非洲狮产气荚膜梭菌病的病原检测

北京动物园一头非洲狮突然死亡,死前曾有神经症状,死后立即解剖,主要病变为肺出血,十二指肠出血。从肺和肾组织分离到Ａ型产气荚膜梭菌,用该菌液０．０５ｍｌ腹腔注射小白鼠致死,用该菌的肉肝胃酶消化汤５ｈ培养的上清液０．１ｍｌ静脉注射小白鼠６ｈ死亡。产气膜梭菌除对草食动物有较强致病作用外,对大型猫科动物也有致病性。     

气肿疽梭菌C54-1株的制备与检定

为研究气肿疽梭菌C54-1株(CVCC60001)的菌种特性,制备了1批气肿疽梭菌C54-1株,并对菌种的形态及生化特性、培养特性、血清学特性、真空度、纯粹、剩余水分、毒力及免疫原性、16S rDNA等进行检定,以及对于该菌的适宜培养基促生长能力等方面进行了比较。实验结果表明,该冻干菌种的形态及生化特性、培养特性、血清学特性、真空度、纯粹、剩余水分、毒力及免疫原性均符合《中华人民共和国兽用生物制品规程》二〇〇〇版质量标准的规定。16S rDNA鉴定为气肿疽梭菌,相似度为99.93%。在免疫原性检定中,使用致死剂量攻毒时,免疫组能够4/4被保护,证明该菌明矾苗免疫效果良好。使用商品化梭菌培养基对于该菌培养进行了比对,证实商品化培养基替代厌气肉肝汤的可能性。本研究为气肿疽梭菌的制备和检定提供参考依据,并使用不同培养基进行比对研究,为该菌的稳定培养和疫苗工艺改进提供了研究基础。     

介绍猪丹毒氢氧化铝菌苗不加硫柳汞可以防止霉菌

我厂自54年冬制造猪丹毒氢氧化铝菌苗以来到现在已经有两年长的时间,在这两年当中,我厂曾用各种培养基制造出合格的菌苗,其培养基种类有下列5种1、10％血清马丁肉汤 2、肝消化汤、3、膵消化汤、4、肉肝胃酶消化汤、5、肉肝猪胃消化汤。我厂常用的培养基10％血清马丁肉汤和肉肝猪胃消化汤     

关于制造猪肺疫菌苗的经验介绍

1、不同培养基对猪肺疫菌的生长情况河南厂用马丁肉汤,2/3马丁肉汤 1/3肉肝胃消化汤, 肉肝胃消化汤和纯肝汤培养猪肺疫菌其中以肉肝胃消化汤活菌数最多,马丁肉汤和3/3马丁肉汤1/3肉肝胃消毒汤次之,纯肝汤最少,但未和效力试验联系起来,因而难定孰优孰劣。     

A型肉毒毒素基因的克隆及序列分析

目的:克隆肉毒梭菌(Clostridium botulinum)A型肉毒毒素(BoNTa)编码基因。方法:提取肉毒梭菌国际标准株(62A)基因组DNA,根据肉毒梭菌BoNTa基因(GenBank登录号M30196)序列设计引物,采用LA-PCR方法,扩增出目的基因片段,与pMD18-T载体连接,通过酶切鉴定、测序分析克隆到的A型肉毒毒素基因序列。结果:该基因片段与Genbank中的BoNTa基因序列(GenBank登录号M30196)一致性为100%,预测氨基酸序列一致性为100%。结论:成功克隆肉毒梭菌的A型肉毒毒素基因序列,为肉毒梭菌的快速检测,以及进一步用基因工程方法生产A型肉毒毒素奠定了基础。     

A型产气荚膜杆菌产毒条件的测定

以肉肝胃酶消化汤作为培养基,对同一A型产气荚膜杆菌分离株在33℃、35℃、37℃、39℃下培养,每个温度分别培养6h,7h,8h,10h,之后提取出每组的毒素,分别测定小白鼠的最小致死量,以确定最佳产毒条件,其中在35℃、7h产毒最强。按不同剂量进行接种,发现接种剂量对产气荚膜梭菌产毒也有较大的影响。     

肉毒中毒(C型)的诊断与菌苗研究——Ⅰ.病源诊断

本文报告了青海省发生的牛羊肉毒中毒症,其症状主要是吞咽困难,流涎和全身肌肉瘫痪。死亡率80％以上,造成较大的经济损失。从尸体胃肠内容物及其他器官中分离出8株肉毒梭菌。该菌在加有无菌新鲜生肝块或生肉块的肉肝胃酶消化汤中生长良好,并产生毒素,每毫升培养物含10万个海猪最小致死量。8株细菌的毒素均能被C型肉毒梭菌抗毒素中和。把毒素给绵羊口服或静脉注射其症状与自然发病者相同,故证明是C型肉毒梭菌引起的中毒症。     

仔猪产气荚膜梭菌肠毒血症病原诊断及疫苗研究V.疫苗的制备、检验和田间试验

将试验确定的产毒力强的产气荚膜梭菌A型、C型菌种,选用复合培养基,经培养、灭活脱毒、浓缩和冷冻干燥,制备多批肠毒血症A型、C型和AC型二价干粉灭活疫苗.采用免疫攻毒或中和试验方法对研制的疫苗进行效力检验,疫苗100%合格,达到<规程>规定的标准.在13个省进行大规模田间试验的结果表明,所研制的疫苗性能良好,安全有效.母猪接种疫苗后无一例不良反应发生,并且仔猪生后健康,能够有效地预防和控制该病的发生和流行.     

A型产气荚膜梭菌最佳产毒时间的确定

测定了A型产气荚膜梭菌在庖肉培养基的生长曲线、培养液的pH值变化曲线以及不同培养时间提取的毒素液的蛋白质含量、溶血活性及卵磷脂酶活性。结果表明，A型产气荚膜梭菌在庖肉培养基培养8h是其a-毒素的最佳产毒时间。     

应用氢氧化铝胶吸着作用去培养基沉淀法之对于肉肝胃酶消化汤之质量影响试验

Ⅰ、试验目的:肉肝胃酶消化汤内之沉淀,常为该培养基制造上的存在问题之一,因鉴于氢氧化铝胶之具有吸着力作用,故应用了氢氧化铝来作为去除培养基内沉淀试验,经初步试验的结果,可达澄清目的,为作进一步的证实,是否有碍肉肝胃酶消化汤之质量而影响产品质量,故将应用此法去沉淀后之培养基进行了菌数生长     

应用巢式PCR-RFLP方法鉴别微小隐孢子虫、安氏隐孢子虫和火鸡隐孢子虫的研究

应用巢式聚合酶链反应（Nested PCR）-限制片段长度多态性 （restriction fragment length polymorphism, RFLP）方法对微小隐孢子虫（C．parvum）、安氏隐孢子虫（C．andersoni）和火鸡隐孢子虫（C．meleagrides）的鉴别进行了研究。结果显示C．parvum BOCC2、C．andesoni BOCC2和C．meleagrides CHCC1扩增产物片段大小分别为830bp、828bp和828bp，扩增产物分别经VspI酶切后形成3种不同的RFLP图谱，根据RFLP图谱可鉴别C．parvum、C．andersoni和C．meleagrides。本研究为我国隐孢子虫的分类和隐孢子虫病的分子流行病学研究打下了良好基础。     

豆状囊尾蚴与细颈囊尾蚴和宿主（兔）的同工酶,蛋白质比较研究

用聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳分离出豆状囊尾蚴囊液乳酸脱氢酶同工酶4～5条酶带,酯酶同工酶1条酶带,蛋白质6～9条区带;豆状囊尾蚴囊壁和头节乳酸脱氢酶同工酶3～4条酶带,酯酶同工酶无,蛋白质17条区带;细颈囊尾蚴囊液乳酸脱氢酶同工酶1～4条酶带,酯酶同工酶1～3条酶带,蛋白质7～10条区带;宿主——兔腹水乳酸脱氢酶同工酶5条酶带,酯酶同工酶3～5条酶带,蛋白质13～16条区带。并作了豆状囊尾蚴与细颈囊尾蚴囊液同工酶、蛋白质和豆状囊尾蚴与宿主的同工酶、蛋白质相互关系的详细分析,结果表明豆状囊尾蚴与细颈囊尾蚴的同工酶和蛋白质具有差异和两者可能存在交叉免疫;豆状囊尾蚴的酶蛋白和蛋白质来源独立于宿主,但在一定程度上受宿主的影响。     

奶牛隐性乳腺炎病理学研究

本课题对15头奶牛,经CMT法等检查为隐性乳腺炎的34个乳区进行了病理形态学观查。证明了患有隐性乳腺炎的乳腺组织存在不同程度的病理变化。并阐明了该病病理组织学的转化规律。     

雏鸡对C．baileyi感染的年龄免疫研究

本文以１．２５×１０７Ｃ．ｂａｉｌｅｙｉ卵囊的剂量人工经口感染３～７５日龄雏鸡，通过Ｃ．ｂａｉｌｅｙｉ卵囊排出规律和临床发病情况的观察，研究了雏鸡对Ｃ．ｂａｉｌｅｙｉ感染的年龄免疫现象。结果表明，３～７５日龄雏鸡均能感染Ｃ．ｂａｉｌｅｙｉ；３～１０日龄雏鸡易感性高，感染后排出印囊的量大，排出印囊的时间长，持续到感染后第２０天；２０日龄以上的雏鸡随着年龄的增长，感染后排出卵囊的量逐渐减少，排出印囊的时间缩短，仅持续到感染后第１５天。５０日龄以下的雏鸡感染后排出卵囊的量明显地高于５０日龄以上的雏鸡，５０～７５日龄的雏鸡易感性很低，排出卵囊的量趋于恒定地极少量排出。从而揭示随着雏鸡年龄增长免疫系统发育逐步完善，感染后排出印囊的量逐渐减少、排出卵囊的时间缩短、对Ｃ．ｂａｉｌｅｙｉ的易感性逐渐降低的规律。首次实验证实Ｃ．ｂａｉｌｅｙｉ作为一种原发性病原主要侵害５０日龄以下的雏鸡，尤其是１０日龄以内的雏鸡易感性最高，发病和死亡主要见于１０日龄以内感染的雏鸡。     

三种锦鸡儿遗传多样性ISSR分析(简报)

柠条锦鸡儿(Caragana korshinskii Kom.)、中间锦鸡儿(C.intermedia Kuang et H.C.Fu.)和小叶锦鸡儿(C.microphylla Lam.)是豆科锦鸡儿属(Caragana Fabr.)的多年生落叶灌木,耐低温、酷热、干旱及沙埋,具有极高的生态和经济价值。     

毛瓣棘豆中苦马豆素的纯化与鉴定

毛瓣棘豆草粉(3.28 kg)经95%乙醇加热回流提取,回收溶剂,浓缩得浸膏。浸膏用蒸馏水混悬,依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取;剩余水溶液用HC l酸化后经氯仿萃取,酸水液用NaOH调pH 12~14得碱水液。碱水液依次用氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取,得到碱性正丁醇萃取物5.7 g。碱性正丁醇萃取物经硅胶柱层析,用氯仿-甲醇梯度洗脱,TLC(薄层色谱)检测,合并相同组份,其中101~200份含有苦马豆素。将101~141份用氨性氯仿处理,减压升华,得到白色针状结晶34 mg。经TLC(薄层色谱)检查、熔点测定和质谱分析可确定该白色针状结晶为苦马豆素。     

二重PCR方法鉴别气肿疽梭菌和腐败梭菌

用包含16S～23S rDNA间隔区和23S rDNA的部分序列作为气肿疽梭菌特异性标志,以α毒素部分序列作为腐败梭菌特异性标志,建立了鉴别气肿疽梭菌和腐败梭菌的二重PCR方法。结果显示：气肿疽梭菌C54-1株扩增出大小为509 bp的条带,腐败梭菌C55-1株、C55-16株均扩增出大小为148 bp的条带,均与预期吻合;而产气荚膜梭菌C57-1株、C59-37株,肉毒梭菌C62-4株,诺维梭菌C61-4株均未扩增出任何条带。扩增产物的测序结果进一步证实了本方法的特异性。菌株的生物学特性试验结果也符合相应气肿疽梭菌和腐败梭菌的特点。本研究所建立的二重PCR方法可用于气肿疽梭菌和腐败梭菌的快速鉴定。     

The effect of various flooring materials on performance and foot health of early-weaned pigs

The effects of various flooring materials on the performance and foot health of early-weaned piglets were evaluated in seven trials using 728 pigs. Pigs housed on galvanized flattened expanded metal, plastic-coated expanded metal, perforated galvanized panels, galvanized woven wire and plastic-coated woven wire had similar average daily gains, average daily feed intakes and feed/gain ratios. Foot pad scores were lower (less cuts, cracks and abrasions) for plastic-coated expanded metal, plastic-coated woven wire and perforated galvanized panels than for galvanized expanded metal and galvanized woven wire. While foot pad scores varied among flooring materials, none of the flooring materials produced lesions that resulted in any visible discomfort or inhibition of locomotion of the pigs. Correlation coefficients between individual pig body weight and foot pad scores were positively related indicating that body weight may be a factor contributing to lesion severity. Although foot pad lesions were common in the weanling pigs, with some variation due to flooring materials, there were no differential effects among the flooring materials evaluated on performance or visible comfort of the pigs.     

贮藏条件对华北驼绒藜种子生理生化特性的影响

超干燥华北驼绒藜种子含水量（MC2．8％～4．2％）在室外温度下,能显著地延长其耐藏期,在室外温度下贮藏可达25个月。超干燥种子丙二醛含量和相对电导率均明显地低于非超干燥种子（MC〉5％）,而种子活力、脱氢酶活性和过氧化物酶活性均显著地高于非超干燥种子。结果表明,超干燥处理能使华北驼绒藜种子保持高水平活力;对脂质过氧化的抑制作用是超干燥种子耐贮藏的生理原因,方一     

猪衣原体感染的血清学调查报告

通过对平顶山地区6个县(市)29个猪场的3000头种猪血清进行鹦鹉热衣原体的间接血凝(IHA)抗体的检测。结果显示,血清的阳性率为3.2%～8%,平均为4.8%,猪场的阳性率为65%,该病在本地区较为普遍。