蛙病毒PCR检测方法的建立与比较分析

为了进一步丰富蛙虹彩病毒检测方法,实验针对蛙病毒3型(frog virus 3,FV3)核衣壳蛋白(major capsid protein,MCP)基因保守区设计一对特异性引物,并选取另外2种蛙病毒PCR检测方法进行对比实验,通过反应体系的优化、反应特异性和敏感性实验,建立了一种针对FV3的PCR检测方法。结果显示,该方法最低检测限可达1.2个拷贝数的病毒粒子,与神经坏死病毒、虾血细胞虹彩病毒、大口黑鲈虹彩病毒、锦鲤疱疹病毒、鲤浮肿病毒、传染性脾肾坏死病毒、加州鲈弹状病毒等常见水产动物致病毒株无交叉反应。临床样品检测表明,该方法所获得的检测结果与另外2种方法一致,结果可靠。本研究所建立的FV3 PCR检测方法,具有简便、快速、敏感度好、特异性高、低成本等特点,可用于FV3蛙病毒的快速诊断和分子流行病学调研。     

稻田鱼,蛙结合养殖技术

稻田鱼、蛙结合养殖技术我国有数亿亩的稻田面积，有很多的稻田都可发展水产业。稻田中水温高，富氧，ｐＨ值适宜，有水稻遮荫，饵料丰富；稻田鱼、蛙结合立体开发，就是鱼、蛙、稻综合养殖种植，即把水稻种植业与水产养殖业有机结合起来，使两种不同的生产在同一场所进行...     

漓江的鱼类调查

漓江（含下游桂江）是西江水系重要支流，其鱼类品种居广西各江河之冠，占全区江河鱼类290余种的50％左右。漓江鱼类鲤科占优势比重达60％，在渔获物组成中相对产量较高。漓江在我国是鱼类研究开展得较早的地方。近年，因漓江鱼类资源极度衰竭而引起世人高度关注。     

三种水生动物细胞系对两株蛙病毒敏感性的比较

利用3个不同物种的水生动物细胞系,包括爪蟾肾细胞系(A6)、大鲵胸腺细胞系(GSTC)和鲤上皮瘤细胞系(EPC),分别用沼泽绿牛蛙蛙病毒(RGV)和大鲵蛙病毒(ADRV)感染,进一步研究细胞病变显微形态、病毒滴度、细胞病变与不同感染时间的相关性等。结果显示,在光镜下可见感染病毒的细胞发生病变,A6和EPC细胞肿胀或破裂;GSTC细胞收缩或聚在一起形成多层。同种水产动物细胞系对不同蛙病毒的敏感性不同,在A6、EPC和GSTC细胞中,RGV的滴度分别为10~(3.6)、10~(5.9)和10~(6.6) TCID_(50)/m L;ADRV的滴度分别为10~(4.3)、10~(5.4)和10~(6.1) TCID_(50)/m L,表明GSTC细胞系对两种蛙病毒都更敏感。研究为后续蛙病毒致病机理提供了有用的信息和重要实验材料。     

怒江傈僳族自治州的鱼类资源调查

为了保护怒江州的鱼类资源,按照《内陆水域渔业资源调查手册》要求,于2006年1月至2007年底开展怒江州鱼类资源调查。调查范围涉及全州29个乡（镇）中的28个,覆盖了怒江州的内怒江、澜沧江、伊洛瓦底江3大水系的干流和主要支流。云南省怒江傈僳族自治州现有鱼类72种;其中,土著鱼类58种,隶属5目、8科、32属;分析了鱼类组成区系和分布特点,并提出了保护鱼类资源的初步建议。     

贡山独龙族怒族自治县鱼类资源调查

野外采样时间分别在2006年9月(雨季洪水期)和2007年4月(干季、枯水期),先后2次对怒江进行调查采样.2006年9～10月对独龙江进行采样调查.结果表明,云南贡山县有鱼类30种,隶属3目、4科、17属;其中,土著鱼类25种,隶属3目、4科、15属,分布于怒江水系的鱼类15种,隶属3目、4科、11属;独龙江(伊洛瓦底江上游)水系鱼类15种,隶属3目、4科、10属.全县土著鱼类中,鲇形目鱼类最多,有13种,占总数的52%;鲤形目类有11种,占总数的44%.     

贡山独龙族怒族自治县鱼类资源调查

野外采样时间分别在２００６年９月（雨季洪水期）和２００７年４月（干季、枯水期）,先后２次对怒江进行调查采样。２００６年９～１０月对独龙江进行采样调查。结果表明,云南贡山县有鱼类３０种,隶属３目、４科、１７属;其中,土著鱼类２５种,隶属３目、４科、１５属,分布于怒江水系的鱼类１５种,隶属３目、４科、１１属;独龙江（伊洛瓦底江上游）水系鱼类１５种,隶属３目、４科、１０属。全县土著鱼类中,鲇形目鱼类最多,有１３种,占总数的５２％;鲤形目类有１１种,占总数的４４％。     

禽流感病毒难侵鱼类

日前在我国 10多个省市发现了禽流感或疑似禽流感 ,许多人对禽类肉品开始“敬而远之” ,有人甚至对食用水产品也充满“戒备”。禽流感对鱼等水产养殖动物到底有无影响呢 ?农业部渔业动植物病原仓库主任、上海水产大学杨先乐教授认为 ,食用水产品还是比较安全的 ,目前尚未发现水产动物携带禽流感病毒 ,对禽流感既要重视 ,也不必恐慌。针对携带禽流感病毒的水禽或候鸟会不会把病毒带入水体中的疑问 ,杨教授表示 ,水生动物被感染的概率非常小。就目前的研究来看 ,广受关注的禽流感病毒、SARS冠状病毒以及其他的人或畜禽方面的病毒 ,与水产病…     

怒江傈僳族自治州的鱼类调查

为了保护怒江州的鱼类资源,按照<内陆水域渔业资源调查手册>要求,于2006年1月至2007年底开展怒江州鱼类资源调查.调查范围涉及全州29个乡(镇)中的28个,覆盖了怒江州的内怒江、澜沧江、伊洛瓦底江3大水系的干流和主要支流.云南省怒江傈僳族自治州现有鱼类72种;其中,土著鱼类58种,隶属5目、8科、32属;分析了鱼类组成区系和分布特点,并提出了保护鱼类资源的初步建议.     

声学海洋鱼类资源调查方法

本文介绍水声技术在海洋鱼类资源调查方面的应用概况。着重说明用回波积分式鱼量计进行资源调查的方法原理和仪器结构。     

西沙群岛鱼类的调查

西沙群岛,位于我国南海的中部,由大小32个岛屿和礁滩所组成,它们像一把洁白的珍珠撒在蔚兰色的海洋上,美丽而富绕。这里,四季炎热、雨量充沛,海水表温在24～29℃之间,年变幅度仅为5℃左右,是典型的热带海洋性气候。这里,海洋生物种类复杂而繁盛,礁盘内珊瑚丛生,为鱼类生长、繁殖提供了丰富的饵料基础和优越     

一株湖北源大口黑鲈蛙病毒的分离鉴定

采用电子显微镜观察和细胞培养等技术, 从湖北黄陂某养殖场患病大口黑鲈(Micropterus salmoides)体内发现并分离到一株蛙病毒。患病大口黑鲈的临床症状主要表现为体表出血、溃疡, 肝脏发白。将病鱼内脏组织匀浆超微滤液接种鳜脑细胞系(mandarin fish brain, MFB)细胞能产生典型细胞病变效应(cytopathic effect, CPE), 病毒滴度达到 10^8.36±0.15 TCID₅₀/mL。细胞培养病毒的超薄切片电镜观察结果显示, 细胞质中存在大量直径约为 150 nm 左右的正六边形病毒粒子, 呈晶格排列。细胞培养病毒的人工感染大口黑鲈试验结果显示, 7 d 内试验鱼死亡率高达 100%, 其临床症状与自然发病鱼相似。采用大口黑鲈病毒(largemouth bass virus, LMBV)的特异性 PCR 检测方法对患病鲈组织样品和细胞培养病毒样品进行检测, 均能扩增出 241 bp 的单一目的条带。进一步根据 GenBank 中 LMBV 主衣壳蛋白(major capsid protein, MCP)基因序列设计特异性引物, 均能从上述样品中扩增出 1392 bp 的 MCP 基因开放阅读框(open reading frame, ORF)全长。将 MCP 氨基酸全序列进行比对, 结果显示其与 Santee-Cooper 蛙病毒、孔雀鱼病毒 6 型及大口黑鲈溃疡综合征病毒的 MCP 氨基酸序列同源性高达 100%。系统进化结果显示, 与感染鱼类的虹彩病毒科蛙病毒属病毒, 如鳜鱼蛙病毒、Santee-Cooper 蛙病毒、孔雀鱼病毒 6 型和大口黑鲈溃疡综合征病毒等聚成一支。这些结果证明, 该分离株为虹彩病毒科蛙病毒属的成员, 暂命名为大口黑鲈蛙病毒(largemouth bass ranavirus, LMBRaV)湖北株 LMBRaV-HB001。病毒敏感细胞系筛选试验结果表明, 病毒 LMBRaV-HB001 感染鲤上皮瘤细胞(epithelioma papulosum cyprinid, EPC)、草鱼性腺细胞(grass carp ovary, GCO)、大鲵肌肉细胞(giant salamander muscle, GSM)和鲫脑组织细胞(gibel carp brain, GiCB)均能产生典型 CPE, 病毒滴度可达 10^8.0 TCID₅₀/mL 以上。本研究首次在湖北省养殖大口黑鲈体内分离与鉴定了 LMBRaV 病毒, 建立了病毒的细胞培养方法, 为进一步研究该病毒的传播、诊断和防控技术提供了重要参考。     

广西柳江鱼类资源调查

本记述了广西柳江鱼类137种，隶属于105属16科6目，并对广西淡水鱼类两新世录进行描述。     

陆水水库鱼类资源调查

陆水水库鱼类资源调查胡菊香，洪峰，黄学才（水利部水库渔业研究所）（水利部长江水利委员会库区处）陆水水库位于鄂东南长江一级支流陆水河中游，总库容为７．０６亿立方米，可养水面为３６１０公顷，于１９６７年建成蓄水。二十几年来渔业作为水库一项重要的功能一直未...     

广西大瑶山自然保护区鱼类资源调查

大瑶山自然保护区鱼类资源43种，隶属于5目14科39属，并对共发布特点和资源保护措施进行了讨论。