犬轮状病毒分离成功

轮状病毒(ROtavirus)是引起婴儿、新生哺乳类及禽类腹泻的重要病原。近几年来,世界各地不断从婴儿及多种动物分离出该病毒。我国在婴儿、牛及猪的粪便中也曾发现轮状病毒或轮状病毒样颗粒,并有病毒在细胞培养物上分离成功的报道。1982年下半年,我们在分离警犬出血性肠炎病原过程中,从临床上严重腹泻的病犬粪液中分出     

猪轮状病毒分离与鉴定

采用MA104细胞从广东省某猪场患有明显腹泻症状的仔猪粪便中分离了1株产生明显细胞病变(CPE)的病毒。电镜观察显示,病毒粒子呈现较为典型的轮状病毒的形态特征;对其VP6基因进行序列分析,结果表明该分离株与A群猪轮状病毒代表株OSU和Gottfried的核苷酸同源分别为86.3%和80.8%,氨基酸序列同源性分别为97.7%和93.2%。综合所见,所分离的毒株为A群猪轮状病毒。     

猪轮状病毒的分离与鉴定

将疑似感染猪轮状病毒的内蒙古某猪场的腹泻仔猪粪便样品在MA104细胞上分离培养,得到一株能产生明显细胞病变的毒株(命名为PRV L1株).经纯净性检测,该毒株无菌生长、无支原体污染及外源病毒污染.特异性检测结果显示该PRV L1株能被猪轮状病毒单特异性血清中和,并可被猪轮状病毒单克隆抗体识别,其VP7基因序列与G5型猪轮状病毒VP7基因序列同源性为99％.动物回归试验结果表明,该毒株口服攻击3日龄仔猪,可引起典型的猪轮状病毒病发病症状,并能在发病仔猪小肠内容物中检测到猪轮状病毒.     

动物轮状病毒分离鉴定

应用MA-104细胞静置培养，胰酶处里样本的方法从仔猪和羔羊泻便中分离到两株轮状病毒(暂定名为PRV与SWV)。细胞培养证实所分离毒株均适应于MA-半连104细胞，并且产生明显的CPE；SPAIEM检查证实，PRV和SRV均呈现十分典型的轮状病毒的形态特征；理化及生物学特性检查结果显示：PRV和SRV对有机溶剂(乙醚、氯仿)、温度(50℃ 30min)、酸碱度(pH3．0)均有抵抗力；中和试验证实所分离毒株与NCDV有血清学相关性；RNA-PAGE有11条RNA带，其带型与有关资料报道相吻合，为4、2、3、2带型，但两株分离毒株的带型有一定的差异。     

猪A群轮状病毒的分离与鉴定

目前国内对猪轮状病毒的研究较少,作者旨在对猪A群轮状病毒进行分离与鉴定,为后续猪轮状病毒致病机理和分子生物学特性研究奠定基础.用胰蛋白酶处理RT-PCR检测猪A群轮状病毒病原阳性的临床腹泻粪样,然后接种长成单层的MA-104细胞,进行病毒分离传代.再对分离毒株进行常规RT-PCR鉴定和电镜观察,并对分离毒株的VP6、VP7和VP8基因进行测序及序列分析.结果成功分离猪A群轮状病毒TM-a株,经序列同源性分析发现,与TM-a株VP6、VP7和VP8基因同源性最高的毒株分别为中国北京人源LL3354株、印度人源RMC321株和日本野猪源GUB-71株,其相似性为96.0％、95.1％和97.0％.该TM-a株轮状病毒不同基因表现出与人源轮状病毒和猪源轮状病毒的高度同源性,推测猪A群轮状病毒可能在人畜间传播,发生基因重组现象.     

一株猪轮状病毒的分离与鉴定

将1份经RT-PCR检测猪轮状病毒阳性的临床腹泻粪样感染Vero细胞,连续盲传8代,出现病变,成功分离到1株病毒,经RT-PCR检验和电镜观察,鉴定该病毒为轮状病毒,命名为GD-01-2015。扩增该病毒的VP4和VP7基因进行分型和系统进化分析,结果发现,其VP4基因为P[7]型,与来自韩国的猪源毒株K71同源性达到99.8%;其VP7基因为G5型,与来自韩国的猪源毒株06-6-1同源性达到99.7%。由此可以推测GD-01-2015株与韩国猪源毒株有相似的进化来源。根据轮状病毒分类委员会(RCWG)提出的A群轮状病毒的最新分类方法,GD-01-2015株基因型为G5P[7]。本研究为监测轮状病毒的流行状况及其疫苗的研制提供了理论依据。     

犬疱疹病毒的分离鉴定

犬疱疹病毒引起１周龄以下仔犬严重和高死亡的疾病,用犬肾传代细胞ＭＤＣＫ,从濒死发病犬的;肾脏器官分离获得一株疱疹病毒,经鉴定为犬疱疹病毒。培养液观察病毒大小为１４０ｎｍ有囊膜病毒,核酸型为ＤＮＡ,对乙醚敏感,对热抵抗力弱,５６℃经４分钟灭活,ｐＨ４．５时３０分钟失去感染力,用分离毒接种７日龄的幼犬引起典型的疱疹病毒感染症状,并从人工感染试验的幼犬回收到病毒。     

犬疱疹病毒的分离鉴定

犬疱疹病毒引起１周龄以下仔犬严重和高死亡的疾病,用犬肾传代细胞ＭＤＣＫ,从濒死发病犬的肾脏器官分离获得一株疱疹病毒,经鉴定为犬疱疹病毒。培养液观察病毒大小为１４０ｎｍ有囊膜病毒,核酸型为ＤＮＡ,对乙醚敏感,对热抵抗力弱,５６℃经４分钟灭活,ｐＨ４．５时３０分钟失去感染力,用分离毒接种７日龄的幼犬引起典型的疱疹病毒感染症状,并从人工感染试验的幼犬回收到病毒。     

犬细小病毒的分离与鉴定

<正> 犬细小病毒(CPV)是引起犬急性出血性胃肠炎和幼犬心肌炎的主要病原。1977年首次由Eugster和Nairn从患腹泻的病犬粪便中分离出病毒,随后许多国家陆续报道。1980年秋以来,在我国警犬中发生疑似本病的流行,对养犬业造成了极大的威胁,严重影响了我国警(军)犬事业的发展。1982年开始使用国外引进疫苗,但仍未控制流行。为查清病原,确定病性,以便提供有效地诊断和     

犬传染性肝炎病毒的分离与鉴定

从南京患疑似犬传染性肝炎病犬的肝脏中分离到两株犬传染性肝炎病毒(定名为:ICHV-GN_1和 ICHV-GN_2)。经系统鉴定,并与国外标准毒株比较,证实为犬传染性肝炎病毒,从而为该病的防制研究奠定了基础。     

犬致病性大肠杆菌的分离与鉴定

为了研究临床犬致病性大肠杆菌的耐药性,指导临床用药,试验采用鉴别培养基从10只腹泻犬肛拭子病料中分离大肠杆菌,并对分离得到的菌株进行生理生化鉴定和分子生物学鉴定,同时对其致病性和药物敏感性进行检测。结果显示从10份病料中均分离到大肠杆菌,试验共分离到10株大肠杆菌,其中有8株具有致病性。这8株致病性大肠杆菌对临床常见的16种药物表现了不同程度的耐药性,其中2株对所有的16种抗生素均耐药,在临床诊疗中应该引起足够的高度重视。分离株对临床上应用较早的药物,如复方新诺明、四环素、氨苄西林具有很强的耐药性,对头孢西丁、磷霉素、阿米卡星比较敏感,建议临床选用这3种药物对腹泻犬进行治疗。     

大熊猫犬冠状病毒的分离与鉴定

以犬肾传代细胞(MDCK)从1只病死大熊猫肝脏中分离到1株病毒,命名为DXMV。电镜观察磷钨酸负染的病毒细胞培养物，发现冠状病毒样粒子，超薄切片上可见细胞浆内病毒包涵体。理化学和生物学鉴定结果表明，DXMV核酸类型为RNA，对氯仿、乙醚敏感，可耐受1％胰蛋白酶的作用，具有一定的耐酸性和耐热性，可在MDCK、FCWF、F81细胞中增殖，无血凝性和血吸附特性。血清中和试验结果表明，DXMV可被犬冠状病毒阳性血清中和。采用犬冠状病毒间接荧光抗体法染色DXMV细胞飞片，可在细胞浆内见到特异性荧光。以冠状病毒通用引物和犬冠状病毒特异性引物，可从大熊猫肝脏和不同代次的病毒细胞培养物中扩增出与预期值251bp和515bp大小相同的核苷酸片段。由此说明，该病毒为犬冠状病毒，大熊猫可被犬冠状病毒感染。     

犬传染性肝炎病毒的分离与鉴定

犬传染性肝炎病毒的分离与鉴定田克恭，渠川玫，遇秀玲，李俊梅，刘永梅（军事医学科学院实验动物中心，北京丰台１０００７１）犬传染性肝炎是大的一种急性败血性传染病。Ｒｕｂａｒｔｈ（１９４７）首次确认本病，Ｋａｐｓｅｎｂｅｒｇ（１９５９）进一步证实病原为腺病...     

犬传染性肝炎病毒的分离与鉴定

1983年6月,作者用临床疑似传染性肝炎死亡犬肝感染未吃初乳的新生仔犬,然后取其肾脏进行带毒培养,分得1株腺病毒(A—8301)。经系统签定为犬传染性肝炎病毒,从而确定了犬传染性肝炎在我国的存在。     

犬细小病毒的分离鉴定

正犬细小病毒(canine parvovirus,CPV)属于自主复制性细小病毒科,细小病毒属,它能引起急性肠炎,白细胞减少,呕吐以及幼犬的心肌炎等病症。为了更好的了解犬细小病毒病在我国的流行和变异情况,通过对宠物医院疑似犬细小病毒病例进行病毒分离,分离出一株犬细小病毒,经过形态学、生物学以子病毒学等鉴定,证明分离出的毒株为细小病毒。     

犬源伪狂犬病毒的分离与鉴定

2012与2013年冬季,本实验室从长春市某宠物诊所连续收到疑似伪狂犬病毒感染的2份犬脑组织病料,接种Vero细胞,分离到2株病毒,经电镜观察、动物回归试验及PCR扩增鉴定为伪狂犬病毒,命名为JLCC-2012和JLCC-2013株。PCR扩增病毒g C基因序列,经遗传进化分析显示,2株PRV g C基因同源性为100%,且与国内犬源分离株BJ/RD、BJ/YT同源性分别为99.93%、100%,与猪源病毒分离株同源性为94.33%~100%,与国外猪源病毒分离株同源性为93.58%~94.81%。结果表明本研究分离株为与最近报道的犬源毒株系相近的流行毒株。     

犬致病性大肠杆菌分离与鉴定的临床意义

为了探究犬致病性大肠杆菌的耐药性,以对临床上的用药进行指导,本研究使用鉴别性的培养基将大肠杆菌从有腹泻症状的犬肛拭子病料中分离出来,而后运用生理生化以及分子生物学鉴定法对分离出来的菌株进行鉴定,并且检测它的致病性以及对药物的敏感性。研究结果显示,9份病料都分离出了大肠杆菌共9株,这其中的7株大肠杆菌都有致病性,其他们对临床上一些常见的药物(16种)有程度不一的耐药性,有2株耐受16种抗生素,这值得临床上高度重视。这些大肠杆菌菌株对复方新诺明、氨苄西林以及四环素等早期使用的药物耐药性更强,而对头孢西丁、阿米卡星以及磷霉素则较为敏感,所以建议使用这3种药治疗有腹泻症状的犬。     

犬腹泻病例沙门氏菌的分离与鉴定

对南京农业大学动物医院9例有腹泻症状的病犬采取直肠粪便进行沙门氏菌(Salmonella)的分离鉴定。通过生化鉴定和PCR扩增沙门氏菌invA基因,筛选出5株沙门氏菌菌株。对分离出的菌株进行血清型鉴定和对抗生素药物的敏感性试验。结果显示,5株分离菌株中4株属于B群鼠伤寒沙门氏菌(S.typhimurium),1株属于D群伊斯特本沙门氏菌(S.eastbourne)。2个分离菌株仅对阿米卡星、头孢西丁、链霉素及头孢吡肟较为敏感。在动物致病性试验中,鼠伤寒沙门氏菌血清型的菌株的致病力则强于伊斯特本沙门氏菌。     

犬细小病毒的分离鉴定

用猫肾(F81)细胞从沈阳某养犬场病死犬的肠内容物中,分离到1株细小病毒.根据犬细小病毒(CPV)VP2基因的核苷酸序列设计合成了两对特异性引物,对分离的病毒株进行PCR扩增,分别得到846 bp和815 bp的2个片段,PCR产物经纯化后测序,测序结果与GenBank中已发表的CPV参考株PLI-IV(typeFPV)、CPV-b(type2)、V154(type2a)、LCPV-V204(type2b)、LCPV-V139(type2c(a))和LCPV-V203(type2c(b))的VP2基因序列相比较,根据分析比较的数据结果,确定此株细小病毒为CPV-2a亚型.