桔梗皂苷D对小鼠巨噬细胞和脾淋巴细胞体外增殖和分泌功能的影响

研究探讨桔梗皂苷D对小鼠脾淋巴细胞体外增殖、腹腔巨噬细胞吞噬及诱导淋巴细胞分泌细胞因子的影响。采用MTT法检测桔梗皂苷D和桔梗皂苷D与脂多糖(LSP)组合对淋巴细胞增殖及金黄色葡萄球菌感染淋巴细胞增殖的影响;ELISA法检测桔梗皂苷D对诱导淋巴细胞γ-干扰素(IFN-γ)和白细胞介素-6(IL-6)的分泌的影响;MTT法检测桔梗皂苷D对诱导巨噬细胞吞噬金黄色葡萄球菌功能的影响。结果显示,桔梗皂苷D在一定质量浓度范围内,均能诱导淋巴细胞的增殖,促进IFN-γ和IL-6的分泌,且呈双向调节;不能协同LSP诱导淋巴细胞的增殖;在金葡菌感染淋巴细胞时桔梗皂苷D能促进淋巴细胞的增殖,但效果低于桔梗皂苷D单药组;能提高巨噬细胞吞噬金黄色葡萄球菌的功能。桔梗皂苷D能有效促进脾淋巴细胞的增殖和巨噬细胞的吞噬功能,可通过淋巴细胞分泌IFN-γ和IL-6发挥免疫增强作用。     

紫薯花色苷对小鼠免疫细胞的调节作用

为分析紫薯花色苷(PSPA)对小鼠免疫细胞的调节作用。无菌分离小鼠脾,制备淋巴细胞,腹腔分离巨噬细胞,并用含10%胎牛血清的RPMI 1640培养,在培养液中分别加入刀豆蛋白A(Con A)或脂多糖(LPS)及1.5、3.0、6.0和12.0 mg/m L不同浓度的PSPA,经过不同时间培养后,采用MTT法检测淋巴细胞的增殖,ELISA法检测淋巴细胞分泌白细胞介素(IL)-2和IL-10的水平,MTT法检测巨噬细胞吞噬能力。结果表明:PSPA能够促进小鼠脾淋巴细胞增殖,能够增强IL-2和IL-10的分泌;能够增强巨噬细胞吞噬能力。因此,PSPA能增强小鼠免疫细胞的调节作用。     

辣椒碱对小鼠淋巴细胞和巨噬细胞体外免疫调节活性的影响

为探讨辣椒碱的免疫调节作用。试验利用体外分离培养小鼠脾淋巴细胞和腹腔巨噬细胞,辣椒碱单药和辣椒碱与脂多糖(LPS)复合刺激脾淋巴细胞,MTT法检测辣椒碱和复合物对脾淋巴细胞增殖的影响;用辣椒碱单药刺激脾淋巴细胞,酶联免疫吸附(ELISA)法检测辣椒碱对淋巴细胞分泌干扰素-γ(IFN-γ)和白细胞介素-6(IL-6)的影响;用辣椒碱单药刺激腹腔巨噬细胞,MTT法检测辣椒碱腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响;用ELISA法检测辣椒碱对巨噬细胞分泌肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和IL-6的影响。结果表明,辣椒碱单药和辣椒碱与脂多糖复合均能促进脾淋巴细胞增殖,辣椒碱单药能促进淋巴细胞IFN-γ和IL-6的分泌。辣椒碱单药能增强巨噬细胞的吞噬功能,促进巨噬细胞TNF-α和IL-6的分泌。辣椒碱具有免疫调节作用。     

白细胞介素-2的研究进展与应用

白细胞介素-2又称T淋巴细胞生长因子,是T淋巴淋巴细胞受抗原刺激后所分泌的具有免疫调节作用的淋巴因子.白细胞介素-2除了能在体外维持T淋巴细胞长期增殖与分化外,还具有增强自然杀伤细胞的杀伤活性及促进B细胞分化与增殖的能力,以及诱导淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK)产生等重要生物学作用.研究发现,白细胞介素-2在抗肿瘤、抗毒素、免疫调节及感染性疾病的治疗等方面具有重要作用.     

太子参参须多糖对RAW264.7细胞免疫调节作用的研究

为研究太子参参须多糖(RPFRP)对小鼠单核巨噬细胞(RAW264.7细胞)的免疫调节作用及作用机制，本研究利用MTT法检测不同浓度RPFRP作用下的RAW264.7细胞的增殖情况，筛选出RPFRP的适宜浓度为25μg/mL～400μg/m L。将25μg/mL～400μg/m L RPFRP作用于RAW264.7细胞并于不同时间后收获细胞培养物或上清液进行后续试验。采用中性红法检测不同浓度RPFRP作用下的RAW264.7细胞的吞噬活性，结果显示：RPFRP可极显著提高RAW264.7细胞吞噬活性(P<0.01)，且该吞噬活性在PRFRP浓度为25μg/mL～200μg/mL时呈剂量依赖式升高；Griess法检测RAW264.7细胞的NO产生量，结果显示：RAW264.7细胞上清液中NO含量显著升高(P<0.05)，且呈RPFRP剂量依赖式升高；ELISA法检测RAW264.7细胞的白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β (IL-1β)、白细胞介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量，结果显示：与空白对照组相比，RPFRP处理的RAW264.7细...     

银耳多糖对小鼠淋巴细胞免疫调节作用及PI3K/Akt、NF-κB信号通路的影响

试验旨在探讨银耳多糖（TFP）对小鼠脾淋巴细胞免疫调节作用及磷脂酰肌醇-3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B (Akt)、核因子κB (NF-κB)信号通路的影响。试验从体外分离小鼠脾淋巴细胞，分别设CK组、LMS组、TFP 20 mg/L组、TFP 40 mg/L组、TFP 80 mg/L组和TFP 160 mg/L组。采用MTT法检测脾淋巴细胞的增殖，ELISA法检测脾淋巴细胞细胞因子白细胞介素-6 (IL-6)、白细胞介素-10 (IL-10)、白细胞介素-12(IL-12)和干扰素-γ (IFN-γ)的分泌，QRT-PCR法检测脾淋巴细胞细胞因子IL-6、IL-10、IL-12和IFN-γm RNA的相对表达量，Western blot法检测PI3K/Akt和NF-κB信号通路相关蛋白表达的影响。结果显示，银耳多糖能够促进脾淋巴细胞的增殖、IL-6、IL-10、IL-12和IFN-γ的分泌及mRNA的表达（P<0.01），降低磷酸化磷脂酰肌醇-3-激酶（P-PI3K）、磷酸化蛋白激酶B (P-Akt)、κB抑制因子激酶α (IKK-α)、κB抑制因子激酶β(IKK-β)和NF...     

芪竹汤对小鼠脾淋巴细胞增殖和巨噬细胞吞噬作用的影响

目的:探讨芪竹汤对小鼠脾淋巴细胞增殖能力和巨噬细胞吞噬能力的影响。方法:将黄芪、穿心莲、玉竹、香附以干重4∶3∶3∶3的比例水煎并浓缩得到芪竹汤药液。不同浓度的芪竹汤在Con A和LPS刺激下与小鼠脾淋巴细胞作用,采用CCK-8法检测各处理组的OD值;不同浓度的芪竹汤与小鼠巨噬细胞共同孵育,采用中性红染色法检测巨噬细胞的吞噬能力。结果:5 ng/mL、1 ng/mL、0.2 ng/mL的芪竹汤对小鼠脾T淋巴细胞的增殖有极显著促进作用(P0.01);5 ng/mL、0.2 ng/mL的芪竹汤对B淋巴细胞的增殖有显著促进作用(P0.05);5 ng/mL、1 ng/mL的芪竹汤对小鼠巨噬细胞的吞噬功能也有正向调节作用(P0.05)。结论:芪竹汤可以促进小鼠脾淋巴细胞的增殖和巨噬细胞的吞噬功能。     

银杏叶提取物对小鼠脾淋巴细胞体外增殖和分泌功能的影响

为分析银杏叶提取物(EGB)对小鼠脾淋巴细胞体外增殖和分泌功能的影响。无菌分离小鼠脾,制备淋巴细胞,并用含10%胎牛血清的RPMI 1640培养,在培养液中分别加入刀豆蛋白A(Con A)或脂多糖(LPS)及8、16、32和64μg/m L不同质量浓度的EGB,经过不同时间培养后,采用MTT法检测淋巴细胞的增殖,ELISA法检测淋巴细胞分泌IL-4和IL-12的水平,流式细胞仪检测淋巴细胞的细胞周期和细胞膜表面标志。结果表明:EGB能够促进小鼠脾淋巴细胞增殖,不能与Con A或LPS协同促进小鼠脾淋巴细胞增殖;能增强IL-4和IL-12的分泌;能提高小鼠脾淋巴细胞CD4~+/CD8~+的比值;能提高脾淋巴细胞周期中细胞进入S期细胞的百分率。结果提示:EGB能增强小鼠脾淋巴细胞的免疫调节活性。     

重组鸡白细胞介素-2对禽流感灭活疫苗的免疫增强效果评价

<正>鸡白细胞介素-2(白介素-2、rCh IL-2、IL-2)是由T淋巴细胞分泌并参与机体免疫应答的一类细胞因子，具有多种生物学功能。IL-2可提高辅助性T细胞数量和活性，活化巨噬细胞，诱导和增强自然杀伤细胞(natural killer cell,NK)等多种杀伤细胞的分化和效应功能，增强机体的细胞免疫功能。IL-2直接作用于B淋巴细胞，具有促进B淋巴细胞的增殖、分化和免疫球蛋白的分泌等功能，具有提高机体体液免疫的功能。为了验证白介素-2(rCh IL-2,IL-2)的生物学功能，特开展相应试验，结果显示IL-2具有免疫增强效果。     

金黄色葡菌球菌脂蛋白对M1型小鼠骨髓源巨噬细胞免疫作用的影响

本研究旨在阐明金黄色葡萄球菌脂蛋白对M1型小鼠骨髓源巨噬细胞免疫作用的影响，为金黄色葡萄球菌致病性研究提供理论参考。以金黄色葡萄球菌野生株SA113（WT SA113）和SA113 lgt：：ermB脂蛋白表达缺失菌株（SA113Δlgt株）体外感染M1型小鼠骨髓源巨噬细胞，分为3组：空白对照组、WT SA113感染组（MOI：3：1）、SA113Δlgt感染组（MOI：3：1）。采用ELISA法检测M1型小鼠骨髓源巨噬细胞中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素1β（IL-1β）、趋化因子（RANTES）和白细胞介素10（IL-10）的水平，实时荧光定量PCR检测Toll样受体2（TLR2）、Toll样受体4（TLR4）和含NLR家族Pyrin域蛋白3（NLRP3）基因的表达，免疫荧光法检测脂蛋白对M1型小鼠骨髓源巨噬细胞吞噬金黄色葡萄球菌作用的影响。结果显示，与空白对照组相比，WT SA113感染组和SA113Δlgt感染组均可显著上调M1型小鼠骨髓源巨噬细胞中TNF-α、RANTES、IL-10分泌量以及WT SA113感染组TLR2、NLRP3基因表达水平（P<0.05），而TLR4基因表达量显著降低（P<0.05）；与WT SA113感染组相比，SA113Δlgt感染组M1型小鼠骨髓源巨噬细胞中TNF-α、IL-1β、RANTES、IL-10分泌量以及TLR2（12 h除外）、NLRP3基因表达水平显著降低（P<0.05）。免疫荧光结果显示，M1型巨噬细胞对SA113Δlgt株的吞噬作用显著低于对WT SA113株的吞噬作用（P<0.05）。综上，金黄色葡萄球菌的脂蛋白在M1型小鼠骨髓源巨噬细胞中主要通过激活TLR2和NLRP3受体，诱导细胞因子TNF-α、IL-1β、RANTES和IL-10的产生和释放。     

黄芪多糖对巨噬细胞活化及其吞噬功能的影响

为研究黄芪多糖对巨噬细胞增殖、抗原呈递与吞噬活性的影响,揭示黄芪多糖免疫调节作用机制,试验采用不同浓度的黄芪多糖(0、0.1、1、10、50、100μg/mL)处理巨噬细胞12 h,用CCK-8比色法检测细胞增殖活性,用流式细胞仪检测细胞表面CD80、CD86、MHC-II分子表达及细胞吞噬活性.结果发现:与对照组相比...     

金黄色葡萄球菌对巨噬细胞自噬相关蛋白表达的影响

巨噬细胞是机体重要的免疫防御细胞,本试验探讨金黄色葡萄球菌感染对巨噬细胞自噬相关蛋白表达的影响,为进一步研究自噬在金黄色葡萄球菌侵袭过程中的作用提供理论依据。采用金黄色葡萄球菌侵袭RAW264.7细胞,运用Western blot分别于侵袭0,15,30,45,60,90,120 min检测细胞内自噬相关蛋白Beclin1、Atg5、LC3、p62的表达水平,激光共聚焦技术检测细胞内LC3聚点,并用透射电镜观察细胞超微结构。结果显示,与侵袭0 min相比,Beclin1、Atg5、LC3、p62表达水平在各时间点均升高(P0.01),且呈一定的时间-效应关系。侵袭45 min时,细胞内LC3蛋白聚点增多,且单个细胞的荧光强度增强。透射电镜观察显示金黄色葡萄球菌侵入细胞内,并形成明显的吞噬泡。故金黄色葡萄球菌侵袭巨噬细胞,促进了细胞自噬的发生和发展,自噬参与了金黄色葡萄球菌的侵袭过程。     

土木香提取物抑制金黄色葡萄球菌毒力因子分泌作用的研究

本研究旨在分析土木香提取物对金黄色葡萄球菌主要毒力因子分泌的影响及机制研究,以耐药性金黄色葡萄球菌USA 300为研究对象,通过醇提法获取土木香提取物,根据主要毒力因子蛋白表型功能(溶血活性和TNF-α含量释放分析),利用蛋白免疫印迹和荧光定量PCR分析检测不同浓度土木香提取物对金黄色葡萄球菌主要毒力因子分泌的影响及机制。无抗菌活性的土木香提取物与金黄色葡萄球菌共培养后可显著抑制培养物上清溶血活性及其诱导小鼠脾淋巴细胞TNF-α释放活性,蛋白免疫印迹分析表明,土木香提取物处理可显著降低金黄色葡萄球菌α-溶血素、肠毒素A和中毒休克综合征毒素-1(TSST-1)的分泌,荧光定量PCR试验结果进一步表明土木香提取物与金黄色葡萄球菌共培养后降低金黄色葡萄球菌α-溶血素、肠毒素A和TSST-1编码基因的转录及金黄色葡萄球菌二元调控系统agr的转录。本研究结果表明,土木香提取物通过抑制agr二元调控系统转录及其毒力因子编码基因的转录而降低毒力因子的分泌,土木香提取物是一种潜在的新型抗金黄色葡萄球菌感染先导化合物。     

羊胎盘转移因子注射液非特异性免疫调节作用的研究

为探讨羊胎盘转移因子注射液(goat placental transfer factor injection,GPTF)对动物非特异性免疫功能的影响,采用巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验、碳廓清试验以及诱导靶细胞释放免疫介质试验,评价羊胎盘转移因子注射液对动物非特异性免疫调节的作用。结果显示,羊胎盘转移因子注射液具有促进巨噬细胞吞噬鸡红细胞功能、提高受试小鼠免疫系统廓清指数和吞噬指数以及增加巨噬细胞一氧化氮(NO)和白细胞介素-1(IL-1)分泌量的作用。试验结果表明,羊胎盘转移因子注射液具有增强动物机体非特异性免疫力的作用。     

刚地弓形虫钙依赖蛋白激酶9对小鼠Ana-1巨噬细胞功能的影响

本试验旨在探究刚地弓形虫钙依赖蛋白激酶9(CDPK9)对小鼠Ana-1巨噬细胞活性及功能的影响。利用激光共聚焦技术验证CDPK9与Ana-1巨噬细胞的结合情况;采用细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)检测不同浓度CDPK9处理24h对Ana-1巨噬细胞增殖活性的影响;利用流式细胞术检测不同浓度CDPK9处理48h对Ana-1巨噬细胞凋亡及吞噬功能的影响;采用总一氧化氮试剂盒检测不同浓度CDPK9处理48h对Ana-1巨噬细胞NO分泌量的影响;利用细胞因子ELISA试剂盒检测不同浓度CDPK9处理48h对Ana-1巨噬细胞TNF-α、TGF-β1、IL-10、IL-1β分泌的影响。结果如下:CDPK9能够与Ana-1巨噬细胞结合。CDPK9对Ana-1巨噬细胞增殖具有抑制作用,较高浓度时抑制作用明显。CDPK9能够显著提高Ana-1巨噬细胞的凋亡比例,同时促进其吞噬能力。CDPK9上调了Ana-1巨噬细胞NO产量。细胞因子IL-1β和TNF-α的表达量上升,而TGF-β1和IL-10的表达量有所下降。CDPK9能够与巨噬细胞结合并通过多种途径影响其活性及免疫功能。     

绢蒿浸液对雏鸡免疫功能的影响

为探讨新疆石河子南山地区牧草绢蒿对雏鸡T淋巴细胞增殖与巨噬细胞吞噬活性的影响,试验采用称重法、MTT法、菌落计数法、ANAE染色法及攻毒试验分别对小鼠的体重、T淋巴细胞增殖、T淋巴细胞数量、腹腔巨噬细胞吞噬功能及发病率进行研究。结果表明,绢蒿浸液能不同程度的提高雏鸡体重、T淋巴细胞增殖能力及T淋巴细胞ANAE阳性率,降低吞噬细胞吞噬性,减少感染大肠杆菌雏鸡的发病率,提高抗感染能力。提示,绢蒿浸液对正常雏鸡具有双向免疫调节作用。     

松针多糖对小鼠腹腔巨噬细胞免疫调节作用的研究

本试验旨在研究松针多糖对正常状态及脂多糖(LPS)刺激状态下小鼠腹腔巨噬细胞的免疫调节作用。试验采用不同浓度的松针多糖作用于正常的和经LPS刺激的小鼠腹腔巨噬细胞,设空白对照组(加入100μL RPMI-1640培养基)、阳性对照组(加入100μL终浓度为5μg/m L的LPS)、松针多糖组(分别加入100μL 25、50、100、200μg/m L的松针多糖)和LPS+松针多糖组(加入与松针多糖组相同浓度的松针多糖和终浓度为5μg/m L的LPS,液体终体积为200μL)。噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞活力,中性红吞噬试验检测巨噬细胞吞噬能力,Griess法检测一氧化氮(NO)的分泌量,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测巨噬细胞培养上清液中白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-10(IL-10)的分泌量。结果表明:1)对空白对照组相比,各松针多糖组巨噬细胞相对增殖率均显著或极显著提高(P0.05或P0.01),50、100和200μg/m L松针多糖组巨噬细胞中性红吞噬率显著或极显著提高(P0.05或P0.01),各LPS+松针多糖组巨噬细胞中性红吞噬率均极显著提高(P0.01),200μg/m L松针多糖组巨噬细胞NO分泌量极显著提高(P0.01),50、100和200μg/m L松针多糖组巨噬细胞TNF-α和IL-1β分泌量显著或极显著提高(P0.05或P0.01),50、100和200μg/m L松针多糖组巨噬细胞IL-10分泌量极显著降低(P0.01)。2)与阳性对照组相比,各松针多糖组巨噬细胞相对增殖率均极显著降低(P0.01),100和200μg/m L LPS+松针多糖组巨噬细胞中性红吞噬率极显著升高(P0.01),50、100和200μg/m L LPS+松针多糖组巨噬细胞NO分泌量极显著提高(P0.01),各LPS+松针多糖组巨噬细胞TNF-α分泌量显著或极显著提高(P0.05或P0.01),50、100和200μg/m L LPS+松针多糖组巨噬细胞IL-1β分泌量显著或极显著提高(P0.05或P0.01),100和200μg/m L LPS+松针多糖组巨噬细胞IL-10分泌量极显著降低(P0.01)。由此可见,松针多糖通过发挥其促炎作用调节巨噬细胞的免疫功能,进而增强机体抗疾病的能力。     

卡介菌多糖核酸对断奶仔猪外周血淋巴细胞增殖和白细胞介素、肿瘤坏死因子分泌的影响

为了研究卡介菌多糖核酸(BCG-PSN)对断奶仔猪外周血淋巴细胞增殖和白细胞介素(IL)、肿瘤坏死因子(TNF)分泌的影响,试验采用MTT法测定外周血淋巴细胞转化率,并用放免法测定培养上清液中IL-2、IL-6和TNF-α的含量。结果表明:卡介菌多糖核酸能显著提高断奶仔猪外周血淋巴细胞转化率,促进IL-2、IL-6和TNF-α的分泌,与对照相比差异显著(P0.05),且这种效应和用药剂量有一定相关性。说明卡介菌多糖核酸可以通过提高淋巴细胞转化率和IL-2、IL-6及TNF-α的分泌发挥免疫调节作用。     

淫羊藿苷对小鼠巨噬细胞和淋巴细胞免疫功能的影响

为探讨淫羊藿苷对小鼠巨噬细胞和淋巴细胞的免疫功能,体外分离小鼠腹腔巨噬细胞和脾淋巴细胞,以淫羊藿苷进行刺激,同时设空白对照组和阳性对照组,采用MTT法检测淫羊藿苷对巨噬细胞吞噬功能和淋巴细胞增殖的影响,ELISA法检测淫羊藿苷对淋巴细胞分泌IL-2、IL-4、IL-10和IL-12的影响。结果显示,淫羊藿苷能够提高腹腔巨噬细胞的吞噬功能,促进脾淋巴细胞增殖,刺激淋巴细胞细胞因子的分泌。结果表明,淫羊藿苷能够提高小鼠腹腔巨噬细胞和脾淋巴细胞的免疫功能。     

杜仲叶免疫调节机制的网络药理学分析及验证

基于网络药理学及小鼠免疫抑制模型方法探讨杜仲叶免疫调节的作用机制。该研究通过TCMSP数据库筛选出3个杜仲叶活性成分，Uniprot和Swiss Target数据库预测到306个相关联的靶基因，经与OMIM、GeneCards数据库对比，获得105个免疫失调与杜仲叶的交集基因，通过Cytoscape3.8.2软件构建“活性成分-基因”网络。利用STRING数据库进行蛋白质-蛋白质相互作用分析，构建蛋白质-蛋白质相互作用网络(PPI),CytoNCA进行网络拓扑学分析，筛选出21个核心靶点，并对核心靶点进行基因本体(GO)富集分析与KEGG通路分析。结果发现，杜仲叶中的山奈酚、槲皮素、绿原酸等主要化合物通过调节肿瘤坏死因子(TNF)、白细胞介素6(IL-6)、血管内皮生长因子A (VEGFA)、白细胞介素1β(IL-1β)等关键靶点，参与IL-17、肿瘤坏死因子信号通路等，从而发挥免疫调节作用。通过腹腔巨噬细胞体外试验和环磷酰胺免疫抑制体内试验探讨杜仲叶提取物的免疫调节作用，结果显示，1 000～5 000μg·mL^-1浓度的杜仲叶提取物可促进腹腔巨噬细胞增殖和吞噬...