香蕉穿孔线虫β-1，4-内切葡聚糖酶基因的克隆与特征分析

 植物寄生线虫的分泌物在线虫的侵染过程中具有重要的作用,其中纤维素水解酶是研究的较多的主要分泌物之一。采用RT-PCR和RACE方法,从香蕉穿孔线虫（Radopholus similis）中获得编码β-1,4-内切葡聚糖酶基因的cDNA序列,命名为RS-eng-1 （GenBank登录号为EU414839）。该cDNA序列全长为1 630 bp,包含一个1 404 bp的开放阅读框（ORF）,编码含467个氨基酸的蛋白,理论分子量与等电点分别为48.22 kD和6.04。序列分析表明该酶含有糖基水解酶家族5（GHF5）的保守结构域,N端具有22个氨基酸残基组成的信号肽,C端含有细菌式样的纤维素结合域（CBDⅡ）。原位杂交结果显示此基因在相似穿孔线虫的食道腺部位表达,并且Southern结果显示其为多拷贝基因。cDNA与基因组DNA重叠分析表明,此基因包含6个内含子,切割点符合5'-GT...AG-3'的规律。进化分析显示该酶与细菌Bacillus subtilis和Erwina carotovora 分泌的纤维素酶属于同一支,推测其来源于细菌的水平基因转移。     

八种食用菌水溶性粗多糖的β-葡聚糖含量与体外免疫活性研究

采用水提醇沉法提取了8种不同食用菌子实体的水溶性粗多糖,测定了样品中多糖、葡聚糖和β-葡聚糖的含量,结果表明,刺芹侧耳(Pleurotus eryngii)、毛头鬼伞(Coprinus comatus)、香菇(Lentinula edodes)和桑黄(Phellinus baumii)粗多糖中的多糖含量较高,香菇和姬松茸(Agaricus blazei)粗多糖中葡聚糖含量较高;猴头菌(Hericium erinaceus)、刺芹侧耳、香菇和姬松茸粗多糖中β-葡聚糖含量较高。采用截留分子量8000～12000透析袋纯化8种食用菌粗多糖,将纯化产物用于体外刺激巨噬细胞RAW264.7释放NO实验和脾淋巴细胞增殖实验,8种样品均能刺激巨噬细胞释放NO,其中香菇、刺芹侧耳和毛头鬼伞粗多糖在低浓度(200μg/mL)时,刺激巨噬细胞释放NO量即可达到40μmol/L以上,高浓度(500μg/mL)时高于阳性对照;体外脾淋巴细胞增殖实验结果显示,8种供试样品均能刺激脾淋巴细胞增殖,以香菇、刺芹侧耳和猴头菌粗多糖效果较好。实验结果证明这8种食用菌粗多糖均具有体外免疫活性。     

醋糟栽培鸡腿菇的研究

试验以醋糟为主原料,设计不同配方配制培养料,进行鸡腿菇育种及出菇试验。结果表明,醋糟可以替代棉籽壳用于鸡腿菇育种以及栽培生产,既能废物利用,减少污染,又能提高菌丝生长速度,提高产量和质量,降低成本,增加效益。     

苹果渣高产栽培鸡腿菇的研究

本试验以果品加工产生的苹果渣为主要原料栽培鸡腿菇 (Coprinus comatus)。结果表明 :以苹果渣栽培鸡腿菇是可行的 ;采用灌大水和二次覆土的管理措施 ,其产量高 ,生物转化率高达 2 16%,并为合理利用苹果渣找到了一条新途径     

硫磺菌β-葡萄糖苷酶产酶液体发酵培养基的优化

通过单因子和正交试验,对硫磺菌产β-葡萄糖苷酶的液体培养进行分析优化。结果表明：在温度为25℃,装液量75mL／250mL,摇瓶转速为150r／min等外部培养条件确定的条件下,硫磺菌产β-葡萄糖苷酶的最佳培养基配比为黄豆（制浆）15．0g／L、葡萄糖20．0g/L、初始pH值5．5,最佳培养时间为96h。     

菌核侧耳β-葡萄糖苷酶液体培养条件的优化

通过单因素和正交试验,对菌核侧耳产β-葡萄糖苷酶液体培养条件进行优化。结果表明:以黄豆浆为氮源,葡萄糖为碳源,初始pH为6.0产酶条件最优。培养温度为25℃、装液量50mL/250mL、摇瓶转速为150r/min培养72h后,酶活力达最高,为1.86U/g(湿菌丝体)。     

农杆菌介导的几丁质酶基因和β-1,3-葡聚糖酶基因转化辣椒研究

以苗龄7～10 d的辣椒组培苗为被侵染的外植体,通过农杆菌介导几丁质酶基因和β-1,3-葡聚糖酶基因,研究基因型、外植体类型、抗生素浓度对辣椒遗传转化的影响,以期获得抗真菌病的转基因辣椒植株.结果表明:不同基因型间、外植体类型、抗生素种类和浓度对辣椒的遗传转化影响存在较大差异.以几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶为目的基因,应用根癌农杆菌介导法对辣椒进行了遗传转化,获得了3株抗性植株.     

果实脱落过程中水解酶作用的研究现状及展望

果实的脱落是由于离区细胞间质的降解,而细胞间质的降解有赖于水解酶的参与,这使得水解酶成为近年来器官脱落研究的热点之一。该文主要综述了各种水解酶的生化特性、克隆表达以及降解细胞间质作用等方面的研究现状,并展望了其未来的发展方向,以期推进水解酶在果实脱落上的研究及其相关制品的开发利用。     

斑玉蕈β-葡萄糖苷酶基因的序列分析及皂苷对基因表达的影响

通过转录组测序获得了斑玉蕈(Hypsizygus marmoreus)SIEF3133菌株的β-葡萄糖苷酶基因的cDNA序列(命名为bgl1),采用荧光定量PCR检测bgl1的相对表达量。当PDB中加入0.05g/L的皂苷溶液,菌丝培养4~6d时,bgl1相对表达量降低了1/2左右(相比对照),8d开始升高,第10天为对照组的1.8倍;向工厂化生产用的栽培瓶(接种培养85d后搔菌处理)中添加0.05g/L的皂苷溶液15mL,可缩短子实体采收时间约3d(与对照组相比),在此过程中bgl1相对表达量在第5天时最低,20d时超过对照组,5d时为对照组的1.66倍。     

保鲜加工处理对鸡腿菇营养成分影响的研究

通过测定不同保鲜加工处理的鸡腿菇中维生素C、游离氨基氮、蛋白质、还原糖和总糖含量,研究保鲜加工处理对鸡腿菇营养价值的影响。     

鸡腿菇交配型的初步研究

以鸡腿菇2个子实体为材料,撕取成熟鸡腿菇菌褶1小片经振荡稀释得到2组Ⅰ和Ⅱ分别为42和43株单核体,经过3轮交配反应,结果表明,鸡腿菇的交配型符合四极性交配系统的分布规律。     

毛头鬼伞子实体含氮化合物的分离纯化及结构鉴定

采用色谱柱层析法,首次从毛头鬼伞(Coprinus comatus)子实体的醇提物中分离得到8个含氮化合物,通过波谱分析,分别鉴定为尿嘧啶(uracil)、黄嘌呤(xanthine)、光色素(lumichrome)、烟酰胺(nicotinamide)、甲酰肼(formylhydrazine)、烟酸(nicotinic acid)、腺苷(adenosine)、尿苷(uridine).     

鸡腿蘑多糖对昆明小鼠血清溶菌酶活性影响的研究

鸡腿蘑多糖（CcP）能明显提高昆明小鼠血清溶菌酶活性，腹腔注射多糖后各处理组血清溶菌酶活力都明显提高，其中CcP6.25实验组尤为显著，该组在用药92h后，酶活力达63076u/mL。CcP50实验组在用药96h后酶力高，约达57061u/mL。CcP25实验组在用药72hr后酶活力达最高，达58430u/mL。     

鸡腿蘑黑斑病病原菌生物学特性研究

研究了鸡腿蘑黑斑病病原菌（Verticillium fungicola var．aleophilum）的生物学特性。结果表明,病原菌孢子萌发的最适温度是28℃;菌丝生长最适温度为25℃;光照对菌丝生长无显著影响;实验范围内菌丝生长适宜碳源和氮源分别为葡萄糖和酵母浸粉。     

鸡腿蘑栽培菌株的SRAP分析

对21个鸡腿蘑栽培菌株的基因组DNA进行SRAP分析,9对引物共获得23条明显的多态性扩增条带,利用23条扩增条带对菌株进行聚类分析,获得亲缘关系树状图.结果显示:不同菌株间存在着丰富的遗传多样性,扩增指纹能有效分辨不同菌株的基因型.在60%的相似值上,21个菌株可以分为5大类,而在100%相似值上,除2个菌株Co.0071和Co.0072未能区分外,其余19个菌株均可单独分开.     

"鸡腿菇2001"菌株生物学特性的研究

“鸡腿菇2001”菌株的生物学特性研究结果表明：在特定的条件下,“鸡腿菇2001”菌株的子实体形态独具特色;菌丝生长最适宜温度24℃-27℃,子实体最适温度为18℃-25℃;最适宜的pH值范围6．5-7．5;湿度：培养料适宜含水量为65％,出菇时空气湿度90％即可;光照：弱光为好。     

以抑制非酶糖基化为指标优化鸡腿菇发酵培养基

通过优化培养基组成,提高鸡腿菇发酵液对非酶糖基化反应的抑制活性.试验以抑制非酶糖基化反应活性为指标,通过单因素试验筛选了适宜碳源、氮源、无机盐以及复合营养因子,通过正交试验进一步优化培养基组成.试验结果表明,使用优化培养基[麦芽糖4%,牛肉膏0.6%,黄豆芽(煮汁)200 g/L,洋葱(煮汁)100 g/L,MgSO4 0.12%,FeSO4 0.10%,CuSO4 0.03%,ZnSO4 0.05%]液体培养鸡腿菇,其发酵液对非酶糖基化反应的抑制率高达97.32%.     

烟秆代料栽培毛头鬼伞初探

利用不同比例的烟秆替代常规培养料中的棉籽壳或稻草栽培毛头鬼伞(Coprinus comatus),结果表明,烟秆可替代棉籽壳或稻草栽培毛头鬼伞,且可促进菌丝生长,缩短生产周期,产量与对照无显著性差异;用25％～50％的烟秆替代棉籽壳的配方栽培毛头鬼伞,得到的子实体产量与质量与对照相当,但能节省原料成本4～8元/m2,具有显著的经济效益.     

鸡腿菇菌株农艺性状比较及相关分析

以鸡腿菇的15个栽培菌株和1个野生菌株为试验材料,对菌株进行了农艺性状比较及相关分析,结果表明,鸡腿菇菌株菌丝体日均生长速度在2.34 mm·d~(-1)～3.93 mm·d~(-1)之间,在菌丝体密度上有差异;菌株间子实体的菌帽长度和菌柄直径间也存在差异;生物学效率测试表明Co9、Co10、Co11、Co18、Co5为适宜于南充地区栽培的菌株,其生物学效率分别为117.55%、104.97%、113.07%、104.64%、100.49%、102.55%。经相关分析后,菌柄直径、菌柄长度、菌帽长度、菌帽厚度与单个子实体重量呈极显著的正相关。