白僵菌生防菌株Bb10和4株家蚕来源白僵菌分离株的生物学特性研究

为探明用于生物防治的白僵菌菌株和家蚕来源白僵菌的关系,用马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基对来自广西壮族自治区的白僵菌生防菌株Bb10和收集自广西象州、宜州、环江等蚕区的4株家蚕白僵菌分离株进行分离鉴定,并对菌株的生物学特性和毒力进行比较。菌株的鉴定结果表明:象州寺村镇的家蚕白僵菌Bb9和广西生防白僵菌Bb10均为卵孢白僵菌;象州中平镇的家蚕白僵菌Bb3和环江家蚕白僵菌Bb12为球孢白僵菌;宜州家蚕白僵菌Bb11为小球孢白僵菌。上述5株白僵菌的菌落形态、营养生长量、产孢量等生物学性状及对家蚕的毒力存在差异。生长最快的是Bb9菌株和Bb10菌株,且二者的菌落形态均呈棉絮状,但Bb10菌株的分生孢子较Bb9菌株的分生孢子要大很多;产孢量最高的是Bb10菌株和Bb11菌株;Bb3菌株对家蚕的毒力最强,Bb9菌株和Bb10菌株的毒力相对较弱。上述结果暗示广西蚕区白僵病的病原来源非常复杂,部分蚕区的家蚕白僵菌与生防用白僵菌有一定程度的相似性,可作为家蚕白僵病的溯源和防控依据。     

家蚕三种白僵菌的初步观察

从本校的蚕病实验室收集寄生家蚕的白僵菌中,分离出球孢、小球孢和卵孢三种白僵菌.球孢和小球孢白僵菌分生孢子为球形或卵形,前者孢子较大,且菌落呈平绒状,并逐渐由白变黄;后者孢子较小,菌落后来形成乳粉状孢子层.卵孢白僵菌分生孢子多亚圆形或椭圆形,且大小开差较大,菌落表面高低不平,白色,后期形成粉状.小球孢白僵菌菌丝体,从病蚕节间膜生出,而球孢和卵孢白僵菌全身布满菌丝层,但以卵孢白僵菌生长速度为快.球孢和小球孢白僵菌病蚕血液中有芽生孢子.且球孢白僵菌特多.而卵孢白僵菌病蚕血液中芽生孢子极少.其中以卵孢白僵菌致病力最强.球孢和小球孢白僵菌较弱.     

白僵菌菌株的分离鉴定及生物学特性研究

以9株白僵菌菌株为材料,对其进行鉴定并探讨了菌株的生物学特性。结果表明,有2株为卵孢白僵菌,7株为球孢白僵菌;以营养生长量、产孢量、抗紫外线能力和致病力等生物学指标进行综合比较筛选,球孢白僵菌B1为生产白僵蚕的最佳接种菌株。     

漂白粉不同剂型对白僵菌分生孢子感染蚕体蚕座的消毒效果试验

本文比较了家蚕三龄起蚕白僵菌分生孢子感染蚕体蚕座后,漂白粉液剂和粉剂的消毒效果。结果如下:1.含有效氯0.5％和1％的漂白粉液对白僵菌分生孢子的消毒效果明显优于2％的漂白粉防僵粉;有效氯0.5％和1％的漂白粉液处理,及白僵菌对照与2％的漂白粉防僵粉处理间的白僵病感染率,在统计学上存在极显著的差异;2.含有效氯1％的漂白粉液和2％的漂白粉防僵粉消毒蚕体蚕座,对蚕的生命力、茧丝质等无影响;3.含有效氯1％的漂白粉液蚕体蚕座消毒的成本低于2％的漂白粉防僵粉。试验结果说明:漂白粉液剂消毒防治白僵菌是一种比粉剂更为有效的方法。     

一株家蚕病原白僵菌的鉴定及人工生产白僵蚕初探

白僵蚕作为传统中药材被用于治疗多种疾病,因此筛选应用于白僵蚕人工培养的优良白僵菌具有重要的实践意义。从僵蚕分离获得一株白僵菌,经形态学观察和菌株rDNA ITS的系统发育分析,鉴定为球孢白僵菌(Beauveria bassiana),命名为Beauveria bassiana GX-1。进一步研究菌株的营养生长量、产孢时间、产孢量等与致病力相关的部分生物学特性。结合不同浓度的白僵菌孢子悬浮液对家蚕5龄起蚕幼虫接种的致死率和2次中试试验的结果,确认人工生产白僵蚕孢子的接种量应为1×10~7个/mL,致死率达到95%以上。2次中试产品经HPLC法测定其草酸铵质量分数分别为6.26%和6.00%,物理和化学指标均达到《中华人民共和国药典》标准。研究结果为人工培养白僵蚕,提高白僵蚕的产量和品质奠定了实验基础。     

家蚕病原白僵菌的核型分析

用脉冲凝胶电泳中的等高压均匀电场 (counter clampedhomogeneouselectricfield,CHEF)凝胶电泳技术研究了家蚕病原白僵菌 (Beauveriabassiana)核型。家蚕病原白僵菌至少有 6条染色体 ,估算其大小在 2 .5～ 7.2Mbp之间 ,3种分离菌株的核型大小为 2 6.5～ 2 9.0Mbp。家蚕病原白僵菌核型在分离菌株间存在多型性。     

家蚕病原白僵菌和黄僵菌的血清学研究初报

家蚕病原白僵菌和黄僵菌的血清学研究初报时连根，陶涛（浙江农业大学）（浙江省农业厅）家蚕白僵菌和黄僵菌是生产上最为常见的病原真菌，尽管两者在对家蚕的致病力、病征等方面有显著不同，但由于两者在形态学上的差异极小，不少生物学者常按国际上采用的分生孢子形成机...     

防消灵对家蚕白僵病原的消毒效果试验

防消灵是四川省农业科学院蚕桑研究所新研制的液粉兼用新型蚕用消毒剂,经过与白僵病孢子感染家蚕的消毒试验结果表明:用2龄起蚕体皮接种和蚕网感染白僵病原接种,毒对照区与药物消毒病原接种比较试验区,防消灵和1％漂白粉液(对照药物)消毒杀灭病原达到一致的100％失活效果。毒对照区的蚕儿全部发病变成白僵蚕。该药剂对微粒子、病毒、细菌等也有广谱、迅速的消毒效果,使用方法简单,装、运、贮方便,价格低廉,无腐蚀,无毒副作用,是现行消毒剂的换代产品之一。     

一株分离自感病桑天牛的高毒力球孢白僵菌菌株对6种植物病原真菌的拮抗作用研究

球孢白僵菌(Beauveria bassiana)Bi05菌株分离自感染白僵病致死的桑天牛幼虫僵体。测试分析白僵菌Bi05菌株对植物病原真菌链格孢菌(Alternaria alternata)、茎点霉(Phoma sp.)、拟盘多毛孢菌(Pestalotiopsis funera)、杨树腐烂病菌(Valsa sordida Nits)、曲霉(Aspergillus ruber)、油松枯梢病菌(Sphaeropsis sapinea)的拮抗作用,探究该菌株是否具有防治害虫和植物病害的双重生防功效。在平板对峙培养试验中,白僵菌Bi05菌株对除油松枯梢病菌之外的其余5种病原菌均有一定的抑制作用,对茎点霉、拟盘多毛孢菌、杨树腐烂病菌的抑制率均在50%以上;在白僵菌Bi05菌株孢子悬浮液的抑菌试验中,显示浓度为108m L-1的孢子悬浮液对6种病原菌均有抑制作用,且抑制效果优于平板对峙培养;在Bi05菌株发酵液的抑菌试验中,培养7 d时对茎点霉、拟盘多毛孢菌、杨树腐烂病菌的抑制率分别达到30.67%、41.38%、46.80%。以上试验结果表明,白僵菌Bi05菌株对茎点霉、拟盘多毛孢菌、杨树腐烂病菌有较明显的抑制效果。     

浅谈白僵病的发生及防治

<正>白僵病是家蚕真菌性病害之一,是由白僵菌经皮肤侵入蚕体而引起发病的.传染途径为接触传染.蚕死后,先软后硬,全身被白色分生孢子覆盖,称为白僵蚕.白僵菌喜湿怕干,多湿地方,多雨季节,蚕就容易被传染发生白僵病.1995年晚秋蚕期,裴圩乡白顶、水银和单庄等村白僵病大流行.据调查这几个村共养蚕2450张,发生白僵病1911张,发病率高达78%.不但蚕农的经济损失大,而且影响了集体和国家的利益.     

不同温、湿度下球孢白僵菌Bb00菌株的生长状况及对桑天牛的致病力研究

球孢白僵菌(Beauveria bassiana)可作为多种农业害虫的真菌杀虫剂。研究测定了不同温、湿度条件对球孢白僵菌Bb00菌株的营养生长、孢子萌发率以及对桑天牛(Apriona germari)幼虫致病力的影响。结果表明:25℃时该菌株营养生长最好,孢子萌发速度快且萌发率高,在此温度下菌株对桑天牛幼虫的致病力也最强;相对湿度为95%～100%时菌株的营养生长最好,随着相对湿度的增大孢子萌发速度、萌发率也增高,相对湿度100%时达到最高,此时被该菌株感染的桑天牛幼虫的死亡速度快,死亡率也最高。     

白僵菌经不同基质传代后对桑天牛幼虫的侵染力比较

以诱集自土壤中的对桑天牛(Apriona germari)幼虫具有较高致病性的球孢白僵菌(Beauveria bassiana)Bb00菌株为原发菌株R0,通过反复接种桑天牛幼虫分别获得菌株R1、R2、R3和R4,并反复在普通查氏培养基上传代分别获得菌株M1、M2、M3和M4。将R0、R2、R4和M2、M4菌株感染桑天牛幼虫进行生物测定,发现在普通培养基上传代,会导致菌株致病力的降低,而通过桑天牛幼虫传代培养可以提高菌株的致病力。R4、R2、R0、M2、M4菌株的LT50分别为3.23、4.01、4.13、4.78和6.34d,LC50分别为0.686×106、1.470×106、3.050×106、7.940×106和9.580×106mL-1。表明通过菌株在桑天牛幼虫虫体上反复接种可以提高白僵菌对桑天牛幼虫的侵染力。     

桑天牛幼虫感染白僵菌后的组织病理学研究

桑天牛(Apriona germari)幼虫被球孢白僵菌(Beauveria bassiana)Bb00菌株感染后,虫体颜色及外部形态发生相应的变化。组织切片观察表明:白僵菌Bb00菌株处理后24 h,分生孢子即可以附着于桑天牛幼虫体表,48 h即可以萌发并侵入幼虫体表,使内表皮分解;菌丝进入血腔后开始增殖并向侵入点附近的脂肪、肌肉、气管等组织入侵。随着菌丝在幼虫体内的增殖,各组织器官遭到不同程度的破坏,4 d后感染幼虫死亡,5 d后菌丝突破体表在虫体外形成菌丝层并有分生孢子产生。     

不同营养条件对草地螟球孢白僵菌生长的影响

研究了不同碳源、氮源和微量元素对3个草地螟（Loxostege sticticalis）球孢白僵菌(Beauveria bassiana)菌株菌丝生长及孢子产量的影响。结果表明,3种菌株均以有机碳作为碳源,且以葡萄糖为最佳碳源,蔗糖次之,而对于无机碳仅Bb S05菌株可少量利用。氮源以酵母粉培养效果最佳。当C∶N=40∶8时,3个菌株菌丝生长和孢子产量最高。Fe3+、Mn2+微量元素组合对Bb D01促进作用最大;Fe3+、Zn2+组合,Fe3+、Zn2+、Mn2+组合对Bb S05有促进作用,而且Fe3+、Zn2+、Mn2+组合效果最佳;对Bb Y03而言,添加任何单元素或多元素组合对其菌落生长均有抑制作用。     

球孢白僵菌侵染对桑天牛幼虫解毒酶活性的影响

为明确球孢白僵菌(Beauveria bassiana)对桑天牛(Apriona germari Hope)的致病机制,探讨了球孢白僵菌侵染对桑天牛幼虫解毒酶系的影响,对用球孢白僵菌处理后不同时间桑天牛幼虫体内羧酸酯酶、谷胱甘肽-S-转移酶和乙酰胆碱酯酶活性进行了测定。结果表明球孢白僵菌对上述3种酶的活性有显著影响,其中对羧酸酯酶和谷胱甘肽-S-转移酶活性的影响,均表现出先刺激后抑制的作用;而对乙酰胆碱酯酶活性的影响则呈先抑制后激活再抑制再激活的趋势。     

Fatal Beauveria bassiana infection in a captive American alligator

The entomopathogenic fungus, Beauveria bassiana, was isolated from pulmonary lesions of a dead American alligator (Alligator mississipiensis) at the Oklahoma City Zoo. Colonies of the fungus, which had sporulated in vivo, were found in the thoracic air spaces. Septate, branching hyphae and fungal spores were seen in stained histologic sections of pleura and lung. Dissemination to other viscera had not occurred. This case indicated that B bassiana, a rare vertebrate pathogen, may be a fatal mycotic agent in captive reptiles.     

桑天牛幼虫感染白僵菌后体内主要保护酶活性的变化

采用分光光度法测定了桑天牛幼虫被白僵菌感染后体内主要保护酶活性的变化。结果表明,桑天牛幼虫感染白僵菌后,为抵御白僵菌入侵,体内超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)活性在接种后初期迅速提高,但在接种后期均出现不同程度下降。其中,SOD、POD在接种后第2天达高峰,而CAT活性在第4天才达高峰,说明在桑天牛幼虫抵御白僵菌侵染的过程中,SOD和POD是首先发生作用的保护酶,CAT是继上述2种酶之后发生作用的酶系;并且POD活性始终高于对照组幼虫,是起主要作用的保护酶。     

Pathogenicity of Beauveria bassiana in mice.

The potential pathogenicity of Beauveria bassiana was examined by intramuscular injection of high (2 x 10(8)) or low (2 x 10(5)) concentrations of conidia spores, into the left or right quadriceps muscles of CD-1 mice, respectively. The injection sites were monitored over a period of 28 days by both microbiological and histopathological methods. Focal muscle necrosis, edema and inflammation occurred rapidly (within 12 hours) at the high dose application (2 x 10(8)) site, but such lesions were far less severe with the low dose spore application (2 x 10(5)). Fungal spores in the high dose site persisted in normal shape for 2 weeks, after which time they began to degenerate. Almost all spores were cleared from the injection site within the 28-day observation period. Spread to other organs of the body was not observed, except by macrophage transport to regional lymph nodes. At the low dose rate, most spores were cleared within 12 h to 2 d, leaving only mild focal edema and inflammation. Viable fungal colonies could be recovered up to 3 d after injection from the high dose site, but only up to 12 h from the low dose site. It was concluded that B. bassiana does not cause infection, nor multiply, nor survive for more than 3 days when injected intramuscularly into healthy mice.     

家蚕抵抗白僵菌感染的机理研究

白僵菌分生孢子在不同抗性品种蚕幼虫体表面,自萌发到侵入的全过程都不形成一个明显象附着胞那样的构造;分生孢子萌发后的侵入情况可观察到三种不同状态;蚕毛窝间隙、气门是自僵菌易侵入的部位之一.不同品种及同一品种不同生长阶段的蚕.对白僵菌的感染性存在差异.家蚕体壁的表面构造,化学性质的防御反应,以及家蚕血液对白僵菌发育、增殖的影响.是造成此差异的机理之一.