸡蛋中残留的研究

应用高效液相色谱法(HPLC)检测了鸡蛋中环丙沙星的残留。鸡蛋经乙腈溶液提取,提取液真空干燥后用流动相溶解。以0.015mol/L四丁基溴化铵/乙腈(94/6,V/V)作流动相,用SymmetryC18柱(5μm,3.9mm×150mm),在激发波长280nm、发射波长455nm处,用荧光检测器检测。将环丙沙星以0.05、0.50、1.00mg/kg分别添加到空白鸡蛋样品中,测得鸡蛋样品中环丙沙星的回收率分别为(82.2±6.8)%、(84.5±5.9)%、(87.9±4.7)%,相对标准差均低于8.3%。用该方法测定鸡蛋中环丙沙星的最低检测限为0.01mg/kg。各试验组产蛋鸡给药剂量分别按10.0、20.0mg/kg(体质量)内服环丙沙星水溶液,每天给药1次,连续5d。停药后鸡蛋中环丙沙星残留消除缓慢;休药8~9d时,鸡蛋中环丙沙星残留量低于0.03mg/kg;休药9~10d时,鸡蛋中环丙沙星残留量均低于最低检测限(0.01mg/kg);且随着环丙沙星给药剂量的增大,环丙沙星在鸡蛋中的残留量也相应增大。     

新型反相固相萃取吸附剂测定鸡蛋中4种氟喹诺酮类药物残留量

建立了一种使用新型反相固相萃取吸附剂(PRiME HLB)的前处理净化流程,采用高效液相色谱-荧光检测器同时测定鸡蛋中环丙沙星、达氟沙星、恩诺沙星和沙拉沙星残留量的方法。试样经乙腈∶0.2%甲酸水溶液(80∶20)提取,PRiME HLB固相萃取柱净化后进行测定,外标法定量。实验结果表明:(1)在鸡蛋中环丙沙星、恩诺沙星和沙拉沙星的检测限为0.75μg/kg,达氟沙星的检测限为0.15μg/kg;在0.005~0.5μg/mL质量浓度范围(达氟沙星在0.001~0.2μg/mL浓度范围)内线性回归关系良好(r0.99999)。(2)环丙沙星、恩诺沙星和沙拉沙星的添加量为0.005、0.05、0.5μg/mL(达氟沙星0.001、0.02、0.2μg/mL)时,方法的添加回收率在74.24%~98.78%,RSD5.15%。本方法适用于鸡蛋中4种氟喹诺酮类药物残留量的测定。     

环丙沙星在肉仔鸡组织中残留的研究

用高效液相色谱法(HPLC)检测肉仔鸡肌肉、脂肪、皮肤、肾脏和肝脏组织中环丙沙星的残留。肉仔鸡肌肉、脂肪、皮肤、肾脏和肝脏组织经二氯甲烷溶液提取,提取液浓缩后用含内标物的水溶液溶解。以0 015mol/L四丁基溴化铵/乙腈(92/8,v/v)作流动相,用SymmetryC18柱(5μm,3 9mm×150mm),在激发波长280nm、发射波长455nm处,用荧光检测器检测。将环丙沙星以0 01、0 05和0 50mg/kg分别添加到空白组织中,测得肌肉、脂肪、皮肤、肾脏和肝脏组织的回收率分别为72 2%～77 9%、73 2%～79 6%、72 4%～77 1%、69 6%～76 5%和70 0%～77 8%,变异系数均低于11 1%。用该方法测定肌肉、脂肪、皮肤、肝脏和肾脏组织中环丙沙星的最低检测限均为0 003mg/kg。肉仔鸡分别用50mg/L和100mg/L盐酸环丙沙星水溶液连续混饮各7d(35～41日龄)后,各组织中环丙沙星残留消除缓慢。休药7d时,肌肉、脂肪组织中环丙沙星残留量均低于0 03mg/kg;休药9d时,皮肤组织中环丙沙星残留量均低于0 03mg/kg;休药12d时,肾脏、肝脏组织中环丙沙星残留量均低于0 03mg/kg,而肌肉、脂肪和皮肤组织中环丙沙星残留量均低于最低检测限(0 003mg/kg);且随着环丙沙星混饮浓度的增大,环丙沙星在各组织中的残留量也相应增大。     

动物性食品中环丙沙星残留检测方法的研究进展

随着药物在畜牧业生产中普遍应用。使畜牧业得到了飞速发展，但由于长期的使用。造成畜产品中药物残留等一系列负面的影响。环丙沙星是应用较为普遍的一种喹诺酮类抗菌药物。其残留问题也日益受到人们的关注，本文就动物性食品中环丙沙星的残留检测方法作一综述。     

高效液相色谱法测定鸡蛋中氟喹诺酮类药物残留量前处理方法的优化

建立了鸡蛋中环丙沙星、达氟沙星、恩诺沙星和沙拉沙星4种氟喹诺酮类药物残留测定的超高效液相色谱方法。样品经磷酸盐缓冲液提取后,用正己烷脱脂,C18固相萃取柱净化,反相高效液相色谱分离,荧光检测器测定。本方法的检测限为环丙沙星、恩诺沙星和沙拉沙星5 μg/kg,达氟沙星1 μg/kg。环丙沙星、恩诺沙星和沙拉沙星在2~200 ng/mL、达氟沙星在0.4～40 ng/mL范围内呈线性相关,相关系数r大于0.9999。在空白鸡蛋中添加环丙沙星、恩诺沙星和沙拉沙星5~50 μg/kg、达氟沙星1～10 μg/kg,4种氟喹诺酮类药物的平均回收率为82.2～101.3％,批内变异系数0.8～5.9％之间(n＝6),批间变异系数在1.0～6.6％之间(n＝4)。结果表明,该法灵敏、准确、特异性强,适用于鸡蛋中氟喹诺酮类药物残留的测定。     

鸡肉组织中环丙沙星残留的ELISA与HPLC检测方法比较

利用单克隆抗体间接竞争ELISA方法测定了鸡肉中环丙沙星的残留,同时利用HPLC方法进行了比较分析。间接竞争ELISA法的线性范围为6.25~400μg/L,最低检测限为4.10μg/L。HPLC法的线性范围为0.06~500μg/L,最低检测限为0.06μg/L。在标准品添加量为1.5625×10-4~1.25×10-3g/kg时,ELISA方法的平均回收率为73.81%,批内变异系数为8.75%,HPLC方法平均回收率为80.41%,批内变异系数为1.27%。结果显示,ELISA方法与HPLC方法具有很好的相关性(r2=0.9925),该ELISA方法可用于鸡肉样品中环丙沙星的检测。     

液相色谱串联质谱法在检测鸡肉中环丙沙星残留的应用

建立了鸡肉中环丙沙星的高效液相色谱串联质谱测定方法,试样经EDTA-Na缓冲盐提取和净化后,C18柱HPLC进行分离,多反应选择离子检测。方法的回收率和变异系数分别在90%~110%和3%~10%。该方法对鸡肉中环丙沙星检测限为1μg/kg。     

高效液相色谱荧光法测定鸡肉及鸡蛋中4种喹诺酮类药物残留量的研究

建立了一种测定鸡肉或者鸡蛋中环丙沙星、达氟沙星、恩诺沙星、沙拉沙星4种氟喹诺酮类药物残留量的高效液相色谱法。鸡肉或鸡蛋样品两次用磷酸盐缓冲溶液(p H=7.0)提取,正己烷去杂质,固相萃取用C18小柱净化,流动相调整为0.05 mol/L磷酸溶液(p H=2.4):乙腈比例为70:30,收集洗脱液,用高效液相色谱法测定。添加低、中、高浓度的标准品时,回收率为88.68%~100.30%,相对偏差在1.55%~2.31%(n=5);标准曲线显示环丙沙星、恩诺沙星和沙拉沙星在0.001~0.200 mg/kg,达氟沙星在0.001~0.040 mg/kg范围内线性关系良好,相关系数在0.9999以上。采用本方法操作简便,灵敏度高,专属性强,基质干扰小,结果准确可靠,可以满足鸡肉或者鸡蛋中的环丙沙星、达氟沙星、恩诺沙星、沙拉沙星四种氟喹诺酮类药物残留检测的需要。     

高效液相色谱法检测猪肉中4种氟喹诺酮类药物残留方法的优化

试验为建立1种采用高效液相色谱法检测猪肉组织中环丙沙星(CIP)、达氟沙星(DFLX)、恩诺沙星(ENR)、沙拉沙星(SAR)残留量的方法。按照农业农村部标准方法进行优化,猪肉样品经磷酸盐溶液提取,固相萃取柱浓缩净化,使用高效液相色谱分析,荧光检测器检测,外标法定量。结果表明:环丙沙星、恩诺沙星、沙拉沙星在5～500μg/L浓度范围内,达氟沙星在1～100μg/L线性关系良好。猪肉中环丙沙星、恩诺沙星、沙拉沙星检出限为5μg/L,达氟沙星检出限为1μg/L。在指定的高、中、低3个浓度添加水平下,4种药物在猪肉的回收率为66.1%～107.9%;批内变异系数为1.3%～6.4%,批间变异系数为2.8%～7.1%。研究表明,该方法操作简单、准确度和精密度较好、实用性强、灵敏度高,可以满足猪肉样品中氟喹诺酮类4种药物残留检测的需要。     

氟喹诺酮类药物胶体金试纸的研制

用针对抗氟喹诺酮类(fluoroquinolones,FQs)药物的广谱性单克隆抗体建立了可以同时检测11种FQs药物的胶体金免疫层析方法。该试纸条用20 nm的胶体金标记单抗,将诺氟沙星－卵清蛋白喷涂在检测线上,羊抗小鼠二抗喷涂在质控线上。该胶体金试纸对猪肉和虾中环丙沙星、恩诺沙星和氧氟沙星的检测限都是30 ng/g,对诺氟沙星、培氟沙星、依诺沙星、麻保沙星、洛美沙星、达氟沙星、沙拉沙星和二氟沙星8种药物在以上两种样品中添加浓度为100 ng/g时都可被检出,整个检测过程包括样品前处理的时间可在20 min内完成。试验结果表明符合对这11种FQs药物在鸡肉和虾中残留现场大量筛查的要求。     

鸡蛋中阿莫西林残留HPLC-DAD检测方法的建立

为了能够准确地测定鸡蛋中阿莫西林的残留,本试验建立了高效液相色谱-二级管阵列检测器(HPLC-DAD)方法来检测鸡蛋中阿莫西林残留。采用乙腈沉淀蛋白提取鸡蛋液中的阿莫西林,以超纯水饱和的二氯甲烷作为进一步萃取纯化的溶剂,0.01 mol/L磷酸二氢钾溶液(pH=5.5)和乙腈溶液为流动相,流速为1.0 mL/min,检测波长为230 nm,样品进样量为20μL,柱温为30℃的色谱条件对鸡蛋中阿莫西林残留进行检测。结果显示,阿莫西林的质量浓度范围为0.05～100.00μg/mL,与峰面积具有良好的线性关系(R²=0.999 8);该方法的重复性、精密度和稳定性均良好,相对标准偏差在2.0%以内;平均加样回收率介于82.89%～89.92%,相对标准偏差介于1.68%～2.71%;阿莫西林检测限为0.025μg/mL,定量限为0.050μg/mL。结果表明,本试验所建立的HPLC-DAD方法操作过程简便、稳定性好、灵敏度高,可适用于鸡蛋中阿莫西林残留的准确检测。     

牛奶中氟喹诺酮类药物残留同步快速检测的酶联免疫吸附法研究

建立同时快速检测牛奶中环丙沙星、恩诺沙星、诺氟沙星、培氟沙星、氧氟沙星和洛美沙星六种氟喹诺酮类药物残留的酶联免疫吸附法。ELISA法的操作在20℃～25℃下进行,以50%抑制浓度、最低检测限反映方法的灵敏度,同时进行加标回收试验。结果表明,本文所建立的ELISA法的最低检测限为1.48μg/L,50%抑制浓度的范围在0.254～0.361μg/L;在环丙沙星、恩诺沙星、诺氟沙星、培氟沙星、氧氟沙星和洛美沙星药物添加浓度为5、25、50μg/L时的回收率为84.58%～115.92%,批内变异系数均小于15.0%,批间变异系数均小于16.0%。本方法简便快捷,灵敏度、准确度和精密度高,适用于牛奶中FQs残留的同时快速检测。     

主动外排系统介导的大肠杆菌多重耐药性的确证

为检测和证实主动外排系统(外输泵)在细菌多重耐药机制中的作用，用四环素和水扬酸钠对大肠杆菌质控株进行了体外人工诱导，筛选出多重耐药株，再用能量抑制剂CCCP(Carbongl cyanide m-chloropheyhydrazone)时耐药株和质控株进行了环丙沙星摄取抑制试验。结果：在耐药株，其菌体内环丙沙星稳态浓度明显低于质控株；多重耐药株在有CCCP存在时，菌体内环丙沙星的浓度随时间的延长而递增，而无CCCP的抑制时，菌体内环丙沙星的浓度递增缓慢；在质控株，不论有无CCCP存在，菌体内环丙沙星的浓度都随时间的延长而呈递增趋势，且保持较耐药株明显高的水平。结论：体外诱导多重耐药大肠杆菌多重耐药性的产生，可能主要依赖于菌体外输泵的激活。     

鸡组织中氟苯尼考和氟苯尼考胺代谢动力学研究

研究三黄鸡摄入氟苯尼考一个月后,肝、肾、胸肌和油等组织中的残留消除规律.鸡组织经pH7.0的磷酸盐缓冲液和丙酮提取,经二氯甲烷萃取后氮吹仪上吹干、定容液定容,定容液经正己烷脱脂后过0.45μm滤膜,进液相色谱二极管阵列检测器.以乙腈-磷酸二氢钠(0.01mol/L,含5mmol/LSDS和体积分数为0.10%三乙胺)(体积比2:3)用磷酸调至4.5作流动相,用Sunfire C18柱(4.6×250mm,5μm),检测波长225nm.用该方法测定肝、肾、胸肌和油组织中环丙沙星的最低检测限为0.020mg/kg.三黄鸡分别用含氟苯尼考饲料连续喂养30d,记录休药后0d、1d、3d、5d、7d、9d,11d,14d,18d,32d时,肌肉、肾脏、肝脏组织中氟苯尼考和氟苯尼考胺残留量的变化.氟苯尼考和氟苯尼考胺在鸡的肝、肾、胸肌和油组织中残留量随着时间的延长而递减.     

复方药物制剂对畜禽肠道分离菌的药敏分析

试验采用纸片扩散法测定了牛、鸡、猪的肠道大肠杆菌和沙门杆菌分离株对庆大霉素、环丙沙星以及庆大霉素-环丙沙星复方药物的敏感性.结果表明:单方药物中环丙沙星对畜禽肠道菌的敏感性优于庆大霉素;复方药物抑菌效果优于单方药物.     

鸡蛋中氟喹诺酮类药物残留量检测方法研究

建立一种可同时检测鸡蛋中四种氟喹诺酮类药物(环丙沙星、达氟沙星、恩诺沙星和沙拉沙星)残留的高效液相色谱-荧光检测法。结果表明,四种氟喹诺酮类药物中环丙沙星、恩诺沙星、沙拉沙星在2~500 ng/mL范围内峰面积与浓度呈良好的线性关系,R2均大于0.9999;达氟沙星在0.4~100 ng/mL范围内峰面积与浓度呈良好的线性关系,R2大于0.9999。环丙沙星、恩诺沙星、沙拉沙星的定量限为10μg/kg,达氟沙星的定量限为2μg/kg。环丙沙星、恩诺沙星、沙拉沙星在10~200μg/kg的浓度添加水平上,其回收率为70%~100%;达氟沙星在2~40μg/kg的浓度添加水平上,其回收率为70%~100%,批内、批间的相对标准偏差均小于10%。     

高效液相色谱法测定中西复方制剂中环丙沙星的含量

用反相高效流体相色谱法（ＨＰＬＣ）测定了中西复方制剂中环丙沙星的含量,流动相为甲醇－０．００８ｍｏｌ／Ｌ西丁基溴化铵溶液（２０：８０,用８５％磷酸调节到ｐＨ３）,检测波长２８０ｎｍ,中西复方制剂中加入０．１ｍｏｌ／Ｌ ＨａＯＨ溶液对环丙沙星进行提取,平均回收率在９９．９５％～１００．０５％之间,批内变异系数小于０．７０％（ｎ＝６）,批间变异系数小于１．５５％（ｎ＝５）。     

牛羊奶中环丙氨嗪残留检测的液相色谱-三重四极杆/线性离子阱复合质谱技术研究

建立了一种可准确定性定量检测牛奶和羊奶中环丙氨嗪残留检测的液相色谱-三重四极杆/线性离子阱（LC-Qtrap）复合质谱技术。牛奶和羊奶样品经3%三氯乙酸水溶液提取,MCX固相萃取柱净化。以20 mM乙酸铵水溶液和乙腈溶液为流动相进行梯度洗脱,在HILIC色谱柱上分离,在电喷雾正离子（ESI+）模式下,用多反应监测联合信息依赖性采集与增强子离子扫描（MRM-IDA-EPI）模式检测,同位素内标法定量。结果表明：环丙氨嗪在0.5～20 ng/mL的浓度范围内均呈现良好的线性关系,相关系数（R2）均大于0.990;在牛奶和羊奶中环丙氨嗪的检测限均为0.2 μg/kg,定量限均为0.5 μg/kg。环丙氨嗪在牛奶和羊奶0.5～5 μg/kg添加浓度水平上的回收率在98.4～106%范围内;批内RSD在0.795~2.45%之间,批间RSD在4.86~5.68％之间。该方法具有简便快速、灵敏度高、定性准确,重复性好等特点,可以满足牛羊奶中环丙氨嗪残留检测的要求。     

高效液相色谱——荧光检测器测定蜂王浆中磺胺类药物残留的研究

本文采用液液萃取进行样品前处理,柱前衍生后用带荧光检测器的液相色谱仪检测蜂王浆中的5种磺胺类药物残留,具有方法简单,快速,准确,试剂用量少,检测成本低的特点。该方法的检测限为1μg/kg,能满足目前蜂王浆出口中磺胺类药物残留允许限量的要求。     

蜂蜜中三氯杀螨醇残留量的检验方法

用有机溶剂提取蜂蜜中三氯杀螨醇残留,经液液萃取和层析柱分离净化除去干扰物质,浓缩定溶提取液,采用气相色谱法,电子捕获检测器(ECD)进行分析检测.