甘蔗茎尖脱毒组织培养技术研究进展

文章从危害甘蔗的主要病害、甘蔗茎尖脱毒技术的发展及原理、甘蔗茎尖脱毒技术在生产上的应用、影响甘蔗茎尖脱毒效率的因素等方面介绍了甘蔗茎尖脱毒组培技术,提出培养基中植物生长调节剂的绝对浓度和配比、培养基的状态及如何解决培养中的酚污染等问题仍是甘蔗茎尖脱毒培养研究的热点。由于碱性孔雀绿、2,4-D、硫尿嘧啶、TS制剂（一种病毒钝化剂）等在其他作物组织培养脱毒培养中可以提高脱毒效率,因此,今后需研究这些化学制剂在甘蔗组培脱毒中的应用效果,并继续深入研究间歇浸没式反应器和植物无糖组培快繁技术等先进技术体系在甘蔗中的应用,运用新技术新设备提高甘蔗组培生产效率并降低生产成本。     

甘蔗脱毒种苗培育技术研究

对甘蔗进行改良热处理脱毒及材料的培养,甘蔗茎尖的诱导培养及培养基的筛选,甘蔗茎尖大小对成苗率的影响,甘蔗脱毒苗的增殖培养,抗多酚氧化污染的措施,甘蔗脱毒苗的炼苗、移栽,甘蔗脱毒苗的脱毒效果等方法进行了研究,探讨了甘蔗脱毒苗的培育技术。结果表明:采用改良热处理脱毒和组织培养的方法能有效去除甘蔗病毒,对其它病害也具有一定的抑制作用。不同生长调节剂对甘蔗茎尖成苗的影响有差异。不同的培养基对甘蔗茎尖分生组织培养存在一定差异,以Ⅰ号培养基效果较好(MS 2.5 mg/L BA 0.2 mg/L NAA 0.5 g/L AC 2.5%蔗糖);外植体甘蔗茎尖大小不但对植株再生能力、成苗率有影响(呈正相关),同时甘蔗茎尖大小对脱毒效果也有影响(呈负相关),以1~2 mm,带有1~2叶原基的茎尖较为适宜。多酚氧化污染是甘蔗组培中最大的污染源,在组培初期采用一段时间的暗培养和加入活性炭能有效抑制多酚害污染,同时也带来一定的负作用,本试验采用在培养基中加入0.5 g/L AC和经5~7 d暗培养是适宜的。     

甘蔗脱毒种苗到生产用种的快繁技术研究

甘蔗的脱毒技术较多,有物理法、化学法、抗病育种法、茎尖培养法等,这些方法均有一定的脱毒效果,但与实际应用结合起来,各种方法都有一定的优缺点.采用改良热处理和茎尖组织培养可以取得良好的脱毒效果,而甘蔗组培苗第1代分蘖多,能够生长拔节成为有效茎的比例不高.为了最大限度地保证分蘖成茎,减少分蘖的死亡率,提高甘蔗脱毒种苗的繁殖率,促进甘蔗脱毒苗在生产中的推广应用,我们于2004年对甘蔗脱毒种苗到生产用种的田间快繁技术进行了探讨,最大限度将甘蔗脱毒种苗应用于甘蔗生产中.     

百合组培球茎尖剥取技术研究

[目的]研究百合组培球茎尖剥取技术。[方法]对不同直径大小的组培球对百合剥取茎尖的影响及不同大小的茎尖对百合脱毒效果的影响进行研究。[结果]大于0.5 cm的百合组培球适合茎尖剥取;在组培球剥取茎尖过程中,剥取0.4~0.7 mm大小的茎尖适合百合脱毒的培养。[结论]为百合种球生产提供技术支撑。     

于薯商薯19茎尖脱毒技术研究

以甘薯商薯19为试材,研究其脱毒快繁技术中的外植体消毒、不同激素配比对外植体诱导的影响、茎尖大小对脱毒的影响、组培快繁培养基选择等。总结出适合商薯19茎尖脱毒快繁的技术。     

植物种苗茎尖组培规模化生产技术研究

为解决目前植物常规茎尖组织培养的技术繁琐、生产成本高等问题,使植物组培苗规模化生产成为现实,为农业栽培生产提供优质生产用苗,采用对比试验法,在植物茎尖组培的初代接种、试管苗驯化和培养基配制成分等方面进行了简化和廉价替代的试验研究。结果表明,与常规组培技术相比,植物茎尖组培新技术有简化工作程序、降低成本、提高效率的技术优势。     

欧李茎尖脱毒快繁研究

[目的]研究欧李脱毒快繁技术。[方法]以欧李嫩梢芽为外植体进行了微茎尖组培脱毒研究,探讨了在培养基中添加不同的激素成分及不同浓度对不定芽诱导、继代增殖和生根培养的影响。[结果]欧李茎尖脱毒快繁不定芽诱导的最佳培养基是：MS＋6-BA0．4mg／L＋IAA0．5mg／L;增殖培养的最适培养基为MS＋6-BA0．3mg／L＋IAA0．4mg／L;最佳生根培养基是：2／3MS十IAA0．5mg／L。应用指示植物鉴定法进行病毒检测显示,0．3～0．4mm茎尖培养对苹果褪绿斑病毒（ACLSV）和李矮缩病毒（PDV）的脱毒率分别为71．6％和73．0％。[结论]试验表明,利用欧李嫩梢为外植体进行茎尖组培脱毒快繁是一种可靠实用的方法。     

甘薯龙薯9号茎尖脱毒技术研究

本文作者以甘薯龙薯9号为材料,研究其脱毒快繁技术中的外植体消毒、不同激素配比对外植体诱导的影响,茎尖大小对脱毒的影响,组培快繁培养基选择等。筛选出适合龙薯9号茎尖脱毒快繁的条件。     

甘蔗茎尖脱毒及再生苗扩繁中培养条件的优化

以甘蔗脱毒茎尖及茎尖分化的茎段外植体为试材,研究基因型、培养基类型、激素种类、活性炭及复合抗氧化剂对甘蔗茎尖及外植体生长分化的影响。结果表明:不同甘蔗基因型茎尖成活率、褐化率不同,褐化率越低,成活率越高;MS改良培养基较MS培养基和B5培养基利于甘蔗外植体生长;培养基中添加激素6-BA5.0 mg/L有利于材料的分化,NAA的添加不利于甘蔗外植体的分化;活性炭添加量为0.8 mg/L时可有效吸附酚类物质,促进外植体分化。添加柠檬酸、亚硫酸钠及抗坏血酸组成的复合抗氧化剂能显著降低外植体褐化率,提高不定芽分化系数。采用改良MS培养基,并添加适量激素、活性炭及抗氧化剂组合能有效解决目前甘蔗工厂化育苗过程中的褐化问题,显著提高甘蔗组培苗的分化率。     

蝴蝶兰茎尖脱毒再生体系建立与优化

以蝴蝶兰茎尖为外植体进行组织培养,研究培养基中无机盐浓度、糖浓度、激素比例及外植体大小对其茎尖生长点成活率及脱毒效果的影响。结果表明,蝴蝶兰茎尖组培脱毒外植体大小为0.2~0.4 mm,并附带1个叶原基,可脱除ORSV病毒。适当降低培养基中无机盐与6-BA浓度有利于提高茎尖生长点的成活率。培养基中添加15 g/L的绵白糖有利于茎尖的成活及生长。1/3MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA为最适宜的蝴蝶兰茎尖培养基。     

甘薯病毒病脱毒及检测

甘薯茎尖分生组织脱毒培养技术是目前防治病毒病最有效的方法。阐述了我国甘薯病的田间症状及病原种类,并综述了茎尖分生组织脱毒及检测甘薯病毒常用的生物学、血清学、分子生物学等几种主要检测技术的特点。     

热处理对大葱茎尖脱毒效果的影响

利用章丘大葱茎尖进行脱毒效果研究。结果表明,当茎尖大小为0.15￣0.3mm或茎尖大小为0.3￣0.5mm,75℃高温处理10min后,脱毒率均达100%。细胞学观察结果表明,该途径能保持遗传稳定性。     

东方百合茎尖组培技术研究

[目的]研究东方百合索蚌（Sorboune）、元帅（Acapulco）、西伯利（Siberia）茎尖分生组织分化,生产脱毒种苗。[方法]利用MS培养基和外源激素,对东方百合品种进行茎尖组织培养。[结果]鳞片诱导小仔球的最适培养基为MS＋6-BA 1.0mg／L＋NAA 0.2mg/L。茎尖诱导和分化的最适培养基为MS＋6-BA 1.0mg／L＋NAA 0.5mg／L。[结论]在百合种球产业化生产中,该方法是获得百合复壮原种的主要手段。     

采用分生组织培养生产脱甘蔗黄叶病毒苗

【目的】尝试使用茎尖分生组织培养技术生产UP01235和UP00972个甘蔗品种的脱甘蔗黄叶病毒（SCYLV）脱毒组培苗。【方法】以大田染病和健康甘蔗植株的不同大小茎尖分生组织为外植体,经培养获得组培幼苗。采用1对甘蔗黄叶病毒特异性引物（SCYLV-615F：5’-ATGAATACGGGCGCTAACcGYYCAC-3’和SCYLV-615R：5’-GT-GTTGGGGRAGCGTCGCYTACC-3’）进行RT—PCR分析,在6个月内每隔1个月检查1次组培苗是否存在病毒。【结果】当以1．5mm茎尖进行培养时,获得的2个甘蔗品种的组培苗在温室种植,在生长期间未发现存在黄叶病毒,说明黄叶病毒已被消除;而以超过1．5mm的茎尖为外植体时,PCR分析表明结果,所获得的组培苗存在黄叶病毒。【结论】对以1．0～1．5mm茎尖培养获得的200多株组培苗进行温室繁殖,在生长期间均未发现黄叶病毒。     

甘蔗离体培养的变异机理及筛选技术 Ⅳ.茎尖培养技术的筛选

本文对旨在以脱毒为目的的甘蔗茎尖培养技术进行了探讨,茎尖长约2mm,成功的关键在于防止酚的污染,采用液体培养,并在培养过程中将培养物转移到新鲜的培养基中,能成功地防止酚的污染,并使茎尖成苗率达50％以上。促根率达80％以上,结果还表明,细胞分裂素是茎尖成苗所必需的激素,而萘乙酸则不是;侧茎茎尖比主茎茎尖易成苗;适当提高蔗糖的浓度及在培养基中加入活性炭均有利于茎尖苗发根,文中还对防止酚污的机理作了分析。     

小苍兰脱毒苗的试管成球试验初报

小苍兰脱毒苗在试管中形成球茎,可减轻组培苗出试管的工作难度和工作量:并降低了污染和重新感毒的机率;为脱毒苗的批量生产创造更好的条件。小苍兰脱毒苗的试管成球程序是:先取脱毒试管苗以培养基A(MS BA2mg/L NAA0.1mg/L)促使其增生许多分蘖;而后取各分蘖以培养基B(MS BA2mg/L NAA0.1mg/L 蔗糖60g/L)促使其基部形成小球并增大至一定大小;最后取成球苗株以培养基C使其成长与成熟。     

果蔗Badila花叶病茎尖脱毒技术的研究

本文利用热带种 (Badila)茎尖培养进行脱毒研究。试验结果表明 :细胞分裂素是茎尖成苗所必需的激素 ,萘乙酸则不是 ,0 .5- 1 .0 mm外植体在附加 2 .0 mg/ L BA和 0 .2 mg/ L NAA的 MS液体培养基中进行离体培养 ,成苗率可达 30 %以上 ;采用液体培养和在培养基中添加少量的活性炭均能有效地防止酚污染 ,提高成苗率 ;茎尖培养结合热处理能有效地脱除花叶病毒 ,侧芽培养无法进行脱毒。田间调查表明 ,茎尖脱毒苗在光合速率、株高、茎径方面显著优于未脱毒的侧芽苗 ,分蘖数两者相近     

不同浓度NAA对甘薯茎尖诱导植株再生的影响

[目的]研究不同浓度NAA对甘薯茎尖诱导植株再生的影响。[方法]以甘薯品种烟薯25号、烟薯26号和烟紫薯3号的茎尖为材料,采用不同浓度NAA处理,对甘薯茎尖组织的诱导培养及高效植株再生进行了研究。[结果]烟薯25号较适宜的茎尖诱导培养基为1.0 mg/L NAA+MS,植株再生率为91%;烟薯26号和烟紫薯3号较适宜的茎尖诱导培养基为1.5 mg/L NAA+MS,植株再生率分别为88%和80%。[结论]该研究可为今后开展规模化甘薯脱毒苗生产提供基础资料。