紫花苜蓿高频植株再生体系的建立

研究了不同品种间愈伤组织诱导及植株再生的差异.结果表明,MS+2,4-D(2.0 mg/L)+6-BA(0.5mg/L)+蔗糖0.3%+琼脂0.08%,MS+KT(0.5 mg/L)+NAA(0.01 mg/L)+蔗糖0.3%+琼脂0.08%,1/2MS+NAA(0.01 mg/L)+蔗糖0.15%+琼脂0.08%分别是紫花苜蓿的愈伤组织诱导、芽、根分化的适宜诱导培养基.     

三个南方紫花苜蓿品种的耐盐性及其再生体系的建立

采用不同浓度的NaCl单盐系列溶液,以MS培养基为基本成分,附加不同浓度和组合的2,4-D、6-BA、KT、NAA和蔗糖,对我国南方广泛种植的‘Victoria’‘CW787’和‘Millennium’3个紫花苜蓿品种的耐盐性和再生体系进行研究.结果表明:3个紫花苜蓿品种随着NaCl溶液浓度的升高,发芽率均逐渐降低;下胚轴作为外植体的诱导效果较好;愈伤诱导以2.0 mg.L-12,4-D+0.2 mg.L-16-BA的配比最佳;0.5 mg.L-1KT+0.05 mg.L-1NAA的激素组合对体细胞胚的发育和幼苗的形成效果最好;适宜的生根培养基为1/2 MS+0.5 mg.L-1NAA+20g.L-1蔗糖+7.5 g.L-1琼脂;‘Millennium’的耐盐性和植株愈伤再生能力较好.     

不同激素及培养基对紫花苜蓿下胚轴愈伤组织诱导及植株再生的影响

以紫花苜蓿无菌苗下胚轴,在附加不同激素配比的改良MS和改良的SH培养基上诱导出愈伤组织并获得再生植株,建立了紫花苜蓿下胚轴离体快速繁殖体系。实验结果表明:适宜下胚轴愈伤组织诱导的培养基为改良的MS+KT0.5 mg·L-1+NAA 1 mg·L-1,出愈率高达100%;适宜愈伤组织再分化的培养基为改良的MS+KT1 mg·L-1+NAA0.5 mg·L-1,出苗率40.3%;适宜生根的培养基为1/2MS,生根率达63.4%。     

紫花苜蓿下胚轴高频离体再生体系的建立

【目的】以北极星、阿尔刚金、皇后2000及国产紫花苜蓿4个苜蓿品种下胚轴为外植体,建立其稳定、高效的离体培养再生体系,为基因转化改良苜蓿性状奠定基础。【方法】研究了种子预处理方法、培养基、基因型以及蔗糖质量浓度对苜蓿下胚轴分化特性的影响。【结果】低温4℃预处理有利于提高苜蓿下胚轴愈伤组织的出愈率和绿苗分化率;其最佳诱导激素组合为"MS+1.0 mg/L 2,4-D+2.0 mg/L 6-BA+5.5 g/L琼脂+30 g/L蔗糖"和"MS+2.0 mg/L 2,4-D+2.0 mg/L 6-BA+5.5 g/L琼脂+30 g/L蔗糖";愈伤组织分化的最佳培养基为"MS+0.3 mg/L6-BA+3.0 mg/L KT+0.1 mg/L NAA+5.5 g/L琼脂+50 g/L蔗糖";最佳蔗糖质量浓度为50 g/L;4个紫花苜蓿品种愈伤组织诱导率的差异不大,但分化特性有较大差异,分化率由高到低依次为北极星、阿尔刚金、皇后2000和国产紫花。【结论】不同的种子预处理方法对4种紫花苜蓿品种的分化率均有一定影响,3种处理中以4℃下浸泡2 h处理的分化率最高,与其他处理间的差异达显著水平(P<0.05)。不同激素组合是影响紫花苜蓿下胚轴愈伤组织诱导率和分化率的主要原因,不同激素组合处理间的差异均达到显著水平(P<0.05),2,4-D与6-BA配合对紫花苜蓿下胚轴愈伤组织的诱导效果较好,分化培养基中高质量浓度的NAA,不利于愈伤组织的分化;不同基因型对分化率有显著影响(P<0.05),而不同蔗糖质量浓度对分化率的影响不显著(P>0.05)。说明其对离体培养再生体系的影响作用与处理方法、培养基、基因型相比是次要的。     

剑麻叶片愈伤组织诱导及再生体系的建立

以剑麻幼叶为外植体,进行愈伤组织的诱导试验,建立从愈伤组织到再生植株的培养体系。结果表明：诱导愈伤组织阶段表现最优的配方是N6＋NAA0．2mg／L＋6-BA3．0mg／L,而后愈伤组织转入MS＋TDZ1．0mg／L＋NAA0．05mg／L的培养基中48d便可诱导出芽,在生根培养基MS中生根率可达90％。     

不同品种谷子种子愈伤组织再生体系的建立

谷子离体再生困难且品种间差异较大,限制了其在品种改良和相关研究中的应用。试验以晋谷29号、晋谷61号、张杂谷10号、张杂谷16号、冀谷39号、冀谷41号等6个谷子品种的种子为外植体开展离体再生培养,研究不同种类和浓度植物生长调节剂配比对谷子种子愈伤组织诱导、植株再生及生根的影响,以期建立稳定高效的谷子离体再生体系;并通过主体间效应检验方差分析,探究不同谷子品种和不同培养基对谷子愈伤组织诱导和分化作用的主次关系。结果表明,晋谷29号、晋谷61号、冀谷39号、冀谷41号的愈伤组织诱导培养基以MS+2.0 mg/L 2,4-D+0.2 mg/L 6-BA为好,张杂谷10号和张杂谷16号的愈伤组织诱导培养基以MS+1.0 mg/L 2,4-D+0.2 mg/L 6-BA为好;晋谷29号、晋谷61号、张杂谷10号、张杂谷16号和冀谷41号的愈伤组织分化培养基均以MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA为好,冀谷39号的愈伤组织分化培养基以MS+2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA为好;6个谷子品种在各自适宜的培养条件下,其种子萌发率、愈伤组织诱导率和分化率均呈现...     

唐古特瑞香愈伤组织培养与再生体系建立

以唐古特瑞香幼嫩叶片为材料,进行愈伤组织诱导与植株再生试验,以期建立唐古特瑞香再生体系,为其无性系的快速繁殖奠定基础。将幼嫩叶片进行表面灭菌后接种于初代培养基中,初代培养时,存在褐化现象,愈伤诱导前需进行除褐培养,除褐后的外植体经愈伤诱导、不定芽分化、增殖培养、生根培养和幼苗出瓶移栽的试验过程,筛选出了最佳培养方案。除褐培养基以MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+PVP 200 mg·L^-1效果较好,在此培养基上连续转移3次后褐变消失。愈伤诱导培养基为MS+6-BA 3.0 mg·L^-1+2,4-D 2.0 mgL^-1,诱导率95.5%;芽苗分化培养基为MS+ZT 2.0 mg·L^-1+TDZ 0.1 mg·L^-1+NAA 0.5 mg·L^-1,分化率93.2%,平均芽数为8.66条;不定芽增殖培养基为MS+6-BA 2.0 mg·L^-1+IBA 0.3 mg·L^-1,增殖倍数为12.21,平均苗高4.81 cm;生根培养基为1/2 MS+NAA 0.5 mg·L^-1,生根数平均为3.83条,生根率为88.72%以上;组培苗移栽于珍珠岩中生长良好,成活率达90%以上。本研究初步建立了唐古特瑞香再生体系,为其无性繁殖奠定了理论基础。     

不同品种紫花苜蓿愈伤组织及分化体系的建立

[目的]建立不同品种紫花苜蓿的愈伤组织及分化体系。[方法]以4个品种的无菌苗子叶为外植体,研究不同的激素浓度及基因型对紫花苜蓿胚性愈伤组织诱导及分化的影响。[结果]4个品种诱导形成的愈伤组织差别不大;最佳胚性愈伤组织诱导培养基为改良SH+2,4-D 2 mg/L+KT 0.05 mg/L;苜蓿王的分化率和出苗率表现较佳;最佳分化培养基为改良SH+KT 0.4 mg/L。[结论]该试验为今后筛选易分化的苜蓿品种和研究"转基因苜蓿疫苗"奠定了基础。     

小麦根愈伤组织诱导再生植株

以６个人工合成小麦品系和对照品种“中国”春种子根为外植体,分别接种在含２,４－Ｄ,２,４,６ｎｍｇ／Ｌ的ＭＳ培养基上,于２０℃和２５℃连续照明条件下进行培养。各种处理和培养条件下,都诱导出愈伤组织。在培养温度２０℃,２,４－Ｄ４ｎｍｇ／Ｌ的ＭＳ培养基中,供试品系再生率显著高于其它培养条件下的再生率,结果表明：此处理是诱导根愈伤组织分化再生植株的最适培养基和培养温度。     

苜蓿高频再生体系和转基因体系研究进展

苜蓿是世界上重要的豆科牧草,以其品质好、产量高而被誉为“牧草之王”。结合国内外苜蓿基因工程研究动态,从基因型、外植体、培养基、培养途径、培养条件对苜蓿再生体系的影响,乙酰丁香酮（AS）浓度、选择压、受体选择对苜蓿转基因体系的影响两个大方面,综述了苜蓿再生和转基因体系研究的进展。     

铜元素对水稻花药愈伤组织绿苗分化率的影响

花培育种是水稻育种的有效途径之一,将花药培养与常规育种技术结合起来,可以快速纯合有益基因,缩短育种周期。花药培养在粳稻品种改良中产生了明显的经济效益,但籼稻花药愈伤组织诱导率和绿苗分化率都很低,绿苗率一般不到1%[1]。为此,研究人员从供体植株、生长条件、外植体     

提高玉米愈伤组织再生率的研究

为了提高玉米愈伤组织再生率,以1个玉米自交系和3个杂交种的幼胚愈伤组织为试材,接入含有不同浓度2,4-D的分化预处理培养基(N6+脯氨酸700 mg/L+水解酪蛋白500 mg/L+蔗糖30 g/L),2,4-D浓度设0、0.5、1.0和1.5 mg/L计4个处理,培养7 d后转移到分化培养基中进行分化处理,以继代培养7 d的愈伤组织直接转入分化培养基进行植株再生作为对照,研究了不同浓度2,4-D分化预处理对玉米愈伤组织再生率和再生进程的影响。结果表明:愈伤组织在转入分化培养基前进行预处理,可以提高玉米植株再生率。分化预处理培养基以不加2,4-D的效果最好,玉米愈伤组织再生率最高,与对照差异达到了极显著水平,且分化成苗进程加快。不同基因型中,杂交种87-1×郑22的植株再生率最高,与其他2个杂交种差异不显著,但三者的植株再生率均极显著高于自交系87-1。对玉米愈伤组织进行分化前的预处理,可以提高植株再生率,加快再生进程。     

番茄花药培养愈伤组织诱导及植株再生的研究

以5个番茄F1杂交种为试材,研究了基因型、植物生长调节剂、变温处理和椰乳对愈伤组织发生及植株再生的影响,旨在优化番茄花药培养的技术方法.结果表明:不同基因型愈伤组织发生率不同;培养基中添加0.5mg·L-1的2,4-D较NAA,5个材料的愈伤组织平均诱导率提高了10.04%;4℃48h 33℃72h的处理对愈伤组织的诱导有明显的促进作用;培养基中加入50mg·L-1的椰乳可提高愈伤组织诱导率.植株再生的较优培养基为MS 0.2mg·L-1IAA 2.0mg·L-16-BA 0.5mg·L-1ZT.基因型和培养基是愈伤组织的发生和植株再生的主要影响因素;适当的低温处理配合高温热激,及在培养基中添加椰乳有利于愈伤组织的发生.     

大豆子叶节高效再生系统的研究

为建立一个大豆子叶节高效再生体系用于大豆的遗传转化,以桂春豆1号、桂早2号、桂夏1号和桂夏豆2号4个大豆品种为材料,子叶节为外植体诱导丛生芽,再生完整植株.实验研究了大豆种子的消毒方法,基因型以及培养过程中植物激素的浓度等影响大豆子叶节再生的因素.结果表明在适宜的条件下,4个大豆品种的丛生芽分化率都可达到90％,丛生芽数基本都在4～6个范围内,4个大豆品种均为子叶节器官发生途径的理想基因型.最适合的种子灭菌方法是双氧水灭菌法;桂春豆1号和桂早2号的适宜芽诱导培养基为B5+ 6-BA 1.6 mg/L+ IBA 0.2 mg/L,桂夏1号和桂夏豆2号为B5 +6-BA 1.0 mg/L +IBA 0.2 mg/L;4个大豆品种的适宜丛生芽伸长培养基为1/2 MS+B5有机+GA3 0.5 mg/L;生根培养基为B5 +NAA0.5 mg/L+ 2.0 g/L活性炭.     

新疆苜蓿愈伤组织再生体系建立的研究

以新牧1号、新疆大叶苜蓿和新疆野生黄花苜蓿无菌苗下胚轴为外植体,研究了两种诱导培养基对愈伤组织诱导、生长的影响,以及增殖培养基中附加GSH和ABA对愈伤组织增殖、分化及再生的影响.结果表明,MS+2,4-D 2mg/L+NAA 2mg/L+KT 1mg/L为较佳诱导培养基;增殖培养基中附加GSH 15mg/L有利于分化及植株再生;增殖培养基中附加GSH 15mg/L+ABA 3 mg/L有利于提高新牧1号和新疆大叶苜蓿体胚分化能力,附加GSH 15mg/L+ABA 6mg/L有利于新疆野生黄花苜蓿体胚分化频率;实验共筛选出新牧1号、新疆大叶苜蓿、新疆野生黄花苜蓿高分化能力基因型分别为5、6和5个.     

苜蓿组织培养和再生体系研究

以农菁一号苜蓿和肇东苜蓿无菌苗幼叶和茎段为外植体,在含6-BA和NAA的MS培养基中诱导出愈伤组织,并通过外植体直接再生途径和胚性愈伤组织再生途径获得再生芽。在含有IBA的1/2MS培养基诱导再生苗生根。     

西瓜高频再生系统的研究

以西瓜栽培种中育 1号为材料对影响西瓜组织培养的多个因素进行了研究 ,建立了西瓜茎尖、子叶块的高频再生系统。结果表明无菌苗子叶呈淡绿色时不定芽诱导率最高 ,茎尖和子叶块适于直接诱导不定芽 ,其中茎尖的诱导率稍高于子叶块 ,MS 6 -BA 1 0 IBA 0 5可较好的诱导子叶块分化不定芽 ,MS 6 -BA 1 0 IBA 0 1对茎尖较为合适 ,低浓度的IAA有利生根 ,低温、高湿可提高移栽的成活率     

兰花高频再生体系探究

[目的]为兰花转基因工程研究奠定基础。[方法]以大花蕙兰原球茎、小苗和春兰种子为材料,以MS为基本培养基,将原球茎切成薄片slice、小苗叶片切成小段进行诱导培养,用舍有GFP基因的农杆菌对春兰幼小原球茎进行转化,检测GFP,的瞬间表达。[结果]薄层切片较薄时,褐化和死亡率较高,但从切口处长出的原球茎多而圆;薄层切片较厚时,褐化和死亡率较低,但切口处无再生原球茎产生;对切片进行7d的暗处理可提高薄层的再生率,黑暗中再生的白色原球茎见光培养2～3d后即可转绿,并很快分化出小芽;叶片原球茎仅在叶片基部的居间分生组织处产生;小于1min的类原球茎为最佳转化受体,GFP的瞬间表达率可达60％。[结论]建立了兰花高频再生体系。     

小麦成熟胚高频再生基因型筛选及再生体系研究

以目前生产上主栽或主推的、具有优良农艺性状的18个黄淮麦区冬小麦品种(系)和2个西北春麦区春小麦品种为材料,对它们成熟胚再生能力进行比较,从中筛选出再生频率高的基因型,并探讨不同接种方法、麦草畏质量浓度、细胞分裂素和干燥处理等对小麦成熟胚愈伤组织诱导和分化频率的影响。结果表明,小麦成熟胚愈伤组织诱导率普遍较高,为66.7%～100.0%,而分化率普遍较低,为3.6%～35.8%。基因型间差异显著,其中愈伤组织分化率较高的基因型有泛麦8号、周麦27和邢麦6号,绿苗分化率超过30%;采用胚十字形切割法接种小麦成熟胚愈伤组织分化率较高,达到54.5%～73.3%;诱导培养基中麦草畏的诱导效果显著优于2,4-D。在麦草畏质量浓度为2～4mg/L时有利于愈伤组织诱导和分化;成熟胚愈伤组织转入不含激素或含有2mg/L 6-BA或KT的分化培养基中时,分化率分别达到38.5%,45.8%和37.0%,较其他细胞分裂素和质量浓度处理分化率高,而愈伤组织分化前干燥处理6h和未干燥处理的差异不显著,干燥12h分化率明显降低。