香菇菌株遗传多样性ISSR、RAPD和SRAP综合分析

采用ISSR、RAPD和SRAP分子标记技术对收集到的26株供试香菇(Lentinula edodes)菌株进行遗传多样性分析,将分析数据合并构建UPGMA亲缘关系树状图,综合分析结果表明,26株供试香菇菌株间的遗传相似系数范围为0.49～0.97,在相似系数0.61时可分为3个类群,具有相似遗传背景或来源于野生资源的菌株优先聚类在同一亚群,由5株野生菌株组成的第三类群与21株主栽菌株相似系数仅为0.50,存在非常明显的遗传差异.该试验结果表明:该方法可以更好地解释供试香菇菌株间的亲缘关系;加强野生香菇种质资源的评价和鉴定研究,将有利于我国现有主栽香菇的品种改良和培育出具有自主知识产权的优良香菇新品种.     

杏鲍菇多孢分离菌株ISSR、RAPD分子标记及体细胞不亲和性分析

通过杏鲍菇多孢分离菌株的ISSR、RAPD分子标记和体细胞不亲和性分析,体细胞不亲和性分析得出子代杏1、杏3、杏4与出发菌株湘杏98有拮抗线,杏1、杏2、杏3、杏4四株子代均有明显的拮抗线。16条ISSR引物和19条RAPD引物分别扩增出99、154个条带,多态性条带分别占48.48%、61.00%;相似系数变异范围分别为0.63~0.86、0.57~0.83。湘杏98、杏2、杏3在2种标记的聚类结果上存在差异。体细胞不亲和性分析从表型上(拮抗线有无)反应了菌株的遗传变异。RAPD标记遗传相似系数小于ISSR标记,表明ISSR标记更适合亲缘关系较近的种群间遗传多样性分析。     

广西野生灵芝菌株的遗传多样性分析

以10个广西野生灵芝菌株为试材,采用酯酶同工酶分析和拮抗试验的方法,研究供试菌株的遗传多样性。结果表明:广西野生灵芝具有丰富的遗传多样性。试验共检测到22条谱带,10个菌株间的谱带均有差异。各菌株间的遗传相似系数在0.36~0.95;在相似系数为0.55时,10个菌株可以分为3类,即菌株C3(红芝)为一类,菌株C9(白芝)为一类,C1、C2、C4、C5、C6、C7、C8、C10(黑芝)为一类;在相似系数为0.64时,黑芝类又可分为2类,即C1、C2、C4、C8、C10为一类,C5、C6、C7为一类。菌株C4与C10、C5与C7间的遗传相似系数大于0.90,亲缘关系很近,且这2对菌株间无拮抗,说明菌株C4与C10为同一菌株,C5与C7也为同一菌株。     

菠萝种质鉴定及亲缘关系的AFLP分析

从FISH-AFLP试剂盒(PSTI/MseI型)64对引物中,筛选出8对AFLP选择性引物P-GAA/M-CTA、P-GAC/M-CTG、P-GAC/M-CTT、P-GAG/M-CAT、P-GAG/M-CTA、P-GAT/M-CAT、P-GAT/M-CTA、P-GAT/M-CTC,对39份菠萝种质进行了AFLP分析,都得到了清晰的多态性指纹图谱。8对引物共获得454个遗传位点,其中多态性位点332个,多态性比例平均为73.1%。UPGMA聚类表明,各种质间的相似系数为0.73～0.98,说明39份菠萝种质遗传关系相对较近。依相似系数0.80的水平,将供试的39份菠萝种质分为4类。研究结果可以作为菠萝分类的理论依据和基础。     

姬松茸与双孢蘑菇不同菌株的RAPD扩增研究

以4个姬松茸菌株和2个双孢蘑菇菌株为材料，用20个随机引物对它们进行RAPD扩增，通过对供试菌株遗传相似系数的估算和系统聚类分析，构建姬松茸和双孢蘑菇遗传相关树状聚类图谱，结果表明，进行RAPD扩增的20个随机引物中，有12个能产生三种带型，当遗传相似系数升至0.8713时，这6个菌株被分为3类，第一类为菌株18和26，第二类为菌株13和12，第三类为菌株33和45。     

核用银杏品种遗传关系的AFLP分析

采用AFLP技术对34份核用银杏品种进行遗传多样性和亲缘关系分析。结果表明：8对AFLP引物组合共扩增出1 337条谱带,多态带百分率为99.63%;品种间的遗传相似系数在0.2915 ~ 0.6812之间,平均值为0.4911;在相似系数为0.50时供试品种可分为4大类;依据AFLP结果建立了核用银杏品种指纹图谱。核用银杏4个类型的Nei’s遗传多样性指数范围为0.1392 ~ 0.2014,总体为0.2112,Shannon’s信息指数范围为0.2138 ~ 0.3165,总体为0.3417;4个类型品种间的遗传分化系数为0.0871,基因流为5.4230。结合特异位点、相似系数、聚类结果等筛选出8份核用银杏优质品种。     

枳属36份特异种质的AFLP指纹图谱构建与分析

 从40个Pstl／MseI酶切的AFLP引物对中筛选出多态性高的7个，对36份枳属特异种质进行了指纹分析。7个引物对共获得539条带，其中146条带具有多态性。各种质材料之间的遗传相似性在0．23～ 0．98之间，只需结合其中的3个引物对即可区分所有的材料。根据7个AFLP引物对所得谱带的聚类分析表明，聚类结果与地理来源没有明显的联系，这可能正反映了近时间内地区之间枳资源的频繁交流。     

枇杷AFLP分析体系的建立与应用

为研究枇杷种质资源遗传多样性和亲缘关系的技术平台奠定基础,以来自5个不同国家43份枇杷种质为试材研究枇杷基因组AFLP反应体系。通过检测AFLP分析中DNA提取、酶切及连接、预扩增和选择性扩增的结果,对影响AFLP分析的主要因子进行分析,建立了AFLP分析体系。利用该体系并选用EcoRI—AGG+MseI—CAC引物组合对供试材料进行扩增,获得的条带清晰可辩,说明所建立的反应体系适合于枇杷进行AFLP分析。     

16个灵芝菌株基于ITS及ISSR标记的遗传多样性分析

应用ITS、ISSR分子标记技术对收集保存的16个灵芝菌株进行遗传多样性分析。基于ITS序列，将2个“白灵芝”鉴定为乳白栓孔菌（Leiotrametes lactinea），并非白肉灵芝（Ganoderma leucocontextum），其他菌株均为灵芝属。基于ISSR分子标记技术对样品进行聚类分析，结果表明，相似水平在0.64时，16株供试菌株可以聚为三组。第一组中的1号与9号的遗传相似系数在0.95以上，11号与12号菌株的遗传相似系数达到1.00，可能属于同物异名。研究结果将为纠正灵芝种源同物异名、同名异物的问题以及进一步开发利用奠定基础。     

运用SSR分子标记分析蛹虫草遗传多样性

以蛹虫草全基因组为模板查找Simple Sequence Repeats(SSR)位点并设计筛选引物进行聚类分析。从100对SSR引物中选出30对多态性高、重复性好的SSR引物,共获得215条多态性条带。根据遗传相似系数(GS)采用不加权成对群算术平均法(UPGMA)进行遗传相似性聚类:材料间GS值的变化范围为0.527~0.995,以GS值为0.761水平可将46株蛹虫草分为6类;菌株亲缘关系与地域来源有一定相关性,且栽培菌株多为同一品种。     

5个灵芝菌株在梅州的比较试验

通过对杂交、G8、本地、三明、广1号五个灵芝菌株生物学性状比较和拮抗试验,筛选出优质菌株,即G8和本地。其特点是母种和原种茵丝生长速度较快,茵丝洁白浓密,边缘整齐;在栽培过程中生长良好,孢子粉产量高,生物学效率高,生物学性状优于其它菌株,是适合梅州生产推广的优良菌株。     

灵芝品种子实体多糖和三萜含量分析与评价

为了选育加工专用型灵芝品种,以灵芝多糖和三萜含量为评价指标,对12个灵芝品种的子实体多糖和三萜含量进行了分析评价.结果表明,不同灵芝菌株的子实体在多糖和三萜含量上存在着一定的差异,其中多糖以薄树灵芝、日本红芝、仙芝、京大、树舌灵芝含量高,三萜含量却以京大、赤芝05、惠州、信州、树舌灵芝、松杉灵芝、日本红芝含量高,并且二者的含量不存在显著的相关性,这为选育灵芝多糖、灵芝三萜含量均高,并适合精深加工专用的灵芝品种提供了理论依据.     

山东石榴品种遗传多样性与亲缘关系的荧光AFLP分析

利用荧光AFLP标记技术,采用8对EcoR I/Mse I引物对山东省25个石榴品种进行AFLP－PCR分析,结果表明： 25个石榴品种扩增的多态性位点数从70条到126条不等,平均90.25条,平均多态性位点41.78%;所有检出位点的平均观测等位基因数、平均有效等位基因数、平均Nei's基因多样度和平均香农信息指数分别为1.4178、1.1874、0.1133和0.1752;方差分析显示各位点的Nei's基因多样度和香农信息指数具有不同程度的显著性差异;基于Lei & Li相似系数利用UPGMA法进行聚类分析,在相似系数0.786处将25个品种划分为4大类。根据AFLP结果探讨了山东石榴品种的亲缘关系与新品种选育的前景。     

2种灵芝液体培养的比较研究

比较赤芝和松杉灵芝液体培养菌丝体生物量和多糖含量。在相同的培养条件下,对赤芝和松杉灵芝进行液体培养,采用热水浸提法提取干燥菌丝体多糖,通过蒽酮-硫酸法测定赤芝和松杉灵芝多糖含量。测得赤芝多糖含量为7.22%,松杉灵芝多糖含量为3.78%,液体培养赤芝生长速度比松杉灵芝快,多糖含量也比松杉灵芝高,因此,赤芝更适合用于液体培养生产灵芝多糖。     

灵芝孢子粉生物酶破壁技术的研究

选择专一性较强的溶壁酶Ⅲ,结合超声波处理南韩赤芝、台芝和中华黑芝孢子粉孢子壁,破壁率可达98％以上。应用冷冻干燥技术,可使溶壁酶破壁灵芝孢子粉的有效成分(多糖)的保护率在99％左右。     

8种中药对灵芝子实体成分的作用

探讨了培养基中添加不同中药对灵芝子实体成分的影响。结果表明,添加不同中药培养的灵芝子实体中黄酮含量均有显著增加,皂甙含量也均有增加,部分子实体中多糖、三萜含量有一定程度的提高,并且子实体中4种成分含量高低对应中药的种类不同。可见不同的中药对灵芝子实体成分含量的作用效果不同;子实体具有富集中药成分的作用,且对同一类化合物不同结构的化合物富集能力不同。这个结果有助于解释用不同原料栽培灵芝,其子实体成分与功效的差异性。     

不同灵芝菌丝体中三萜与多糖含量的比较

根据十九种不同来源的灵芝菌株的生长速度及长势，从中选出了菌丝体阶段生长性能良好的10个菌株进行液体培养，并测定了菌丝中三萜和多糖的含量。结果表明，不同灵芝菌株在三萜和多糖含量上存在着一定的差异，其中多糖含量以汉城2号，日本灵芝，南韩灵芝为高；三萜含量却以韩国灵芝、灵芝0772、灵芝0771为高，并且二者的含量不存在必然的联系，这为灵芝优良品种的筛选提供了理论依据。     

不同品质灵芝的抗肿瘤和免疫调节作用比较

为比较不同品质灵芝在抗肿瘤和免疫调节方面的异同,建立了肿瘤抑制和免疫调节的体外筛选细胞模型,利用体外模型对不同品质灵芝提取物的活性进行比较.用K562肿瘤细胞株测试灵芝的醇提物对肿瘤的抑制作用,用小鼠巨噬细胞测试灵芝水提物的调节免疫作用.试验结果表明,不同品质灵芝醇提物对肿瘤细胞都有明显的抑制作用,水提物对巨噬细胞有激活作用.     

灵芝破壁孢子粉对小鼠运动恢复功能的影响

为了研究灵芝破壁孢子粉对小鼠运动恢复功能的影响,选择120只SPF级健康雄性小鼠作为研究对象划分成对照组、小剂量组和大剂量组,通过无负重游泳进行训练,在小剂量组中添加约0.1 g灵芝破壁孢子粉,在大剂量组中添加约0.4 g灵芝破壁孢子粉。研究灵芝破壁孢子粉对小鼠免疫器官脏器指数、迟发型变态反应、血清溶血素水平、NK细胞活性的影响、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力的影响。结果表明,服用灵芝破壁孢子粉后,小鼠免疫器官脏器指数和NK细胞活性无显著变化,可延缓迟发型变态反应,血清溶血素水平、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力以及碳廓清能力提高。发现灵芝破壁孢子粉在整体上有助于改善小鼠免疫力指标,而且有利于小鼠身体运动功能的恢复。     

28个灵芝菌株栽培特性比较

28个灵芝菌株栽培特性比较研究结果表明，灵芝子实体浸出液和木屑浸出液对灵芝母种的生长均有促进作用；新6、K6、902、信州、18、韩1等菌株对绿色木霉具强拮抗作用；8、新6、6、12、13、18、19、韩1、韩3具良好的综合栽培性状，生长周期短，子实体形态好，产量高，产孢量大。