Dot─ELISA检测规模化猪场猪瘟抗体水平

应用斑点酶联免疫吸附试验（Dot-ELISA)对四川某规模化猪场的43份免疫母猪的血清进行猪瘟病毒抗体水平检测。试验结果：按抗体水平1：80及其以上计为阳性,则阳性血清占30头份,阳性率为69.8%,其中,1：80占14头份（32.6%),1：160占10头份（23.2%),1：320占6头份（14%）;抗体水平在1：40以下占4头份（9.3%）,1：40占9头份（20.9%)。研究表明,Dot-Elisa是一种操作简便,准确,快速的检测方法,特别适应规模化猪场猪瘟抗体水平的监测。     

某猪场猪瘟抗体水平检测及反思

近年来各养殖场重视疫病防控工作,尤其是疫苗免疫接种。某猪场对饲养的猪针对8种疾病用6种疫苗进行免疫接种。结果是急性暴发性典型性疫病越来越少,而慢性非典型性疫病在不断增多,以猪瘟为例,猪场管理者认为猪瘟免疫从未有半点懈怠,却每年都有慢性猪瘟发生,为了了解和掌握该猪场的猪瘟免疫后抗体产生情况,笔者对该场不同年龄的猪采血,用正向间接血凝方法检测猪瘟抗体,结果表明1岁以上的母猪抗体水平较高,3月龄以下的猪抗体水平非常低,这是免疫时机掌握不当,还是另有原因正是我们关注的。1材料与方法1.1被检材料:耳静脉采猪血,分离血清,低温…     

河南新乡某规模化猪场猪瘟抗体水平检测分析

为了解河南省新乡市某规模化猪场猪瘟疫苗的免疫抗体水平,本试验采用猪瘟疫苗抗体阻断ELISA检测试剂盒,对该猪场不同日龄的保育猪、妊娠母猪、后备母猪及公猪进行猪瘟抗体水平检测。结果显示:妊娠中后期母猪的抗体阳性率均为100%,离散度分别为16.13%、17.01%,离散度相对稳定,免疫效果好。后备母猪、哺乳母猪抗体阳性率达100%,离散度分别为0.65%、8.80%,相对偏低,免疫效果好,猪群比较稳定。公猪的整体抗体阳性率为100%,猪场3个区中公猪的抗体离散度分别为3.23%、3.51%、6.11%,公猪免疫效果好且抗体整齐度高。保育仔猪前期的猪瘟抗体阳性率最高达100%,保育中期抗体阳性率最低,为50%,保育后期抗体阳性率是80%,保育中后期离散度分别为24.77%、32.98%,离散度相对不稳定,免疫水平不均一,存在感染野毒的风险,不同个体间抗体水平差异比较大。结合试验猪场具体情况,在保育猪30～55日龄之间再检测,确定仔猪的最佳首免时间,提高仔猪的免疫效果。本文通过对某规模化猪场不同阶段猪群的猪瘟抗体水平检测分析,为该猪场生产中防控猪瘟提供理论依据。     

间接ELISA在猪瘟抗体检测上的应用

间接ELISA以其灵敏、特异、简单、快速、稳定、高通量及易于操作等优点,在猪瘟免疫猪群抗体水平监测、猪瘟的快速诊断与流行病学调查中得到了广泛应用,显示出了良好的应用前景。论文就间接ELISA方法及其在猪瘟诊断上的应用概况做一综述,以期为我国猪瘟的综合防控提供参考。     

ELISA方法检测猪瘟抗体水平的分析

<正>2008至2012年期间,对某规模猪场的育肥猪使用ELISA方法进行猪瘟抗体水平检测。猪场里部分育肥猪发生猪瘟,有的出现典型的临床症状,有的病程较长,死亡率均在15%左右。当病死猪的解剖症状具有猪瘟病理症状时,将病料送到江西农业大学进行猪瘟抗体检测。现在将检测分析的相关情况报告如下。1试验材料1.1被检血清猪场育肥猪在接种猪瘟疫苗后30d随机采血,血样经处理后获取血清(血液冷凝,3000r/min离     

云南省部分规模猪场猪瘟抗体水平调查

为评估云南省规模猪场的猪瘟免疫状况,用猪瘟ELISA抗体检测试剂盒,对云南省不同地区38个规模化猪场的种公猪、种母猪、后备猪和商品猪,共2 663份血清进行猪瘟抗体检测。结果显示:38家猪场平均猪瘟抗体合格率为78.82%,其中滇东、滇中、滇西南、滇西北、滇西、滇南、滇东北地区抗体合格率分别为82.2%、72.4%、78.87%、81.58%、83.61%、84.72%、64.63%;种公猪、种母猪、后备猪和商品猪的抗体合格率分别为89.79%、92.58%、85.38%、65.12%。结果表明,本次调查的38家猪场的猪瘟免疫保护水平较高,整体上达到了国家免疫方案中要求的不低于70%的标准,但存在一定的地区差异和猪群差异,其中滇东北地区以及商品猪群免疫保护水平较低,存在发生疫情风险,需要加强免疫和检测。本调查为云南省规模化猪场的猪病防控策略制定提供了参考。     

应用间接ELISA方法监测规模化猪场猪瘟抗体水平的研究

对吉林省某规模化养猪场的不同阶段的哺乳母猪、哺乳小猪、怀孕母猪、后备母猪、保育小猪和公猪随机抽血采样,采用猪瘟病毒抗体ELISA检测试剂盒测定样品抗体水平,分析当前该猪场猪瘟流行状况,是否对免疫程序进行优化,制定出科学、适用的综合防控措施,以促进猪瘟的控制和扑灭,从而达到猪瘟净化的计划。通过实验操作结果表明:猪瘟病毒抗体ELISA检测试剂盒具有简便、快速和敏感等特性,是适合于地方规模化养猪场检测猪瘟抗体水平较好方法之一。     

2011-2014年规模猪场猪瘟抗体的检测及分析

2011-2014年间对200多家规模猪场送检的种猪、育肥猪血清样品进行了猪瘟抗体检测,结果表明:规模猪场的猪瘟抗体阳性率在75%左右,说明各规模猪场对猪瘟的免疫防控给予了足够的重视;不同厂家生产的猪瘟疫苗免疫猪群后抗体阳性率参差不齐,南京、广东、哈尔滨等三家疫苗生产厂家的猪瘟疫苗免疫后猪瘟杭体阳性率稍高于其他厂家,达到80%以上。     

猪瘟抗体间接ELISA检测试剂盒的研制和应用

对猪瘟抗体间接ELISA检测试剂盒的稳定性及保存条件等进行了摸索,确定该试剂盒具有良好的稳定性,并可在2℃～8℃环境中的保存9个月。同时,测定了本试剂盒与荧光抗体病毒中和试验的符合率为92.62%;并将该试剂盒应用于免疫动物抗体的动态监测。     

五家渠市规模猪场猪瘟免疫抗体水平检测分析

为了解当前五家渠市规模猪场猪瘟疫苗的免疫效果,以便为今后做好猪瘟防控工作提供参考,特进行本试验。1材料与方法1.1样品来源及主要试剂和仪器2012年1—12月选取五家渠市周边某养殖小区的4个猪场进行抽样调查,每头采血样5 mL。猪瘟抗体ELISA检测试剂盒为美国IDEXX公司产品,批号：43220-A291。     

规模化猪场猪瘟免疫试验

对妊娠期母猪进行猪瘟疫苗免疫,观察其抗体变化情况;采用5种商品猪瘟疫苗免疫仔猪,检测其在一免和二免情况下的抗体变化规律.结果表明：仔猪猪瘟母源抗体与母猪的抗体水平正相关,妊娠母猪在妊娠期60-80 d免疫无显著差异,不同来源疫苗的免疫效果相似,二次免疫效果优于一次免疫.     

猪瘟免疫抗体水平监测及免疫效果评估分析

通过2005-2010年对银川市猪瘟抗体水平的监测,明确猪瘟抗体合格率变化特点,分析相关原因,探寻猪瘟的发生动态和流行规律,为指导和制定猪瘟防控措施提供参考。     

REV重组env蛋白间接ELISA诊断试剂盒的研制

以纯化的env蛋白为包被抗原,建立了检测REV抗体的间接ELISA（ienv-ELISA）方法。ienv-ELISA工作条件优化结果表明,最佳包被液为CB;最佳封闭液浓度为1%BSA-PBS;最佳抗原包被量为8μg/mL;血清最佳稀释度为1∶300;血清最佳作用时间为1 h;二抗的最佳稀释度为1∶5000;二抗最佳作用时间为1 h;底物最佳显色时间为25 min。重复性试验、特异性试验和对比试验结果显示,建立的ienv-ELISA方法有良好的可重复性,标准差均小于15%;与鸡MDV、ALV、NDV、H5N1、H9N1等病毒阳性抗体均无交叉反应;与REV抗体检测试剂盒（以REV全病毒为包被抗原）对比,所建立的ienv-ELISA诊断敏感性、诊断特异性以及准确率分别为90.625%9、3.75%和92.7%。     

间接ELISA检测抗传染性法氏囊病病毒抗体方法的建立

采用原核表达的传染性法氏囊病毒(IBDV)核衣壳蛋白VP2作为诊断抗原,建立检测IBD血清抗体的间接ELISA方法.抗原最佳包被量为每孔174.67ng,待检血清最佳稀释度为1:40,待检血清样品的D492nm≥0.43Dpos+0.57Dneg判为阳性,反之判为阴性.对采自安徽省部分地区的979鸡血清样品进行检测,IBDV抗体阳性率为39.73%.结果证实,间接ELISA法用于IBDV血清抗体的监测具有良好的特异性,是一种快速简便的血清学方法,值得在基层推广应用.     

猪圆环病毒2型间接ELISA抗体检测试剂盒的研制及初步应用

以大肠杆菌原核表达系统表达的猪圆环病毒2型Cap蛋白为抗原,建立猪圆环病毒2型间接ELISA检测方法,优化ELISA反应条件,研制猪圆环病毒2型ELISA抗体检测试剂盒。与商品化试剂盒相比,该检测试剂盒敏感性、特异性和符合率分别为95.12%、92.86%和94.55%;同时与猪圆环病毒1型（PCV1）、猪瘟病毒（CSFV）、猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）等多种病毒阳性血清无交叉反应。试剂盒具有较好的重复性,在-20 ℃至少可保存1年以上,将其应用于临床血清样品的检测,结果安徽、广东、广西采样猪场的PCV2阳性率分别为100%、48.39%、100%。     

间接ELISA法对禽霍乱抗体的动态监测

将40只50日龄健康禽霍乱非免疫鸡随机分为四组,每组10只。用禽霍乱蜂胶佐剂灭活疫苗对各组鸡进行不同水平的免疫,同时设非免疫对照组。各组鸡间隔5-7天采血,以间接ELISA法测定血清P／N值,并确定临界值。将P／N值在2.1-4.7的13只试验鸡以一个最小致死量（相当于10个菌／ml）进行攻毒试验,同时设攻毒对照,在1周内3只对照鸡均表现感染发病并死亡,而试验鸡均健活,从而初步证明所确定的临界值是合理的。     

新疆部分地区规模化猪场弓形虫抗体监测与分析

为了查明新疆部分地区规模化猪场弓形虫流行情况,应用酶联免疫吸附试验对5个猪场随机采集的173分血清样品进行弓形虫抗体监测。结果表明,猪弓形虫抗体阳性率高达82.7%(143/173),其中3个猪场的后备母猪的弓形虫抗体阳性率高达100%,5个猪场公猪的弓形虫抗体阳性率在85%~75%之间。     

应用单克隆抗体酶联免疫斑点试验检测抗传染性喉气管炎抗体

本文提出以硝酸纤维膜作为固相载体，辣根过氧化物酶标记的抗传染性喉气管炎病毒（ＩＬＴＶ）的单克隆抗体（ＭｃＡｂ），邻苯二胺为底物，检测ＩＬＴＶ抗体的免疫斑点试验方法（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）。该方法较常规方法敏感，特异、省时。该方法的建立为鸡群疫病监测，免疫鸡群抗体水平的检测提供了新的可靠方法。     

闽西地区规模化猪场猪瘟抗体水平监测及免疫效果分析

应用猪瘟正向间接血凝试验 ,检测了闽西地区规模化猪场 10 93份血清的猪瘟抗体水平。结果表明 ,猪瘟血清抗体水平≤ 1∶ 8的有 2 6 7份 ,免疫合格率为 75 .5 %。哺乳仔猪检测 10 7份 ,猪瘟血清抗体水平≤ 1∶ 8的有 34份 ,免疫合格率为 6 8%。断奶仔猪检测 333份 ,猪瘟血清抗体水平≤ 1∶ 8的有 12 3份 ,免疫合格率为 6 2 %。育肥猪检测 34 0份 ,猪瘟血清抗体水平≤ 1∶ 8的有 94份 ,免疫合格率为 72 %。母猪检测 313份 ,猪瘟血清抗体水平≤ 1∶ 8的有 16份 ,免疫合格率为 95 %。所有猪群中断奶仔猪免疫合格率最低 ,与临床上断奶仔猪猪瘟发病率最高相吻合。