抑制素被动免疫对大鼠排卵率及血浆雌二醇与孕酮的影响

本试验研究了注射人抑制素α亚基（１－２６）Ｔｙｒ．Ｇｌｙ抗血清对大鼠排卵率、血浆Ｅ２与Ｐ水平的影响。     

抑制素主动免疫对山羊繁殖率的影响

选用８只母山羊随机分成两组,试验组用卵巢抑制素与血清蛋白偶合物进行主动免疫,探讨免疫对排卵率和血浆ＦＳＨ水平的影响。结果显示,试验组山羊的抗体效价分别为１：１２８、１：６４、１：３２和１：３２,且卵巢黄体数显著高于对照组（Ｐ〈０．０５）,ＦＳＨ平均水平极显著高于对照组（Ｐ〈０．０１）。这表明,抑制素主动免疫能够引起血浆ＦＳＨ水平的升高,提高排卵率,可以改善母山羊的繁殖性能。     

猪卵泡抑制素主动免疫对山羊生殖的影响

抑制素是由动物的性腺分泌的一种糖蛋白,主要生理作用是反馈性抑制ＦＳＨ的合成和分泌。用抑制素对动物进行主动免疫,产生抑制素抗体中和内源性抑制素,从而削弱或解除它对ＦＳＨ分泌的抑制作用,引起动物排卵数增加,可能达到多产的目的。这种方法不仅与在生产和实验中广泛应用的促性腺激素处理一样可以提高动物的排卵率,而且可以弥补促性腺激素处理个体反应不一的缺陷,同时还能提高处理后几个胎次的产仔数,这在畜牧生产中有重要的应用价值。为此,本实验制备猪卵泡抑制素,并用它免疫山羊,探讨它用于提高家畜繁殖力的方法和可能性。1　材料…     

抑制素对雄性动物生殖的影响

抑制素是一种由雌性动物的卵泡颗粒细胞和雄性动物的睾丸支持细胞分泌的糖蛋白激素。用抑制素或其片段主动或被动免疫以提高母畜的排卵率和产仔数方面的试验国内外已做了很多，并得到了肯定的结果。但其对雄性动物生殖的影响研究得较少。现就从雄性动物抑制素分泌途径、浓度的变化，对FSH水平影响、生殖调节，抑制素免疫对公畜繁殖力的影响及存在的问题加以阐述。     

抑制素α主动和被动免疫对哈萨克羊生殖激素含量的影响

为了研究抑制素α（INHα）主动和被动免疫对哈萨克羊生殖激素含量的影响，本试验在对抑制素α重组质粒表达菌株进行诱导表达的基础上，将经纯化、鉴定的抑制素α重组蛋白免疫接种新疆双峰骆驼，制备驼抗抑制素α多克隆抗体，并对其进行纯化，检测抗体效价，验证抗体的特异性。之后选择3~5岁、发情时间相近并处于间情期的45只成年哈萨克羊随机分为3组，分别作为抑制素α多克隆抗体免疫组（A组）、抑制素α重组蛋白免疫组（B组）及对照组（C组），每隔10 d连续进行3次加强免疫，应用ELISA法检测在绵羊繁殖活动中具有重要功能的5种生殖激素：促卵泡素（FSH）、促黄体素（LH）、孕酮素（P₄）、雌激素（E₂）、抑制素（INH），并检测血液生化指标。结果显示，IPTG的最佳诱导浓度是0.6 mmol/L，在4 h时诱导出产量较高的抑制素α包涵体蛋白，纯化后的抑制素α重组蛋白纯度较高，并具有较好的免疫原性，经进一步验证发现，制备的抑制素α抗体效价为1：512 000，该抗体可与抑制素α重组蛋白特异性结合。说明成功制备了具有免疫原性的抑制素α重组蛋白和高效价的驼抗抑制素α多克隆抗体。免疫后A组LH、P₄含量和B组FSH、LH、P₄、E₂、INH含量与C组相比差异不显著（P>0.05），而A组FSH含量和E₂含量显著高于C组（P<0.05），INH含量显著低于C组（P<0.05）。通过血液生化指标检测发现，抑制素α蛋白和抑制素α抗血清两种免疫制剂免疫后，试验动物均没有出现不良症状。说明两种抑制素α抗原均可对哈萨克羊血液生殖激素的分泌产生良好效果，相比之下抑制素α抗血清免疫效果更佳。     

抑制素主动免疫提高山羊排卵率

将８只关中奶山羊（白羊）和８只山东青山羊（青羊）分为２组，每组含有白羊和青羊各４只。试验组山羊以抑制素α亚单位１～３２片段人血清白蛋白偶合物为抗原进行主动免疫，对照组山羊则以人血清白蛋白为抗原进行免疫。３次免疫注射时间间隔分别为２０ｄ和３０ｄ。在末次免疫注射后１个月和２个月时，用腹腔镜检查试验羊卵巢上的黄体数。试验组白羊和青羊平均每只羊分别有１．８个黄体和２．４个黄体，对照组分别有１．６个黄体和２．２个黄体，说明抑制素主动免疫可以提高山羊的排卵率。     

抑制素主动免疫后波尔山羊的排卵反应

在不发情季节 ( 6月 ) ,用重组绵羊抑制素α亚单位 (r oIHN α)主动免疫 40只经产波尔山羊 ,每只试验羊的用量为 10 0 μgr oIHN α ,4周后用相同剂量进行强化免疫。每周采取血样 ,用放射免疫法测定血浆中抑制素抗体滴度。试验羊发情后每天配种 1～ 2次至发情结束。每天 1次从发情开始至发情结束后 48h ,用超声波检查卵泡发育和排卵情况。最后 1次配种后 6或 7d用非手术法回收胚胎。免疫 6个月后让试验羊配种、妊娠和产羔。抑制素免疫 1周后抗体滴度开始上升。强化免疫 2周后 ,抗体滴度达到最大值。抑制素抗体滴度与直径大于 4mm的卵泡数 (r=0 70 ,P <0 0 0 1)、排卵数 (r=0 5 5 ,P <0 0 0 1)和获取卵子或胚胎数 (r=0 5 0 ,P <0 0 0 1)存在显著的正相关。而抑制素抗体滴度与排卵率存在明显的负相关 (r =- 0 37,P <0 0 0 1)。抑制素免疫山羊的排卵率为46 %～ 70 %。从 8月至 11月排卵数超过 4枚。 40只母羊抑制素免疫 6个月后 ,第一情期配种 ,有 34( 85 % )只母羊怀孕 ,2 9只正常分娩 ,平均产羔羊 2 2 ( 1～ 4)只。试验结果表明 ,抑制素主动免疫能引起山羊超数排卵。抑制素免疫 6个月后卵巢机能恢复正常 ,母羊仍能正常繁殖。     

抑制素免疫对羊生殖的影响

抑制素是一种主要由动物性腺（睾丸的支持细胞和卵巢的颗粒细胞）分泌的一种异二聚体糖蛋白激素,由两个二硫键连接两个不同的亚单位（α和β）构成。抑制素对垂体ＦＳＨ的分泌和／或合成具有选择性地抑制作用。抑制素免疫中和技术能特异性地刺激ＦＳＨ分泌,进而促进配子生成,提高动物繁殖力。西方把抑制素免疫对羊排卵率、产羔数、初情期、超数排卵和公羊繁殖性能的影响作一综述。     

生殖激素分泌的动态分析

生殖激素分泌的动态分析连正兴盛志廉（东北农业大学动物科学系·哈尔滨·１５００３０）如何提高家畜的繁殖性能，一直是畜牧工作者所面临的大问题。繁殖性状的遗传力较低，单纯从表型进行选择效果不甚理想。内部性状受外界环境因素影响较小，通过对内部性状研究来探讨外...     

促卵泡素与促黄体素对猪卵母细胞体外成熟的影响

本试验探讨了促性腺激素（FSH、LH）对猪卵母细胞体外成熟的影响,最终找到了其合理的使用剂量。在成熟液中添加LH浓度分别为1、5、10IU／mL时,与没有添加FSH与LH的对照组（15．9％）相比,成熟率有显著提高,成熟率分别为49．1％、30．0％、36．3％。LH浓度为1IU,mL的实验组成熟率最高,显著高于对照组（P〈0．05）;然后以成熟液中只添加1IU/mLLH为对照组,试验组分别添加1、5、10IU/mLPSH。试验结果表明：添加FSH浓度为5和10IU/ml时其成熟率分别为40．1％、27．6％,低于对照组（49．0％）。添加FSH浓度为1IU／mL时其成熟率（49．1％）高于对照组（49．0％）,但差异不显著（P〉0．05）。两组试验同时得出,随着LH与FSH添加浓度的增加,成熟率呈下降趋势。通过本试验结果得出,在体外成熟培养猪卵母细胞时,各添加1IU／mL LH与FSH时,得到最佳的成熟效果。     

促卵泡素与促黄体素对猪卵母细胞体外成熟的影响

本试验探讨了促性腺激素(FSH、LH)对猪卵母细胞体外成熟的影响,最终找到了其合理的使用剂量。在成熟液中添加LH浓度分别为1、5、10 IU/mL时,与没有添加FSH与LH的对照组(15.9%)相比,成熟率有显著提高,成熟率分别为49.1%、30.0%、36.3%。LH浓度为1 IU/mL的实验组成熟率最高,显著高于对照组(p<0.05);然后以成熟液中只添加1 IU/mLLH为对照组,试验组分别添加1、5、10 IU/mLFSH。试验结果表明:添加FSH浓度为5和10 IU/ml时其成熟率分别为40.1%、27.6%,低于对照组(49.0%)。添加FSH浓度为1 IU/mL时其成熟率(49.1%)高于对照组(49.0%),但差异不显著(p>0.05)。两组试验同时得出,随着LH与FSH添加浓度的增加,成熟率呈下降趋势。通过本试验结果得出,在体外成熟培养猪卵母细胞时,各添加1 IU/mL LH与FSH时,得到最佳的成熟效果。     

抑制素(IB)主动免疫对牛超排效果的影响及机制

用猪精液抑制素 ( inhibin,IB)抗原主动免疫供体母牛 ,结合外源纯化 FSH超排处理 ,观察了抑制素主动免疫对牛超排效果的影响 ,并通过检测不同生理时期血液中相关生殖激素的水平 ,探讨了抑制素免疫影响牛超排效果的机制。选产后 50 d以上的 3～ 5岁荷斯坦母牛 1 2头和西杂青年母牛 1 2头 ,按其发情顺序随机分为试验组和对照组 ,每组 1 2头。试验组用完全福氏佐剂乳化的 IB抗原进行首免 ,间隔 2 0 d再用不完全福氏佐剂乳化的 IB抗原加免 1次 ,加免后 6 d开始采用纯化 FSH做超排处理 ,观察发情 ,适时进行配种 ,于配种后 7d进行非手术法采卵。对照组只是用纯化 FSH做超排处理。参试牛于不同生理时期颈静脉采血 ,分离血清 ,用放免法测定各生理时期血清中 FSH、LH、E2 、P4水平。结果表明 :( 1 )抑制素主动免疫可以提高牛超排效果 ,试验组头均胚胎数和头均可用胚胎数分别比对照组增加 2 .4枚和 1 .4枚 ( P<0 .0 5) ;( 2 )抑制素主动免疫可提高母牛血浆中 FSH水平 ,从而促使卵泡发育 ,增加胚胎数和可用胚胎数 ;( 3)在首免后到加免前 ,抑制素主动免疫对 LH、E2 、P4基础分泌基本无影响     

Differential Effects of Continuous Exposure to the Investigational Metastin/Kisspeptin Analog TAK-683 on Pulsatile and Surge Mode Secretion of Luteinizing Hormone in Ovariectomized Goats

The aim of the present study was to determine if the estradiol-induced luteinizing hormone (LH) surge is influenced by the constant exposure to TAK-683, an investigational metastin/kisspeptin analog, that had been established to depress the pulsatile gonadotropin-releasing hormone (GnRH) and LH secretion in goats. Ovariectomized goats subcutaneously received TAK-683 (TAK-683 group, n=6) or vehicle (control group, n=6) constantly via subcutaneous implantation of an osmotic pump. Five days after the start of the treatment, estradiol was infused intravenously in both groups to evaluate the effects on the LH surge. Blood samples were collected at 6-min intervals for 4 h prior to the initiation of either the TAK-683 treatment or the estradiol infusion, to determine the profiles of pulsatile LH secretion. They were also collected at 2-h intervals from –4 h to 32 h after the start of estradiol infusion for analysis of LH surges. The frequency and mean concentrations of LH pulses in the TAK-683 group were remarkably suppressed 5 days after the start of TAK-683 treatment compared with those of the control group (P<0.05). On the other hand, a clear LH surge was observed in all animals of both groups. There were no significant differences in the LH concentrations for surge peak and the peak time of the LH surge between the TAK-683 and control groups. These findings suggest that the effects of continuous exposure to kisspeptin or its analog on the mechanism(s) that regulates the pulsatile and surge mode secretion of GnRH/LH are different in goats.     

促性腺激素(FSH、LH)对牛腔前卵泡体外发育及E_2分泌的影响

利用McCoy's 5a基础无血清培养系统研究了促卵泡素(FSH)、促黄体素(LH)2种促性腺激素对牛腔前卵泡的体外生长、存活及雌二醇(E2)分泌的影响.结果显示,培养液中单独添加LH对牛腔前卵泡生长影响不大,而单独添加50、100μg/L以上FSH对牛腔前卵泡直径增长和培养后期体外存活有明显的促进作用;当培养液中有10 μg/L LH存在时,2种促性腺激素协同刺激卵泡生长的作用更加明显.添加10 μg/L LH 50μg/L FSH对腔前卵泡体外生长、发育、存活及E2分泌均具有显著的促进作用(P<0.05).     

鸵鸟主要性激素分泌规律的研究

本研究旨在观察鸵鸟一年中激素分泌规律与发情行为的相关性,为采精和输精掌握最准确的时间,采用放射免疫分析法(RIA)测定样品中促卵泡刺激素(FSH)、雌激素(E2)和睾酮(T)的浓度水平。结果表明:①雌鸵鸟血浆内FSH水平在一年之中呈现波动式变化,从11月开始上升,12、2、7月中出现3个明显的分泌波峰,峰值分别为114.354、130.168和144.375 mIU/mL,6月中旬达到全年中最低22.312 mIU/mL;②E2水平在1~5月都呈缓慢上升趋势,在7月突然下降到最低(18.874 pg/mL),9月达全年最高峰(367.285 pg/mL);③雄鸵鸟血浆睾酮(T)浓度从1~6月一直呈上升趋势,6月达到较高水平(121.473 ng/dL),8月达到全年中最低(77.166 pg/dL),到10月中旬达到全年最高(138.562 ng/dL);鸵鸟血浆内FSH、E2及T的浓度水平在一年之中呈现波动式变化与发情表现趋于一致。     

Preliminary Observations on the Concentrations of Serum Luteinizing Hormone and Follicle-stimulating Hormone during Gestation in Bactrian Camels (Camelus bactrianus)

The concentrations of luteinizing hormone (LH) and follicle-stimulating hormone (FSH) in the serum of the Bactrian camel (Camelus bactrianus) throughout pregnancy were analysed by radioimmunoassay. The samples were withdrawn at intervals of half a month. The serum LH concentrations varied significantly between 2.2±0.9 and 20.3±18.8 ng/ml during the pregnancy, with the highest value on the day of artificial insemination, which indicated that a preovulatory LH peak appeared. Thereafter, the LH concentration tended to fall, reaching a fairly constant low level by the eighth month of pregnancy. The serum FSH concentrations varied between 7.0±0.2 and 28.9±0.4 ng/ml during gestation, with the peak value being reached at 4.5 months, followed by a marked drop to 7.0±0.2 ng/ml at 7.5 months.     

抑制素主动免疫对大鼠生殖激素及卵巢发育的影响:Montanide和Freund’s佐剂效应比较

本研究采用新疆细毛羊抑制素成熟区序列重组融合蛋白(roINH)作为免疫原,以Montanide (MON)和Freund's (FA)作为佐剂,主动免疫SD大鼠,测定生殖激素及卵巢发育情况,评价佐剂效应.选用72只9～10周龄性成熟雌性SD大鼠,随机分为3组,分别皮下注射生理盐水(对照组)、roINH+ MON(MON组)和roINH+FA (FA组).各组大鼠每20 d免疫1次,连续免疫3次.结果,MON组产生的抗体滴度显著高于FA组(P＜0.05);与对照组相比,注射roINH+MON和roINH+FA均可极显著提高大鼠血清FSH平均含量(P＜0.01),显著提高P峰值(P＜0.05),而FSH及P平均含量及峰值在2个免疫组间无显著差异(P＞0.05);LH含量和峰值在2个试验组间无显著差异(P＞0.05); MON和FA组成熟卵泡数无显著差异(P＞0.05),但均显著高于对照组(P＜0.05);MON组脓包直径及炎症反应小于FA组.结果表明,应用roINH作为免疫原并配以MON或FA佐剂免疫大鼠均能取得较好的免疫效果,且MON佐剂炎症反应小于FA佐剂.