大理一种烟草叶斑病的病因初步诊断

近年来,在大理州局部烟区发生一种尚未明确病因的烟草褐色凹陷状的叶斑性病害,给当地烤烟生产带来较大危害.通过田间调查分析病害症状特点、发病规律及比对文献资料,开展了可能的致病因子--臭氧(O3)危害试验.经臭氧处理后的烟株出现褐色不规则凹陷状的斑点与发生在大理的一种烟草叶斑病症状相符,初步认为该叶斑病是由臭氧(O3)所致,属烟草气候性斑点病的类型之一.     

不同烟草品种对云南烟草野火病菌的抗性鉴定*

 采用采自云南省不同地点、不同生理小种的24株烟草野火病菌对24个不同烟草品种及两个野生种黄花烟和长花烟进行抗病性鉴定分析。结果表明,不同抗性品种对不同生理小种的抗性反应差异显著,根据接种后不同烟草品种的形成的病斑直径,将其划分为4个等级：高抗、中抗、中感、高感。辽烟15,G28对于烟草野火病菌0,1号生理小种均表现为高感,而云南省大面积栽培的K326、红花大金元、云烟87等对于两个生理小种均表现为中感,而两个野生种黄花烟和长花烟均表现为高抗,可以作为烟草野火病抗性育种优先利用的种质资源。     

枯草芽孢杆菌 B9601-Y2基因组文库的构建*

 枯草芽孢杆菌B9601-Y₂是一个具有防治植物病害和促进植物生长的专利菌株。本文采用Sau3A I部分酶切的DNA、粘粒载体pLARF-5和Packagene λ DNA包装系统,构建了该菌株基因组文库。文库总量为11 000个克隆,插入片段平均长度为14.77 kb,按99.99%的概率计算,文库覆盖了基因组4.2次。这为该菌株防治病害和促进植物生长机理研究奠定了物质基础。     

NH4＋/NO3-对珍汕胚的愈伤组织诱导和分化的影响

 研究了早籼稻品种珍汕97的七成熟胚和成熟胚诱导愈伤组织及植株再生的条件,通过改变大量元素的配比和培养条件,可较大的提高其愈伤组织诱导及植株再生的频率;发现大量元素对珍汕97的愈伤组织诱导培养有着重要作用,其中氨态氮与硝态氮的比列尤为重要结果表明:7成熟胚和成熟胚在氨态氮与硝态氮的比列在2∶1时诱导效果最好,其愈伤组织的分化能力也最好;在12 h光照条件下愈伤组织的分化能力明显高于暗培养。     

云南食用百合病毒病的发生与检测*

 通过田间调查、血清学技术、电镜技术、RT PCR技术对侵染云南食用百合的主要病毒进行调查和研究,结果表明,食用百合病毒病的症状类型多为花叶,斑驳或者无症等类型。 病毒种类主要是黄瓜花叶病毒（CMV）,百合无症病毒（LSV）和百合斑驳病毒（LMoV）。 其中通过ELISA检测,CMV的检出率达到53.3%,LSV的检出率达到46.7%;通过RT PCR检测,CMV的检出率达到60%,LSV的检出率达到50%,LMoV的检出率达到30%。     

烤烟间作草木樨对烟草病害的影响*

 通过田间试验，研究了烤烟与草木樨间作对烟草病害的控制效果。结果表明： 烤烟间作草木樨处理对烟草病毒病有明显的控制效果，普通花叶病的发病率和病情指数极显著下降，防治效果为22.58%～80%。间作能不同程度地减轻烟草真菌类病害的危害，防治效果为44.50%～52.91%。在本试验条件下间作对细菌类病害的控制效果不明显。     

精原干细胞更新分化的影响因素*

 精原干细胞可以体外培养、冷冻保存、遗传操作及移植，因而在医学、生物学及动物科学方面均有广泛应用前景。根据现有资料阐述一些因素，包括c-Kit受体及其配体SCF、白血病抑制因子（LIF）、维生素A（V_A）、表皮生长因子（EGF）、胶质细胞源神经营养因子（GDNF）、激素和温度，对精原干细胞更新分化的影响。     

甘蔗宿根矮化病的TBIA快速检测*

 利用从澳大利亚引进的RSD标准抗原抗体,研究建立了TBIA快速检测甘蔗宿根矮化病（RSD）的方法。通过对田间采集的样本进行检测,并用I-ELISA检测法验证,结果表明：TBIA能简便、快速、准确、有效的检测出RSD,且检测效率高,适合于田间大批量样品快速检测。该方法为甘蔗宿根矮化病的诊断和防治、脱毒种苗的生产、对外甘蔗品种/材料交换检疫检测提供了技术支撑。     

甘蓝短散布元件对转基因表达效果的研究*

 为检验甘蓝短散布元件（SINE）对植物转基因表达的影响,采用PCR方法,从甘蓝基因组中克隆了一段短散布元件序列（Short Interspersed Nuclear Element,SINE）,该SINE具有核基质结合区（matrix attachment region,MAR）的结构特征,将其构建到β-葡糖醛酸酶（β-glucuronidase,GUS）基因（uidA）的两侧翼,形成SINE调控的植物表达载体,采用农杆菌介导法,将含SINE序列和不含SINE序列的植物表达载体导入烟草中。对转基因植株进行GUS活性定量测定,结果表明,SINE表现出类似MAR的功能,可以提高外源uidA基因的表达水平,与不含SINE的转化植株相比,外源基因的平均表达水平提高了2倍,但转基因植株个体间表达水平存在较大的差异。     

PBI121/GPAT质粒的构建及对非洲菊转化*

 为提高植物抗寒性,本文构建一个植物表达载体,并对非洲菊进行转化。用已克隆的强抗冷植物兵豆的甘油-3-磷酸转酰酶（GPAT）基因构建表达载体,将GPAT插入表达载体pBI121质粒取代该质粒上原有的GUS基因,并用PCR和酶切进行鉴定。用农杆菌介导的方法将该质粒转化到非洲菊中。结果表明该植物表达载体构建成功,同时对非洲菊高效转化体系进行探索,获得卡那霉素抗性苗7苗。     

60Co-γ射线辐射处理对球根海棠M3代生理活性变化的影响

 用不同剂量⁶⁰Co-γ射线急性辐射处理球根海棠根茎后,在连续2年试验研究的基础上,对种植的M₃代开花期分别测定其叶生理生化特性。结果表明10 Gy,40 Gy,50 Gy处理均可增加叶绿素a,叶绿素b和类胡萝卜素的含量,而叶绿素a和类胡萝卜素以50 Gy处理增幅最大,40 Gy处理叶绿素b增加较大,20 Gy处理对光合色素含量影响不大。⁶⁰Co-γ射线急性辐射诱导提高了球根海棠SOD,CAT活性,但高剂量（40 Gy,50 Gy）的⁶⁰Co-γ射线急性辐射导致了球根海棠MDA增加,⁶⁰Co-γ射线急性辐射处理均可增加类黄酮含量,其中尤以较低剂量处理的增幅较大。     

烟草品种Coker176和Ti245抗TMV的遗传分析*

 以2个抗烟草花叶病毒（TMV）的烟草品种Coker176和Ti245及感TMV烟草品种K326为材料,经杂交、自交、回交建立F1,F2,BC1等世代群体。采用人工接种TMV的方法对各群体进行抗性鉴定,统计各世代抗感植株数;利用卡方测验对分离世代群体进行抗感分离比检测。结果表明,Coker176的TMV抗性由一对显性基因所控制,Ti245的TMV抗性由两对隐性基因所控制。最后对2个抗性亲本在抗TMV育种中的利用进行了探讨。     

植被覆盖调节气候空间差异性的初步研究*

 以大连市区为例,通过对其区域气候指标与植被覆盖面积的相关分析,利用区内局地小气候观测结果,得出植被覆盖对区域气候调节效应在空间具有差异性,即植被调节效应在大范围影响微弱,但在局地范围表现明显;初步研究发现:植被群落生物多样性、植被面积、植被结构等是造成这种差异的主要原因。     

烟草抗赤星病突变体ces21的产生和鉴定*

 用烟草花叶病毒弱毒株系N14预先接种,可以诱导烟草对病原真菌赤星病菌的系统获得性抗性（SAR）,减轻病菌引起的赤星病。选择表现诱导抗性最强植株材料进行组织培养与植株再生,通过体细胞无性系变异增强和巩固SAR性状,获得SAR组成性表达的突变体（constitutive expresser of SAR）ces2-1。除了抗病表型,ces2-1还组成性表达多种防卫反应基因。回交实验与遗传分析表明,ces 2-1是在野生型位点上的单基因显性突变。对ces 2-1与野生型进行mRNA差异显示分析,得到一个 ces 2-1独有、在野生型中缺少的转录本,与前人报道的烟草受过氧化氢诱导的一个基因片段同源。用cDNA末端快速扩增技术克隆了这个转录本的全长序列,根据生物信息学分析与功能的初步测定,把这个基因命名为烟草受过氧化氢诱导的抗病相关基因（hydrogen peroxide induced 1,NtHPI1）。     

间作对水稻根系分布特征的影响*

 通过田间试验，研究了两种水稻品种黄壳糯与合系41间作条件下的根系分布特征。结果表明：间作黄壳糯的根深指数显著高于单作，较单作提高49%。合系41第1行的根深指数显著高于第2行和第3行，分别比第2行和第3行高了26.7%和24.9%，且第2行和第3行之间的根深指数无显著差异。间作黄壳糯产量较单作黄壳糯呈增加趋势，但未达显著差异。合系41第1行的产量显著低于第2行、第3行及合系41单作的产量,分别低了23.7%，24.6%和24.6%,但合系41间作第2行、间作第3行与合系41单作之间的产量无显著差异。本试验应用Sufer软件绘制的根系分布图表明：合系41第1行表层根密度较小，下层根密度较大，根系总量显著减少；单作黄壳糯根系呈两边伸展，而间作黄壳糯根系则深层次分布较多。     

烤烟调制过程中微波处理对烟草特有亚硝胺含量的影响*

 研究了烤烟调制初期及变黄过程中,微波处理对烟草特有亚硝胺(TSNA)、硝酸盐、亚硝酸盐及其它含氮化合物的影响。结果表明:在烤烟调制初期和变黄过程中用频率为2450MHz的微波对烟叶进行适当处理均能降低TSNA的含量。其中以在烟叶完成变黄后进行微波处理90s最为明显,总体来说,在烟叶变黄后对烟叶进行微波处理效果优于对鲜烟叶进行处理,然而微波处理对总氮、蛋白质等含氮化合物影响不很明显。     

抗黑胫病烟草品种K326 cDNA文库的构建*

 以优质高抗黑胫病的烟草品种K326为材料,在苗期接种黑胫病菌丝,3d后取叶片用Trizol试剂提取总RNA,经电泳检测28S,18S条带清晰,无DNA污染。以总RNA为模板,采用SMART技术合成双链cDNA,其产物主要集中在0.5～3kb之间,最大片段超过3kb。合成的双链cDNA经SfiⅠ（A/B）酶酶切后,用CHROMA SPIN-400层析柱分离分级cDNA,将大于0.5kb的cDNA片段混合,载入λTriplEx2载体,构建成云南第一个烟草cDNA文库。该文库的大小为1.2×10⁷pfu。扩增文库的滴度达到1.2×10⁹pfu/mL。文库的重组率大于94%。取阳性克隆转化为质粒,通过PCR反应检测,重组体确有DNA插入, 其片断大小在0.5～1kb之间。     

弱光胁迫对不同烤烟品种生理效应的影响*

 利用不同规格（遮光率约35%和65%）生产用遮阳网,以人工控光研究了弱光胁迫对云烟87,K326,红花大金元烤烟生育期生理效应的影响。结果表明：3个品种烤烟在弱光胁迫下,叶绿素含量较对照有明显增加;红大和云烟87丙二醛（MDA）含量较对照有明显减少,成熟期增势缓慢;红大和云烟87在弱光胁迫下脯氨酸（Pro）含量与多酚氧化酶（PPO）活性随处理时间的延长开始显著上升并明显高于对照,并且遮光率越高,上升速度越快。     

二氧化氯对烟草漂浮育苗剪叶刀具的消毒作用研究*

 对二氧化氯在烟草漂浮育苗中剪叶工具的消毒效果进行了研究。结果表明用16%二氧化氯200~1600倍液浸泡污染了TMV的剪刀,均能有效控制TMV的传播;其中16%绿先锋牌二氧化氯800倍液浸泡消毒10s即可有效防止TMV的传播,相对防效可达98%以上。研究结果可供烤烟等漂浮育苗生产中对剪叶工具进行消毒,以防止病毒病的传播蔓延。     

水杨酸诱导云烟85基因表达差减文库的构建及初步分析*

 利用水杨酸（SA）诱导烟草抗病相关基因表达,以此为目标样本,以清水喷施为对照样本,进行抑制差减杂交,构建烟草抗病基因表达文库。结果显示,插入片段主要集中在150～500bp之间。随机挑选12个克隆进行测序,结果有7条与已知的系统获得性抗病基因同源,1条与病程相关蛋白PR1a同源,1条与光系统II的促氧蛋白一个亚基有较高同源性,1条与水通道蛋白基因（aquaporin 1）同源, 1条与Ert13基因有关,1条未找到同源序列,是新的cDNA片段。