油松雌性不育系(28号无性系)的RAPD分析

辽宁兴城油松种子园中的 2 8号无性系是雌性不育变异体 .为了探索不育原因 ,揭示与育性相关的分子机制 ,该实验运用RAPD技术对 2 8号雌性不育系及部分可育系进行分析 ,目的在于寻找与 2 8号不育系遗传背景最相近的可育系 ,为进一步研究提供选材依据 .实验结果表明 ,5 9个 10碱基的随机引物共扩增出 2 36个条带 ,其中具有多态性的条带有 4 2个 ,占 17 8% ,证明供试油松无性系间遗传变异性较小 .用NTSYS2 0软件包进行结果分析 ,发现可育系中15号无性系与 2 8号不育系遗传距离较近 ,此组材料可用作研究油松雌性不育分子机制的对比材料 .用S37号引物从2 8号雌性不育系基因组扩增出一条分子量为 75 0bp的特异DNA片段 .     

应用Super SMART cDNA合成技术扩增油松胚珠总RNA

以油松雌性不育突变体和具有相似遗传背景可育系的胚珠为材料,用Plant RNA assistant kit试剂盒提取油松总RNA,采用Super SMART cDNA合成技术合成cDNA第l链,优化扩增第2链,通过设置梯度PCR扩增循环数,电泳分析后鉴定cDNA质量,采用定量法评估其扩增效率。可育系和不育系各1μg总RNA分别成功扩增出46.06和43.59μg纯化的双链cDNA,质量及纯度较高。此方法的应用解决了研究材料有限的问题,可由微量的胚珠总RNA扩增出足够多的高质量双链cDNA,为今后抑制性消减杂交文库的构建奠定基础。     

狼尾草属牧草资源的RAPD分析

利用RAPD分子标记技术对83份狼尾草属(Pennisetum)牧草资源(其中7株为“23A”不育系中的可育株)进行遗传多态性聚类分析。结果表明:①共筛选200个随机引物,其中10个引物对所有供试材料都能扩增出清晰的多态性条带,且重复性好;②83份材料可分为5类,其中7株23A不育系里的可育株与23A单独聚成一类,初步确定其为不育系23A的育性逆转株;③引物S1038(TCGCGGAACC)能扩增出“杂交狼尾草”的特异指纹图谱标记,为牧草品种杂交狼尾草的保护提供了分子鉴定基础。     

滇寻1号A中可育株的RAPD分析

 首次用RAPD技术分析了滇寻1号A与其大田中自然产生的可育株的差异。在所用的33个随机引物中,引物OPA-13在不育系和可育株间可扩增出差异性片段,不育系与可育株的DNA在个别位点上存在差异。初步认为此差异与育性相关,不育系中的可育株是由基因回复突变引起的。     

美洲黑杨×青杨派杂种无性系SSR指纹图谱的构建与遗传差异性分析

用SSR分子标记构建9个美洲黑杨×青杨派杂种无性系和3个父母本的指纹图谱并进行遗传差异性分析。研究表明,所筛选出的12对引物共扩增出94条清晰条带,每对引物平均扩增条带为7.8条,其中,多态性条带85条,多态性比率达到90.4%;各杨树无性系间遗传相似系数在0.44~0.80之间,平均相似系数为0.62,并利用多态性条带构建出12个杨树无性系的分子指纹图谱。通过系统聚类分析发现,杂种无性系与母本美洲黑杨遗传差异性小,且在该指纹图谱中,每个无性系的谱带都不同,说明不同供试无性系在DNA分子水平上表现出一定的遗传差异,据此可将它们区别开来。     

百日草细胞核雄性不育基因的RAPD标记研究

试验以百日草雄性不育两用系AB201中的不育株和可育株为供试材料,采用BSA法和RAPD技术,在64个随机引物中筛选与育性基因紧密连锁的分子标记,结果发现引物BE-05在DNA纯合可育池和杂合可育池中扩增出一条长约1 500 bp的特异谱带,在DNA不育基因池中未发现特异谱带,该标记在3个育性不同的DNA池之间表现稳定的差异。用建池的单株DNA进一步对这个引物进行RAPD分析,发现仍表现稳定的多态性,该标记与育性基因MS紧密连锁,命名为BE-051500。     

甜椒CMS不育基因ISSR的分子标记

运用ISSR技术对甜椒CMST6A及其相应的保持系T6B基因组DNA进行了比较分析,共使用了44条随机引物,其中33条引物在两系之中都获得了扩增产物.在不育系中获得了1条稳定扩增的特异片段ISSR-81400.通过随机抽取群体的不育和可育单株对ISSR引物进行鉴定,初步认为ISSR-81400可能是与甜椒CMS不育基因连锁的分子标记.     

离体培养条件下不同育性油松胚珠发育的细胞学观察

离体培养条件下观察比较28号雌性不育系和遗传背景相近的14号可育系油松胚珠的发育过程.结果表明,在离体培养条件下,两种育性不同的胚珠发育过程不同,可育系胚珠及其雌配子体在培养过程中体积明显增大.雌配子体中的游离核在培养前期能正常分裂,其数目从500-600个增加到2 000多个,培养后期,胚珠珠心、珠被等组织过度生长,雌配子体出现缺口,游离核流失而停止发育;不育系胚珠在培养过程中体积增大,其雌配子体体积只略有增大,游离核在培养初期就停止分裂,同自然条件下的败育现象一致.但两系胚珠的珠心、珠被等组织均能继续进行细胞分裂、组织增生,后期仍能产生大量愈伤组织,生长情况基本相同.试验结果表明油松胚珠中二倍体细胞有丝分裂与雌配子体游离核有丝分裂是两个相对独立的过程,其调节机制不尽相同.     

油菜核不育两用系不育基因RAPD标记研究初报

为建立有效的不育基因分子标记辅助育种平台,以5个核不育两用系为研究材料,选用20条随机引物,利用RAPD混合集群分离分析法,对各两用系可育与不育基因池进行分子标记的初步分析.结果表明,在油研10号筛选到2个与不育基因相关的标记:BA2084-600和S1354-1300;在萝×诸中筛选到1个与不育基因相关的标记:LC02-500.在827AB、T18筛选到集团间有差异的引物,未筛选到通过集团单株检测的与其育性基因相关的标记.通过RAPD混合BSA法可以筛选到与不育基因相关的特异DNA标记.     

2个新育成黄芪品种(系)的RAPD研究

采用RAPD分子标记技术,对甘肃省定西市旱作农业科研推广中心选育的2个黄芪品种(系)陇芪1号、 HQN03-03进行PCR扩增反应,以鉴别其遗传多样性和亲缘关系.结果表明,陇芪1号筛选出的12条引物共扩增出112个位点,平均每条引物能扩增出9.3个位点; HQN03-03筛选出的13条引物共扩增出107个位点,平均每条引物能扩增出8.2个位点.这2个黄芪品种(系)的主谱带基本一致,说明二者的遗传背景具有很大的相似性,但次谱带存在不同程度的差异,从分子水平上说明这2个黄芪品种(系)具有一定的遗传差异性,也说明了甘肃省黄芪资源具有遗传多样性.     

油松无性系种子园雌雄球花量及球果量变异分析

对洛南古城油松种子园37个无性系共222个单株的雌雄球花量及2年生球果量进行调查,并对数据进行处理分析,研究其遗传变异规律.结果表明,无性系间雌球花量、雄球花量、2年生球果量、树高及冠幅均存在显著差异.雌雄球花及球果产量在各无性系内分株间存在一定的差异,雌球花量和结实量越多,其差异相对小得多.油松单株南北枝条间雌球花量及2年生球果量差异极显著,雄球花量差异不显著;有的无性系单株存在"偏雌偏雄现象";根据雌球花量、2年生球果量、树高、胸径、冠幅5个数量性状,采用育种值综合评分法筛选出6个优良无性系:285#、273#、291#、10#、266#、289#.     

植物雌配子体发育的分子调控研究进展

近年来,以雌性不育突变体植株为材料,应用遗传学方法与分子生物学技术来研究雌配子体及胚珠发育的分子调控机制引起人们的重视,并取得了重要进展.该文从雌配子体发育、胚珠发育及珠被发育等几个方面综述了近年来植物雌配子体发育的分子调控机制研究进展.国际上大部分研究都以草本的模式植物或农作物为材料.通过化学诱变以及转座子和T-DNA插入等诱变方法,已经在拟南芥中鉴别出许多胚珠和胚囊发育异常的突变体,并初步获得了一些影响雌配子体发育的调控基因.由于木本植物的生长发育周期长而复杂,发育生物学方面的研究还停留在形态解剖学和生理生化水平上.国内最近几年以油松和文冠果的雌性不育突变体为材料,从分子调控水平开展了木本植物发育生物学的研究.      

我国油松主要分布区种质资源遗传多样性

利用随机微卫星扩增多态性DNA(RMAPD)分子标记技术,对全国范围内的12个天然居群245个个体进行遗传多样性分析,用筛选出的18对引物组合共扩增出303个条带,其中多态性条带229个,多态条带百分率为77.58%.用NTSYS-PC软件中的SIMQUAL程序计算Jaccard遗传相似性系数(genetic similarity,S_G)并聚类.结果表明:245份油松材料间的S_G值变化范围为0.5238～0.9682,平均为0.8141.采用UPGMA法在0.68水平上可将供试材料聚为4类.内蒙古宁城油松、山西地区油松各自聚为一类外,甘肃小陇山地区油松分别于陕西的洋县、留坝、周至、洛南、柞水的油松聚为一类,黄龙、黄陵、府谷的油松聚为一类.表明各居群间存在较高遗传多样性.     

油松种子园无性系花期同步指数稳定性分析

种子园无性系花期的同步性是保证其种子批遗传品质和产量的重要基础,研究其变异与不同株龄间的稳定性和影响因子对于无性系的管理与利用有实际意义。根据一油松种子园49个无性系跨度13年的花期、花量调查结果,分析了各无性系不同株龄的花期同步指数。结果表明:无性系组合间异性花期同步指数有较大差异;无性系作为父本时的花期平均同步指数整体上高于作为母本时的同步指数;多数无性系内具有高于异交平均水平的自交机会;无性系作为母本的同步性指数在株龄间较稳定,大量结实初期的母本花期同步指数可以作为选择的参考,但选择较高母本花期同步指数无性系时,其父本的花期同步指数则会相对较低。种子园无性系花期同步指数分析在种子园管理和改良种子园建设中有广泛的利用潜力。     

用RFLP技术检测水稻染色体片段的来源

利用已定位的28个RFLP标记为探针,测定了IR8及其亲本在9种限制性内切酶酶切条件下的RFLP表现,以此来判断IR8品种中这些标记所在的染色体片段来源。结果,有18个标记揭示了品种间的RFLP存在。根据RFLP图谱,IR8品种中9个标记的图谱相同于Peta,5个标记的图谱相同于低脚乌尖（DGWG）,这表明这些标记所在的染色体片段分别来自Peta和DGWG。另外3个标记显示了IR8特有的RFLP图谱,表明IR8中这些标记所在的染色体片段的DNA顺序已经发生了重组。在IR8不同个体的测定中,发现了一个不与RG365标记DNA杂交的个体,该个体可能是缺少RG365标记同源顺序的突变体。RG237标记的EcoRV酶切条件下,也揭示了个体间的RFLP存在。     

思茅松种子园无性系生长与开花特征的研究

在云南省林科院普文试验林场思茅松无性系种子园，调查了16个无性系161株母树的生长状况及花量，结果分析表明：在树高、胸径、冠幅和花量方面，各优树无性系间均存在极显著差异；雌雄球花产量方面变异异幅度更大，存在偏雌偏雄现象；各性状间存在一定的相关性，这些结果为种子园的经营管理提供了依据。     

植物细胞质雄性不育恢复基因分子生物学研究进展

 综述了近10年来植物细胞质雄性不育恢复基因分子生物学的研究进展。包括：(1)恢复基因的遗传；(2)恢复基因的定位；(3)恢复基因的克隆；(4)恢复基因的结构特征；(5)育性恢复的分子机理等。     

油松表型性状三水平遗传变异分析

运用巢式固定效应模型,分析了油松亲本和苗期１３个表型性状在种源—林分—家系三个水平上的遗传差异。结果表明,三者中以家系间变异最大,种源次之,林分最小,分别占总变异的５８．７％、２８．１％和１３．２％。遗传力估值也以种源和家系较高。据此提出了油松遗传改良的最佳策略     

油松天然群体遗传结构的研究

本文运用同工酶电泳技术对油松大配子体的遗传结构进行了研究,分析材料为油松大配子体,共检测了４个群体４个酶系统（ＧＯＴ、ＭＤＨ、ＧＤＨ、ＡＬＰ）的１０个基因位点。结果表明,油松群体在这几个酶系统上的遗传变异水平中等偏低,４个群体多态位点百分率平均为５６．７％,等位基因平均数为１．７６,平均期望杂合度０．１５９;群体内纯合体不足,杂合体过量,大都处于非平衡状态;群体间的分化程度较低,４个群体的平均遗传距离为０．０１１;同工酶测定的总变异中,只有１％来自群体间,其余的变异均来自群体内个体间