9个平菇菌株的生长特性与酯酶同工酶活性研究

对邯郸市菌种市场上搜集的9个平菇品种进行了酯酶同工酶与长速、长相的测定,发现平菇长速与其酯酶同工酶有一定的相关性,长速快的菌株,一般酯酶的酶带数量也较多。同时发现同一菌株保藏管理方法不同,可能出现长相、长速不同的现象,但酯酶酶谱一致。另外也发现邯郸食用菌菌种市场存在同物异名现象,需要进一步规范管理菌种市场。     

大丽轮枝菌(Verticillium dahliae)酯酶同工酶的测定

对棉花黄萎病菌不同致病力及致病类型菌系，不同寄主上的大力轮枝菌（Verticilliumdahliae）共14个菌系的酯酶，进行了聚丙烯酰胺凝胶平板电泳。结果表明棉花黄萎病不同致病类型菌系有其独特的酯酶同工酶谱。E6酶带的有无与致病力类型有关，E3酶带活性与病菌致病力有关，E3酶带活性与棉花发病病指关联度为0．85。不同寄主大丽轮枝菌酯酶同工酶总酶带数在7～12条之间，主酶带数在2～4条之间，按E3酶带活性强、中、弱划分为3个类型。E3酶带活性与病菌致病力有关，其活性大小与棉花、番茄、茄子病指的关联度均为0．774以上。说明酯酶同工酶技术可和于鉴定大丽轮枝菌同一种内不同致病类型致病力菌系。     

应用酯酶同工酶分类鉴定平菇菌种的研究

采用聚丙烯胺凝胶园盘电泳法对河南省表现较好的38个平菇菌株的菌丝体进行酯酶同工酶的研究,结果发现38个菌株的同工酶谱分为12个类型。试验表明,根据酯酶同工酶谱的类型对平菇菌种进行分类是一种简单迅速而又可靠的鉴别分类方法。     

壳聚糖对平菇菌丝体同工酶的影响

通过在平菇液体培养基中添加不同浓度的壳聚糖,应用聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳技术,研究壳聚糖对平菇菌丝体酯酶和过氧化物酶同工酶的影响。结果表明,浓度为0.5%的壳聚糖稀释400、600、800、1 000倍,均可增强平菇菌丝体酯酶和过氧化物酶同工酶酶带的强度,两种酶相比,对酯酶同工酶的增强作用更为明显,但无论哪种浓度处理均不能诱导产生新的酯酶和过氧化物酶同工酶谱带,稀释600倍时壳聚糖对酯酶同工酶酶带增强效果最为明显,不同稀释倍数的壳聚糖对平菇菌丝体中酯酶和过氧化物酶两种同工酶的R f值没有影响。     

GA3解除川贝母种子休眠过程中酯酶和过氧化物酶同工酶的变化

[目的]研究不同浓度的GA3对解除川贝母种子休眠过程中酯酶同工酶和过氧化物酶同工酶变化的影响。[方法]用浓度0（CK）、20、40、60、80mg／L的GA3处理川贝母种子,对不同浓度GA3下的酯酶同工酶和过氧化物酶同工酶进行电泳分析。[结果]浓度40和60mg／L GA3处理时,川贝母种子酯酶同工酶在图谱上增加2条彤分别为0．3893和0．937的新谱带;而其过氧化物酶同工酶在图谱上分别增加2条可为0．833和0．937的新谱带,且在浓度60mg／LGA3处理时,图谱中又增加1条彤为0．771的新谱带。[结论]浓度40mg／L和60mg／LGA3对川贝母种子休眠的解除有一定的作用。     

静电处理对月见草种子萌发期酶谱谱带的影响

高压静电场对月见草种子萌发期过氧化物酶（ＰＯＤ）同工酶,酯酶（ＥＳ）同工酶,可溶性蛋白（ＳＰ）的谱带颜色,谱带数目均有一定影响,当迁移率Ｒｆ＝０．７０处,可使过氧化物同工酶谱颜色加深,在迁移率Ｒｆ＝０．２８,０．４５,０．６５,０．７５处,可使酯酶同工酶及可溶性蛋白在适宜剂量范围内比对照组增加了１－２条谱带。     

天津野生黄伞菌株的酯酶同工酶分析

[目的]对天津野生黄伞菌株进行初步分类鉴定。[方法]利用酯酶同工酶技术对4个野生菌株、7个引入黄伞菌株及1个滑菇菌株进行聚类分析。[结果]12个菌株共检出22条酶带,11种酶谱类型。黄伞菌株具有共同特征谱带,且遗传多样性丰富。菌株分为3大类群,天津野生黄伞聚为一个类群,亲缘关系相近,而与其他菌株的亲缘关系相对较远。[结论]为黄伞种质鉴定、资源保护和育种提供参考。     

12个黄伞菌株的酯酶同工酶分析

[目的]探讨同工酶技术在黄伞分类鉴别中的应用效果。[方法]利用垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳,对来源于不同地区的12个黄伞菌株进行酯酶同工酶比较和分析,并通过聚类分析软件对各菌株间的遗传差异性进行分析。[结果]电泳染色共检测出23条酶带,绝大多数菌株间同工酶图谱类型表现出差异。各菌株的酶带数目不同,分别为3—14条,其中相对迁移率（Rf）值为0．70的酶带为12个菌株所共有,Rf值为0．66的酶带为11个菌株共有,可以认为是黄伞的基础酶谱带;Pa1、Pa2、Pa3、Pa4、Pa5、Pa10、Pa11菌株之间酶谱差异非常大,多态性较强;Pa6、Pa7菌株酶带基本相同,亲缘关系非常近,具有共同的遗传基础,可能为同种异名。聚类分析结果表明,12个黄伞菌株间隶属度在（0．49,1．00）,在0．64水平上可将12个菌株划分为3大类。[结论]酯酶同工酶可作为黄伞菌种质资源研究最有效的生化指标之一。     

食用菌菌种纯度的酯酶同工酶电泳测定

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,对平菇、草菇、白灵菇和灰树花4种食用菌的部分菌株的酯酶同工酶进行了分析,结果表明,4种菇的特征谱带分别为平菇有9条;草菇4条;白灵菇5条;灰树花4条,并确定了其各菇种种内亲缘关系.     

侧耳（平菇）的酯酶,多酚氧化酶及过氧化酶同工酶的电泳分析

对怀远平菇、凤尾菇、佛罗达平菇、黑龙江平菇的酯酶,多酚氧化酶及过氧化物酶同工酶进行了聚丙烯酰胺弟前平板电泳研究。结果就酶谱来说,它们具有一些相同或相似的种特性的酶带,但其总的酶带数目、酶带的的宽主颜色的深浅均存在种间或品系间的差异,万以酯酶同工酶的酶谱差异最显著,从而２为这４种平菇的分类鉴定提供了简便直观的生化手段,同时建立了生化指标。     

RAPD分子标记技术用于实验兔品系鉴定的初探

本文选用新西兰白兔(New Zealand White Rabbit,NZWR)、青紫兰兔(Chinchilla Rabbit,CR)、日本白兔(Japanese White Rabbit,JWR)3个品系的血样提取基因组DNA,并应用随机引物扩增多态性DNA技术(Random Amplified Polymorphic DNA,RAPD)进行遗传分析和比较。结果表明,使用随机引物PCR扩增后,扩增产物经琼脂糖凝胶电泳检测共发现78个条带,其中多态性片段25条,占32.1%,从7套共140个随机引物中筛选出10个多态性较高的引物,包括BH9、AD1、BH11、AN12、AN14、O19、AD3、AD19、O4和O14。其中BH9、AD1扩增效果最好,扩增产物有较大的共性和较好的多态性,可作为实验兔品系鉴定的分子依据。日本白兔和新西兰兔片段共享度最高为0.8268,青紫兰兔和日本白兔最低为0.6190,统计结果显示RAPD标记多态性丰富,3品系的种内相似度大于种间相似度。该技术可用于实验兔的遗传检测。     

12个金针菇菌株亲缘关系研究

采用平板对峙培养法和PAGE技术研究了12个金针菇菌株间的亲缘关系。平板对峙培养法研究结果表明:12个菌株间存在不同程度的拮抗现象,无拮抗或拮抗效果不明显的菌株组合为:1号和6号、2号和4号、7号和10号、3号和5号。基于12个菌株的酯酶同工酶图谱的聚类分析结果表明,12个菌株在遗传距离为D=0.39处明显地聚成5组。其中,Ⅰ组为1号和6号,呈现Ec、Ed、Ei、Ek、El特征带;Ⅱ组为2号和4号,呈现Ec、Ed、Ef～Ei、El特征带;Ⅲ组为7号、8号、9号和10号,呈现Ed、Eh、Ei和El特征带;Ⅳ组为3号、5号和11号,呈现Ea、Ed～Ei、El特征带;Ⅴ组为12号,呈现Ed、Ee、Ei和El特征带。拮抗关系法和酯酶同工酶图谱聚类分析结果基本一致。此外,12个金针菇菌株的酯酶同工酶图谱中,谱带d、i、l为12个菌株所共有,说明这3条谱带为金针菇的标志性谱带,其相对迁移率分别为0.479、0.744、0.905。     

地肤子活性成分对山楂叶螨酯酶同工酶的影响

实验研究了地肤子活性成分KFCE-2处理后,山楂叶螨体内的酯酶同工酶的影响。从聚丙烯酰胺凝胶电泳结果来看,在处理组中,没有检测到新的其它酶带。并且其酯酶酶带E1、E2比对照组的颜色要浅,而且图谱面积小;而E3在处理的12h后完全消失。酯酶同工酶电泳图谱经UVP2凝胶成像系统扫描分析,从强度变化上可以看出,E2、E3带的活性从处理的4h(LANE-a')开始活性就在逐渐减弱,尤其是E3带的活性在处理的12h后(LANE-c')就完全被抑制。此外,在迁移率的变化上,处理组E1、E2带的迁移率有逐渐增大的趋势;E3带的迁移率在能观察到的两个时间内,有减小的趋势。这表明KFCE-2可能通过抑制山楂叶螨体内的酯酶同工酶的活性,并且通过特异性的结合,改变部分酯酶的活性结构,来降低其解毒代谢。这也表明了地肤子作为新型植物源农药具有良好的开发前景。     

紫外线照射对棉铃虫成虫几种同工酶的影响

采用同工酶电泳的方法,研究了紫外(ultraviolet,UV)胁迫条件下对棉铃虫体内酯酶、过氧化物酶(peroxidase,POX)及过氧化氢酶(catalase,CAT)等同工酶的影响。结果表明:与对照相比,紫外线照射处理组酯酶同工酶谱带发生了质和量的变化,照射时间为30min和60min时,谱带E4、E9、E10增强,谱带E2、E8减弱,谱带E1、E5、E7、E11消失,新增了谱带E3、E6;照射时间延长至90min时,谱带E4、E9增强,谱带E2、E8减弱,谱带E1、E5、E7消失,新增了谱带E3、E6。紫外线照射处理下,棉铃虫POX同工酶谱带P5有所增强,CAT同工酶谱带的变化因照射时间不同而有所差异。与对照相比,紫外线照射处理组的C1谱带增强,但C2谱带在30min时减弱,60min时恢复到对照水平,90min时与对照相比又有所减弱。     

核盘菌不同水平抗药性菌株可溶性蛋白和酸酶的电泳图谱比较研究

为寻找到快捷有效的生理生化抗药性检测方法,对供试的6株对速克灵具有不同抗性水平的核盘菌进行了可溶性蛋白和酯酶的聚丙烯酰胺凝胶电泳谱带的试验研究。结果表明:不同抗性水平的菌株间蛋白质及酯酶图谱存在明显差异,中抗菌株与敏感菌株可溶性蛋白的主带基本一致,但中抗菌株的带数略多于敏感菌株,Rf=0.14,Rf=0.53两条带为中抗菌株所拥有,而敏感菌株不具有,高抗菌株的谱带数又显著少于敏感菌株,Rf=0.53的谱带为抗性菌株所特有。酯酶电泳图谱中敏感菌株与抗性菌株均存在特异性酶带,敏感菌株在Rf=0.20处有一条主酶带是抗性菌株所没有的,Rf=0.22的主酶带则为抗性菌株中所特有而敏感菌株没有的。因此,认为Rf=0.20的酯酶带与核盘菌的抗药性有一定相关性。     

广西百色云耳野生菌株的遗传多样性分析

[目的]分析广西百色云耳野生菌株的遗传多样性,为其种质资源的保护及开发利用提供参考.[方法]从广西百色地区采集23个云耳野生菌株,进行人工栽培,期间观察测定其农艺性状;采用酯酶同工酶技术分析不同云耳菌株的酯酶同工酶酶谱多态性,并进行聚类分析.[结果]在23个云耳野生菌株中,子实体朵形为单生的菌株有16个、簇生的7个;耳片边缘平滑的菌株13个,波浪状的菌株10个;耳片背面筋道脉纹明显或较明显的有15个,不明显或无脉纹的有8个;耳片颜色为浅黄褐色的菌株4个,黄褐色的8个,黑褐色的11个;耳片大小(长×宽)为30.1~51.6 mm×20.5~41.7 mm,厚度0.95~1.44 mm,表明百色云耳的形态特征具有丰富的多样性;原基形成时间26~59 d,杂菌感染率0~51.1%,耳片干湿比10.1~14.1,第一潮产量8.2%~50.5%,表明不同菌株的原基形成时间、抗杂性、干湿比和产量等方面也具有丰富的多样性.23个云耳野生菌株共检测到19条谱带,有18种谱带类型,谱带的迁移率(Rf)为16.6~88.6,分布频率为4.3%~100.0%,其中有3条带是百色云耳酯酶同工酶的特征谱带.23个云耳野生菌株的遗传相似系数为0.68~1.00,在遗传相似系数为0.68时,可分为两大类群,其中大部分菌株的聚类结果与其地理位置吻合.[结论]广西百色云耳野生菌株具有丰富的遗传多样性,蕴含着较多的优异遗传性状,具有较大的开发利用潜力.     

中早熟马铃薯品种(系)遗传多样性ISSR分析

【目的】采用ISSR分子标记研究中早熟马铃薯品种(系)的亲缘关系及遗传多样性,为南方冬作区中早熟马铃薯育种亲本选择提供参考。【方法】利用筛选的8条ISSR引物,对33份广西各地应用的马铃薯品种(系)进行遗传多样性分析。【结果】8条引物共扩增出46条条带,其中有29条呈多态性,平均多态性带比率为63.0%。33份马铃薯品种(系)的遗传相似系数在0.63045~1.00000,平均相似系数为0.80967。聚类分析结果表明,在相似系数0.79000附近,33份马铃薯品种(系)可分为四大类,第一大类有4个品种(系),分别是DE03-34-6、JL03-786、中薯19号和中薯18号;第二大类仅有中薯6号;第三大类包括龙脊1号和DE03-79-1两个品种(系);余下的26份品种(系)聚为第四大类。在分类中,部分亲缘关系较近的品种如中薯13号和中薯14号、中薯18号和中薯19号可聚为较近的一类,说明ISSR分子标记能够正确地按马铃薯的亲缘关系进行分类。【结论】供试马铃薯品种(系)间存在较丰富的遗传多样性,可根据聚类分析结果中的遗传距离选择亲本,为南方冬作区中早熟马铃薯育种亲本的选择和杂种优势利用提供参考。     

草菇菌丝体超氧化物歧化酶

采用 NBT 光化还原抑制技术检测8个草菇菌株的6个不同周(?)期的菌丝体超氧化物歧化酶(SOD)活性水平发现,草菇菌丝体在第2周龄期 SOD 活性最强高的可达光化还原抑制47%。低的为28%。从第3周龄期至第6周龄期 SOD 活性反复波动,(?)均在第2周龄期活力水平之下。菌丝 SOD 活性水平,可反映出草菇菌株子实体产量和生长速度水平。从不同龄期菌丝产量变化表明菌丝生长快、衰老快和自溶快等特性。采用聚丙烯酰胺凝胶电泳结果表明,参试的8个菌株6个周龄期的草菇菌丝在凝胶板上 Rf 值0.3附近有一条 SOD 同工酶强带,这条带可能属于 Mn-SOD 类型。从菌丝体 SOD 同工酶谱情况,可判断草菇子实体(?)伞的快慢。     

应用DGGE技术比较池塘人工生物膜与水体微生物多样性差异

[目的]为改善养殖的微生态环境提供参考。[方法]以无纺布为载体材料,采用PCR-DGGE技术比较了生物膜和水体微生物多样性的差异。[结果]电泳分析表明,总共检测到46条不同的条带。第4天,生物基与水体样品的条带数差异不明显。第8天时,二者出现了不同条带。在10~18天,生物膜多样性指数一直低于水体,直到第18~20天才开始高于水体。第12天时生物膜上优势菌种普遍存在,但是部分开始出现衰减和增强的趋势。Band1、5、6分别是生物膜上第8、12、16天出现的特征性条带,除假单胞菌属外,其他结果均为未得到分离培养或者未经过命名的菌类。水样中的特征条带Band3、4同爱德华菌、弧菌属的相似性分别为94%、87%。[结论]生物基载体可以改善池塘生物多样性。